Патологическая протеинурия является одним из наиболее важных и постоянных признаков заболеваний почек и мочевых путей. Определение концентрации белка в моче является обязательным и важным элементом исследования мочи. Выявление и количественная оценка протеинурии важна не только в диагностике многих первичных и вторичных заболеваний почек, оценка изменения выраженности протеинурии в динамике несет информацию о течении патологического процесса, об эффективности проводимого лечения. Обнаружение белка в моче даже в следовых количествах должно настораживать в отношении возможного заболевания почек или мочевых путей и требует повторного анализа. Особо следует отметить бессмысленность исследования мочи и, в частности, определения белка мочи без соблюдения всех правил ее сбора.
Все методы определения белка в моче можно разделить на:
- Качественные,
- Полуколичественные,
- Количественные.
Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.
Условия определения белка в моче на основе реакции коагуляции:
- Моча должна иметь кислую реакцию. Мочу щелочной реакции подкисляют несколькими (2 — 3) каплями уксусной кислоты (5 – 10%).
- Моча должна быть прозрачной. Помутнение устраняется через бумажный фильтр. Если помутнение не исчезает, добавляют тальк или жженую магнезию (около 1 чайной ложки на 100 мл мочи), взбалтывают и фильтруют.
- Качественную пробу следует проводить в двух пробирках, одна из них – контрольная.
- Искать помутнение следует на черном фоне в проходящем свете.
К качественным методам определения белка в моче относятся:
Как показывают многочисленные исследования, ни один из большого числа известных методов качественного определения белка в моче не позволяет получать надежные и воспроизводимые результаты. Несмотря на это, в большинстве КДЛ в России эти методы широко используются в качестве скрининга – в моче с положительной качественной реакцией в дальнейшем проводят количественное определение белка. Из качественных реакций чаще используют пробу Геллера и пробу с сульфосалициловой кислотой, однако пробу с сульфосалициловой кислотой большей частью считают наиболее подходящей для выявления патологической протеинурии. Проба с кипячением в настоящее время практически не используется в связи с ее трудоемкостью и длительностью.
В основе метода Брандберга-Робертса-Стольникова лежит кольцевая проба Геллера, поэтому при данном методе наблюдаются те же ошибки, что и при пробе Геллера.
В настоящее время для определения белка в моче все чаще используются диагностические полоски. Для полуколичественного определения белка в моче на полоске в качестве индикатора чаще всего используется краситель бромфеноловый синий в цитратном буфере. О содержании белка в моче судят по интенсивности сине-зеленой окраски, развивающейся после контакта реакционной зоны с мочой. Результат оценивается визуально или с помощью анализаторов мочи. Несмотря на большую популярность и очевидные преимущества методов сухой химии (простота, скорость выполнения анализа) данные методы анализа мочи в целом и определения белка в частности не лишены серьезных недостатков. Одним из них, приводящих к искажению диагностической информации, является большая чувствительность индикатора бромфенолового синего к альбумину по сравнению с другими белками. В связи с этим, тест-полоски в основном приспособлены к обнаружению селективной гломерулярной протеинурии, когда практически весь белок мочи представлен альбумином. При прогрессировании изменений и переходе селективной гломерулярной протеинурии в неселективную (появление в моче глобулинов) результаты определения белка оказываются заниженными по сравнению с истинными значениями. Данный факт не дает возможности использовать данный метод определения белка в моче для оценки состояния почек (гломерулярного фильтра) в динамике. При тубулярной протеинурии результаты определения белка также оказываются заниженными. Определение белка с помощью диагностических полосок не является надежным индикатором низких уровней протеинурии (большинство выпускаемых в настоящее время диагностических полосок не обладают способностью улавливать белок в моче в концентрации ниже, чем 0,15 г/л). Отрицательные результаты определения белка на полосках не исключают присутствия в моче глобулинов, гемоглобина, уромукоида, белка Бенс-Джонса и других парапротеинов.
Хлопья слизи с высоким содержанием гликопротеидов (например, при воспалительных процессах в мочевых путях, пиурии, бактериурии) могут оседать на индикаторной зоне полоски и приводить к ложноположительным результатам. Ложноположительные результаты могут также быть связаны с высокой концентрацией мочевины. Плохое освещение и нарушение цветоощущения может быть причиной неточного результата.
В связи с этим, использование диагностических полосок следует ограничить скринирующими процедурами, а результаты, полученные с их помощью, следует рассматривать лишь как ориентировочные.
Корректное количественное определение белка в моче в ряде случаев оказывается непростой задачей. Трудности ее решения определяются следующим рядом факторов:
- низким содержанием белка в моче здорового человека, часто находящимся на пороге чувствительности большинства известных методов;
- присутствием в моче множества соединений, способных вмешиваться в ход химических реакций;
- значительными колебаниями содержания и состава белков мочи при различных заболеваниях, затрудняющими выбор адекватного калибровочного материала.
В клинических лабораториях преимущественно применяются так называемые «рутинные» методы определения белка в моче, однако они далеко не всегда позволяют получать удовлетворительные результаты.
С точки зрения специалиста-аналитика, работающего в лаборатории, метод, предназначенный для количественного определения белка в моче, должен отвечать следующим требованиям:
- обладать линейной зависимостью между поглощением образовавшегося в ходе химической реакции комплекса и содержанием белка в пробе в широком диапазоне концентраций, что позволит избежать дополнительных операций при подготовке пробы к исследованию;
- должен быть прост, не требовать высокой квалификации исполнителя, выполняться при малом количестве операций;
- обладать высокой чувствительностью, аналитической надежностью при использовании небольших объемов исследуемого материала;
- быть устойчивым к воздействию различных факторов (колебаниям состава образца, присутствию лекарственных препаратов и др.);
- обладать приемлемой стоимостью;
- быть легко адаптируемым к автоанализаторам;
- результат определения не должен зависеть от белкового состава исследуемого образца мочи.
Ни один из известных к настоящему времени методов количественного определения белка в моче не может в полной мере претендовать на роль «золотого стандарта».
Количественные методы определения белка в моче можно разделить на турбидиметрические и колориметрические.
К турбидиметрическим методам относятся:
- определение белка с сульфосалициловой кислотой (ССК),
- определение белка с трихлоруксусной кислотой (ТХУ),
- определение белка с бензетоний хлоридом.
Турбидиметрические методы основаны на снижении растворимости белков мочи вследствие образования суспензии взвешенных частиц под воздействием преципитирующих агентов. О содержании белка в исследуемой пробе судят либо по интенсивности светорассеяния, определяемого числом светорассеивающих частиц (нефелометрический метод анализа), либо по ослаблению светового потока образовавшейся суспензией (турбидиметрический метод анализа).
