Бак посев из цервикального канала и мочи с антибиотикограммой

Бактериологический посев (бакпосев) – это микробиологическое лабораторное исследование биологического материала человека путем его посева на определенные питательные среды при определенном температурном режиме с целью выявления наличия в нем любого количества патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и дальнейшего решения задач специфического лечения.

При выделении определенных микроорганизмов проводится второй немаловажный анализ – антибиотикограмма – определение чувствительности обнаруженных патогенов к антибактериальным препаратам и бактериофагам.

• Высокая специфичность метода (то есть перекрестных ложных реакций не наблюдается).
• Возможность исследовать абсолютно любую биологическую жидкость человека.
• Лечебная цель – определение чувствительности выявленного микроба к тому или иному лечебному средству (антибиотикограмма), что позволяет с достаточно высокой точностью проводить лечебные назначения.

• Длительность получения результата.
• Высокие требования к забору материала.
• Определенные требования к квалификации персонала бактериологических лабораторий.

Применение микробиологического метода исследования достаточно широко распространено в медицинской практике, в частности, в инфекционных болезнях, гинекологии, урологии, хирургии, отоларингологии, онкологии и других. Безусловным показанием для необходимости проведения бакпосева являются любое воспалительное заболевание органов и систем организма человека, подозрение на септический процесс.

Для исследования забираются следующие биологические среды организма человека: носоглоточная слизь, слизь из зева, секрет бронхиального дерева (мокрота), испражнения (кал), слизь уретры, цервикального канала, секрет простаты, моча, кровь, спинномозговая жидкость, грудное молоко, желчь, содержимое кист, воспалительных очагов, раневое отделяемое.

В слизи носа и зева можно обнаружить гемолитические стрептококки (Streptococcuc pyogenes, Streptococcuc agalactiae), пневмококки (Streptococcuc pneumoniae), золотистый стафилококк (Staphylococcus auereus), коринобактерии дифтерии (Corynebacterium diphtheriae), гемофильную палочку (Haemophilus influenzae типа b), менингококк (Neisseria meningitidis), листерии (Listeria).

В испражнениях пытаются выявить кишечную группу бактерий – салмонеллы и шигеллы (Salmonella spp., Shigella spp.) иерсинии (Iersiniae spp.), тифо-паратифозную группу бактерий (Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B), условно — патогенные возбудители кишечных инфекций, анаэробные микробы, возбудителей пищевых токсикоинфекций, а также обследовать кал на дисбактериоз кишечника.

В содержимом ран, биопунктате, гнойном отделяемом можно выявить псевдомонады или синегнойную палочку (Pseudomonas aeruginosa).

Слизь урогенитального тракта обследуют на предмет наличия в ней возбудителей инфекций, передающихся половым путем – гонококка, трихомонады, грибов (Neisseria gonorrhoeae ,Trichomonas vaginalis, грибы рода Candida), уреаплазму (Ureaplasma urealyticum), микоплазму (Mycoplasma hominis), листерии (Listeria), также можно исследовать мазок на бактериальную флору.

Кровь можно посеять (обследовать) на стерильность.

Такие материалы, как грудное молоко, моча, секрет простаты, соскоб, мазок, раневое содержимое, суставная жидкость, желчь исследуют на общую обсемененность (бактериальную флору).

Материал для исследования в бактериологической лаборатории помещают (делают посев) на специальные питательные среды. В зависимости от желаемого поиска того или иного возбудителя или группы возбудителей посев производится на разные среды. Например, это может быть избирательная или элективная питательная среда (для роста какого-то одного возбудителя, рост других микробов при этом угнетается), примером которых может быть свернутая лошадиная сыворотка для выявления возбудителей дифтерии или среда с селенитом или с солями желчных кислот для обнаружения кишечных возбудителей.

Другим примером могут быть дифференциально-диагностические среды (среда Гисса), которые используются для расшифровки бактериальных культур. При необходимости с жидких питательных сред делают пересев на твердые среды с целью большей идентификации колоний.

Бакпосев. Колонии на твердой среде

Затем питательные среды помещают в термостат (специальный прибор), в котором создаются благоприятные условия (температура, влажность и др.) для роста и размножения возбудителей, в термостате среды находятся определенное время.

