Иммунофиксация — это ключевой тест для подтверждения и типирования М-компонента с целью диагностики гаммапатий (миелома, болезнь Вальденстрема, лимфома, амилоидозы и пр.) при помощи антисывороток к тяжелым (G, A, M, D, E) и легким (каппа, лямбда) цепям иммуноглобулинов.
При выявлении аномальных полос на электрофореграмме сывороточных белков, в первую очередь в зонах гамма-глобулинов, а также в зонах альфа- и бета-глобулинов (эти полосы могут быть скрыты за обычными белками соответствующих зон), всегда следует заподозрить наличие моноклональных белков, т.е. гаммапатию. Для идентификации этих аномальных полос применяется методика иммунофиксации. Кроме того, иммунофиксация позволяет выявить моноклональные белки небольшой концентрации и/или скрытые другими обычными белками электрофоретического профиля.
Электрофорез с иммунофиксацией – это простая методика, которая позволяет фиксировать белок in situ после электрофореза путем образования нерастворимого комплекса с антителом к нему.
Результаты. Результат иммунофиксации сыворотки каждого пациента представлен в виде шести дорожек — одна референсная дорожка (ELP) на которой зафиксированы все белки и пяти дорожек обработанных индивидуальными антисыворотками против цепей Ig (G, А, М, каппа, лямбда или другими выбранными антисыворотками). — В первую очередь проводится оценка референсной дорожки на наличие качественных аномалий. Затем анализируются дорожки, обработанные антисыворотками. В случае присутствия в образце моноклональных Ig, выявленные на дорожках с антисыворотками полосы (одна полоса на любой из дорожек тяжелых цепей и одна на дорожка легких цепей) сравниваются с аномальными полосами на референсной дорожке – они должны иметь одинаковую скорость.
Материал для исследования: сыворотка крови или моча
Пробоподготовка: не требуется.
Совместимость с прибором
№ по каталогу
Наименование набора
Кол-во тестов на набор
Белковые фракции с иммунофиксацией ГИДРАГЕЛЬ (HYDRAGEL 1 IF (SM))
Белковые фракции с иммунофиксацией ГИДРАГЕЛЬ (HYDRAGEL 2 IF (SM))
Белковые фракции с иммунофиксацией ГИДРАГЕЛЬ (HYDRAGEL 4 IF (SM) — ACID VIOLET))
Белковые фракции с иммунофиксацией ГИДРАГЕЛЬ (HYDRAGEL 4 IF (SM) – AMIDOBLACK)
Белковые фракции с иммунофиксацией ГИДРАГЕЛЬ (HYDRAGEL 9 IF (SM))
Антисыворотки (обязательны для анализа, различные фасовки и комбинации)
Антисыворотки для иммунофиксации (IF ANTISERA AND FIXATIVE SOLUTION (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig A (ANTI-Ig A 1 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig G (ANTI-Ig G 1 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig M (ANTI-Ig M 1 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-KAPPA (ANTI-KAPPA 1 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-LAMBDA (ANTI-LAMBDA 1 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig DE (ANTI-Ig DE 0,5 mL (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig D (ANTI-Ig D 1 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig E (ANTI-Ig E 1 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ПОЛИВАЛЕНТ (POLYVALENT 8 ml)
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig A (ANTI-Ig A 8 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig G (ANTI-Ig G 8 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-Ig M (ANTI-Ig M 8 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-KAPPA (ANTI-KAPPA 8 ml (SM))
Антисыворотки для иммунофиксации ANTI-LAMBDA (ANTI-LAMBDA 8 ml (SM))
Контрольные материалы
Контрольная сыворотка для электрофореза ИФ (IF CONTROL)
Дополнительные реагенты и расходные материалы (по потребности)
Промывающий раствор для электрофореза ГИДРАЗИС (HYDRASYS WASH SOLUTION)
Обесцвечивающий раствор для электрофореза (DESTAINING SOLUTION)
Аксессуары для иммунофиксации и исследования белка Бен Джонса (для гелей форматом 1 образец на гель)
Аксессуары для иммунофиксации (для гелей форматом 2 или 4 образца на гель)
Аксессуары для иммунофиксации (для гелей форматом 9 образцов на гель)
источник
зарегистрируйте свою электронную почту на сайте и получайте дополнительные информационные материалы по аутоиммунной диагностике
