Диастаза мочи норма по вольгемуту

Диастаза (или альфа-амилаза) — вещество-фермент, участвующее в процессах расщепления углеводов. Благодаря амилазе сложные соединения углеводов пищи расщепляются на мелкие углеводы (глюкоза). Диастазу вырабатывает поджелудочная железа – это так называемая панкреатическая диастаза, также слюнные железы и др. органы. Диастаза попадает в мочу благодаря клубочковой фильтрации.

Для выявления заболеваний поджелудочной железы, а также других органов определяют уровень диастазы (амилазы) в крови или в моче. И крайне плохо, если этот уровень повышен.

Из всех присущих в моче ферментов наиболее важным, с точки зрения диагностики, является диастаза. Моча на диастазу сдается для диагностики заболеваний, поражающих поджелудочную железу, слюнные железы, и для выявления причин боли, возникающих в области живота.

Заболевания, возникающие вследствие большого количества амилазы

Повышенный уровень амилазы может быть опасным симптомом таких заболеваний, как острый (либо хронический) панкреатит (так называемое воспаление поджелудочной железы), почечная недостаточность, паротит, перитонит, киста, холецистит, сахарный диабет и др. При таких болезнях уровень амилазы увеличивается в раз 10 и более.

Уровень амилазы может повыситься вследствие различных травм живота, а также по причине прерывания беременности. Если анализ показывает нулевые значения амилазы, это сигнализирует о недостаточном функционировании поджелудочной железы, что является сигналом острого (или хронического) гепатита. Во время беременности при токсикозе тоже возможно снижение количества амилазы.

Анализ на диастазу. Норма

Для определения такого вещества, как диастаза мочи, берется анализ суточной мочи. Медики рекомендуют сбор мочи осуществлять таким способом: удалить первую утреннюю порцию, и, начиная со второй, собрать мочу, выделенную в течение суток. При диагностике амилазы (диастаза мочи) норма колеблется в интервале от 16 до 64 Ед/ч. По методу Вольгемута диастаза мочи в здоровом человеке не должна превышать 64 единицы. Поэтому при увеличении диастазы в моче есть все основания полагать, что, скорее всего, поражена поджелудочная железа. Реже диастаза мочи в больших количествах может присутствовать не по причине поражения поджелудочной железы, а вследствие других заболеваний, например, холецистита или перитонита.

Очень важное значение имеет анализ крови и мочи на диастазу. Повышается уровень диастазы сначала в крови, а лишь затем увеличивается ее содержание в моче, поэтому исследование важно особенно на ранних стадиях развития панкреатита. При остром его течении обычно количество амилазы заметно растет в первые часы с начала заболевания. Затем повышенный уровень удерживается на протяжении трех суток. Если форма протекания болезни затяжная, то такой уровень диастазы сохраняется в течение нескольких недель. Повышенное количество амилазы в моче не всегда указывает на тяжесть состояния больного, так как уровень амилазы может быть нормальным и даже пониженным при панкреонекрозе. Быстрое снижение количества диастазы может сигнализировать о прогрессирующем патологическом процессе в железе.

Диастаза мочи может незначительно повыситься при таких заболеваниях, как гастрит, острый гепатит, плеврит, аппендицит. Большое внимание уделяется диагностике панкреатита, количество диастазы при котором варьирует от 128- 256 ед. В таких случаях с большой уверенностью можно диагностировать данное заболевание.

Препараты, увеличивающие объем диастазы в моче (крови)

Важно знать, что увеличиться количество амилазы в моче может из-за приема некоторых лекарственных препаратов. Прежде всего, в группу таких лекарств вошли:

— немедицинские наркотики (героин, кокаин и т.д.).

источник

Термин «диастаза» применяется для определения пищеварительного фермента, также именуемого амилазой, основной функциональной задачей которого является расщепление полисахаридов и участие в процессах переработки организмом сложных углеводов.

Основным органом, который производит выработку данного вещества, является поджелудочная железа. После поступления в желудок диастаза также проникает в кровь и урину, что дает возможность определить количество фермента и оценить соответствие показателей нормам или констатировать отклонение от таковых.

Анализ мочи на диастазу является показательным методом исследования, которое позволяет выявить панкреатические заболевания на ранних этапах развития. Преимущественно прохождение процедуры назначается пациенту на фоне уже имеющихся клинических проявлений, свидетельствующих о нарушении деятельности поджелудочной железы.

Итак, что такое диастаза мочи, было рассказано чуть выше. Теперь следует рассмотреть принятые нормы данного анализа, так как их понижение или увеличение является прямым показателем нарушений деятельности поджелудочной железы.

Варианты нормы диастазы могут несколько варьироваться в зависимости от половой принадлежности больного, а также его возраста. В качестве показателя уровня ферментативного вещества выступает значение мккат/л, катал, кат или условная единица. Что это такое? Приведенные термины используются для обозначения одной единицы активности диастазы. На практике чаще всего используется значение катал.

В среднем нормы диастазы в моче абсолютно здорового человека могут колебаться от 10 до 160 единиц. Наименьшими они должны быть у детей младшей возрастной категории. Более высокие значения наблюдаются у пожилых лиц. Также являются допустимыми некоторые отклонения, которые представлены в следующей таблице:

• У ребенка возрастом менее 7-10 лет, показатели могут колебаться от 10 до 64 катал или единиц на один литр урины.
• У мужчин и женщин показатели являются идентичными. До возрастной отметки в шестьдесят лет нормы могут быть следующими – от 10 до 124 ед./л.
• У людей более старшего возраста этот показатель несколько увеличивается и составляет от 25 – 32 до 160 единиц на литр мочи.

Показатели диастазы мочи зависят не только от состояния здоровья человека, но также от соблюдения им правил сдачи биологического материала для проведения исследования.

Заболевания поджелудочной железы, независимо от этиологии, характеризуются повышением или понижением уровня диастазы – специфического фермента, активно участвующего в процессах пищеварения. Длительное течение имеющейся патологии приводит к плохому усвоению потребляемой пищи, возникновению признаков общей интоксикации организма.

Для того чтобы получить максимально объективные результаты проведенных исследований, важно осуществлять сборы мочи на диастазу согласно определенным правилам, в противном случае вероятны погрешности. Итак, как правильно сдавать биологический материал? Алгоритм является следующим:

1. В первую очередь необходимо внести коррективы в рацион питания. Особенно актуальным это является в том случае, если предполагается сбор урины у детей на анализ. Не следует употреблять чрезмерно тяжелую, насыщенную белками и углеводами пищу.
2. Важно исключить употребление сильнодействующих лекарственных препаратов, если их прием не является жизненно необходимым. Также следует отказаться от приема напитков, в состав которых входит алкоголь.
3. Перед тем, как собрать мочу, требуется совершить тщательные гигиенические процедуры, то есть, обмыть наружные половые органы теплой водой. Использовать при этом любые средства для ухода за телом не нужно.
4. В период менструации женщинам рекомендуется отказаться от прохождения исследования. Кроме того, перед тем, как собирать урину, следует ввести во влагалище ватный тампон. Эта мера поможет предупредить попадание в мочу у женщин вагинальных выделений.

Анализ мочи на диастазу можно сдавать двумя различными способами: один из них предполагает исследование разовой порции урины, а второй – жидкости, собранной на протяжении суток. Итак, как правильно сдать образцы в этом случае? Правила являются следующими:

• Если требуется сдать анализ мочи на диастазу в объеме разового мочеиспускания, следует взять только среднюю порцию. При этом важно собирать только утреннюю урину.
• В том случае, если необходима так называемая суточная моча, процедура сбора проводится несколько иначе, и занимает существенно больше времени. Итак, как сдавать этот анализ? Сразу после пробуждения необходимо посетить туалет, после чего начать отчет 24-х часового периода. Далее требуется собирать весь объем урины при каждом мочеиспускании. Для хранения и сбора отходов жизнедеятельности требуется заранее подготовить стерильную емкость достаточного объема. Хранить жидкость следует в затемненном и прохладном месте. Далее необходимо перемешать урину, после чего перелить порцию, объем которой составляет не более 500 мл, в стерильный контейнер и сдать мочу на анализ. На этом процедура сбора завершена.

Для того чтобы результат показал соответствующие реальному положению значения, следует отказаться от приема мочегонных препаратов, а также употребления напитков, обладающих соответствующими свойствами, минимум за сутки до исследования.

Для определения понижения или повышения диастазы мочи производится комплекс манипуляций в стерильных условиях лаборатории. Процедура является достаточно длительной, поэтапной и предполагает обязательное использование различных химических веществ – реагентов. Действия специалиста, которые производятся на протяжении часа и дольше, подчинены строгому алгоритму:

1. В первую очередь производятся манипуляции, включающее последовательное перемешивание урины с физраствором и крахмалом. Для активации действия фермента, то есть, непосредственно диастазы, требуется последовательное нагревание и охлаждение полученного раствора. В ходе проведения исследования требуется использование пятнадцати стерильных пробирок.
2. Для прекращения действия фермента требуется резкое его охлаждение с последующим добавлением в полученный раствор.