Величина светорассеяния в преципитационных методах обнаружения белка в моче зависит от множества факторов: скорости смешивания реактивов, температуры реакционной смеси, значения pH среды, присутствия посторонних соединений, способов фотометрии. Тщательное соблюдение условий реакции способствует образованию стабильной суспензии с постоянным размером взвешенных частиц и получению относительно воспроизводимых результатов.
Некоторые лекарственные препараты влияют на результаты турбидиметрических методов определения белка в моче, приводя к так называемым «ложноположительным», либо «ложноотрицательным» результатам. К ним относятся некоторые антибиотики (бензилпенициллин, клоксациллин и др.), рентгеноконтрастирующие йодсодержащие вещества, сульфаниламидные препараты.
Турбидиметрические методы плохо поддаются стандартизации, часто приводят к получению ошибочных результатов, но, несмотря на это, в настоящее время они широко используются в лабораториях из-за невысокой стоимости и доступности реактивов. Наиболее широко в России используется метод определения белка с сульфосалициловой кислотой.
Наиболее чувствительными и точными являются колориметрические методы определения общего белка мочи, основанные на специфических цветных реакциях белков.
- биуретовая реакция,
- метод Лоури,
- методы, основанные на способности различных красителей образовывать комплексы с белками:
- Понсо S (Ponceau S),
- Кумасси бриллиантовый синий (Coomassie Brilliant Blue)
- пирогаллоловый красный (Pyrogallol Red).
С точки зрения исполнителя, в повседневной работе лаборатории при большом потоке исследований биуретовый метод является неудобным из-за большого числа операций. В то же время, метод характеризуется высокой аналитической надежностью, позволяет определять белок в широком диапазоне концентраций и выявлять альбумин, глобулины и парапротеины со сравнимой чувствительностью, вследствие чего биуретовый метод рассматривают в качестве референтного и рекомендуют для сравнения других аналитических методов обнаружения белка в моче. Биуретовый метод определения белка в моче предпочтительно выполнять в лабораториях, обслуживающих нефрологические отделения, и использовать в тех случаях, когда результаты определения с помощью других методов представляются сомнительными, а также для определения величины суточной потери белка у нефрологических больных.
Метод Лоури, обладающий более высокой чувствительностью по сравнению с биуретовым методом, сочетает биуретовую реакцию и реакцию Фолина на аминокислоты тирозин и триптофан в составе белковой молекулы. Несмотря на высокую чувствительность, данный метод не всегда обеспечивает получение надежных результатов при определении содержания белка в моче. Причиной тому служит неспецифическое взаимодействие реактива Фолина с небелковыми компонентами мочи (чаще всего аминокислотами, мочевой кислотой, углеводами). Отделение этих и других компонентов мочи путем диализа или осаждения белков позволяет с успехом использовать данный метод для количественного определения белка в моче. Некоторые лекарственные препараты – салицилаты, хлорпромазин, тетрациклины способны оказывать влияние на данный метод и извращать результаты исследования.
Достаточная чувствительность, хорошая воспроизводимость и простота определения белка по связыванию красителей делают эти методы перспективными, однако высокая стоимость реактивов препятствует более широкому их использованию в лабораториях. В настоящее время в России все большее распространение получает метод с пирогаллоловым красным.
Проводя исследование уровня протеинурии, нужно иметь ввиду, что различные методы определения протеинурии имеют разную чувствительность и специфичность к многочисленным белкам мочи.
Исходя из эмпирических данных, рекомендуется определять белок двумя разными методами и рассчитывать истинное значение по одной из приведенных формул:
протеинурия = 0,4799 B + 0,5230 L;
протеинурия = 1,5484 B – 0,4825 S;
протеинурия = 0,2167 S + 0,7579 L;
протеинурия = 1,0748 P – 0,0986 B;
протеинурия = 1,0104 P – 0,0289 S;
протеинурия = 0,8959 P + 0,0845 L;
где:
B – результат измерения с Кумасси G-250;
L — результат измерения с реактивом Лоури;
P — результат измерения с молибдатом пирогаллола;
S — результат измерения с сульфосалициловой кислотой.
Учитывая выраженные колебания уровня протеинурии в различное время суток, а также зависимость концентрации белка в моче от диуреза, различное его содержание в отдельных порциях мочи, в настоящее время при патологии почек принято оценивать выраженность протеинурии по суточной потере белка с мочой, то есть определять так называемую суточную протеинурию. Она выражается в г/сут.
При невозможности сбора суточной мочи рекомендуется определять в разовой порции мочи концентрации белка и креатинина. Поскольку скорость выделения креатинина в течение дня достаточно постоянна и не зависит от изменения скорости мочеотделения, отношение концентрации белка к концентрации креатинина постоянно. Данное отношение хорошо коррелирует с суточной экскрецией белка и, следовательно, может использоваться для оценки выраженности протеинурии. В норме отношение белок/креатинин должно быть менее 0,2. Белок и креатинин измеряют в г/л. Важным достоинством метода оценки выраженности протеинурии по соотношению белок-креатинин является полное исключение ошибок, связанных с невозможностью или неполным сбором суточной мочи.
- О. В. Новоселова, М. Б. Пятигорская, Ю. Е. Михайлов, «Клинические аспекты выявления и оценки протеинурии», Справочник заведующего КДЛ, № 1, январь 2007 г.
- А. В. Козлов, «Протеинурия: методы ее выявления», лекция, Санкт-Петербург, СПбМАПО, 2000 г.
- В. Л. Эмануэль, «Лабораторная диагностика заболеваний почек. Мочевой синдром», — Справочник заведующего КДЛ, № 12, декабрь 2006 г.
- В.И. Пупкова, Л.М. Прасолова — Определение белка в моче и спинномозговой жидкости. Кольцово, 2007 г.
- Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва, «Медицина», 1975 г.
Для количественного определения белка пригоден любой образец мочи. Большинство исследователей для выяснения величины суточной потери белка предпочитают определять содержание белка в моче, собранной за сутки.
Раздел: Анализ мочи
В настоящее время для определения белка в моче все чаще используются диагностические полоски. Для полуколичественного определения белка в моче на полоске в качестве индикатора чаще всего используется краситель бромфеноловый синий в цитратном буфере. О содержании белка в моче судят по интенсивности сине-зеленой окраски, развивающейся после контакта реакционной зоны с мочой.
Раздел: Анализ мочи
Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.
Раздел: Анализ мочи
Проба с 20% сульфосалициловой кислотой относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.
Раздел: Анализ мочи
Кольцевая проба Геллера относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.
Раздел: Анализ мочи
источник
Качественный, удобный и легкий в применении анализатор белка в моче «Белур 600» популярен среди аналогов. Интерфейс взят с прибора по измерению гемоглобина «МиниГЕМ+» и изготовлен на его основе. Прибор работает в широком диапазоне благодаря использованию реагентов стандартного и современного образца. Доступен для любого пользователя.