где сдать анализ крови на тест анализы спб СПб инвитро Петербург Питер на целиакию аутоиммунные заболевания аутоантитела аутоиммунная диагностика Лапин autoimmun антиядерные лабораторная антинуклеарный фактор антинуклеарные антитела HEp-2 тип волчанка свечения амилоидоз склеродермия иммуноблот ревматоидный цитруллиновый расшифровка экстрагируемые скрининг заболевания смешанное системная СКВ артрит дсДНК CCP ССР АЦЦП саркоидоз антинейтрофильные криоглобулины гранулематозные АНФ АНЦА ANCA ENA иммунофиксация васкулиты Крона целиакия аутоиммунный печени язвенный колит глиадину трансглутаминазе стероидпродуцируюшим Вегенера яичника эндокринопатии пузырные пузырчатка пемфигоид рассеянный склероз миастения миелина белок олигоклональный изоэлектрофокусирования IgG IgA IgM легкие цепи полиневрит ганглиозидам полимиозит парапротеин миелома неоптерин островковые GAD антимитохондриальные гладкие скелетные мышцы ASCA колит антигену фосфолипидный синдром кардиолипину фосфолипидам гликопротеину нуклеосомам SSA SSB RNP Sm CENT Scl Jo-1 АМА антикератиновые антиперинуклеарный MCV LKM-1 рецептору иммунофлюоресценция ИФА иммунологическая лаборатория университет санкт-петербург павлова Чардж-Стросса полиангиит микрокристаллические первичный билиарный цирроз трансглутаминаза трансглютаминаза критерии ревматоидного артрита 2010 года СПб Питер Петербург нейрогенетика
грибковые аллергены, дерматомиозит, Копрограмма, Фгдс, цена, подготовка к анализу, КОД 01 02 15 170, аттг, Альфа 1 микроглобулин, Сколько стоит анализ к ССР цитрули, смитт антиген блот, Как лечить Аутоиммунные заболеван, C3 и C4, иммуногистохимическое трепанобио, Антинейтрофильные антитела при б, ANAs, Герпетиформный дерматит, анализ на антитела к GM CSF, HLA B27, энмг, иммунология.
Парапротеинемии и иммунофиксация
Диагностика парапротеинемий множественная миелома, болезнь легких цепей, амилоидоз, болезнь Вальденстрема, моноклональная гаммапатия неясного значения (MGUS)
Парапротеины являются первыми описанными опухолевыми маркерами, т.е. отражают объем опухоли. Как и другие онкомаркеры парапротеины встречаются как при онкологических и так и патологических процессов, отражая нарушенное функционирование иммунной системы. Наблюдается увеличение встречаемости с возрастом; в бессимптомной популяции большинство случаев представлено гаммапатии неясного значения. Значение обнаружения парапротеинемии (ПП) в популяции приведено ниже:
MGUS(без прогресса за 5 лет)
Транзиторное (пожилой возраст)
Парапротеин может быть выявлен в сыворотке крови с помощью электорофореза белков сыворотки, количественного определения основных классов иммуноглобулинов сыворотки, а также с помощью метода иммунофиксации. Несомненным преимуществом выполняемого нами метода является проведение одновременного анализа сыворотки и мочи..
Особую важность в дифференциальной диагностике злокачественных и доброкачественных состояний является обнаружение фрагментов иммуноглобулинов, которые секретируются злокачественными клетками. Фрагменты иммуноглобулинов (легкие цепи) могут быть обнаружены в моче благодаря концентрирующему эффекту, но обычно не определяются при электрофорезе белков сыворотки. Таким фрагментом иммуноглобулина является белок Бенс-Джонса (ББД), представляющий агрегаты легких цепей иммуноглобулинов. При доброкачественных парапротеинемиях ББД в моче не обнаруживается, что позволяет использовать его выявление в качестве основного метода скрининга миеломы.
Концентрации Ig сыворотки
Болезнь тяжелых цепей альфа/гамма/мю
Тест 01.02.15.340 Легкие цепи иммуноглобулинов каппа и лямбда в сыворотке крови
При миеломе легкие цепи иммуноглобулинов отражают синтез парапротеина при большинстве типов парапротеинемий. Концентрация в крови может оставаться нормальной, но обычно повышена. Целесообразно подсчитать суточную экскрецию свободных легких цепей в моче. Для каппа цепи в норме она меньше чем 0,1 гр за 24 часа.. Увеличение свидетельствует о высокой вероятности парапротеинемии и требует обследования с помощью иммунофиксации.
Тест 01.02.15.420 Скрининг парапротеинемий методом иммунофиксации с в сыворотке крови (количественная оценкая парапротеина)
Данный метод представляет разновидность иммунофиксации, при которой белки сыворотки разделяются с помощью электрофореза, а на отдельной электрофоретической дорожке проводится иммунофиксация с антисывороткой направленной против тяжелых цепей IgG, IgM, IgA и легких цепей иммуноглобулинов. При наличии подозрения на присутсвие парапротеина (моноклональной полосы) в электрофореграмме, скрининговый иммунофиксационный метод позволяет обнаружить наличие парапротеина и расчитать его количество. Благодаря низкой цене метод скрининга более удобен для обследования как в целях дифференциальной диагностики парапротеинемий, так и наблюдения за динамикой парапротеина на фоне лечения моноклональных гаммапатий.