Следует отметить, что на основе полученных результатов могут быть определены только такие показатели, как пониженная или повышенная диастаза, специалист, который проводит анализ, не ставит предварительного диагноза.

Расшифровка полученных результатов производится исключительно врачом. Допускается незначительная от 1 до 10 ед./л, погрешность полученных значений. После сдачи мочи на диастазу пациент может увидеть следующие показатели:

• От 128 ед./л. Чаще всего подобные показатели свидетельствуют о незначительных нарушениях деятельности поджелудочной железы. Как правило, если в сдаваемой урине наблюдается такое количество диастазы, это может говорить о воспалительных процессах на ранних этапах возникновения. Кроме того, возможно получение ложноположительных результатов. Почему такое происходит? Некачественные анализы у сдавшего мочу пациента могут быть следствием употребления нездоровой пищи, лекарственных препаратов, алкоголя.
• Если значения существенно отклоняются от средних и составляют от 512 ед./л, это, как правило, является следствием локальных воспалительных процессов, отечности слизистых тканей и существенных нарушений деятельности поджелудочной железы. Так как диастаза в моче не является единственным методом, на основе которых допустимо поставить диагноз, пациенту требуется пройти дополнительные исследования.
• Если показатели существенно выше, нежели этого требует норма диастазы мочи, и составляет более 1024 ед./л, это является крайне тревожным признаком, который может говорить о наличии острых воспалительных процессов. Важно знать, что подобные нарушения деятельности поджелудочной железы являются результатом длительно протекающих воспалительных процессов.

Если значения диастазы в моче повышены, это можно отнести к числу тревожных признаков, которые указывают на развитие заболеваний поджелудочной железы.

Превалирующие причины, которые могут спровоцировать плохие результаты, могут быть следующими:

1. Почечная недостаточность, нарушение деятельности почек.
2. Панкреатит.
3. Холецистит.
4. Нарушение функционирования печени и поджелудочной железы вследствие длительного употребления большого количества спиртных напитков.
5. Острый аппендицит, перитонит.
6. Острый воспалительный процесс, который может затрагивать полость рта, органы пищеварительного тракта.
7. Паротит.
8. Сахарный диабет.

Также анализ на диастазу может показать существенно более низкие, нежели этого требуют нормы, показатели. В этом случае речь может идти о развитии следующих патологий: закупорка протоков, посредством которых выводится желчь; длительная интоксикация организма алкоголем или различными психотропными препаратами; если больной вынужден принимать сильнодействующие лекарственные средства, это также может отразиться на качестве полученных результатов; гепатиты и другие тяжелые поражения печени; ранний или поздний токсикоз гестационного периода, протекающий в тяжелой форме.

При наличии подозрений на развитие тех или иных заболеваний врач может порекомендовать пациенту пройти дополнительные диагностические процедуры, которые помогут дать полную и объективную оценку состояния здоровья больного. Как правило, для постановки диагноза требуется сдача общих анализов мочи, крови, а также задействование таких способов, как ультразвуковое исследование, рентгенография. Следует помнить, что назначение оптимального варианта терапии возможно только после прохождения комплексных диагностических процедур, которые, кстати, рекомендуются проводить каждый год тем пациентам, кто страдает хроническими формами заболеваний поджелудочной железы и печени.

источник

Проблемы с поджелудочной железой очень часто сопровождаются выраженным болевым синдромом и общим недомоганием.

Для лечения патологии, а также для оценки состояния и функционирования этого важного органа врачи назначают проведение анализа на диастазу мочи.

Диастаза (амилаза или альфа-амилаза) – это фермент, который вырабатывается поджелудочной и слюнными железами.

Его главная задача состоит в расщеплении сложных углеводов – с его помощью они распадаются на простые сахара, которые легко усваиваются организмом.

Этот важный энзим позволяет быстро обнаружить патологические процессы, анализируя уровень его концентрации в моче: чем выше показатель содержания амилазы, тем выше вероятность диагностирования острого или хронического воспалительного процесса, например панкреатита.

Повышение или понижение концентрации амилазы в моче служит информативным маркером при осмотре больного и постановке диагноза.

Этот анализ в комплексе с другими исследованиями (оценкой лабораторных показателей крови, УЗИ) позволяет как диагностировать патологические процессы в поджелудочной и слюнных железах, так и скорректировать курс терапии выявленных раннее заболеваний.

Диастаза мочи исследуется при наличии следующих симптомов:

• опоясывающих болей в верхней части живота с иррадиацией в спину;
• тошноты, отсутствия аппетита, рвоты;
• лихорадочного состояния на фоне тошноты и общего недомогания;
• болевого синдрома и отечности слюнных желез (околоушных).

На достоверность результата могут повлиять кашель, прием определенных групп медикаментов (диуретиков, гормональных препаратов, пантезоцина, кортикостероидов), беременность, попадание инородных частиц в образец мочи, употребление алкоголя перед сдачей анализа.

Единственной классификации показателей нормы диастазы не существует, поскольку в разных лабораториях используются разные методики и разные реактивы для проведения анализа.

Наиболее распространенными считаются показатели амилазы, которые оцениваются в ЕД на л или в ЕД на час.

Таблица — референсные границы значений активности диастазы.

к содержанию ↑

Концентрация альфа-амилазы не зависит от пола больного, времени суток и от приема пищи.

Активность диастазы новорожденных не имеет диагностического значения, поскольку ее показатель в первые месяцы жизни достаточно низкий и повышается до информативного уровня только к возрасту от 1 года.

При расшифровке анализа на диастазу мочи также стоит брать во внимание тот факт, что активность этого фермента может изменяться на протяжении суток. Поэтому для большего диагностического эффекта рекомендуется использовать суточный материал или проводить повторное исследование мочи, собранной за 2 часа.

Снижение или увеличение активности амилазы является признаком ряда заболеваний.

В первую очередь этот анализ назначается при оценке состояния поджелудочной железы. Именно панкреатит может вызывать повышенные в несколько (при хроническом течении болезни) или в 5-10 раз (при острой форме) показателя диастазы мочи.

ВАЖНО! Концентрация амилазы в моче может оставаться достаточно высокой на протяжении 2-х недель после перенесенного острого приступа панкреатита.

Значение уровня амилазы в крови и моче в норме достаточно невысокие, при этом концентрация диастазы в моче пропорциональна показателям в плазме крови.

Поэтому повышение амилазы в моче напрямую свидетельствует о повышении этого показателя в крови.

Сдача мочи для оценки активности амилазы должна проводиться с соблюдением определенных правил подготовки к анализу (без подготовки — в случае экстренных ситуаций).

• Во-первых, за сутки до сдачи анализа необходимо отказаться от алкоголя.
• Во-вторых, уточнить с лечащим врачом необходимость временного прекращения приема медицинских препаратов, которые могут исказить результат анализа.
• В-третьих, обеспечить достаточное поступление жидкости в организм для предупреждения появления завышенных значений амилазы.

Сбор материала, который может проводиться 2 часа (разовая порция урины ) или 24 часа (суточная моча), также имеет свои особенности в виде:

• обязательного предварительного проведения гигиенических процедур;
• использования специальных стерильных контейнеров или емкостей, подготовленных и очищенных с раствором соды;
• предупреждения попадания внутрь контейнера любых инородных частиц, включая волосы, каловые массы, кровяные выделения и т. д.;
• оперативной доставки материала в лабораторию.

Поскольку для анализа может использоваться разовая или суточная моча, существуют некоторые особенности в сборе материала:

1. для сбора разовой порции рекомендуется использовать утреннюю мочу (среднюю фазу мочеиспускания);
2. для сбора суточной порции урины необходимо утром опорожнить мочевой пузырь и после этого начать отсчет 24-часового периода. Далее всю мочу нужно собирать в одну большую стерильную емкость, объемом до 3-4 л. Хранить контейнер на протяжении дня можно как в комнате, так и в холодильнике (допустимый диапазон температур от +2 до +25 градусов по С). После завершения сбора жидкость нужно перемешать, измерить общий объем и отлить в стерильный контейнер до 50 мг урины для отправки в лабораторию.

Всю суточную мочу не нужно сдавать в лабораторию — достаточно на контейнере с отобранным небольшим количеством биоматериала указать общее время сбора урины и общий объем, собранный за этот период.

Нормальные значения амилазы для женщин в возрасте до 60 лет соответствуют мужским показателям и могут колебаться в пределах 20-125 ЕД/л.

Анализ на диастазу мочи у женщин может несколько отличаться в зависимости от возраста и особенностей организма:

• повышение показателей может наблюдаться в преклонном возрасте (от 60 лет), а также на фоне гормональных изменений;
• понижение уровня амилазы может возникать на фоне раннего гестоза в период беременности.

к содержанию ↑

Проведение анализа на диастазу мочи может назначаться при поступлении в стационар в случае наличия соответствующей симптоматики.

Контролировать показатели этого фермента с целью предупреждения развития ряда панкреопатологий можно также, обратившись в специализированные лаборатории: Инвитро, Гемотест, KDL.