Прибор применяется для получения уровня фермента в урине, используя биораствор с применением химических веществ (сульфосалициловой кислоты, пирогаллолового красного), а также метод Бредфорд. Производителями веществ для анализа служат западные и отечественные фирмы. Основа аппарата изготовлена из пластика, обладающего стойкостью химических структур. Внешняя сторона анализатора белка в моче «Белур 600» имеет пленку на поверхности для удобной и быстрой антибактериальной обработки. В приборе присутствует фотометрическая система защиты от скопления пыли. Чтобы аппарат не скользил, есть накладки из резины.
Аппарат заряжается от розетки либо можно использовать бататейки. Вес прибора небольшой — 400 г, размеры — 178×128×43 мм. Степень чувствительности определяется используемыми реагентами. Показатели представлены в таблице:
| № | Наименование | Шифр конструкторской документации | Кол-во |
|---|---|---|---|
| 1 | Анализатор общего белка в моче фотометрический портативный АОБМФ-01-«НПП-ТМ» | ТУ 9443-020-11254896-2009 | 1 |
| 7 | Руководство по эксплуатации с методикой поверки | ДГВИ.941416.011 РЭ | 1 |
Заключения испытательных медицинских центров.
Институт Клинической Кардиологии им. А.Л. Мясникова
Российского Кардиологического Научно- Производственного Комплекса МЗ РФ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Результаты медицинских испытаний показали, что анализатор общего белка в моче фотометрический портативный АОБМФ-01-«НПП-ТМ», производства НПП» Техномедика» г. Москва , является удобным прибором для измерения белка в моче и может быть рекомендован для применения в клинико-диагностических лабораториях поликлиник, экспресс-лабораторий стационаров и ЛПУ РФ.
Состав и последовательность испытаний.
1. Определить возможности применения прибора для определения общего белка мочи.
Мы проводили испытания прибора, определяя общий белок мочи методом с пирогаллолом красным производства ЗАО » Вектор-Бест» » Белок-ПКГ-Ново».
Контролями служили контрольные образцы мочи производства » Био-Рад» и «Биосистемс» с содержанием белка в диапазоне от 0.04 г/л до 1. 44 г/ л, т.е. в диапазоне линейности определения белка данным реактивом.
Данные воспроизводимости и правильности в одной серии ( п= 10) представлены в таблице 1.
источник
Белур 600 — это зарегистрированная торговая марка анализатора белка в моче
Анализатор белка в моче Белур 600 имеет регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития (N ФС 022а2004/0919-04 от 20 декабря 2004 года) и сертификат об утверждении типа средств измерений Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии (RU.C.39.003A № 19858 от 20 февраля 2005 года).
Анализатор белка в моче Белур 600 разработан и изготавливается в НПП «Техномедика». Обозначение прибора при его заказе и в документации других изделий:
«Анализатор общего белка в моче фотометрический портативный АОБМФ-01-«НПП-ТМ» ТУ 9443-020- 11254896-2004″.
Медицинским соисполнителем разработки является кафедра клинической лабораторной диагностики Российской медицинской академии последипломного образования (зав. кафедрой профессор Долгов В.В.).
Анализатор Белур 600 обеспечивает определение белка с точностью соответствующей нормам, утвержденным приказом Минздрава РФ N220 от 26.05.2003 г.
Анализатор белка в моче Белур 600 получил высокую оценку специалистов ведущих клиник Москвы и главных специалистов регионов, в чьи клиники прибор передавался на апробацию.
Прибор предназначен для определения концентрации общего белка в моче современными и традиционными методами: с пирогаллоловым красным, с сульфосалициловой кислотой и Бредфорд. Могут использоваться реагенты любых отечественных и зарубежных производителей.
Информация по вопросам приобретения анализатора белка в моче Белур 600 здесь .
ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗАТОРА БЕЛУР 600
Диапазон измерения концентрации общего белка — от 0 до 10 г/л.
Чувствительность определяется применяемыми реагентами и составляет — 0,020 г/л для методов пирогаллолового красного и Бредфорд; 0,080 — для сульфосалицилового.
Для фотометрирования используются стандартные кюветы или пробирки из боросиликатного стекла.
Габариты 178х128х43 мм.
Вес 400 г.
Питание от сети или 3-батареек в течение нескольких лет.
Гарантийный срок 4 года.
Прибор прост в эксплуатации и не требует специальной подготовки персонала и технического обслуживания.
ДОСТОИНСТВА АНАЛИЗАТОРА БЕЛКА В МОЧЕ БЕЛУР 600 И ЕГО ПРЕИМУЩЕСТВА
1. ТОЧНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ
Точность измерений соответствует нормам, утвержденным приказом Минздрава РФ N200 от 26.03.2003 г.
2. КАЧЕСТВЕННАЯ КОНСТРУКЦИЯ
Прибор разработан НПП «Техномедика» — крупнейшим производителем медицинских фотометров в России. Продукция с торговой маркой ТЕХНОМЕДИКА хорошо известна и во многих странах мира. Среди них Великобритания, Швеция, Италия, Норвегия, США, ЮАР, Малайзия, Египет, Индия, Иран, Казахстан, Молдавия, Украина.
Фирма создана в 1990 году. С тех пор произведено свыше 9 тысяч фотометров.
Наиболее известные гемоглобинометры МиниГЕМ и неинвазивные неонатальные билирубинометры Билитест награждены
ЗОЛОТЫМИ ЗНАКАМИ «ВСЕРОССИЙСКАЯ МАРКА (III ТЫСЯЧЕЛЕТИЕ). ЗНАК КАЧЕСТВА ХХI ВЕКА».
В 2003 году гемоглобинометры МиниГЕМ награждены дипломом 1 степени в программе «100 ЛУЧШИХ ТОВАРОВ РОССИИ».
3. ВЫСОКАЯ НАДЕЖНОСТЬ
Анализатор белка в моче Белур 600 создан на основе гемоглобинометров МиниГЕМ, опыт десятилетней эксплуатации которых подтвердил качество и надежность конструктивных решений фотометра.
ГАРАНТИЙНЫЙ СРОК — 4 ГОДА
4. ЛЕГКОСТЬ В ОБУЧЕНИИ
Отличительным признаком анализатора Белур 600 являются простые и понятные алгоритмы обращения с ним. Для работы с анализатором белка в моче Белур 600 требуется освоить 2 простейшие процедуры — обнуления прибора (бланк) и изменения численных значений фактора или концентрации калибратора. Эти процедуры производятся всего 2 кнопками.