Тест 01.02.15.640 Скрининг белка Бенс-Джонса в крови с помощью иммунофиксации (разовая и суточная моча)
Выявление белка Бенс-Джонса позволяет отличить моноклональную гаммапатию невыясненного значения и злокачественную парапротеинемию на фоне онкогематологических заболевания, с высокой вероятностью диагностирует миелому легких цепей. Позволяет оценить содержание легких цепей (и их аггрегатов) в моче.
Тест 01.02.15.650 Скрининг гаммапатий в сыворотке и моче (два материала)
Комбинированное исследование позволяет исключить диагноз парапротеинемии (и моноклональной гаммапатии) при неясной клинической картине.
Тест 01.02.15.655 Типирование парапротеина в сыворотке крови с помощью иммунофиксации (IgG, IgA, IgM, каппа, лямбда)
с количественным исследованием парапротеина
В процессе этого метода белки сыворотки и мочи одновременно разделяются с помощью электрофореза и окрашиваются соотвествующими антисыворотками. Проводится денситометриеская оценка моноклонального компонета (парапротеина) и определяется его содержанию в г/л. Вероятность множественной миеломы значительно повышается при определении парапротеина более 3 гр/л. Тест позволяет одновременно сопоставить клональность иммуноглобулинов в сыворотке и моче.
Тест 01.02.15.645 Типирование белка Бенс-Джонса с помощью иммунофиксации (разовая и суточная моча)
Исследование позволяет определить наличие и типировать белок Бенс-Джонса в моче с панелью специфических антисывороток.
источник
Протеин в моче может быть признаком серьезных осложнений со здоровьем. Почки ответственны за фильтрацию отходов и дополнительную жидкость из крови и в моче, оставляя белки в крови. Однако, когда процесс фильтрации не функционирует должным образом, организм фильтрует эти белки крови и в моче.
Различные диагностические тесты могут определять тип и количество белка в моче. Результаты теста помогут вашему врачу определить соответствующий диагноз и лечение.
Тест на иммунную фиксацию или анализ иммунофиксации мочи обнаруживает присутствие и измеряет количество определенных типов белков в мочи. Эти белки известны как иммуноглобулины. Они подразделяются на две широкие классификации: нормальные или ненормальные.
Аномальные иммуноглобулиныв моче указывают на наличие заболевания. Примером аномального иммуноглобулина является моноклональный белок или М-белок.
Тест на иммунофиксацию мочи является общим тестом, который используется, когда врач подозревает, что у человека могут быть определенные состояния здоровья, включая множественную миелому и макроглобулинемию Вальденстрема. Эти нарушения производят аномальные иммуноглобулины, которые могут быть обнаружены в моче мокрого иммунофиксационного теста.
Симптомы множественной миеломы включают:
- увеличение кровоподтеков и кровотечение десен или из носа
- усталость, бледность и одышка из-за анемии
- лихорадки неизвестного происхождения и повторные инфекции
- боль в костях, особенно в позвоночнике, ребрах, черепе и тазе
- необъяснимое повреждение кости и переломы
- симптомы высокого уровня кальция в крови, включая мышечные боли / слабость, боль в суставах, сердечные аритмии, запоры, тошнота, рвота и изменения психического состояния
Симптомы макроглобулинемии Вальденстрема включают:
- кровотечение десен
- помутнение зрения
- головокружение
- усталость
- легкие синяки кожа
- головная боль
- изменения в психическом состоянии
- онемение или покалывание в руках или ногах
- необъяснимая сыпь
Тест на иммунофиксацию мочи является общей мерой скрининга для оценки аномальных уровней иммуноглобулина, поскольку результаты доступны быстрее, чем при других тестах.
Тест иммуноэлектрофореза-сыворотки (IEP-сыворотка) дает аналогичные результаты. Это может занять больше времени, чтобы получить результаты теста IEP-сыворотки. Однако результаты могут быть более точными.
Тест на иммунофиксацию мочи происходит в условиях здравоохранения. Вам нужно будет предоставить образец мочи с чистой водой.Этот метод поможет предотвратить появление микробов, находящихся вблизи или в уретре, от входа в контейнер для проб.
Ваш врач или медсестра предоставят вам набор для очистки мочи. В комплект входят стерильные полотенца для чистки и контейнер с стерильным лотком с крышкой. Если вы мужчина, вы должны сначала очистить голову пениса, используя стерильные полотенца. Если вы женщина, используйте стерильные полотенца, чтобы вымыть область между губами вульвы.
После тщательной очистки, вы будете мочиться небольшим количеством в унитаз, а затем остановите поток мочи. Это очистит уретру от загрязнений. Затем вы будете собирать оставшуюся мочу в стерильной чашке. Общий объем образца мочи должен составлять от одной до двух унций.