Большая сеть этих лабораторных центров, использование инновационной технологической базы, применение современного оборудования и внедрение новых методов исследования биоматериалов позволяет быстро и по доступной стоимости (в пределах 350 рублей) получить достоверный и информативный результат анализа.

Отклонение от нормативных показателей концентрации в моче диастазы может указывать на наличие ряда заболеваний:

• панкреатита;
• холецистита;
• перитонита;
• сахарного диабета;
• дисфункции почек;
• острого аппендицита;
• воспалительных процессов с локализацией в ротовой области, кишечнике или органах половой системы;
• онкологии;
• алкогольного или наркотического отравления;
• паротита;
• сиаладенита.

Не менее информативным для постановки диагноза являются и пониженные показатели амилазы, которые возникают на фоне:

• хронического панкреатита;
• гепатита;
• раннего токсикоза при вынашивании ребенка.

Снижение уровня амилазы также может спровоцировать хирургическое удаление поджелудочной железы, травмы органов брюшины, наличие генетического заболевания – муковисцидоза.

Получение результатов анализа диастазы мочи не допускает самостоятельной расшифровки пациентом. Оценить отклонения показателей, сделать выводы и назначить необходимый курс лечения может только высококвалифицированный медицинский специалист, который также может назначить прохождение дополнительного обследования (биохимического анализа крови, УЗИ брюшной полости, анализа каловых масс и т. д.).

Комплексный подход к диагностике служит залогом достоверности определения заболевания, оценки его тяжести (острой фазы или хронического периода) и подбора адекватной схемы терапии.

источник

Альфа-амилаза (диастаза) – пищеварительный фермент, который выделяется в полость рта и тонкий кишечник. Повышение уровня диастазы в сыворотке и моче свидетельствует о поражении поджелудочной и/или слюнных желез, органов брюшной полости. Активность фермента в моче определяется в комплексе с исследованием его концентрации в сыворотке. Анализ широко применяется в гастроэнтерологии для диагностики, контроля терапии панкреатита и других заболеваний, при которых нарушается функционирование поджелудочной железы, а также для оценки работы почек. Биоматериалом для анализа является суточная моча. Исследование выполняется кинетическим колориметрическим методом. В норме полученные показатели определяются в промежутке от 1 до 408 Ед/сут (суточная моча). Подготовка результатов занимает не более 1 рабочего дня.

Альфа-амилаза (диастаза) – пищеварительный фермент, который выделяется в полость рта и тонкий кишечник. Повышение уровня диастазы в сыворотке и моче свидетельствует о поражении поджелудочной и/или слюнных желез, органов брюшной полости. Активность фермента в моче определяется в комплексе с исследованием его концентрации в сыворотке. Анализ широко применяется в гастроэнтерологии для диагностики, контроля терапии панкреатита и других заболеваний, при которых нарушается функционирование поджелудочной железы, а также для оценки работы почек. Биоматериалом для анализа является суточная моча. Исследование выполняется кинетическим колориметрическим методом. В норме полученные показатели определяются в промежутке от 1 до 408 Ед/сут (суточная моча). Подготовка результатов занимает не более 1 рабочего дня.

Альфа-амилаза в моче – биохимический показатель, который указывает на количество фермента, выведенного из кровотока через почки. Анализ используется для диагностики патологий поджелудочной и слюнных желез, а также органов брюшной полости. Альфа-амилаза или диастаза является гидролитическим ферментом, участвующим в расщеплении углеводов, а именно в разложении крахмала и гликогена до мальтозы. Слюнные железы и поджелудочная железа производят основную часть амилазы в организме. Соответственно, она выделяется в полость рта, где осуществляется первичное переваривание сложных углеводов, и в просвет тонкой кишки для более полного расщепления сахаров. В кровь альфа-амилаза попадает благодаря тому, что происходит постоянное обновление тканей органов, в которых она содержится: поджелудочной железы, слюнных желез, а также яичников, кишечника, печени, легких, скелетной мускулатуры. Размеры этого фермента достаточно малы, поэтому он в неизменном виде пропускается почечными фильтрами и выходит с мочой.

Уровень альфа-амилазы в моче определяется ее количеством в сыворотке крови. В норме активность фермента низкая, ее увеличение является маркером поражения поджелудочной железы, закупорки и повреждения панкреатического протока, нарушения целостности стенок кишечника, патологии слюнных желез. Во всех этих случаях происходит увеличение концентрации альфа-амилазы в кровотоке и в моче. При макроамилаземии фермент образует крупные соединения с белками плазмы и не фильтруется почечными клубочками. Активность альфа-амилазы варьируется в течение 24 часов, по этой причине для определения ее уровня чаще используется суточная моча или выполняется расчет клиренса диастазы по креатинину. Иногда материалом служит разовая порция мочи. В большинстве лабораторий исследование выполняется кинетическим колориметрическим методом. Анализ находит широкое применение в гастроэнтерологии, эндокринологии и хирургии.

Основным показанием для выполнения анализа на альфа-амилазу в моче являются поражения поджелудочной железы. Исследование необходимо для диагностики острого и хронического панкреатита. При этом заболевании активность амилазы в моче соответствует таковой в крови, но повышение и снижение показателей происходит с задержкой: при острой форме панкреатита количество фермента в моче остается высоким до 8-10 дней, в сыворотке – 2-4 дня. Таким образом, тест помогает диагностировать заболевание на более поздних сроках. В качестве ориентировочного метода исследования анализ на альфа-амилазу в моче показан при подозрении на опухоль поджелудочной железы. Результаты могут быть использованы для контроля терапии и мониторинга течения патологий этого органа. Основанием для назначения диагностической процедуры могут послужить жалобы пациента на интенсивную боль в области живота и спины, повышение температуры, потерю аппетита, рвоту.

Другими показаниями для анализа на альфа-амилазу в моче являются заболевания слюнных желез, болезни почек с нарушением фильтрации, декомпенсированный сахарный диабет, а также острые состояния с кишечной непроходимостью, кровотечением, воспалением и/или перфорацией органов брюшной полости («острый живот»). Таким образом, спектр применения исследования достаточно широк и может включать в себя эпидемический паротит, кисту и псевдокисту поджелудочной железы, почечную недостаточность, язвенную болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, болезнь Крона, внематочную беременность, кисты яичников, острый аппендицит, перитонит, холецистит, желчнокаменную болезнь, тупые травмы живота и печени.

Из достоинств данного исследования стоит отметить его высокую чувствительность и воспроизводимость при использовании кинетического колориметрического метода. Однако анализ на альфа-амилазу в моче оказывается неинформативным при макроамилаземии. В этом случае фермент соединяется с белками плазмы и не выводится в полном объеме с мочой. В результате показатели исследования остаются нормальными или пониженными, несмотря на наличие патологического процесса (панкреатита и др.).

Определение уровня альфа-амилазы чаще всего производится в порции суточной мочи. Так как фермент является пищеварительным, для получения достоверных результатов перед исследованием следует ввести в распорядок дня некоторые ограничения: нужно исключить прием алкоголя минимум за 2 недели, не употреблять в пищу острые, соленые и изменяющие цвет мочи продукты (например, свеклу) за 12 часов до начала сбора биоматериала. На протяжении суток, в течение которых происходит сбор мочи, необходимо не нагружать организм физически, не переедать, избегать воздействия стрессовых факторов. За 7-10 дней до исследования рекомендуется сообщить врачу о принимаемых лекарственных препаратах, чтобы он отменил медикаменты, влияющие на значение показателя.

Чаще всего исследуется суточная моча, реже – разовая порция. Сбор материала производится пациентом самостоятельно, помощь медперсонала может потребоваться только в случае тяжелого состояния и нахождения в стационаре. Для исследования суточной мочи необходимо приготовить емкость – специальный стерильный пластиковый контейнер (продается в аптеках) либо стерилизованную трехлитровую банку с крышкой. Первое мочеиспускание с утра нужно пропустить, отметив его время. В последующем необходимо осуществлять сбор материала после предварительного туалета наружных половых органов. Последняя порция собирается утром в то же время, которое было отмечено сутки назад. Материал нужно хранить с закрытой емкости в холодильнике, не допуская замораживания. В лабораторию сдается полный объем мочи или стандартная порция с отметкой о суточном диурезе (полном объеме).

В клинических лабораториях исследование уровня альфа-амилазы в моче может быть выполнено унифицированным методом по Каравею, энзиматическим методом «по конечной точке» и кинетическим колориметрическим методом. Последний вариант наиболее распространен, в ходе него диастаза взаимодействует с синтетическим субстратом EPS, в результате образуются бесцветные нитрофенилмальтоозиды. Они вступают в реакцию с реагентом альфа-глюкозидазой и гидролизуются до глюкозы и окрашенного соединения п-нитрофенола. Активность фермента рассчитывается на основе скорости нарастания концентрации окраски. Все исследование занимает 1 день.