5. ПРОСТОТА И УДОБСТВО В ЭКСПЛУАТАЦИИ
Анализатор белка в моче Белур 600 имеет размеры 178х128х43 мм. Питание от внутренних батарей или от сети через адаптер. Малое энергопотребление гарантирует работу прибора от внутренних батарей в течение 2-4 лет. Автономное питание и миниатюрные размеры прибора дают возможность организовать измерения непосредственно на рабочем месте (например, в вытяжном шкафу).
В анализаторе используются стеклянные прямоугольные кюветы и цилиндрические пробирки, а также прямоугольные пластиковые одноразовые кюветы.
Поскольку кюветы свободно вставляются и вынимаются из прибора, это проделывается одной рукой, не удерживая легкий прибор на столе другой рукой.
Высокая производительность измерений — время фотометрирования не превышает 2 секунд.
В анализаторе концентрация и оптическая плотность растворов измеряется одновременно, без перекалибровки прибора.
6. ВЫСОКАЯ СТЕПЕНЬ АВТОМАТИЗАЦИИ
— автоматическое определение и сохранение в памяти значения фактора по концентрации белка в калибраторе
— автоматическое определение при необходимости значения фактора с повышенной в 4 раза точностью
— автоматическое переключение диапазонов измерения концентраций
7. НЕ ТРЕБУЕТСЯ ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ
С устройством и принципом работы анализатор белка в моче Белур 600 можно ознакомиться здесь .
8. КОНТРОЛЬ ПАРАМЕТРОВ ПРИБОРА ПРОИЗВОДИТСЯ БЕЗ ПОКУПНЫХ КОНТРОЛЬНЫХ МАТЕРИАЛОВ
Контроль прибора в процессе эксплуатации осуществляется самим медицинским персоналом с помощью прилагаемых оптических мер.
9. СОЧЕТАНИЕ СОВРЕМЕННЫХ И ТРАДИЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ
Определение белка в анализаторе Белур 600 производится фотометрическим методом на длине волны 600 нм: с пирогаллоловым красным, с сульфосалициловой кислотой, с Кумасси бриллиантовым синим (Бредфорд).
10. ШИРОКИЙ ДИАПАЗОН КОНЦЕНТРАЦИЙ И ВЫСОКАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ
Анализатор общего белка в моче Белур 600 имеет измерительный диапазон концентраций от 0 до 10 грамм/литр с минимальным дискретом 0,001 грамм/литр. Измерение производится без дополнительных разведений.
Чувствительность ограничивается только используемыми реагентами (от 0,02 г/л для пирогаллолового красного).
11. ОТКРЫТАЯ СИСТЕМА
Открытая система избавляет пользователя от необходимости использовать реагенты лишь одного производителя (далеко не всегда оптимальных по цене и качеству).
В анализаторе применяются РЕАГЕНТЫ РАЗЛИЧНЫХ АВТОРИТЕТНЫХ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ И ЗАРУБЕЖНЫХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ («Вектор-Бест», «Диакон Диагностикс», «Bayer Diagnostics», «Beckman», «Biocon Diagnostic», «Biodirect», «Bio-Rad», «Kone», «Merck», «Randox», «Sigma», «Chronolab», «DiaSys», «Serono», «Sentinel CH», «Sigma»).
Разработанный в ЗАО «Вектор-Бест» набор «Белок-ПГК- Ново» сравним по правильности определения белка в моче с наборами реагентов фирм «Biocon», «Bio-Rad» и «Chronolab».
12. МИНИМАЛЬНЫЙ РАСХОД РЕАГЕНТОВ
Объем реакционной смеси 1 мл. Объем фотометрируемой пробы — от 0,8 мл.
Отзывы об анализаторе белка в моче Белур 600
Белур 600 получил одобрительную оценку в Санк-Петербурге и Ленинградской области
Белур 600 апробирован на кафедре КДЛ МАПО СПб. Заключение заведующего кафедрой Козлова А.В. положительное. По его оценке прибор прост в освоении, прост и удобен в работе. А, главное, — полезен в лабораторной практике.
Получен также отзыв по апробации, проведенной под эгидой отделения Российской ассоциации медицинской лабораторной диагностики по Санкт-Петербургу и Ленинградской области.
Высокая производительность исследований на анализаторе подтверждена использованием в рабочем режиме в КДЛ стационара Ленинградской областной клинической больницы (1000 коек) и в Центре лабораторной диагностики С-Петербургского Государственного медицинского Университета (1500 коек).
В отзыве особо отмечены эргономические свойства анализатора, которые позволяют использовать его не только в условиях стационара, но и при выездной работе (профосмотры, диспансеризация и т.д.).
Отзыв подписан Главным специалистом по клинической лабораторной диагностике Ленинградской области Ворониной Е.А.
и заведующей лабораторией контроля качества и методического развития лабораторных исследований СПбГМУ Бондаренко И.Б.
ТАМБОВСКАЯ ОБЛАСТНАЯ БОЛЬНИЦА
В соответствии с договором № 11511/04 от 15 ноября 2004 г. клинико-диагностической лабораторией ГУЗ «Тамбовская областная больница» была проведена апробация анализатора общего белка в моче «БЕЛУР 600» (фотометрический портативный АОБМФ-01-«НПП-ТМ» ТУ 9443-020-11254896-2004).
Все исследования были выполнены в соответствии с приказами МЗ РФ №50 от 07.02.2000 г. и №220 от 26.05.2003 г.
Для апробации был применен фотометрический метод определения белка в моче с 3% раствором сульфосалициловой кислоты и с пирогаллоловым красным фирмы «Вектор-Бест».
Исследования проводились параллельно на анализаторе «БЕЛУР 600» и на КФК-2, который по настоящее время используется в КДЛ ГУЗ ТОБ для выполнения данного вида исследований.
Для построения калибровочных кривых и контроля качества на сходимость, воспроизводимость и правильность исследований были использованы: набор контрольных растворов белка мочи «БМ-контроль» (с калибраторами) производства ООО «Медлакор» г. Санкт-Петербург и набор «БЕЛОК-ПГК-НОВО» ЗАО «Вектор-Бест» Новосибирская область.
ВЫВОДЫ:
1. По результатам статистической обработки проведенных исследований анализатор мочи «БЕЛУР 600» имеет большую чувствительность и аналитическую надежность по сравнению с наиболее часто применяемыми в лабораторной практике фотоэлектроколориметрами.
2. При работе на анализаторе «БЕЛУР 600» в 2,5 раза снижается расход реактивов для одного исследования методом с 3% раствором сульфосалициловой кислоты, что пропорционально снижает себестоимость анализа.
3. Время, затраченное на одно измерение, выполненное на анализаторе «БЕЛУР 600» приблизительно в 2-2,5 раза меньше, чем на фотоэлектроколориметре, что сокращает затраты рабочего времени сотрудника и ускоряет время выдачи результатов исследований.