Когда вы закончите сбор образца, вы положите крышку на чашку и оставите ее в коробке, помеченной для образцов, или отведите ее к врачу или медсестре. Человек, который дал вам комплект для чистки, расскажет вам, что делать с образцом. Затем врач или медсестра отправят образец мочи в лабораторию для оценки.
Процедура мочи с чистым улоком может быть неудобной, и вы можете обнаружить, что ваш первый образец меньше требуемой от одной до двух унций. Это не редкость. Вы можете выполнить более одной процедуры очистки, чтобы получить необходимый объем выборки.
Вы должны попросить новый стерильный набор для чистки для каждой попытки сбора мочи. Вы не можете повторно использовать стерильные полотенца и контейнеры. Повторите все шаги процедуры мочи с чистым улоком, когда вы собираете больше мочи.
Тест на иммунофиксацию мочи требует только нормального мочеиспускания. Тест не является инвазивным и не представляет значительных рисков для пациента. Тест не должен вызывать дискомфорта.
Отрицательный результат теста показывает, что в моче нет аномальных иммуноглобулинов. Если тест не обнаруживает аномальные иммуноглобулины, вам может не потребоваться дополнительное тестирование.
Положительный результат означает, что аномальные иммуноглобулины присутствуют в моче. Аномальные иммуноглобулины могут указывать на серьезную проблему со здоровьем, такую как множественная миелома или макроглобулинемия Вальденстрема. Наличие аномальных иммуноглобулинов также может быть признаком других видов рака.
Тест на мочи иммунофиксации является лишь одним из нескольких диагностических тестов, которые подтвердят ваш диагноз. Обнаружение аномальных иммуноглобулинов может не указывать на основное состояние здоровья некоторых пациентов. Небольшой процент людей имеет низкий уровень аномальных иммуноглобулинов в их телах. Эти люди не развивают никаких проблем со здоровьем. Это состояние известно как моноклональная гаммапатия неизвестного значения (MGUS).
источник
Код исследования: В69
Определение свободных легких цепей иммуноглобулинов (капа и лямбда) в сыворотке крови и в суточной моче (выявление белка Бенс-Джонса) – показатель в диагностике множественной миеломы (болезнь Рустицкого-Калера, миеломная болезнь). Основные показания к применению (c учетом клинической картины заболевания): боли в костях, патологические переломы, анемия, полинейропатия, неясные лихорадки, гиперкальциемия, протеинурия, изменения картины электрофореза белков.
Множественная миелома – это злокачественное заболевание плазматических клеток в результате их злокачественной пролиферации, происходящей главным образом в костном мозге, но иногда и в экстрамедуллярных очагах. Относится к гематоонкологическим заболеваниям. Поражаемые клетки – это плазматические клетки, являющиеся разновидностью лейкоцитов, которые вырабатывают в нашем организме иммуноглобулины (антитела). Плазматические клетки — разновидность клеток соединительной и кроветворной тканей; образуются у позвоночных животных и человека из стволовых кроветворных клеток костного мозга, являются конечным этапом развития B-лимфоцита. Основная функция – выработка антител. Каждый плазмоцит секретирует иммуноглобулины только одного класса.
Термин «миелома» впервые был предложен в 1873 году Рустицким для обозначения опухоли, развивающейся множественно в костном мозге. В 1900 г. Райт обратил внимание на связь этой болезни с поражением плазматических клеток.
Миелому обычно называют «множественной миеломой», поскольку в костях обнаруживают сразу несколько очагов или участков образования опухолей. Единичная опухоль из миеломных клеток называется изолированной плазмацитомой.
Опухолевая ткань разрастается преимущественно в плоских костях — череп, рёбра, таз и в позвоночнике, приводя к остеолизису и остеопорозу. Множественная миелома может проявляться патологическими переломами, болями в костях, анемией, снижением гемоглобина, тромбозами, кровотечениями. При разрушении костей в крови увеличивается содержания кальция , который в виде конкрементов откладывается в почках, лёгких. Миеломная нефропатия в основном обусловлена поступлением через почечный фильтр парапротеинов. Характерным для миеломной болезни является частота бактериальных инфекций вследствие уменьшения количества нормальных иммуноглобулинов и нарушения образования антител.
Иммуноглобулины разных классов (G, A, M, D, E) характеризуются общим строением. Легкие L-цепи одинаковы у всех иммуноглобулинов, тогда как тяжелые Н-цепи гетерогенны. Молекула иммуноглобулина содержит две легкие и две тяжелые цепи. Легкие цепи существуют в двух формах: каппа-цепи и лямбда-цепи.
От типа тяжелых цепей зависит принадлежность молекулы иммуноглобулина к тому или иному классу иммуноглобулинов.