В суточной моче нормальными считаются колебания уровня альфа-амилазы от 1 до 408 Ед/сут или от 1 до 17 Ед/ч. Если материалом для анализа является разовая порция, то референсные значения составляют 24-490 Ед/л. При самостоятельной интерпретации результатов важно учитывать, что показатели нормы зависят от чувствительности реагентов и особенностей аппаратуры, которая используется в конкретной лаборатории. Физиологическое повышение активности амилазы может быть определено во время беременности, снижение – в первые месяцы жизни. Временно концентрация фермента в моче увеличивается при приеме алкоголя, употреблении жирных, острых и соленых блюд. Это важно учитывать при подготовке к анализу.

Увеличение концентрации диастазы в моче определяется у пациентов с острым панкреатитом, обострением хронического панкреатита, кистой, псевдокистой, панкреонекрозом и злокачественным новообразованием поджелудочной железы. Все эти патологии приводят к повреждению тканей органа и являются основной причиной повышения уровня альфа-амилазы в моче. Кроме этого, выход фермента в кровоток, а затем и его выведение почками увеличиваются после травм брюшной полости, операций и инвазивных диагностических процедур. Иногда повышенный уровень альфа-амилазы связан с воспалительными заболеваниями печени, желчного пузыря, кишечника, аппендикса, органов репродуктивной системы. Уровень альфа-амилазы в моче может быть повышен по причине высвобождения фермента из слюнных желез при слюннокаменной болезни, эпидемическом паротите, после хирургических вмешательств в области нижней челюсти. Иногда увеличение количества диастазы связано с онкологическим заболеванием, сахарным диабетом, циррозом печени, гепатитом, расстройствами пищевого поведения.

У пациентов с недостаточным функционированием поджелудочной железы происходит понижение уровня альфа-амилазы в плазме и в моче, причиной этого может стать муковисцидоз, хроническая прогрессирующая форма панкреатита, поздняя стадия рака, панкреатэктомия. Уменьшение количества фермента в моче с повышением концентрации в сыворотке происходит при снижении фильтрующей способности почек. Изменения такого характера определяются у пациентов с макроамилаземией – доброкачественным состоянием, не требующим лечения, а также с хронической почечной недостаточностью, множественной миеломой, трансплантированными почками, в состоянии шока, под влиянием ибупрофена, индометацина, карбамазепина.

Анализ на альфа-амилазу в моче имеет большое диагностическое значение при выявлении панкреатита, является непрямым показателем фильтрующей способности почек и уровня фермента в крови. Если определяются отклонения результатов от нормы, необходимо обратиться за консультацией и назначением лечения к врачу – терапевту, гастроэнтерологу, нефрологу. Чтобы предупредить физиологическое повышение показателей, искажающих результаты исследования, необходимо исключить из рациона острую, жирную и соленую пищу, отказаться от приема алкоголя, подбирать физическую нагрузку соответственно уровню подготовленности.

источник

Железы внутренней секреции человеческого организма вырабатывают множество ферментов, которые обеспечивают ему бесперебойное выполнение всех необходимых функций. Пищеварительный процесс достаточно длителен и сложен, причем начинается он не в самом желудке, а намного раньше, то есть при попадании пищи в ротовую полость.

За начальный этап расщепления пищи отвечают несколько пищеварительных ферментов, в том числе и альфа-амилаза, который в основном вырабатывается поджелудочной и слюнными железами. Его основной функцией является расщепление углеводов до простых олигосахаридов. Фермент находится в ротовой полости, и именно от его работоспособности зависит расщепление пищи на первичном этапе.

В случае если ферментов и, в частности, амилазы недостаточно, то процесс пищеварения претерпевает сложности на своем начале, в результате чего все дальнейшие этапы будут затруднены, что рано или поздно приведет к развитию различных заболеваний. Для исследования подобных отклонений у пациента берется моча на диастазу (ферменты поджелудочной железы), что является быстрым и простым диагностическим методом.

Альфа-амилаза является одним из самых важных пищеварительных ферментов, включенных в диастазу, который расщепляет крахмал до простых углеводов. Ее синтез происходит также в тонком кишечнике и у женщин в яичниках. Амилаза содержится в слюне, и поэтому пищеварительный процесс начинается именно под ее воздействием.

Исторический факт! Амилаза была открыта в 1833 году Ансельмом Пайеном французским химиком, когда он впервые описал диастазу (смесь ферментов), которая расщепляла крахмал до мальтозы. По другим источникам амилазу открыл К. С. Кирхгоф – академик петербургской научной Академии в 1814 году.

Именно амилаза становится причиной появления сладковатого вкуса при долгом пережевывании продуктов, содержащих крахмал (картофель, рис), но без добавления сахара. При этом активность данного фермента в моче напрямую связана с активностью в сыворотке крови, поэтому для изучения его содержания проводится анализ мочи на диастазу.

По количеству ферментов в исследуемом материале врачу удается сделать вывод о функциональном состоянии поджелудочной железы и выявить присутствие патологий, в частности, панкреатита. Наряду с остальными ферментами, участвующими в пищеварительных процессах, диастаза попадает в желудок, затем в кишечник, оттуда всасывается в кровь, после чего абсорбируется почками и выводится вместе с мочой.

В норме в кровяном русле циркулирует небольшое количество ферментов поджелудочной и слюнных желез (это происходит из-за обновления клеток). Но при повреждении поджелудочной железы, что чаще всего связано с развитием панкреатита либо при блокировке протока железы камнем или новообразованием, ферменты начинают попадать в кровь, а затем в мочу в большем количестве. Это и легло в основу исследования.

Кроме того, учитывая, что, к примеру, амилаза вырабатывается и слюнными железами, то ее увеличившаяся активность в моче может быть вызвана патологиями данных органов. В любом случае подобные изменения не должны оставаться без внимания, а, наоборот, пациенту потребуется пройти полное обследование.

Причин, по которым может назначаться анализ на диастазу, немало, и самыми частыми из них являются:

• подозрение на панкреатит или сахарный диабет;
• другие патологии поджелудочной железы;
• поражение околоушных желез;
• наличие острых бактериальных или вирусных инфекций;
• эпидемический паротит (свинка), гепатит;
• токсическое поражение печени вследствие алкоголизма.

Кроме этого, определение диастазы в моче назначается при наличии острых болей в животе как взрослым, так и детям, что помогает врачам быстрее выставить диагноз и назначить соответствующую терапию.

Многие ферменты, участвующие в пищеварении, могут изменять свою концентрацию на протяжении суток, поэтому врачи рекомендуют производить сбор мочи на диастазу в утреннее время. Для того чтобы правильно сдавать образец урины, следует изначально проконсультироваться с врачом или медсестрой о тонкостях забора биоматериала. При этом в каждой лаборатории должна быть памятка, которая содержит алгоритм сбора мочи на анализ.

Во-первых, следует приобрести стерильный контейнер в аптеке, специально приспособленный для этих целей. Безусловно, можно воспользоваться обычной стеклянной емкостью, но тогда придется ее тщательно вымыть и простерилизовать, чтобы туда не попали никакие посторонние примеси. Во-вторых, за 24 часа постараться свести к минимуму физическое и психоэмоциональное напряжение.

В-третьих, за сутки исключить употребление алкоголя и мочегонных препаратов, по поводу последних предварительно проконсультировавшись с лечащим врачом. В-четвертых, за день до исследования воздержаться от приема в пищу продуктов, способных изменить цвет мочи (морковь, свекла, черника и т. д.), а также соленой, острой и пряной пищи.

В большинстве случаев врачи рекомендуют сдать мочу теплой, то есть пациенту будет необходимо провести дома туалет половых органов, а забор биоматериала провести в специально отведенной для этих целей комнате, оборудованной в лаборатории. Иногда, в зависимости от показаний, рекомендуется сдавать урину холодной, тогда забор можно произвести и дома.

В отдельных ситуациях может потребоваться собрать мочу на протяжении суток, или, например, не в утреннее, а в другое время суток. Все это будет решать лечащий врач исходя из присутствующей симптоматики и анамнеза пациента. Для стандартного анализа на диастазу достаточно несколько миллиграммов мочи, главное, чтобы собиравший ее строго придерживался всех необходимых правил.

Учитывая, что составляющие диастазу биологически активные вещества содержатся и в крови, можно провести анализ и данной жидкости организма. Но, как правило, для первичной диагностики обычно достаточно мочи, и если данное исследование показывает отклонения, то следующим будет изучение диастазы в крови.

В случае если пациенту выставляется диагноз «острый панкреатит», то его урину будут исследовать несколько раз в день, приблизительно с интервалом в 3 часа. Благодаря этому, станет возможным производить постоянный мониторинг состояния больного, если под угрозой находится его дальнейшее здоровье или жизнь.

Расшифровка данных анализа должна проводиться опытным врачом, желательно профилирующим на эндокринологии или гастроэнтерологии. В своих выводах он опирается на общепринятые нормы, которые имеют небольшие отличия для разных возрастных категорий. При этом норма диастазы в моче у женщин и мужчин одного возраста отличаться не будет.

У взрослых от 17 до 56–60 лет диастаза в моче составляет 10–124 ед/л. Тогда как норма у взрослых людей более старшего возраста будет заключена в интервал 25–160 ед/л. Для детей данный показатель составляет 10–64 ед/л. Все значения выше или ниже указанных границ будут рассматриваться как отклонения, и, по всей вероятности, потребуется проведение дополнительных обследований.