4. Метод определения белка с применением красителя пирогаллолового красного обладает ещё большей точностью по сравнению с сульфосалициловым методом, т.к. позволяет определять белок при микроальбуминурии (чувствительность метода по данным инструкции — 0,06 г/л).
Определение концентрации белка пирогаллоловым методом позволяет использовать одну контрольную пробу на всю серию опытных исследований (с сульфосалициловой кислотой — на каждое исследование свой контроль), что экономит расход реактивов, количество химических пробирок и время выполнения исследования. Таким образом, результаты апробации работы анализатора белка «БЕЛУР 600» показали необходимость приобретения данного аппарата для ежедневной работы в клинико-диагностических лабораториях и отказа от определения белка в моче более дешевым методом с 3% раствором сульфосалициловой кислоты в пользу метода с использованием красителя пирогаллолового красного, который максимально соответствует современным требованиям качества лабораторных исследований.
Главный врач ГУЗ «Тамбовская областная больница»,
заслуженный врач РФ
Буркин А.И.
Главный специалист по клинической
лабораторной диагностике Тамбовской области,
заведующая КДЛ ГУЗ ТОБ
Семенова Е.Н.
Врач-лаборант по контролю и качеству КДЛ ГУЗ ТОБ
Бобровских Е.И.
ВОЛОГОДСКАЯ ОБЛАСТНАЯ БОЛЬНИЦА №1
С октября по декабрь 2004 года в ГУЗ «Вологодская областная больница №1» в клинико-диагностической лаборатории прошел апробацию портативный анализатор белка в моче Белур 600.
Было проведено более 2000 определений белка в моче пирогаллоловым методом.
Отзыв о работе прибора – положительный.
Прибор прост в обращении, результаты исследований удовлетворили как специалистов КДЛ, так и лечащих врачей.
Можно рекомендовать данный аппарат для работы в КДЛ любого уровня.
Главный внештатный специалист
по клинической лабораторной диагностике
Вологодской области
Каргольцева Т.А.
РЕСПУБЛИКАНСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА им. Г.Г.КУВАТОВА
РЕСПУБЛИКА БАШКОРТОСТАН
Анализатор белка в моче Белур 600 был апробирован на базе клинического отдела КДЛ РКБ им. Г.Г.Куватова с 14 по 31 января 2005года.
Было сделано более 100 исследований мочи с пирогаллоловым красным фирмы Вектор Бест.
Аппарат понравился тем, что он:
1. Прост и удобен в работе: позволяет начать работать на приборе после небольшого обучения; работает как от сети, так и от батареек, может использоваться и на выезде.
2. Для фотометрирования требуется малый объем исследуемого материала, быстрота проводимого исследования — 2 сек.
3. Анализатор не требует длительной предварительной подготовки всегда готов к работе и поэтому подходит как для одиночных, так и для серийных исследований, что делает оптимальным его использование в экспресс-лабораториях.
4. Может быть использован для исследования белка в моче различными методами (сульфосалициловым, пирогаллоловым красным).
Заведующий КДЛ
Панкратов А.В.
КОГАЛЫМСКАЯ ГОРОДСКАЯ БОЛЬНИЦА
ХАНТЫ-МАНСИЙСКИЙ АВТОНОМНЫЙ ОКРУГ
ТЮМЕНСКАЯ ОБЛАСТЬ
Анализатор белка в моче «Белур-600» был предоставлен для апробации в клинико-диагностическую лабораторию МЛПУ «Когалымская городская больница» (г. Когалым, Тюменская обл., ХМАО) в октябре 2004 г.
Анализ белка проводили пирогаллоловым методом с реагентами ООО «Вектор-Бест» и ООО «Юнимед».
В работе были использованы стандартные калибраторы ООО «Вектор-Бест» и ООО «Медлакор».
В соответствии с Инструкцией, калибровку прибора осуществляли растворами двух концентраций: 0,4 г/л и 0,6 г/л. Это наиболее часто встречающийся диапазон концентрации белка в опытных пробах.
Измерение белка проводили параллельно на приборе «Белур-600» и КФК-3. На анализаторе «Белур-600» выполнялось измерение белка в опытных образцах мочи и контрольном материале для внутрилабораторного контроля качества, что составило 980 проб.
Построение калибровочной кривой для белка в моче на КФК-3 всегда было большой проблемой, поскольку разброс факторов при низких, средних и высоких концентрациях белка (в пределах 1 г/л) колебался от 1,9 до 9,8. Т.о., рассчитать единый фактор на всем протяжении кривой и не ошибиться с результатом в опытной пробе, было практически невозможно.
Результаты измерений с помощью «Белур-600» показали, что прибор довольно точно определяет фактор и удерживает его в памяти без отклонений.
Построение калибровочной кривой достаточно проводить с какой-либо одной приемлемой концентрацией белка (в наших условиях 0,4 г/л или 0,6 г/л), и пропорциональная зависимость сохраняется до концентрации 1 г/л.
Сравнение параллельных измерений на КФК-3 и «Белур-600» в опытных образцах мочи показали, что более точными были результаты с помощью «Белур-600».
Особенно хорошо это проявилось при наблюдениях за определенной группой больных и беременными с нефропатией в динамике лечения.
Результаты проведенного контроля качества в серии из 20 проб на КФК-3 дали для уровня 0,6 г/л S1 = 0,057, S2 = 0,114 или CV=19%.
Для того же уровня на «Белуре 600» получено S1 = 0,029, S2 = 0,058 или CV = 9,6%.
То-есть измерения на «Белуре 600» в 2 раза точнее, чем на КФК-3.
У прибора «Белур-600» имеется и ряд других преимуществ, которые делают его более рациональным для использования в лабораториях:
1. Размеры прибора достаточно малы, что позволяет использовать его непосредственно на рабочем месте (разделка мочи и ее обработка проводится в вытяжном шкафу);
2. Простота в эксплуатации, легкость в обучении лаборантов;
3. Не требует подключения к сети;
4. Простота получения калибровочного фактора и быстрой перекалибровки прибора в случае необходимости;
5. Длительность гарантийного срока.
На протяжении пяти лет в клинико-диагностической лаборатории и отделении новорожденных «Роддома» МЛПУ «Когалымская городская больница» используются приборы НПО «Техномедика»: «Билимет», «Билитест» (два варианта), «МиниГем» (два прибора).
Отзывы о них самые положительные, каких-либо нареканий относительно плохой работы, некачественных результатов не было.
Надеемся, что прибор «Белур-600» займет достойное место в ряду приборов, изготовленных вами.
Заведующая клинико-диагностической лабораторией
МЛПУ «Когалымская городская больница»,
врач-лаборант высшей категории,
кандидат биологических наук
Петренко Е.П.