Далее проводят контрольный осмотр выросших колоний микроорганизмов, которые называют «культурой микроорганизмов». При необходимости проводят микроскопию материала колоний с предварительной окраской специальными красителями.

Что оценивается при контрольном осмотре? Это форма, цвет, плотность колоний, после дополнительного исследования – способность разлагать некоторые неорганические и органические соединения.

Далее проводят подсчет возбудителей. При микробиологической исследовании учитывается такое понятие, как колониеобразующая единица (КОЕ) — одна микробная клетка, способная образовать колонию, или видимая колония микробов. По КОЕ возможно определить концентрацию или количество микроорганизмов в исследуемом образце. Подсчет КОЕ проводится разными методами: подсчетом колоний под микроскопом, методом серийных разведений, секторным методом.

Качество проводимого бактериологического посева во многом зависит от правильности забора материала для исследования. Нужно помнить простое правило: стерильная посуда и стерильные инструменты! Несоблюдение этих требований приведет к контаминации (внешней обсемененности материала представителями кожи и слизистых, окружающей среды, не имеющих клинического значения), что автоматически сделает исследование бессмысленным. Для забора материала используют стерильную посуду, которая выдается в самой бактериологической лаборатории на руки пациенту при амбулаторном обследовании, для забора испражнений, мочи. Из различных очагов воспаления забор проводится только стерильными инструментами (шпатели, петли, ложки) специально обученным медицинским работником (в поликлинике обычно это медсестра инфекционного или смотрового кабинетов).

Кровь и мочу собирают в сухие пробирки, остальные материалы в посуду с транспортной питательной средой.

Стерильная посуда для забора мочи и испражнений

Другое правило: забор материала до начала антибиотикотерапии! На фоне приема антибиотиков результат будет существенно искажен. Если принимали такие препараты, то прекратить их прием за 10 дней до исследования и сообщить врачу о факте приема любых антибактериальных препаратов.

Должна быть обеспечена быстрая доставка в лабораторию! Микроорганизмы могут погибнуть при высыхании, изменении кислотности. Например, кал должен быть доставлен в теплом виде.

При заборе мочи: после утренних гигиенических процедур забирается средняя порция утренней мочи в количестве 10-15 мл в стерильную посуду. Доставить в лабораторию в течение 2х часов.

При заборе мазка из зева и носа: нельзя утром чистить зубы, полоскать рот и нос дезинфицирующими растворами, пить и есть.

Забор испражнений должен производиться утром стерильной лопаточкой в стерильную посуду в объеме 15-30 гр. Недопустимо попадание в пробу мочи. Доставка в течение 5 часов. Не допускается замораживание или ночное хранение. Собирать кал без применения клизм и слабительных.

Кровь для бакпосева берется до начала антибиотикотерапии на фоне подъема температуры в стерильную пробирку в количестве не менее 5 мл (детям), не менее 15 мл (взрослым).

Мокрота собирается утром натощак в стерильный контейнер во время приступа кашля со слизью. Перед забором почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой. Доставить в лабораторию в течение 1 часа.

Грудное молоко собирается после гигиенической процедуры. Околососковая область обрабатывается тампоном, смоченным 70% этиловым спиртом. Первые 15 мл сцеженного молока не используются. Затем 5 мл сцеживается в стерильный контейнер. Доставить в течение 2х часов.

Отделяемое половых органов: у женщин забор проводится не ранее, чем через 14 дней после менструации, не ранее чем через 1 месяц после отмены антибиотиков, желательно в течение 2х часов не мочиться; у мужчин – не рекомендуется мочиться в течение 5-6 часов до взятия пробы.

При исследовании слизи из носоглотки результат будет готов через 5-7 дней, исследование испражнений займет около 4-7 дней. При обследовании соскоба урогенитального тракта длительность исследования займет 7 дней. Посев на общую флору длится 4-7 дней. Больше всего по длительности готовится кровь на стерильность – 10 дней. Однако самый ранний предварительный результат могут дать через 3 дня.

Результатом бакпосева является как качественная оценка (сам факт наличия возбудителя в исследуемом образце), так и количественная оценка (концентрация возбудителя в материале).

Расшифровка количественного результата проводится самым простым способом. Выделяют 4 степени роста (обсемененности) микроорганизмов в исследуемом материале. Для 1 степени роста характерен скудный рост только на жидкой среде, на твердой – роста нет; для 2 степени – рост на плотной среде до 10 колоний одного вида; для 3 степени – от 10 до 100 колоний; для 4 степени – более 100 колоний.