Вырабатываемые пораженными клетками антитела различных видов в избыточных количествах, легкие и тяжелые цепи иммуноглобулинов принято называть парапротеинами. Их можно обнаружить в крови или в моче методом электроиммунофореза. Легкие цепи способны проходить через почечный фильтр и поэтому их находят в моче. Лёгкие цепи иммуноглобулинов, обнаруживаемые в моче или в крови называются — белок Бенс-Джонса. Белок Бенс-Джонса, примерно в 60% случаев, выявляют чаще в моче больных множественной миеломой. Чаще легкие цепи обнаруживаются в моче за счет концентрирующего эффекта и реже, в крови. Считается, что при доброкачественных парапротеинемиях белок Бенс-Джонса не выявляется, поэтому его определение используют как скрининговое исследование при подозрении на миелому.
Следует учитывать, термин — «белок Бенс-Джонса» не всегда можно отнести к наличию легких цепей. Поскольку, даже при наличии в моче легких цепей только в 10% случаев их поведение соответствует тому эффекту, который показал автор (преципитация и растворение при нагревании и охлаждении мочи). Для определения белка Бенс-Джонса применяют нагревание мочи. При 56° С белки преципитируют, а при точке близкой к кипению вновь растворяются.
По иммунохимической классификации выделяют 5 основных типов миеломы: G, A, D, Е и Бенс-Джонса (обнаруживаются только легкие цепи – «болезнь легких цепей»). К редким формам относятся несекретирующая миелома (1-3%), М-миелома, биклональная миелома (2-4%). Частота встречаемости типов миеломы примерно соответствует концентрации различных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови: G-миелома обнаруживается в среднем в 60% случаев, А-миелома — в 25%, D-миелома — в 1%, Е- миелома 1%. М-миелома и несекретирующая форма встречаются очень редко. Чаще встречаются G- и A-миелома, миелома Бенс-Джонса (15-20%). При несекретирующей миеломе для диагностики используют определение бета-2-микроглобулина.
Легкие цепи каппа и лямбда в молекуле парапротеинов распределяются приблизительно равномерно, как и при парапротеинемии Бенс-Джонса, при D-миеломе обычно обнаруживают лямбда-цепи.
У части пациентов миеломные клетки продуцируют только легкие цепи и не продуцируют тяжелых цепей. В этом случае говорят о болезни легких цепей или миеломе Бенс-Джонса. Эти цепи обнаруживаются в моче при отсутствии патологических иммуноглобулинов в сыворотке крови. Примерно у 30% больных обнаруживаются легкие цепи в моче — легкие цепи каппа. Обнаружение белка Бенс-Джонса, типа лямбда является худшим прогностическим признаком, поскольку этот белок более нефротоксичен (приводит к развитию почечной недостаточности) чем белок каппа.
Следует учитывать, что обнаружение парапротеинов увеличивается после 50 лет и достигает 4-7 % у лиц старше 65 лет (моноклональная гаммапатия невыясненного значения). Этот термин указывает на случаи парапротеинемии без других признаков плазмаклеточного или онкогематологического заболевания.
Таким образом, при ряде заболеваний в сыворотке крови появляется большее количество какого либо из класса иммуноглобулинов (их еще называют парапротеины) на фоне присутствия и других видов иммуноглобулинов. При электрофорезе сыворотки,которая содержит нормальные иммуноглобулины, их миграция идет в виде широкой, размытой полосы, а моноклональные (парапротеины) — проявляются в виде более узкой и четко очерченной. Моноклональные иммуноглобулины в силу своей однородности мигрируют при электрофорезе с образованием четко сформированной полосы, которую называют М-градиент.
Материал: Cыворотка крови, суточная моча.
Метод: Иммунофиксации в агарозном геле.
Тест – система: HELLABIO.
Референсные значения (норма): Не обнаружено.
Основные показания к назначению анализа:
1. Диагностика миеломной болезни;
2. Макроглобулинемия Вандельстрема;
3. Амилаидоз;
4. Болезнь тяжелых цепей.
Понижение значения:
1. Свидетельствует об эффективности терапии.
источник
Белок в моче может быть признаком серьезных осложнений со здоровьем. Почки отвечают за фильтрацию отходов и лишнюю жидкость из крови и в моче, оставляя белки в крови. Однако, когда процесс фильтрации не функционирует должным образом, тело фильтрует эти белки из крови и в моче.
Различные диагностические тесты могут определить тип и количество белка в моче. Результаты испытаний помогут вашему врачу определить соответствующий диагноз и лечение.
Тест иммунофиксации теста иммунофиксации мочи или моча обнаруживает присутствие и измеряет количество определенных типов белков в моче. Эти белки известны как иммуноглобулины. Они подразделяются на две широкие категории: нормальные или ненормальные.
Аномальные иммуноглобулины в моче указывают на наличие заболевания. Пример аномального иммуноглобулина моноклонального белка или М-протеин.