Выдержки из протоколов клинических испытаний
Институт Клинической Кардиологии им. А.Л. Мясникова
Российского Кардиологического Научно-Производственного Комплекса МЗ РФ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Результаты медицинских испытаний показали, что анализатор общего белка в моче фотометрический портативный АОБМФ-01-«НПП-ТМ», производства НПП» Техномедика» г. Москва , является удобным прибором для измерения белка в моче и может быть рекомендован для применения в клинико-диагностических лабораториях поликлиник, экспресс-лабораторий стационаров и ЛПУ РФ.
Состав и последовательность испытаний.
1. Определить возможности применения прибора для определения белка мочи.
Мы проводили испытания прибора, определяя общий белок мочи методом с пирогаллолом красным производства ЗАО » Вектор-Бест» » Белок-ПКГ-Ново».
Контролями служили контрольные образцы мочи производства » Био-Рад» и «Биосистемс» с содержанием белка в диапазоне от 0.04 г/л до 1. 44 г/ л, т.е. в диапазоне линейности определения белка данным реактивом.
Данные воспроизводимости и правильности в одной серии ( п= 10) представлены в таблице 1.
источник
Нормальные показатели: белок в норме в моче содержится в минимальных количествах, которые не обнаруживаются обычными качественными реакциями. Верхняя граница нормы белка в моче – 0,033 г/л. Если содержание белка выше этого значения, то качественные пробы на белок становятся положительными.
Клиническое значение определения:
Появление белка в моче называется протеинурия. Протеинурии могут быть ложными и почечными. Экстраренальные протеинурии могут быть при наличии примесей белкового происхождения из половых органов (вагинитах, уретритах и др.), количество белка при этом незначительно – до 0,01 г/л. Почечные протеинурии могут быть функциональными (при переохлаждении, физических нагрузках, лихорадке) и органическими — при гломерулонефрите, пиелонефрите, нефрите, нефрозах, почечной недостаточности. При почечных протеинуриях содержание белка может быть от 0,033 до 10 – 15 г/л, иногда выше.
Принцип метода: основан на том, что белок под действием неорганических кислот коагулирует (становится видимым). Степень помутнения зависит от количества белка.
Обнаружение белка в моче с 20% сульфосалициловой кислотой.
Реактивы: 20% р-р сульфосалициловой кислоты. Оборудование: темный фон.
1. Требования к моче: моча должна быть кислой (или слабокислой) рН, должна быть прозрачной, для этого мочу центрифугируют. Щелочную мочу подкисляют до слабокислой реакции среды, используя для контроля индикаторную бумагу.
2. В 2 пробирки одинакового диаметра наливают по 2 мл подготовленной мочи. 1 пробирка – контроль, 2 – опыт. В опытную пробирку добавляют 4 капли 20% сульфосалициловой кислоты.
3. Результат отмечают на темном фоне.
4. При наличии белка, моча в опытной пробирке мутнеет.
Качественное определение белка в моче тест – полосками.
Для выявления протеинурий используют различные монотест – полоски: Альбуфан, Альбустикс, Биофан Е и политесты: Трискан, Нонафан и др.
Обнаружение белка в моче по методу Робертса – Стольникова.
Принцип метода: основан на том, что белок под действием неорганических кислот коагулирует (становится видимым). Степень помутнения зависит от количества белка (т.е. кольцевая проба Геллера). При концентрации белка в моче 0,033 г/л к концу 3 минуты после наслаивания мочи появляется тонкое нитевидное белое кольцо.
Реактивы: 50% р-р азотной кислоты или реактив Робертса (98 частей насыщенного раствора поваренной соли и 2 части концентрированной соляной кислоты) или реактив Ларионовой (98 частей насыщенного р-ра поваренной соли и 2 части концентрированной азотной кислоты).
1. 
Требования к моче: моча должна быть кислой (или слабокислой) рН, должна быть прозрачной, для этого мочу центрифугируют. Щелочную мочу подкисляют до слабокислой реакции среды, используя для контроля индикаторную бумагу.
2. В пробирку наливают 2 мл 50% р-ра азотной кислоты или один из реактивов, затем осторожно по стенке пробирки с помощью пипетки наслаивают такой же объем подготовленной мочи
3. Пробу оставляют на 3 минуты
4. Через 3 минуты отчитывают результат. Результат отмечают на темном фоне в проходящем свете. Если кольцо широкое, компактное, то мочу разводят дистиллированной водой и вновь наслаивают на реактив.
5. Мочу разводят до тех пор, пока через 3 минуты не образуется тонкое нитевидное кольцо.
6. Расчет содержания белка в моче производят по формуле:
С = 0,033г/л х степень разведения.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
Лучшие изречения: Студент — человек, постоянно откладывающий неизбежность. 10372 — 
| 7278 — 
или читать все.
195.133.146.119 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.
Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно
источник
Для дошкольников и учеников 1-11 классов
16 предметов ОРГВЗНОС 25 Р.
Тема: Определение белка в моче.
Цель: Изучить исследование химических свойств мочи.
Изучить количественные и качественные методы определения белка в моче;
Изучить основные принципы работы с тест-полосками на автоматических анализаторах.
Тип занятия: практическое (6ч)
Студент должен знать: 
Качественные пробы для определения белка.
Метод Робертса – Стольникова.
Биуретовый метод определения белка (ТХУ).
Диагностическое значение исследования показателей.
Подготовить рабочее место к исследованию мочи.
Приготовить реактивы, посуду и оборудование к исследованию.
Определять химические свойства мочи (белок в моче качественными и количественными методами).
Работать с бланочной продукцией (оформление бланков анализа).
Правильно интерпретировать полученные результаты исследования.
Средства достижения поставленной цели:
1. Работа с конспектами, учебной и специальной литературой.
2. Подготовка к практическим занятиям с использованием методических рекомендаций преподавателя, выполнение и оформление практических работ.
3. Работа с информационными средствами обучения на электронных и бумажных носителях.
Оборудование учебного кабинета и рабочих мест кабинета:
посадочные места по количеству обучающихся;
рабочее место преподавателя;
специализированная мебель и оборудование.
Технические средства обучения:
компьютеры для оснащения рабочего места преподавателя и обучающихся;
технические устройства для аудиовизуального отображения информации;
аудиовизуальные средства обучения (презентация, учебный видеосюжет).
Результатом освоения урока является:
Формирование практических профессиональных умений и первоначального практического опыта, в том числе профессиональными ( ПК ) и общими ( ОК ) компетенциями:
ПК 1.1 . Готовить рабочее место для проведения лабораторных общеклинических исследований.
ПК 1.2 . Проводить лабораторные общеклинические исследования биологических материалов.
ПК 1.3 . Регистрировать результаты проведенных исследований.
ПК 1.4. Проводить утилизацию отработанного материала, дезинфекцию и стерилизацию использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.