Самые высокие показатели диастазы в моче отмечаются при остром панкреатите или воспалительном процессе поджелудочной железы, при образовании в ней кисты или на начальных стадиях злокачественного процесса. В диагностике данных патологий параметры диастазы играют важную роль – они предоставляют возможность определить заболевания на ранних стадиях.

К примеру, при панкреатите либо опухоли показатель может быть повышен до 128–256 ед/л, что сразу укажет врачу на наличие патологического процесса в тканях органа. Увеличение значений, но не более чем в 10 раз, нередко отмечается при воспалении слюнных желез, причиной которого стал паротит, а также при холецистите (воспалении желчного пузыря).

И также возрастают показатели диастазы при острых патологиях почек инфекционной природы, таких как гломерулонефрите, пиелонефрите, которые способны приводить к обратимой почечной недостаточности. При почечной недостаточности необратимого характера показатели диастазы в моче всегда повышены.

Менее распространенные причины увеличения значений пищеварительных ферментов следующие:

• хронический панкреатит – изначально при нем показатели умеренно повышаются, но потом могут спадать до нормы по мере поражения тканей поджелудочной железы;
• травмы (удар, ушиб) поджелудочной железы;
• новообразования злокачественной природы;
• закупоривание протока железы камнем, рубцом;
• острый перитонит, аппендицит;
• прободение (перфорация) язвы желудка;
• диабетический кетоацидоз (декомпенсация сахарного диабета);
• хирургическое вмешательство на органах брюшной полости;
• прерванная трубная беременность;
• кишечная непроходимость;
• разрыв аневризмы аорты.

Кроме вышеперечисленного, значительно повышенные показатели диастазы могут наблюдаться при беременности, протекающей с токсикозом, а также у лиц, страдающих алкоголизмом.

Причины снижения активности диастазы в моче:

• недостаточность функции поджелудочной железы;
• удаление поджелудочной железы, тяжелый гепатит;
• тиреотоксикоз, интоксикация организма;
• кистозный фиброз (муковисцидоз) – серьезное генетически обусловленное заболевание желез внутренней секреции;
• макроамилаземия – достаточно редкое доброкачественное нарушение обмена веществ, при котором амилаза связывается с крупными белковыми молекулами в плазме, в результате чего не может проникнуть сквозь почечные клубочки.

На полученные данные может оказывать влияние прием некоторых препаратов таких, как кортикостероидные гормоны, противосвертывающие и мочегонные средства (Фуросемид), Ибупрофен, Каптоприл и наркотические анальгетики. Кроме этого, повышение значений диастазы может наблюдаться у беременных женщин на любом сроке вынашивания, что связано с общей перестройкой гормонального фона.

И также повлиять на данные анализа может употребление алкогольсодержащих напитков накануне исследования, потому что его компоненты губительно действуют на клетки поджелудочной железы, разрушая их. В связи с этим ферменты выделяются в кровоток, и затем транспортируются в мочу. Иногда попадание слюны в образец может привести к недостоверным результатам, к примеру, при разговоре, чихании, кашле неподалеку от открытого контейнера с мочой.

Может сказаться на исследовании недавнее проведение рентгенологического исследования желчевыводящих протоков, выполненное с использованием контрастного вещества. Второе название данной диагностики звучит как этопическая ретроградная холангиография.

Пациентам . Анализ мочи на диастазу – быстрый способ проверить, все ли в порядке с поджелудочной и слюнными железами. Главное – тщательно ознакомиться со всеми тонкостями проведения исследования и подготовки к нему, учесть все моменты, которые могут стать причиной получения недостоверных результатов.

источник

Для переваривания пищи человеку необходима не только соляная кислота в желудке, но и масса различных пищеварительных ферментов. К их числу относится диастаза, или альфа-амилаза, которая вырабатывается слюнными железами и специальными клетками поджелудочной железы. С помощью этого фермента происходит метаболизм углеводов, содержащихся в продуктах питания, причем начинается процесс расщепления уже в полости рта. Затем, на всем протяжении желудочно-кишечного тракта, диастаза полностью перерабатывает сложные углеводы в простые формы и, всасываясь из кишечника в кровь, поступает в почки.

При фильтрации крови в почечных клубочках амилаза в неизмененном виде поступает в мочу и выводится из организма при мочеиспусканиях. Ее количество в моче, а также определение уровня в крови, является важнейшим диагностическим признаком, помогающим уточнить наличие у взрослых и детей определенного заболевания и вовремя принять терапевтические меры. Диастаза мочи – это обязательный показатель, который должен уточняться при различных патологиях.

Выработка пищеварительных ферментов не происходит одинаково интенсивно на протяжении всех суток, а зависит от времени приема пищи и ее качества. Естественно, что в начале пережевывания пищи и при дальнейшем поступлении пищевых масс в желудок количество ферментов в пищеварительном тракте и в крови увеличивается. Но диастаза мочи в это время обычно снижается, ее уровень начинает повышаться только при активной фильтрации почками крови, содержащей амилазу в максимальных количествах. Это происходит в конце процесса переваривания пищи, поэтому сразу после еды уровень диастазы мочи минимален, а максимальным, но в пределах нормы, он становится между приемами пищи.

Вот почему физиологическая норма диастазы в моче имеет такие широкие границы: от 10 до 65 единиц активности фермента на литр , так как в течение суток происходят значительные колебания его уровня. Причем эти значения не зависят от возрастной или половой категории пациента, ведь здоровые слюнные и поджелудочная железы вырабатывают одинаковое количество амилазы как на единицу массы человека, так и на единицу объема крови. Поэтому норма в анализах мочи на диастазу у женщин и мужчин, а также у детей любого возраста считается одинаковой.

Некоторое различие референсных значений может отмечаться из-за того, что лаборатории могут использовать различные способы определения количества диастазы в крови и моче. Поэтому неодинаковой может быть и расшифровка анализов. Приведенные выше нормальные показатели относятся к способу Вольгемута, который основан на скорости расщепления ферментом специально добавленного в образцы урины крахмала.

Такое лабораторное исследование, как анализ мочи на диастазу, широко назначается при симптомах различных патологий. Отклонения в сторону увеличения или уменьшения являются важнейшим диагностическим критерием, с помощью которого можно или подтвердить, или исключить определенное заболевание. Рост уровня амилазы, хотя и в неодинаковых пределах, происходит при следующих патологиях:

• острый панкреатит и другие заболевания поджелудочной железы;
• острое воспаление слюнных желез;
• перитонит (воспаление брыжейки кишечника);
• заболевания органов ЖКТ;
• употребление алкогольных напитков;
• травмы органов брюшной полости;
• почечные патологии.

Так как преобладающая часть всего количества фермента продуцируется поджелудочной железой, то и максимальное отклонение диастазы от нормальных значений происходит именно при ее заболеваниях. Особенно типичным и характерным становится резкое повышение амилазы в крови и моче при остром панкреатите.

Еще в 1907 году Вольгемутом было предложено использовать это лабораторное исследование для диагностики острого воспаления паренхимы поджелудочной железы. Было доказано, что воздействие воспалительного процесса вызывает высвобождение максимального количества фермента из клеток железы, причем этот уровень сохраняется на протяжении первых 3–4 суток острого периода. Поэтому диагностическим критерием определение диастазы мочи при остром панкреатите можно считать только в этот промежуток времени.

Так, при остром панкреатите диастаза зашкаливает за 512 единиц, при других же заболеваниях она повышена, но не более 500. Так, при остром холецистите уровень амилазы в моче в среднем составляет 100 ед., при остром аппендиците – 55–60 ед., при перитоните – 71 ед., при перфоративной язве – 69–70 ед. по Вольгемуту.

Есть и исключения, касающиеся особенностей течения острого воспаления в поджелудочной железе. Если острый панкреатит сопровождается разрушением и некрозом органа (панкреонекроз), то амилаза в моче становится менее 512 ед. или снижается вплоть до нормальных значений. Это объясняется полным или частичным разрушением клеток железы, продуцирующих фермент. Но, в целом, обнаружение максимально повышенного уровня диастазы в моче – ведущий признак, подтверждающий наличие у взрослого или ребенка острого панкреатита.

Уменьшение количества диастазы может сопровождать такие патологии, как муковисцидоз, острые или хронические болезни печени. Оно характерно для состояния после оперативного вмешательства на поджелудочной железе, а также при беременности, особенно при токсикозах первого триместра.

Чтобы получить информативные результаты, важно знать, как правильно сдать мочу для изучения на амилазу. За 24 часа до сдачи урины нельзя употреблять алкоголь, а за 2 часа – ничего кушать и пить, кроме чистой воды. Также следует временно исключить прием некоторых лекарственных препаратов. Емкость для образца должна быть стерильной, это или специальный контейнер, купленный в аптеке, или стеклянная баночка, вымытая с содой и высушенная.