Это важно для условно-патогенной флоры, при выявлении которой 1 и 2 степень не считают причиной болезни, это просто свидетельствует о загрязненности материала для исследования, 3-4 степени указывают на этиологию (причину) заболевания. Если выделена патогенная флора, то учитываются все без исключения выделенные колонии, то есть все 4 степени.

Результат подсчета колоний в КОЕ/мл расшифровывается следующим образом: 103/мл означает обнаружение 1 колонии; 104/мл – от 1 до 5 колоний; 105/мл – рост 5-15 колоний; 106/мл – более 15.
Количественный результат важен не только для определения степени обсемененности, но и контроля правильности проводимого лечения.

Определение чувствительности выделенного микроорганизма к тому или иному антибактериальному препарату является важной составляющей бактериологического исследования. Набор препаратов, к которому чувствителен или резистентен возбудитель, и является антибиотикограммой.

Чувствительность возбудителя – это восприимчивость к лекарственному препарату, то есть антибиотик подействует на рост и размножение микроба. Резистентность – устойчивость возбудителя к тому или иному препарату, то есть антибактериальный препарат не подействует.

Антибиотикограмма выдается в определенных единицах измерения – минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

источник

Бактериологический посев на флору с антибиотикограммой в гинекологии используется для определения неспецифической микрофлоры в материале, взятом из половых путей, выявления потенциального возбудителя воспалительного процесса и определения его чувствительности к антибактериальным препаратам. Антибиотикограммой называется перечень антибиотиков, к которым имеется чувствительность или нечувствительность выделенных культур микроорганизмов. Бактериологический посев исследуемого материала производится на специальные питательные среды, помещенные в благоприятные для размножения микроорганизмов условия.

Бактериологический (культуральный) посев исследуемого материала производится на специальные питательные среды, помещенные в благоприятные для размножения микроорганизмов условия, с последующей оценкой результатов (идентификацией микроорганизмов и исследованием их биохимических и биологических свойств). Специальные тесты определения чувствительности к антибиотикам, антисептикам и бактериофагам позволяют вне организма пациентки смоделировать действие химиотерапевтических препаратов на выделенные микроорганизмы и подобрать эффективное для данного случая лекарственное средство.

Бактериологический посев на флору обладает высокой специфичностью, но имеет свои недостатки: длительный срок исследования; повышенные требования, предъявляемые к забору материала; высокий уровень квалификации сотрудников лабораторий и отсюда — увеличение сроков лечения. Клиническая гинекология применяет бактериологический посев на флору как дополнительный к другим лабораторным исследованиям (микроскопия мазков с окраской по Грамму, ИФА и ПЦР) метод диагностики.

Показаниями к проведению бактериологического посева на флору в гинекологии являются воспалительные процессы в малом тазу у женщин, в том числе имеющие хроническое или рецидивирующее течение, подозрение на ИППП. Бактериологический посев на флору применяется в комплексном обследовании пациенток при установлении причин бесплодия или невынашивания беременности.

Материал для бактериологического посева на флору у женщин берут до начала менструации и противовоспалительного лечения. Необходимо прекратить прием любых антибактериальных препаратов за 14 дней до взятия анализа. Нельзя пользоваться вагинальными свечами, спринцеваться, жить половой жизнью минимум за сутки до исследования. Также накануне не рекомендуется проходить УЗИ вагинальным датчиком, непосредственно перед обследованием не проводить туалет наружных половых органов и воздержаться от мочеиспускания в течение 1-2 часов. Материал для бакпосева не должен содержать примесей крови. Взятие анализа производится до проведения двуручного гинекологического исследования.

Забор биоматериала проводит гинеколог во время осмотра влагалищными зеркалами при соблюдении правил асептики. Обычно материал для бактериологического посева на флору берется из цервикального канала, заднего свода влагалища и уретры. Перед взятием мазка из цервикального канала необходимо удалить слизистую пробку и обработать шейку матки стерильным физраствором. Образцы биоматериала берут стерильным ватным тампоном, помещают в стерильную посуду, маркируют и в короткие сроки отправляют в бактериологическую лабораторию. Тампон при извлечении не должен касаться стенок влагалища. При бартолините выполняют пункцию бартолиниевых желез, а содержимое абсцесса железы забирают стерильным ватным тампоном. Материал для исследования из матки берется специальным инструментом типа шприца-аспиратора. При воспалении придатков матки забор материала из очага инфекции проводят или во время оперативного вмешательства, или методом диагностической пункции через своды влагалища.