ОК 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей профессии, проявлять к ней устойчивый интерес.
ОК 2 . Организовывать собственную деятельность, выбирать типовые методы и способы выполнения профессиональных задач, оценивать их эффективность и качество.
ОК 6. Работать в коллективе и команде, эффективно общаться с коллегами, руководством, пациентами.
ОК 9 . Ориентироваться в условиях смены технологий в профессиональной деятельности.
ОК 13. Организовывать рабочее место с соблюдением требований охраны труда, производственной санитарии, инфекционной и противопожарной безопасности.
I модуль. Теоретическая часть с элементами самостоятельной работы
Задание №1. Изучите и законспектируйте учебный материал в рабочие тетради.
М оча здорового человека обычно содержит менее 0,002 г/л и редко до 0,012 г/л белка и как правило такое содержание белка в моче называют «в виде следов» и общепринятыми (унифицированными) химическими методами в моче здорового человека не определяется.
Содержание белка в порциях мочи, собранной в разное время суток, может колебаться в значительных пределах.
П оявление белка в моче называется протеинурия.
В зависимости от суточной потери белка различают следующие степени протеинурии: умеренная — до 1 г; средняя — от 1 до 3 г; выраженная — более 3 г.
Существует два основных вида протеинурии:
Протеинурии, обусловленные заболеваниями мочевыводящих путей;
протеинурии, при поражениях (заболеваниях) почек.
Протеинурии, связанные с воспалительными процессами мочевыводящих путей, сопровождаются появлением в моче значительного количества лейкоцитов или эритроцитов, что, однако, не позволяет исключить одновременного попадания белка в мочу из почечной паренхимы; содержание белка редко превышает 1 г/л.
Почечная протеинурия в большинстве случаев связана с повышенной проницаемостью гломерул и делится на 2 группы :
К физиологической протеинурии относят случаи временного появления белка в моче, не связанные с заболеваниями:
после приема большого количества пищи, богатой не денатурированными белками (сырое мясо, сырые яйца);
при интенсивной мышечной работе (продолжительные походы, спортивные соревнования);
при приеме холодной ванны или душа;
при сильных эмоциональных переживаниях;
при эпилептических приступах.
Различают ортостатическую, или юношескую, протеинурию, встречающуюся у детей и подростков и проходящую с возрастом. В дифференциально — диагностическом отношении имеет практическое значение то, что ортостатическая альбуминурия обнаруживается нередко в период выздоровления после острого гломерулонефрита.
Патологическая почечная протеинурия может быть следствием органических заболеваний почек и других органов и систем: острые гломерулонефриты; хронические гломерулонефриты; острые пиелонефриты; хронические пиелонефриты; нефропатии беременных; различные заболевания, сопровождающиеся лихорадкой; выраженная хроническая сердечная недостаточность; а милоидоз почек; липоидный нефроз; туберкулез почки; геморрагические лихорадки; геморрагический васкулит; выраженная анемия; гипертоническая болезнь и др.
Задание №2. Перепишите и зарисуйте схемы лабораторных методов определения белка в моче.
Лабораторные методы определения белка в моче
Существуют качественные и количественные методы определения белка в моче, они основаны на коагуляции белка в объеме мочи или на границе сред (моча и кислота); при этом измерение степени коагуляции делает пробу количественной.
проба с 20% сульфосалициловой кислотой (унифицированная);
кольцевая проба Геллера (в настоящее время не используется);
обнаружение белка с помощью индикаторной бумаги (полосок) и тест-полосок.
унифицированный метод Брандберга-Робертса-Стольникова;
с 3% сульфосалициловой кислотой.
Качественные методы определения белка в моче
Задание №3. Определение белка в моче с помощью у нифицированной пробы с 20% сульфосалициловой кислотой
Принцип метода: основан на коагуляции белка в объеме мочи или на границе сред (моча и кислота)
Посуда, оборудование и реактивы:
20% сульфосалициловой кислоты (2-гидрокси-5-сульфобензойная кислота C 7 H 5 0 6 S ).
3мл профильтрованной мочи
В две пробирки вносят по 3 мл профильтрованной мочи, в одну из них (опытную) прибавляют 6—8 капель сульфосалициловой кислоты. На темном фоне сравнивают обе пробирки.
Интерпретация полученных результатов:
Помутнение в опытной пробирке свидетельствует о наличии в моче белка — проба положительна.
Примечание. Мочу со щелочной реакцией перед исследованием подкисляют добавлением нескольких капель 10% раствора уксусной кислоты
Задание №4. Определение белка с помощью кольцевой пробы Геллера
Принцип метода: В основу положена кольцевая проба, заключающаяся в том, что при добавлении к моче азотной кислоты на границе сред (кислота – моча) при наличии белка происходит его коагуляция и появляется белое кольцо.
Посуда, оборудование и реактивы:
— реактивы: 30% раствор азотной кислоты ( HNO 3) ( d = 1,2) или реактив Ларионовой : 20— 30 г хлорида натрия ( NaCl ) растворяют при нагревании в 100 мл дистиллированной воды, остужают, фильтруют; к 99 мл фильтрата приливают 1 мл концентрированной HNO 3.
В пробирку наливают 1 — 2 мл 30% раствора HNO 3 или реактива Ларионовой и осторожно по стенке наслаивают столько же профильтрованной мочи.
Интерпретация полученных результатов:
Появление на границе двух жидкостей между 2-й и 3-й мин тонкого белого кольца указывает на наличие белка в моче.
Зарисуйте схему определения белка
Количественное определение белка
Принцип метода: В основу положена кольцевая проба Геллера, заключающаяся в том, что при добавлении к моче азотной кислоты на границе сред (кислота — моча) при наличии белка происходит его коагуляция и появляется белое кольцо.
Посуда, оборудование и реактивы:
Биологическая жидкость (моча);
В пробирку наливают 1 — 2 мл 30% раствора HNO 3 или реактива Ларионовой и осторожно по стенке наслаивают столько же профильтрованной мочи.
Интерпретация полученных результатов:
Появление на границе двух жидкостей между 2-й и 3-й мин
тонкого белого кольца указывает на наличие белка в концентрации примерно 0,033 г/л. При появлении кольца раньше 2-х мин после наслаивания мочу следует развести дистиллированной водой и провести повторное исследование с разведенной мочой. Степень разведения мочи подбирают в зависимости от вида кольца, его ширины, компактности и времени появления.
При нитевидном кольце, появившемся ранее 2 мин, мочу разводят в 2 раза, при широком — в 4 раза, при компактном — в 8 раз и т.д. Концентрацию белка вычисляют, умножив степень разведения на 0,033 г/л.
Белое кольцо может образовываться при наличии большого количества уратов; в отличие от белкового оно появляется немного выше границы двух жидкостей и растворяется при легком нагревании.