Как правило, моча должна быть утренней и обязательно теплой поступить на лабораторное исследование, которое осуществляется инвитро. Поэтому ее собирают в домашних условиях и в специальной сумке доставляют на изучение или непосредственно в лечебном учреждении пациент должен помочиться в баночку. Сдавать анализ мочи на диастазу следует по тому же принципу, что и общий анализ. То есть осуществляется сбор не всей мочи, а лишь средней порции, для чего следует пропустить начальную и заключительную стадии мочеиспускания. Сдаваемый образец урины должен поступить на изучение сразу и быть исследованным в течение 1–2 часов, пока диастаза сохраняет свою активность.

В некоторых лабораториях производится изучение 24-часовой пробы материала, для которой требуется собрать всю мочу, выделяемую пациентом за сутки. При таком способе требуется контейнер объемом до 4 литров и специальный консервант, а также соблюдение всех гигиенических правил, чтобы собирать мочу без посторонних примесей.

Если диастаза в моче определяется методом Вольгемута, то производится это следующим образом:

• берутся 12 стерильных пробирок, в первую наливается образец мочи, в остальные 11 – по 1 мл 1%-го раствора хлорида натрия;
• далее по определенной методике пробирки заполняются разведенными в разных концентрациях порциями мочи;
• в каждую пробирку доливают по 2 мл крахмала в виде 1%-го раствора;
• все емкости помещаются в термостат на 30 минут при температуре 38 град., затем быстро охлаждают в холодной воде;
• в каждую пробирку добавляют по 2 капли йода.

Реакция неизмененного амилазой крахмала с йодом придает раствору синий цвет. Чем крахмала в пробирке меньше (а значит, больше диастазы), чем больше появляется фиолетовых, красных и желтых оттенков. Эти цвета оцениваются по специальной таблице, далее по определенной методике рассчитывается уровень фермента в единицах Вольгемута. Каждая единица показывает то количество диастазы, которое за 30 минут при 38 градусах расщепляет 1 мг крахмала полностью.

Показатели диастазы мочи, полученные лабораторным путем, не являются диагнозом. Они должны быть использованы лечащим врачом комплексно, в сочетании с анализом клинических проявлений болезни и данных других диагностических способов.

источник

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

ГРОДНЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КАФЕДРА БИОХИМИИ

ПО БИОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ ДЛЯ СТУДЕНТОВ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО

И ИНОСТРАННОГО ФАКУЛЬТЕТОВ

Методические рекомендации подготовлены заведующим кафедрой биохимии ГГМУ профессором В. В. Лелевичем, профессором Н. К. Лукашиком, доцентами В. В. Воробьевым, В. В. Климовичем, А. А. Масловской, Л. Н. Дворянинович..

Под общей редакцией профессора В. В. Лелевича.

Заведующий кафедрой общей и биоорганической химии

Гродненского государственного медицинского университета

Утверждено и рекомендовано к печати решением Центрального научно-методического Совета университета (протокол № от ).

Преподавание биологической химии в медицинских вузах должно со-ответствовать динамическому развитию биохимической науки. В связи с этим периодически обновляются учебные программы и методические доку-менты. Действующая учебная программа по биологической химии для студентов лечебно-профилактического факультета была разработана и утверждена МЗ РБ в 1997 г. В течение трех последних лет она адаптирована в учебном процессе на лечебно-профилактическом и иностранном факультетах. На кафедре биохимии ГГМУ был разработан ряд методических материалов в соответствии с действующей учебной программой: рабочая программа, экзаменационные вопросы, экзаменационные билеты, тестовые задания для компьютерного контроля знаний. Для оптимизации учебного процесса студенту необходимы методические рекомендации, где указаны все темы практических занятий, лабораторные работы, выполняемые студентами, рекомендуемая учебная литература. Это позволит студентам создать цельное представление об учебной программе по предмету, унифицировать их подготовку к занятиям, избавить от переписывания вопросов к каждому занятию.

В предлагаемых методических рекомендациях приводятся темы 36 лабораторных занятий, что соответствует учебному плану, выполняемому в течение 3 и 4-го семестров.

При подготовке теоретического раздела занятия необходимо внимательно ознакомиться с контрольными вопросами для самоподготовки. Изучение теоретического материала должно начинаться с восстановления исходного уровня знаний к теме или разделу (из биологии, биоорганической химии или уже пройденных тем биохимии). Необходимая учебная информация содержится в рекомендуемых разделах учебников «Биологическая химия» Т. Т. Березова, Б. Ф. Коровкина (М., 1990 и 1998 г.); А. Я. Николаева (М., 1989); лекционном курсе.

При подготовке к лабораторной работе рекомендуется изучить кон-трольные вопросы по данному разделу, материал, изложенный в «Руковод-ствах к практическим занятиям по биологической химии» Т. Л. Алейни-ковой, Г. В. Рубцовой (М., 1988); О. Д. Кушмановой, Г. М. Ивченко (М., 1983); Н. К. Лукашика, В. В. Климовича (2000) и составить протокол к лабо-раторной работе. В протоколе должны быть отражены следующие разделы:

3. Название лабораторной работы.

4. Принцип метода и химический механизм реакций.

5. Схема выполнения (ход) работы.

Разделы 1-5 заполняются в протоколе при самоподготовке, разделы 6-7 в процессе выполнения лабораторной работы. Для показателей, определяемых количественно, в протоколе указать референтные величины и клинико-диагностическое значение.

Изучение отдельных разделов биохимии заканчивается проведением контрольных занятий, на которых обобщаются все знания, полученные по данной части учебной программы.

Надеемся, что подготовленные коллективом кафедры методические рекомендации помогут студентам успешно овладеть программными знаниями по биологической химии.

З А Н Я Т И Е № 1

ТЕМА: ВВЕДЕНИЕ В БИОХИМИЮ

ЦЕЛЬ: Сформировать у студентов представление о предмете и задачах биологической химии, специфике биохимических лабораторий и особенностях работы с биологическим материалом.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Правила работы в биохимических лабораториях. Техника безопасности.

2. Колориметрия, общий принцип. Устройство и особенности

3. Пипетки, предназначение, типы.

4.1. Отработка практических навыков использования пипеток.

4.2. Работа на фотоэлектроколориметре. Построение калибровочного

5. Контроль выполнения лабораторной работы.

6. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным

занятиям по биологической химии. – М.: Медицина, 1983. – С. 80.

2. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным

занятиям по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 4-8.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. Предмет и задачи биологической химии.

2. Этапы истории биохимии, основные разделы и направления.

3. Живые системы, их характеристика.

4. Объекты биохимических исследований и методы биохимии.

5. Медицинская биохимия, теоретические и практические аспекты.

6. Место биохимии среди биологических дисциплин и ее роль в формировании мировоззрения.

7. Вклад ученых-биохимиков в становление и развитие науки.

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 15-18.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 13-15.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 5-8.

З А Н Я Т И Е № 2

ТЕМА: СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ БЕЛКОВ – Ι

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о физико-химических свойствах белка. Обучить методике выполнения цветных реакций на белки и аминокислоты. Освоить биуретовый метод определения концентрации белка.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Цветные реакции на белки и аминокислоты, химические механизмы.

2.2. Принципы методов количественного определения белков в растворе:

2.3. Клинико-диагностическое значение определения общего белка в сыворотке крови.

3. ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА: 3.1. Цветные реакции на белки и аминокислоты.

3.1.2. Нингидриновая реакция.

3.1.3. Ксантопротеиновая реакция.

3.2. Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом.

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу..

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. – М.: Высш. шк., 1988. – С. 11-13, 18-20, 22-23. Работы 5, 7, 10, 11.

2. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. – М.: Медицина, 1983. — С. 7 – 14. Работа: нингидриновая реакция (с. 10-11), 179.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 9-13. Работы 1(пункты 1, 2, 3,

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. История изучения белков.

2. Белки – важнейшие компоненты живых организмов. Содержание белков в тканях.

3. Аминокислотный состав белков; строение пептидов.

4. Форма и размеры белков, молекулярная масса, методы ее определения.

5. Физико-химические свойства белков, осаждение их из растворов.

6. Методы выделения и очистки белков. Разделение пептидов. Искусственный синтез пептидов.

7. Цветные реакции на белки и аминокислоты, их практическое применение.

8. Количественное определение белков в растворах и тканях.

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 19-20, 22-37, 44-49.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 16-17, 19-32, 37-42.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 9-17, 36-42, 48-52.

З А Н Я Т И Е № 3

ТЕМА: СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ БЕЛКОВ — ΙΙ

ЦЕЛЬ: Изучить основные физико-химические свойства белков, уметь проводить реакции осаждения белка и объяснять их механизмы. Сформировать знания о структурной организации белков.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Факторы устойчивости белков в растворе.

2.2. Обратимое осаждение белков, факторы, механизмы.

2.3. Необратимое осаждение белков, (денатурация), факторы, механизмы.

2.4. Практическое использование обратимого и необратимого осаждения белков.

2.5. Представление о клинико-диагностическом значении протеинограммы сыворотки крови.