Основными стадиями исследования являются: посев биоматериала на питательные среды; выделение чистых культур (штаммов) микроорганизмов; проведение идентификации и дифференциации выделенных микробных культур; тесты in vitro на чувствительность микроорганизмов к антибиотикам, антисептикам и бактериофагам.

Взятый у пациента материал высевают на специальные питательные среды (чаще элективные и дифференциально – диагностические, обеспечивающие предпочтительный рост определенных видов микроорганизмов). Питательные среды с биоматериалом помещают в термостаты, поддерживая благоприятные условия для размножения микроорганизмов (температура, влажность). Через определенное время осуществляют контрольный осмотр роста микроорганизмов на питательных средах. При этом оцениваются видимые характеристики микробных колоний (их размер, плотность, цвет, форма). В случае необходимости проводят исследования материала под микроскопом. Для дифференциации сходных микроорганизмов дополнительно проводят исследование с помощью биохимического ряда.

В результате бактериологического посева на флору производится выделение чистых культур (штаммов) микроорганизмов, их идентификация и количественная оценка в единицах КОЕ (колониеобразующие единицы). Различают 4 степени роста условно – патогенных микроорганизмов при первичном посеве: I и II степени (очень скудный и скудный рост) — чаще всего говорят о загрязнении извне, III (умеренный) и IV (обильный) степени роста — о причинной роли данного микроорганизма в развитии воспалительного процесса.

Важным преимуществом бактериологического посева на флору является определение чувствительности данного микроорганизма к антибиотикам. Составление антибиотикограммы обеспечивает подбор оптимального лекарственного препарата для лечения, что важно в условиях широкого распространения антибиотикоустойчивых штаммов микроорганизмов. С этой целью применяется метод бумажных дисков или метод серийных разведений. Ведущим является дискодиффузный метод, при котором эффективность антибактериальных препаратов определяется по диаметру зоны задержки роста данного микроорганизма вокруг дисков, пропитанных различными концентрациями антибиотиков. Максимально точный в количественном отношении, но более трудоемкий – метод серийных (последовательных) разведений антибиотиков в жидких и плотных питательных средах.

Результаты антибиотикограммы выражаются в единицах МИК (минимально ингибирующей концентрации). Для достижения лечебного эффекта важно, чтобы в крови пациента концентрация лекарственного препарата примерно в 4—8 раз превышала МИК.

источник

Бактериологический посев – это анализ, выявляющий в том числе чувствительность патогенного микроорганизма к антибактериальным лекарственным средствам. С помощью этого метода исследования биологического материала специалисты определяют тип возбудителя инфекции, его концентрацию и патогенность, что помогает врачу назначить адекватное, эффективное для конкретного клинического случая специфическое лечение.

Посев на чувствительность, называемый еще бакпосевом на микрофлору – это вид исследования, применяемый при диагностике венерологических, гинекологических, урологических, дерматологических и других инфекционных заболеваний. После забора биологического материала производится его посев в различные питательные среды. Спустя некоторое время «разросшиеся» на нем в результате искусственного культивирования микроорганизмы тестируют на чувствительность к разным типам антибиотиков или противомикробных препаратов.

Исследование, называемое антибиотикограммой, демонстрирует, от препаратов какой фармакологической группы быстрее всего погибнет возбудитель инфекции. Кроме того, анализ определяет концентрацию патогенных микроорганизмов (выражается в КОЕ/мл, называемых колониеобразующими единицами), их резистентность (устойчивость) по отношению к медикаментозным средствам и внешним факторам. Для проведения исследования могут забираться следующие биоматериалы:

кровь;
урина;
желчь;
кал;
сперма;
спинномозговая жидкость;
слизь из уретры;
слизь из цервикального канала;
слизь из зева;
слизь из носоглотки;
мокрота;
содержимое кисты;
содержимое очага воспаления;
раневое отделяемое;
грудное молоко;
секрет простаты.