Задание №6. Определение количества белка в моче с 3 % сульфосалициловой кислотой
Принцип метода: Концентрация белка в моче пропорциональна помутнению, появляющемуся при его коагуляции сульфосалициловой кислотой
Посуда, оборудование и реактивы:
0,9% раствор хлорида натрия;
1% стандартный раствор альбумина — 1 г лиофилизированного альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9% раствора NaCl в колбе емкостью 100 мл, а затем доводят до метки тем же растворителем. Реактив стабилизируют прибавлением 1 мл 5% раствора азида натрия ( NaN 3). При хранении в холодильнике реактив стабилен в течение 2 месяцев.
В пробирку вносят 1,25 мл профильтрованной мочи, добавляют 3,75 мл 3% раствора сульфосалициловой кислоты, перемешивают. Через 5 мин пробу фотометрируют на ФЭКе при длине волны 590—650 нм (оранжевый или красный светофильтр) против контроля в кювете с длиной оптического пути 5 мм. Контролем служит проба, в которой к 1,25 мл мочи добавлено 3,75 мл 0,9% раствора хлорид е натрия. Концентрацию белка рассчитывают по калибровочному графику, для построение которого готовят разведения стандартного раствора альбумина (см. таблицу) . Из каждого полученного разведенного раствора берут по 1,25 мл и обрабатывают, как опытные пробы.
Приготовление разведений для построения калибровочного графика
0,9% раствор хлорида натрия, мл
Прямолинейная зависимость величины экстинкции и концентрации белка сохраняется до 1 г/л. При более высоких концентрациях белка пробу следует разводить и учитывать разведение при расчете.
При наличии в моче веществ, содержащих йод, могут быть получены ложноположительные результаты. Поэтому тест нельзя использовать у больных, принимающих препараты йода или прошедших исследование с применением йодсодержащих рентгеноконтрастных соединений. Ложноположительные J реакции при проведении исследования могут быть вызваны приемом сульфаниламидных лекарственных средств, больших доз пенициллина и при высоких концентрациях в моче мочевой кислоты.
Зарисуйте схему определения белка
Задание №7. Обнаружение в моче белка Бенс-Джонса
Принцип метода: основан на реакции термопреципитации
Посуда, оборудование и реактивы:
Реактив: 2М ацетатный буфер рН 4,9.
4 мл профильтрованной мочи смешивают с 1 мл буферного раствора и нагревают 15 мин на водяной бане при температуре 56°С.
Интерпретация полученных результатов:
При наличии в моче белка Бенс-Джонса уже в первые 2 мин появляется выраженный осадок.
При концентрации белка менее 3 г/л проба может быть отрицательна, что встречается довольно редко, так как обычно концентрация белка Бенс-Джонса в моче весьма значительна.
Наиболее достоверно выявление белка Бенс-Джонса осаждением при температуре 40—60°С. Однако в слишком кислой (рН менее 3,0) или слишком щелочной (рН более 6,5) моче, при низкой относительной плотности мочи и низкой концентрации бежа Бенс-Джонса (менее 3 г/л) осаждение может не происходить.
Зарисуйте схему определения белка
II модуль. Самостоятельная работа с исследовательским этапом
Задание №1. Изучите и законспектируйте приложение №1 « Обнаружение белка с помощью диагностических тест-полосок»
— Получите образцы биологической жидкости (мочи) у преподавателя, пронумеруйте образцы;
— Проведите исследование мочи с помощью диагностических тест-полосок;
— Оцените полученный результат (норма, патология). Предположите причину возникновения белка в моче.
— Результат запишите в бланки анализа, сдайте их преподавателю.
« Обнаружение белка с помощью диагностических тест-полосок»
Принцип. Белок изменяет цвет индикатора, нанесенного на полоску. Индикаторы упакованы в комплекте по 100 полосок, которые хранятся в плотно закрытом пенале, прохладном и сухом месте.
Правила работы с диагностическими тест-полосками
При работе с диагностическими тест-полосками необходимо соблюдать следущие правила:
— держать диагностические тест-полоски в плотно закрытых упаковках-пеналах;
— хранить пеналы в темном, сухом, прохладном месте при температуре, не превышающей 30ºС, но не в холодильнике;
— не подвергать полоски действию влаги и прямого солнечного света, высокой температуры и летучих химических веществ;
— доставать только строго необходимое количество полосок, после чего немедленно закрывать пенал;
— не дотрагиваться пальцами до диагностических зон.
1. Для исследования используйте утреннюю мочу, собранную в одноразовый пластиковый контейнер для мочи (или чистую сухую посуду). Перемешайте доставленную мочу, но не центрифугируйте.
При использовании нестандартной приспособленной тары остатки моющих средств в посуде для сбора мочи являются причиной ложных результатов.
2. Из пенала возьмите тест-полоску.
3. Сразу же закройте пенал фабричной крышкой, полоску охраняйте от влаги.
4. Индикаторные бумажные зоны полоски опустите на 2-3 секунды в исследуемую мочу и сразу же выньте.
5. Для удаления избытка влаги с диагностических зон полоски проведите ее длинным краем по краю контейнера (или иной емкости, в которой доставлена моча) или приложите этот край полоски к фильтровальной бумаге.
Смывать с диагностических зон полоски лишнюю мочу нельзя.
6. По истечении времени, указанного на этикетке пенала или в инструкции к каждому тесту, сравните цвет соответствующей диагностической зоны с цветной шкалой на этикетке пенала с полосками (эталоном). Порядок проведения теста представлен рисунками 1-7.
7. Реакцию оценивают как положительную или отрицательную. Или выражают в цифровом обозначении в г/л. (см. рисунок №8).
Рис. №8 Оценка результатов исследования
III Модуль. Контрольные вопросы и задания
Ответьте на поставленные вопросы, используя рабочую тетрадь
Расскажите метод определения белка в моче 50% азотной кислотой.
Расскажите метод определения белка в моче 20 % ССК.
Расскажите методику определения белка в моче методом Робетса – Стольникова – Бранберга.
Расскажите методику определения белка в моче диагностическими тест- полосками.
Какие существуют правила работы с диагностическими тест-полосками.
Назовите основные критерии правильно проведенного теста.
Расскажите методику обнаружения в моче белка Бенс-Джонса.
Диагностическое значение определения химических свойств мочи.
Клиническая оценка химических свойств мочи.
Запишите в рабочей тетради термины и дайте им обозначение , используя изученный материал
Знать теоретический и практический материал.
Отвечать на контрольные вопросы.
Литература для самостоятельной подготовки: И.И.Миронова, Л.А.Романова, В.В.Долгов. Общеклинические исследования: моча, кал, ликвор, эякулят.- М.-Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2005
источник