Тест иммунофиксации мочи общего тест используется, когда врач подозревает, физическое лицо может иметь определенные состояния здоровья, в том числе множественной миеломы и макроглобулинемии Вальденстремы. Эти нарушения производят аномальные иммуноглобулины, что анализ мочи иммунофиксации может обнаружить в моче.
Симптомы множественной миеломы включают:
- увеличился кровоподтеки и кровотечение из десен или из носа
- усталость, бледность, и одышка в связи с анемией
- лихорадки неизвестного происхождения и повторные инфекции
- боль в костях, особенно в позвоночнике, ребер, черепа и таза
- необъясненное повреждение кости и переломы
- симптомы высокого уровня кальция в крови, включая мышечные боли / слабость, боли в суставах, сердечные аритмии, запор, тошноту, рвоту, а также изменения психического статуса
Симптомы макроглобулинемии Вальденстремы включают:
- кровотечение из десен
- затуманенное зрение
- головокружение
- усталость
- легко кровоподтеки кожи
- Головная боль
- изменения психического состояния
- онемение или покалывание в руках или ногах
- необъяснимая сыпь
Тест иммунофиксации мочи является общей мера скрининга для оценки аномальных уровней иммуноглобулина, потому что результаты доступны гораздо быстрее, чем они были бы с другими тестами.
Тест-сыворотка иммуноэлектрофореза (ИЭП-сыворотка) дает аналогичные результаты. Это может занять больше времени, чтобы получить результаты теста МЭП-сыворотки. Тем не менее, результаты могут быть более точными.
Испытание иммунофиксации мочи происходит в медицинских учреждениях. Вам нужно будет предоставить переправу, чисто поймать образец мочи. Этот метод поможет предотвратить микробы, которые могут быть рядом или в мочеиспускательном канале от входа в контейнер для пробы.
Ваш врач или медсестра предоставит вам набор мочи чисто поймать. Набор будет включать в себя стерильные полотенца для чистки и стерильно поймать контейнер с крышкой. Если вы мужчина, вы должны сначала очистить головку полового члена, используя стерильные полотенца. Если вы женщина, использовать стерильные полотенца, чтобы вымыть область между губами вульвы.
После тщательной очистки себя, вы будете мочиться небольшое количество в унитаз, а затем остановить поток мочи. Это очистит уретру загрязняющих веществ. Тогда вы будете собирать оставшуюся мочу в стерильную чашку. Общий объем образца мочи должен находиться в диапазоне от одного до двух унций.
Когда вы закончите сбор образца, положите крышку на чашке и либо оставить его в коробке с маркировкой для образцов или взять его к своему врачу или медсестре. Человек, который дал вам набор чистых поймать подскажет вам, что делать с образцом. Врач или медсестра затем отправить образец мочи в лабораторию для оценки.
Процедура очистки мочи улова может быть неудобно, и вы можете найти ваш первый образец меньше, чем требуется от одного до двух унций. Это не является необычным. Вы можете выполнить более одной процедуры очистки улова приобрести необходимый объем выборки.
Вы должны попросить о новом, стерильном очистке улова набора для каждой попытки сбора мочи. Вы не можете повторно использовать стерильные полотенца и контейнеры. Повторите все шаги процедуры очистки мочи поймать, как вы собираете больше мочи.
Тест иммунофиксации мочи требует только нормального мочеиспускания. Испытание не агрессивен и не создает каких-либо существенных рисков для пациента. Испытание не должно производить никакого дискомфорта.
Отрицательный результат из теста указует на то, что нет аномальных иммуноглобулинов, присутствующих в моче. Если тест не обнаружить аномальные иммуноглобулины, вы не можете пройти любое дополнительное тестирование.
Положительный результат означает , что аномальные иммуноглобулины присутствуют в моче Аномальных иммуноглобулины могут предложить серьезную проблему для здоровья , таких как множественная миелома или макроглобулинемия Вальденстремы . Наличие аномальных иммуноглобулинов также может быть признаком других видов рака.
Тест иммунофиксации мочи только один из нескольких диагностических тестов, которые подтверждают ваш диагноз. Обнаружение аномальных иммуноглобулинов не может указывать на скрытые состояния здоровья для некоторых пациентов. Небольшой процент людей имеет низкий уровень аномальных иммуноглобулинов в организме. Эти люди не развивают никаких проблем со здоровьем. Это состояние известно как моноклональная гаммапатия неизвестного значения (МГНГ).
источник
Иммунохимически идентифицировать белки на электрофореграмме без потери наглядности и четкости классической электрофоретической картины позволяет метод иммунофиксации (ИФ).
При выполнении иммунофиксации на одной и той же пластине с агарозным гелем проводят несколько электрофоретических разделений исследуемого образца, после чего один из треков окрашивают сразу после окончания фореза (он служит контролем), а на поверхность остальных наносят антисыворотки определенной специфичности.