Выращивание колоний патогенных микроорганизмов на исследуемых материалах проводят в чашках Петри, либо сначала в жидкой среде, а затем на скошенном агаре в термостате на протяжении суток. После штаммы полученной культуры переносят на предметное стекло, окрашивают и изучают морфологические свойства микроорганизма под микроскопом. Внимание обращают на размер и форму клеток и их тинкториальные свойства (отношение к окрашиванию).

Бакпосев на микрофлору широко применяется в медицинской практике при диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний (в гинекологии, урологии, венерологии, отоларингологии, хирургии и других областях), и при риске развития сепсиса (системной реакции на развивающееся воспаление). Анализ на чувствительность к антибиотикам позволяет выявить и вывести возбудителей следующих заболеваний:

бактериальный вагинит;
инфекционные ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем);
хламидиоз;
гонорея;
трихомониаз;
цистит;
кишечная инфекция;
пневмония;
туберкулез;
ангина и мн. др.

Определение чувствительности к антибиотикам при беременности проводится как минимум дважды – сразу после постановки на учет и на 36 неделе. Делается мазок из влагалища и со слизистой оболочки зева и носоглотки. Биоматериал исследуют, определяют наличие урологических и мочеполовых инфекций и золотистого стафилококка – возбудитель, провоцирующий гнойный мастит, послеродовой сепсис и др. инфекции в период после родоразрешения. При наличии показаний (заболевания почек, повышенный уровень лейкоцитов в моче и др.) могут назначаться:

посев мочи;
мазок из шейки матки;
соскоб влагалищного эпителия;
бактериальный посев из цервикального канала.

В зависимости от типа биоматериала и показаний к проведению анализа по результатам исследования выделяют следующие виды патогенных возбудителей бактериальных инфекций:

Слизь из носоглотки и зева: золотистый стафилококк, гемолитический стрептококк, менингококк, листерия, коринебактерия дифтерии, гемофильная палочка, синегнойные пневмококки.
Гнойное отделяемое, содержимое ран, биопунктат: синегнойная палочка, псевдомонада.
Урогенитальная слизь: бактериальная флора, возбудители мочеполовых инфекций (микоплазма, гарднерелла, уреаплазма, трихомонада, грибы, гонококк, листерия).
Каловые массы: тифопаратифозная бактериальная группа, кишечная группа (иерсинии, сальмонеллы, шигеллы), анаэробные возбудители пищевых инфекций, условно-патогенные возбудители кишечных инфекций.
Кровь исследуют на стерильность.
Остальные биожидкости – на обсемененность (бактериальную флору).

По статистике, около 80% ошибок в лабораторных исследованиях вызваны ошибками при сборе и транспортировке материалов для обследования. Как правило, забор осуществляет медицинский персонал, но некоторые биоматериалы больной собирает сам. Поэтому при подготовке к сдаче анализа необходимо соблюдать следующие общие правила:

Во время забора биоматериала требуется исключить попадание в него антисептических или дезинфицирующих соединений, обсеменения бактериями и иными организмами. Для этого инструментарий и посуда для сбора должны быть стерильными.
На результаты посева на антибиотики влияет прием пациентом антибактериальных и иных медикаментозных препаратов. О терапии необходимо сообщить назначившему анализ врачу, применение лекарств необходимо приостановить за срок не менее 10 суток до назначенной даты анализа.
Материалы для обследования должны быть доставлены в лабораторию в специальных герметичных контейнерах в максимально короткие сроки. Во время транспортировки собранные биологические жидкости должны быть защищены от воздействия света, температур, механического воздействия.

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотикам проводится на разных видах биоматериала. В зависимости от их типа необходимо соблюдать следующие предписания специалистов при заборе проб:

Сбор мочи производят по утрам, натощак, после предварительно проведенных гигиенических процедур. Необходимый объем урины составляет от 10 до 15 мл. Забор производят в специальную стерильную посуду, материал должен быть доставлен в лабораторию не позднее чем через два часа.
Мазок на чувствительность к антибиотикам из носоглотки или зева проводят по утрам, до приема пищи и воды и до проведения гигиенических процедур (чистки зубов и полоскания рта).
Сбор кала производится утром, стерильной лопаткой в стерильную посуду, необходимый объем биоматериала – до 30 мг. Недопустимо попадание мочи, использование клизмы или слабительных препаратов, замораживание. Срок доставки в лабораторию не должен превышать 3-5 часов.
Проба мокроты доставляется в место проведения исследования на протяжении часа после забора, который проводят натощак, после предварительной чистки зубов и полоскания рта.
Пробу грудного молока берут после проведения гигиенических процедур и обработки кожи вокруг соска спиртом. Перед забором материала в объеме 5 мл (в стерильную посуду) сцеживают от 15 мл жидкости. Время доставки в лабораторию не должно превышать 2 часов.
Мазок со слизистых влагалища и другие виды забора материала на мочеполовые инфекции. Анализ проводят не ранее чем через 2 недели после окончания менструации (точную дату определит врач на основе данных о месячном цикле). Последнее мочеиспускание должно быть проведено за два часа до взятия пробы у женщин и за 5-6 – у мужчин.
Объем забранной для посева крови у детей составляет 5 мл, у взрослых – 15 мл.

Посев на флору и чувствительность к антибиотикам проводится в течение некоторого продолжительного времени (по сравнению с готовностью результатов других анализов). Выделение штаммов проводится не одинаково, потому что разные биологические среды человеческого организма требуют индивидуальных подходов. Примерные сроки результатов анализов для разных типов биоматериала:

Кал: от 5 дней до недели.
Урогенитальные материалы: 4-10 дней.
Кровь: 10-14 дней (первые предварительные данные готовы через 3-4 дня).
Слизь из зева или носоглотки: от 5 до 7 дней.
Посев на флору: 5-10 дней.

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотику дает представление о качественной и количественной оценке исследуемого образца. Качественная оценка (наличие возбудителя) классифицируется по следующим четырем степеням роста:

Первая. При этой степени рост на твердой среде отсутствует, на жидкой регистрируется небольшой рост.
Вторая. Небольшой рост на твердой среде (до 10 колоний).
Третья. Значительный рост на твердой среде (10-100 колоний).
Четвертая. Больше 100 колоний.

При обнаружении в результате исследования условно-патогенной микрофлоры (непатогенных грамотрицательных бактерий) первые две степени относят к норме, при третьей или четвертой степени говорят о присутствии в организме микробов-возбудителей инфекции, размножение которых стало причиной возникновения и развития заболевания. При наличии в материале патогенной микрофлоры все четыре степени свидетельствуют о наличии болезни. Например, сапрофитная микрофлора в бакпосеве мочи свидетельствует об инфекции мочеполовой системы.

Количественная оценка проводится в колониеобразующих единицах (КОЕ), обозначающих объединение (сообщество) клеток бактерий, образовавших колонию. Она помогает установить степень обсемененности и проконтролировать достаточность назначенных для лечения дозировок лекарственных средств (адекватность проведенных медикаментозных назначений). Принято следующее условное соотношение КОЕ и миллилитров:

1 колония – это 103 КОЕ/мл.
1-5 колоний – это 104 КОЕ/мл.
5-15 колоний – это 105 КОЕ/мл.
более 15 колоний – это 106 КОЕ/мл

Тест на чувствительность к антибиотикам, проводимый одновременно с посевом на определение возбудителя инфекции, называют антибиотикограммой. Выделив патогенный микроорганизм, его пересаживают в благоприятную для роста среду, где исследуется резистентность (чувствительность) конкретного штамма к активным компонентам антибактериальных препаратов. Чувствительные к антибиотику патогенные клетки не растут в зоне его действия, устойчивые показывают рост колоний.

Распространенным методом проведения антибиотикограммы является метод диффузии смоченных в антибактериальном препарате бумажных полосок в чашке Петри с исследуемой средой. Их выкладывают по поверхности, отступая на два сантиметра от края чашки и от друг друга. После 5-7 часов при комнатной температуре чашу помещают в термостат на срок от 3 до 5 дней. По результатам исследования рост колоний оценивается следующим образом:

Кольцо вокруг полоски диаметром от 2,5 см говорит о повышенной чувствительности микрофлоры к препарату;
2,5-1,5 см – стандартная чувствительность (средняя клиническая эффективность).
до 1,5 см – слабая реакция, лечение с высокой вероятностью не будет эффективным.
Отсутствие задержки роста колонии – полная устойчивость к медикаментозному средству.