3.1. Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка методом высаливания (пункты 2 и 3)

3.2. Осаждение белков HNO₃ (демонстрация)

3.3. Разделение белков методом электрофореза (демонстрация электрофореграмм и их анализ).

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. – М.: Высш. шк., 1988. – С. 24-25, 37. Работа 14 (пункты 2 и 3).

2. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. – М.: Медицина, 1983. — С. 26, 28-29, работа 73. С. 186-192.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 14-15. Работы 3 и 4.

1. Первичная структура белка, методы ее установления, роль пептидных связей.

2. Зависимость биологических свойств и видовой специфичности белков от первичной структуры.

3. Вторичная структура белка, ее виды, методы установления, роль водородных связей.

4. Третичная структура белка, методы ее установления, виды стабилизирующих связей.

5. Зависимость биологических свойств белков от третичной структуры. Денатурация белка, факторы, ее вызывающие, практическое использование.

6. Четвертичная структура белка, ее биологическое значение.

7. Представление о кооперативных взаимодействиях и мультимолекулярных структурах. Доменные белки.

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 47-48, 49-71.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 40-41, 42-60.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 18-29, 30-36.

З А Н Я Т И Е № 4

ТЕМА: СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ БЕЛКОВ — ΙΙΙ

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о биологических функциях белков. Освоить методику кислотного и ферментативного гидролиза белка.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Гидролиз белков и его типы, схема.

2.2. Контроль кислотного гидролиза (биуретовая реакция) и гидролиза белка трипсином.

2.3. Практическое использование гидролиза и белковых гидролизатов.

3.1. Кислотный и ферментативный гидролиз белков.

3.1.2. Гидролиз белков трипсином.

3.1.3. Контроль за полнотой гидролиза (биуретовая реакция).

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

1. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. М., 1983. С. 15-17, 18-19. Работа 2.

2. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. – Биохимия, руководство. М., Высш. шк., 1988 — С. 52-53. Работа 26.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 16-18. Работы 5 и 6.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. Биологически активные пептиды, классификация, представители. Глутатион.

2. Динамическое состояние нативного белка. Понятие комплементарность. Лиганды и функционирование белков.

3. Многообразие белков и их функции. Количественное определение белков по функциональным свойствам. Белковые препараты (гормоны, ферменты и т.д.).

4. Различие белкового состава органов и тканей. Изменение белкового состава в онтогенезе, при болезнях.

5. Простые белки, представители, характеристика, биологические функции.

6. Сложные белки, представители, характеристика, биологические функции.

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 20-22, 71-95.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 17-18, 60-76.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 29-30, 31-32, 42-45, 52-53.

З А Н Я Т И Е № 5

ТЕМА: Ф Е Р М Е Н Т Ы — Ι

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о природе, свойствах и механизмах действия ферментов. Отработать методические подходы к определению активности и изучению свойств ферментов.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Химическая природа ферментов, представление об активном центре.

2.2. Особенности ферментативного катализа и этапы ферментативной реакции.

2.3. Реакция, катализируемая амилазой. Принцип метода определения активности фермента.

2.4. Факторы, влияющие на активность амилазы (температура, активаторы, ингибиторы).

2.5. Принцип метода определения активности диастазы (амилазы) мочи по Вольгемуту. Единицы амилазной активности.

2.6. Диагностическое значение определения активности диастазы мочи.

3.1. Влияние температуры на активность амилазы.

3.2. Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны.

3.3. Определение активности амилазы (диастазы) мочи по Вольгемуту. (Методика прилагается).

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. – Биохимия, руководство. М., Высш. шк., 1988 — С. 60-61, 79-80. Работы 31 и 45.

2. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. М., 1983. С. 64-66.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 21- 24. Работы 7, 8, 9.

Определение активности амилазы в моче и сыворотке крови широко используется в клинической практике с целью диагностики заболеваний поджелудочной железы. При острых панкреатитах амилазная активность мочи и сыворотки крови увеличивается в десятки раз, особенно в первые сутки заболевания, а затем постепенно возвращается к норме. При почечной недостаточности амилаза в моче отсутствует.

В детском возрасте увеличение активности амилазы наблюдается при эпидемическом паротите, что указывает на одновременное поражение поджелудочной железы вирусом паротита.

Ход работы: Берут 10 пронумерованных пробирок, приливают в каждую по 1 мл 0,85% раствора хлорида натрия. Затем в первую пробирку добавляют 1 мл исследуемой мочи. Содержимое этой пробирки перемешивают, несколько раз втягивая и выпуская жидкость из пипетки. Набирают в пипетку 1 мл смеси и переносят ее во 2-ю пробирку и т.д. до 10-й пробирки. Из 10-й пробирки отбирают 1 мл смеси и выливают. В каждую пробирку добавляют по 1 мл 0,85% раствора хлорида натрия, по 2 мл 0,1% раствора крахмала и, перемешав, все пробирки помещают в термостат на 15 мин. при 45 о С. После инкубации пробирки охлаждают водопроводной водой и ставят по порядку в штатив. Прибавляют в каждую пробирку по 2 капли раствора йода и перемешивают. При реакции с йодом жидкость в пробирках окрашивается в желтоватый, розовый и фиолетовый цвет. Отмечают пробирку с наибольшим разведением мочи, при котором произошло полное расщепление крахмала (желтая окраска с йодом). Полученные данные заносят в таблицу.

Расчёт: Предположим, что полное расщепление крахмала произошло в первых четырёх пробирках. В четвёртой пробирке разведение мочи 1 : 16. Следовательно:

1 /₁₆ мл мочи расщепила 2 мл 0,1% раствора крахмала

1 мл неразведенной мочи расщепит Х мл 0,1% раствора крахмала

2 · 1 ·16

X = ———— = 32 мл 0,1 % раствора крахмала.

Следовательно, активность амилазы (диастазы) мочи равна 32 ед.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. История открытия и изучения ферментов.

2. Химическая природа ферментов. Активный и аллостерический центры.

3. Кофакторы ферментов: ионы металлов, коферменты. Коферментные функции витаминов.

4. Механизмы действия ферментов.

5. Особенности ферментативного катализа. Специфичность действия ферментов.

6. Классификация и номенклатура ферментов.

8. Единицы измерения активности и количества фермента.

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 114-134, 142-143, 157-158, 159-163.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 92-108, 114-115, 124-125, 126-129.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 53-58, , 61-73, 76-77, 81-83, 89-90.

З А Н Я Т И Е № 6

ТЕМА: Ф Е Р М Е Н Т Ы — ΙΙ

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о регуляции ферментативной активности. Изучить действие липазы и влияние желчи на активность фермента.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Реакция, катализируемая липазой, ее роль в процессе пищеварения.

2.2. Факторы, активирующие липазу в кишечнике.

2.3. Изменение скорости ферментативной реакции во времени.

2.4. Принцип метода количественного определения активности липазы.

3.1. Кинетика действия липазы. Влияние желчи на активность липазы.

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. — М.: Высш. шк., 1988. — С. 146-148. Работа 82.

2. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. – М.: Медицина. 1983. – С. 72.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 25 — 26. Работа 10.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. Кинетика ферментативных реакций, анализ и графическое изображение уравнений Михаэлиса-Ментен и Лайнуивера-Берка.

2. Зависимость скорости ферментативных реакций от температуры, рН, концентраций субстрата и фермента.

3. Ингибиторы и активаторы ферментов. Типы ингибирования: обратимое (конкурентное и неконкурентное), необратимое.

4. Лекарственные препараты-ингибиторы ферментов.

5. Механизмы регуляции ферментативной активности.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 134-142, 143-157.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 108-114, 115-124.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 73-76, 78-81, 84-89.

З А Н Я Т И Е № 7

ТЕМА: Ф Е Р М Е Н Т Ы — III

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о клинических аспектах энзимологии и закрепить знания о структуре и функциях белков и ферментов.

СЕМИНАРСКОЕ ЗАНЯТИЕ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

3. Самостоятельная аудиторная работа в соответствии с предложенными заданиями.

4. Решение и обсуждение ситуационных задач.

5. Контроль выполнения самостоятельной работы.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. Различия ферментного состава органов и тканей. Органоспецифические ферменты.

2. Определение ферментов в плазме крови с диагностической целью: причины ферментемии, происхождение ферментов плазмы крови.

3. Изменение активности ферментов при патологии. Наследственные (первичные) и приобретенные (вторичные) энзимопатии.

4. Применение ферментов для лечения болезней и как аналитических реагентов в лабораторной диагностике. Иммобилизованные ферменты.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 163-168, 439, 579-580, 615-616.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 129-132, 343-344, 446-447, 480.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 90-92.

З А Н Я Т И Е № 8

ТЕМА: КОНТРОЛЬНОЕ ЗАНЯТИЕ «БЕЛКИ. ФЕРМЕНТЫ»

1. История изучения белков.

2. Белки – важнейшие компоненты живых организмов. Содержание белков в тканях.

3. Аминокислотный состав белков; строение пептидов. Гидролиз белка.

4. Форма и размеры белков, молекулярная масса, методы ее определения.

5. Физико-химические свойства белков, осаждение их из растворов.