В месте расположения белка, прореагировавшего с родственной ему антисывороткой, через некоторое время (обычно в пределах часа) образуется преципитат, который полностью сохраняет форму и положение изучаемой фракции. Предварительно отмыв несвязавшиеся белки солевым раствором, пластины окрашивают. Зону миграции белка уточняют, соотнося положение преципитата, образованного этим белком, с контрольной фореграммой.
Иммунофиксацию широко используют в диагностике моноклональной секреции. К наиболее типичным ситуациям относятся:
1) иммунохимическая идентификация небольших М-градиентов, особенно при нормальном содержании поликлональных иммуноглобулинов;
2) выявление и идентификация скрытых М-градиентов, когда моноклональный белок мигрирует в зоне а- или b-глобулинов и маскируется нормальными белками этих фракций, особенно при низком уровне продукции.
В ряде случаев иммунофиксация позволяет распознать так называемые ложные М-градиенты — электрофоретически гомогенные полосы, напоминающие М-градиент, но не относящиеся к иммуноглобулинам. Отсутствие специфического преципитата в зоне такой полосы при реакции с антисыворотками к Н- и L-цепям иммуноглобулинов позволяет отвергнуть предположение о наличии парапротеина в исследуемом образце.
Выявление и характеристика М-градиента в сыворотке крови методом иммунофиксации в геле агарозы.
При проявлении электрофореграмм антисыворотками к а- и к-цепям иммуноглобулинов в b2-зоне выявлен М-градиент, образованный парапротеином Ак (указан стрелкой).
Иммунофиксация является методом выбора при анализе множественной секреции, если в образце присутствуют два и более М-градиентов.
Помимо высокой специфичности и разрешающей способности, достоинством метода является также его высокая чувствительность. Это объясняется двумя факторами: накоплением белка (антител) в зоне градиента при образовании специфического преципитата и минимальной диффузией антигена при реакции с антисывороткой. При иммунофиксации можно выявить следовые М-градиенты, которые не видны на окрашенной электрофореграмме.
Основная методическая трудность — подбор адекватного разведения образца для получения плотного, хорошо видимого преципитата. Если образец разведен недостаточно, то преципитат может раствориться в избытке антигена (исследуемый белок). При слишком большом разведении образца образовавшийся преципитат можно не увидеть. В обоих случаях имеет место ложноотрицательный результат.
В последние годы благодаря исключительно высокой информативности метода и появлению коммерческих диагностических наборов, укомплектованных высокоаффинными антисыворотками (что приводит к получению стабильных результатов), иммунофиксация в большинстве диагностических ситуаций оттеснила на второй план традиционный иммуноэлектрофорез (ИЭФ).
Чувствительность иммунофиксации можно значительно повысить, если использовать для разделения белков противоточный изотахофорез (ИТФ) на ацетат-целлюлозной мембране, предложенной Г. И. Абелевым и соавт.. Это метод электрофореза в неоднородной системе буферов, имеющих общий катион, но разные анионы.
При изотахофорезе (ИТФ) ионы разделяемого образца располагаются в порядке уменьшающейся электрофоретической подвижности между двумя видами анионов буфера: «ведущим» (с более высокой подвижностью) и «замыкающим» (с меньшей подвижностью). Изотахофорез (ИТФ) позволяет одновременно с разделением концентрировать в 10—100 раз белки, находящиеся в высокоразбавленных растворах.
В связи с этим метод хорошо подходит для выявления и индентификации белка Бенс-Джонса в моче, а также для исследования малобелковых биологических жидкостей, доступных в небольшом объеме, ограничивающем предварительное концентрирование (церебральная и слезная жидкости, слюна и т. д.).
источник
Выявление в моче свободных легких цепей иммуноглобулинов (белка Бенс-Джонса), используемое для диагностики моноклональных гаммапатий, в том числе множественной миеломы.
Свободные легкие цепи иммуноглобулинов в моче
Синонимы английские
Bence-Jones protein, Urine (immunofixation)
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Суточную мочу, среднюю порцию утренней мочи.
Общая информация об исследовании
Белок Бенс-Джонса – это группа моноклональных свободных легких цепей иммуноглобулинов, которые могут быть определены в моче или в крови. Их появление характерно для лимфопролиферативных заболеваний, таких как множественная миелома. Эта особенность была впервые описана английским врачом Генри Бенс-Джонсом при исследовании образца мочи, что и дало такое название. Впоследствии стало известно, что белок Бенс-Джонса – это, в действительности, гомогенная группа свободных легких цепей иммуноглобулинов, синтезируемых одной плазматической клеткой (моноклональных). Белок Бенс-Джонса – это собирательное название мономеров, димеров, тетрамеров и других полимерных структур, состоящих из легких цепей иммуноглобулинов.