источник

Посев на аэробную и факультативно-анаэробную бактериальную флору с определением чувствительности к основному спектру антимикробных препаратов и бактериофагам

Взятие материала проводится до начала антибактериальной терапии или не ранее, чем через 2 недели после ее окончания.

Правила взятия биоматериала

взятие материала из уретры не ранее, чем через 3 часа после последнего мочеиспускания,
из цервикального канала и влагалища — вне менструации,
взятие секрета предстательной железы проводится после тщательного туалета наружного отверстия головки полового члена (водой с мылом), секрет собирают после массажа предстательной железы (врачебная процедура),
взятие эякулята проводится после тщательного туалета наружного отверстия головки полового члена (водой с мылом), после мастурбации сначала в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой, затем зонд-тампон пропитывают биоматериалом в течение 5 сек. и помещают его в пробирку, обламывают по метке и плотно закрывают крышкой.

В лабораторию необходимо доставить пробирку с крышкой оранжевого или фиолетового цвета, с жидкой средой AMIES, с зонд-тампоном, пропитанным биоматериалом (пробирку можно получить в регистратуре CMD). Доставка в лабораторию в день взятия биоматериала.

Метод исследования: Микробиологический

Исследование позволяет оценить качественный и количественный состав аэробной и факультативно-анаэробной микрофлоры исследуемого биоматериала и оценить чувствительность микроорганизмов к основному спектру антибиотиков, что позволит врачу назначить адекватную терапию. Нормальная микрофлора человека представляет собой совокупность микроорганизмов. При развитии патологических процессов состав микроорганизмов изменяется в сторону увеличения условно-патогенных и/или появления патогенных возбудителей.

Исследование направлено на обнаружение роста этиологически значимых бактерий: энтеробактерий (родов Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Proteus и др.); неферментирующих грамотрицательных бактерий (родов Pseudomonas, в т.ч. Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter, Moraxella и др.); стрептококков (Streptococcus agalactiae (group B), Streptococcus pyogenes (group A) и др.); энтерококков (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium и др.); стафилококков (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus и др.);

Идентификация микроорганизмов выполняется новым автоматизированным методом с использованием современных технологий на масс-спектрометре Microflex (Bruker). На следующем этапе лабораторного исследования выполняется определение чувствительности возбудителя к лекарственным препаратам на современных микробиологических анализаторах. Выбор спектра антибиотиков зависит от выявленного возбудителя и соответствует стандартам CLSI (Институт клинических и лабораторных стандартов), США и EUCAST (Европейский комитет по определению чувствительности к антимикробным препаратам (European Committee Antimicrobial Susceptibility Testing).

Наличие симптомов инфекционно-воспалительных заболеваний
Подбор антибактериальной терапии;
Оценка эффективности антибактериальной терапии.

Результат бактериологического исследования стандартизирован и выдается в соответствии с выявленными этиологически значимыми микроорганизмами в количественном формате, в единицах измерения КОЕ/тамп, содержит антибиотикограмму и заключение, помогающее лечащему врачу лучше сориентироваться в предоставленной информации.

Производитель бактериофагов: ФГУП “НПО “Микроген” Минздрава России, Н.Новгород, Пермь, Уфа

Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.

Внимание! Чувствительность к спектру антибиотиков проводится в случае обнаружения роста патогенной флоры, выявленной в любом количестве и условно-патогенной флоры в количестве более 10 4 КОЕ/тамп.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(4) «1150» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(3) «542» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(6) array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(14) «Эякулят» > [1]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(54) «Секрет предстательной железы» > [2]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(55) «Мазок/отделяемое из влагалища» > [3]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(40) «Аспират полости матки» > [4]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(49) «Мазок/отделяемое из уретры» > [5]=> array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(76) «Мазок/отделяемое из цервикального канала» > > >

Биоматериал и доступные способы взятия:

Тип	В офисе
Эякулят
Секрет предстательной железы
Мазок/отделяемое из влагалища
Аспират полости матки
Мазок/отделяемое из уретры
Мазок/отделяемое из цервикального канала

Подготовка к исследованию:

Правила взятия биоматериала

взятие материала из уретры не ранее, чем через 3 часа после последнего мочеиспускания,
из цервикального канала и влагалища — вне менструации,
взятие секрета предстательной железы проводится после тщательного туалета наружного отверстия головки полового члена (водой с мылом), секрет собирают после массажа предстательной железы (врачебная процедура),
взятие эякулята проводится после тщательного туалета наружного отверстия головки полового члена (водой с мылом), после мастурбации сначала в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой, затем зонд-тампон пропитывают биоматериалом в течение 5 сек. и помещают его в пробирку, обламывают по метке и плотно закрывают крышкой.