6. Методы выделения и очистки белков. Разделение пептидов. Искусственный синтез пептидов.

7. Цветные реакции на белки и аминокислоты, их практическое применение.

8. Количественное определение белков в растворах и тканях. Клинико-диагностическое значение определения общего белка в сыворотке крови.

9. Первичная структура белка, методы ее установления, роль пептидных связей.

10. Зависимость биологических свойств и видовой специфичности белков от первичной структуры.

11. Вторичная структура белка, ее виды, методы установления, роль водородных связей.

12. Третичная структура белка, методы ее установления, виды стабилизирующих связей.

13. Зависимость биологических свойств белков от третичной структуры. Денатурация белка, факторы, ее вызывающие, практическое использование.

14. Четвертичная структура белка, ее биологическое значение.

15. Представление о кооперативных взаимодействиях и мультимолекулярных структурах. Доменные белки.

16. Биологически активные пептиды, классификация, представители. Глутатион.

17. Динамическое состояние нативного белка. Понятие комплементарность. Лиганды и функционирование белков.

18. Многообразие белков и их функции. Количественное определение белков по функциональным свойствам. Белковые препараты (гормоны, ферменты и т. д.).

19. Различие белкового состава органов и тканей. Изменение белкового состава в онтогенезе, при болезнях.

20. Методы выделения и очистки белков. Белковые препараты (гормоны, ферменты и т.д.).

21. Простые белки, представители, характеристика, биологические функции.

22. Сложные белки, представители, характеристика, биологические функции.

23. История открытия и изучения ферментов.

24. Химическая природа ферментов. Активный и аллостерический центры. Механизмы действия ферментов.

25. Кофакторы ферментов: ионы металлов, коферменты. Коферментные функции витаминов.

26. Особенности ферментативного катализа. Специфичность действия ферментов.

27. Классификация и номенклатура ферментов.

29. Единицы измерения активности и количества ферменты.

30. Кинетика ферментативных реакций, анализ и графическое изображение уравнений Михаэлиса-Ментен и Лайнуивера-Берка.

31. Зависимость скорости ферментативных реакций от температуры, рН, концентраций субстрата и фермента.

32. Ингибиторы и активаторы ферментов. Типы ингибирования: обратимое ((конкурентное и неконкурентное), необратимое.

33. Лекарственные препараты – ингибиторы ферментов.

34. Механизм регуляции ферментативной активности.

35. Различия ферментного состава органов и тканей. Органоспецифические ферменты.

36. Определение ферментов в плазме крови с диагностической целью: причины ферментемии, происхождение ферментов плазмы крови.

37. Изменение активности ферментов при патологии. Наследственные (первичные) и приобретенные (вторичные) энзимопатии. Клинико-диагностическое значение исследования активности амилазы (диастазы) мочи.

38. Применение ферментов для лечения болезней и как аналитических реагентов в лабораторной диагностике. Иммобилизованные ферменты.

ТЕМА: СТРУКТУРА И ФУНКЦИИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о строении нуклеиновых кислот и их функциях. Провести гидролиз нуклеопротеинов и освоить качественные реакции определения продуктов гидролиза.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Нуклеопротеины, их представители, биологическая роль.

2.2. Схема гидролиза нуклеопротеинов.

2.3. Сущность качественных реакций на продукты гидролиза нуклеопротеинов.

3.1. Гидролиз нуклеопротеинов. Реакции на компоненты нуклеопротеинов в гидролизате:

3.1.1. Биуретовая реакция на полипептиды.

3.1.2. Серебряная проба на пуриновые основания.

3.1.3. Проба Троммера на рибозу и дезоксирибозу.

3.1.4. Молибденовая проба на фосфорную кислоту.

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. — М.: Высш. шк., 1988. — С. 94-96. Работа 53.

2. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. – М.: Медицина. 1983. – С. 29-34.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 27-28. Работа 11.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. История открытия и изучения нуклеиновых кислот.

2. Химическая природа нуклеиновых кислот. Различия между ДНК и РНК.

3. Структура и функция ДНК.

4. РНК, виды, особенности структурной организации, биологические функции.

5. Денатурация и ренатурация ДНК. Гибридизация нуклеиновых кислот.

6. Роль белков в структурной организации нуклеиновых кислот. Нуклеопротеины. Структура хроматина. Строение рибосом эукариот.

7. Особенности организации генома человека.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 86-88, 96-113, 513-515, 517-520.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 71-73, 77-91, 402, 403-406..

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 92-105.

З А Н Я Т И Е № 10

ТЕМА: БИОСИНТЕЗ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ.

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о биосинтезе нуклеиновых кислот. Выполнить выделение дезоксирибонуклеопротеинов из биологического материала. Освоить метод количественного определения мочевой кислоты в моче.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Сравнительное содержание ДНК в тканях.

2.2. Принцип метода выделения дезоксирибонуклеопротеинов из тканей.

2.3. Сущность качественной реакции на ДНК.

2.4. Происхождение мочевой кислоты в организме. Клинико-диагностическое значение исследования мочевой кислоты в крови и моче.

2.5. Принцип метода количественного определения мочевой кислоты в моче.

3.1. Выделение дезоксирибонуклеопротеинов из тканей животных (демонстрация).

3.2. Определение мочевой кислоты в моче.

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. — М.: Высш. шк., 1988. — С. 97-98, 109-110. Работы 54 и 61.

2. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. – М.: Медицина. 1983. – С.35-36, 210-211.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 29-30. Работа 12.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. Биосинтез ДНК (репликация) у эукариот, общая схема, ферменты, роль ДНК-полимераз. Регуляция синтеза ДНК.

2. Повреждения ДНК, типы, способы репарации, эксцизионная репарация.

3. Обратная транскрипция, схема, биологическая роль. Представление об онкогенах.

4. Биосинтез РНК (транскрипция) у эукариот, этапы, схема, роль ДНК-зависимых РНК-полимераз.

6. Процессинг матричных, рибосомных, транспортных РНК.

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 478-495.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 377-387.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 105-115, 135-139.

З А Н Я Т И Е № 11

ТЕМА: БИОСИНТЕЗ БЕЛКОВ

ЦЕЛЬ: Сформировать знания о биосинтезе белков.

СЕМИНАРСКОЕ ЗАНЯТИЕ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Самостоятельная аудиторная работа в соответствии с предложенными заданиями.

3. Решение и обсуждение ситуационных задач.

4. Контроль выполнения самостоятельной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. Основной постулат молекулярной биологии.

2. Генетический код и его свойства.

3. Образование и строение аминоацил-т РНК. Адапторная функция тРНК.

4. Синтез белка (трансляция) у эукариот, этапы, схема.

5. Посттрансляционные изменения белков, значение фолдинга белков.

6. Регуляция синтеза белка у эукариот. Теория оперона (лактозный оперон у прокариот).

7. Антибиотики — ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот и белков.

8. Представление о технологии рекомбинантнных ДНК (генной инженерии). Использование ее достижений в медицине.

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 496-498, 509-544.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 388-390, 399-422.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 116-124, 126-129, 156-159.

Конспект лекций.

З А Н Я Т И Е № 12

ТЕМА: ВВЕДЕНИЕ В МЕТАБОЛИЗМ.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. Сукцинатдегидрогеназная реакция, принцип определения активности.

2.1. Конкурентное ингибирование сукцинатдегидрогеназы.

2.2. Цитохромоксидаза, биологическая роль.

2.4. Принцип метода качественного определения активности цитохромоксидазы.

3.1. Определение активности сукцинатдегидрогеназы.

3.2. Определение активности цитохромоксидазы.

4. Контроль выполнения лабораторной работы.

5. Письменная контрольная работа по теоретическому разделу.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. — М.: Высш. шк., 1988. — С. 111-114. Работы 62 и 63.

2. Кушманова О. Д., Ивченко Г. М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. – М.: Медицина. 1983. – С. 91-92, 102-104.

3. Лукашик Н. К., Климович В. В. Руководство к лабораторным занятиям

по биологической химии. – Гродно, 2000. – С. 31-33. Работы 13 и 14.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ

1. Представление о метаболизме и метаболических путях.

2. Методы изучения обмена веществ. Использование изотопов.

3. Специфические и общие пути катаболизма.

4. Метаболиты в норме и при патологии. Конечные продукты метаболизма.

5. Состав и строение биологических мембран.

6. Общие свойства и функции биологических мембран. Липосомы.

8. Механизмы мембранного транспорта веществ.

9. Патология мембран, роль лизосом.

Л И Т Е Р А Т У Р А :

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 298-305, 406-408.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 204, 208-212, 316-317.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 160-164, 172-198.

З А Н Я Т И Е № 13

ТЕМА: ЭНЕРГЕТИЧЕСКИЙ ОБМЕН — I

ЦЕЛЬ: Сформировать знания об основах биоэнергетики клетки, представление о макроэргах тканей (АТФ, креатинфосфат) и принципах их количественного определения.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Разбор вопросов теоретического раздела.

2. Контрольные вопросы к лабораторной работе:

2.1. АТФ, строение, пути синтеза, биологическая роль.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ — конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

источник