Метод исследования: Микробиологический

Наличие симптомов инфекционно-воспалительных заболеваний
Подбор антибактериальной терапии;
Оценка эффективности антибактериальной терапии.

Производитель бактериофагов: ФГУП “НПО “Микроген” Минздрава России, Н.Новгород, Пермь, Уфа

Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

Посев на флору с определением чувствительности к основному спектру антибиотиков и бактериофагам,в т.ч.кандида

Посев на микрофлору дает возможность получить рост возбудителей воспаления женского урогенитального тракта на специализированных питательных средах. Идентифицируют вид возбудителей автоматически методом масс-спектрометрии с постановкой антибиотикограммы диско — диффузионным методом. Тест на чувствительность флоры к бактериофагам проводят, если к микроорганизму данного вида есть бактериофаги. Антибиотикочувствительность не ставится, если получен рост нормальной флоры.

В норме в составе биоценоза женских половых органов встречаются стафилококки, энтерококки, непатогенные виды коринебактерий и энтеробактерий, но их количество у женщин в репродуктивном возрасте не должно превышать количество лактобактерий и не иметь клинических проявлений. Микроорганизмы (кроме лактобактерий), выросшие в посеве, тестируются на чувствительность к антибиотикам.

Бактериологический посев позволяет выявить патогенного возбудителя или ассоциацию условно патогенной микрофлоры в количественном выражении – в КОЕ ( колониеобразующие единицы). Данный анализ позволит врачу гинекологу подобрать антибиотикотерапию, исходя из устойчивости флоры: R — возбудитель резистентен к препарату, S -возбудитель чувствителен и антибиотик можно использовать. В случае полирезистентности флоры к антибиотикам, особенно при хронических воспалительных процессах, анализ поможет выбрать для лечения бактериофаг, к которому будет чувствительна выявленная микрофлора.

Для получения достоверного результата посева взятие материала проводят до терапии антибиотиками или через 14 дней после лечения. Накануне сдачи анализа нельзя применять местные антисептические средства, в том числе и антибактериальное мыло. Подробнее про условия сдачи можно прочитать в разделе «Подготовка».

Выберите требуемый вид биоматериала

Соскобы из урогенитального тракта не берутся в течение суток после местной терапии (свечи, мази, спринцевания), после полового контакта и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ должно пройти 48 часов. В случае наличия признаков острого воспаления необходимость взятия мазка определяется лечащим врачом. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней после окончания лечения.

Соскобы из урогенитального тракта не берутся в течение суток после местной терапии (свечи, мази, спринцевания), после полового контакта и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ должно пройти 48 часов. В случае наличия признаков острого воспаления необходимость взятия мазка определяется лечащим врачом. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Накануне исследования не применять местные лекарственные препараты и процедуры, исключить половой акт. При взятии соскоба из уретры не мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

источник

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразная цепная реакция (ПЦР) и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, уреа- микоплазмы медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают бактериальный вагиноз (гарднереллез);
Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
Наличием патогенных микробов, которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями сифилиса – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов, которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

Первым пунктом заключения, как правило, стоит название возбудителя на латинском языке, например, Escherichiacoli. Это – кишечная палочка, она является естественным обитателем кишечника и в допустимых количествах никакого вреда не приносит;
Следующий пункт – концентрация микроорганизма. Е.coli– обильный рост (1х10^ 6 и более) норма – менее 1x10^ 4 ;
Далее – патогенность: флора условно-патогенная.

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или мазок из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
1. дифтероидами;
2. стафилококками;
3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала, перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку, окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14, поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный грибок рода Candida (обычно это Candida albicans), трихомонады и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой гонореей и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает хламидийная инфекция, приносящая большой вред не только при беременности. Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

Бактериальной петлей;
Пастеровской пипеткой;
Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1 : 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

Размер и форму бактериальной клетки;
Наличие капсул, жгутиков, спор;
Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном. Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

источник