Свободные цепи иммуноглобулинов – это полипептиды с молекулярной массой 22 кДа, которые синтезируются плазматическими клетками и, соединяясь с тяжелыми цепями, образуют молекулы иммуноглобулинов различных классов: IgG, IgM, IgA и других. В зависимости от строения константного домена, различают два класса легких цепей – лямбда (λ) и каппа (κ) цепи. Каждый иммуноглобулин может иметь только один класс легких цепей – или лямбда, или каппа. В норме плазматические клетки синтезируют больше легких, чем тяжелых цепей. Легкие цепи, не вошедшие в состав иммуноглобулинов, называются свободными. Свободные каппа-цепи, как правило, существуют в виде мономера, имеют небольшой размер и поэтому относительно легко фильтруются в первичную мочу. Лямбда-цепи, напротив, обычно существуют в форме димера, что затрудняет их фильтрацию в почечных клубочках. В редких случаях как каппа-, так и лямбда-цепи могут образовывать тетрамеры – крупные комплексы белков, которые в мочу не проникают. В норме практически все количество легких цепей, поступивших в почечные канальцы, подвергается реабсорбции и лишь их незначительная часть выделяется с мочой (не более 0,75-1,8 мг/л). Появление избытка свободных легких цепей иммуноглобулинов в моче (появление белка Бенс-Джонса) может свидетельствовать об их чрезмерной продукции плазматическими клетками (гаммапатии) или о нарушении процесса почечной реабсорбции (заболевания почек). Обнаружение белка Бенс-Джонса может быть использовано для диагностики и контроля лечения этих заболеваний.
Белок Бенс-Джонса определяется у 50-70 % пациентов с множественной миеломой, 30-40 % пациентов с макроглобулинемией Вальденстрема и у 90 % пациентов с первичным амилоидозом. Другими состояниями, при которых может наблюдаться белок Бенс-Джонса в моче, являются лимфома, лейкоз (чаще хронический лимфолейкоз или плазмаклеточный лейкоз), рак поджелудочной железы, медуллярная карцинома щитовидной железы, доброкачественная гаммапатия неясного генеза. При отсутствии какой либо причины появления этого белка в моче говорят об идиопатической протеинурии Бенс-Джонса.
Свободные легкие цепи иммуноглобулинов не могут быть определены с помощью обычного анализа мочи – для этого используются специальные тесты. Как правило, лабораторная диагностика при подозрении на гаммапатию начинается с обычного электрофореза белков плазмы и мочи. Этот шаг необходим для определения концентрации М-белка (парапротеина) и начальной дифференциальной диагностики гаммапатий. Электрофорез, однако, недостаточно чувствительный метод. По этой причине на втором этапе обследования рекомендуется проведение более чувствительного теста – иммунофиксации белков мочи. Это позволяет избежать диагностических ошибок, учитывая, что гаммапатии могут иметь нормальный результат электрофореза белков. Метод иммунофиксации позволяет не только выявить даже незначительное количество свободных легких цепей, но и определить их класс (лямбда-или каппа-цепи).
Как правило, проводят параллельный анализ как крови, так и мочи. Это связано с некоторыми особенностями экскреции легких цепей при гаммапатиях. Например, у большинства пациентов с клиническими признаками миеломы при электрофорезе сыворотки обнаруживается более 3 г М-белка в дл крови. Однако примерно у 20 % пациентов выявляется лишь незначительное повышение М-белка (менее 1 г в дл крови) или вовсе нормальный уровень иммуноглобулинов крови. При анализе мочи у таких пациентов удается выявить повышенную экскрецию легких цепей в мочу (такая миелома часто называется миеломой Бенс-Джонса). Таким образом, параллельный анализ позволяет предотвратить ошибки диагностики.
Следует отметить, что существует особая, редкая форма миеломы, при которой легкие цепи не выявляются ни в крови, ни в моче ни с помощью электрофореза, ни иммунофиксации (так называемая несекретирующая множественная миелома). Для диагностики этой формы миеломы рекомендуется определение соотношения свободных легких цепей иммуноглобулинов λ и κ в сыворотке крови.
Белок Бенс-Джонса также может не определяться в моче на ранней стадии заболевания, когда избыток свободных легких цепей еще может быть реабсорбирован в почечных канальцах (вплоть до 1 г в день при нормальной функции почек), и в редких случаях, когда свободные легкие цепи образуют тетрамеры, не фильтрующиеся в почечном клубочке.
Ложноположительный результат может быть получен при приеме некоторых лекарственных средств (например, аспирин и пенициллин в высоких дозах), хронической почечной недостаточности или при некоторых системных заболеваниях (ревматоидный артрит, СКВ, полимиозит).
Учитывая эти ограничения метода иммунофиксации, интерпретация результатов должна проводиться с учетом дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики и контроля лечения моноклональных гаммапатий (множественной миеломы, болезни легких цепей, макроглобулинемии Вальденстрема).
Когда назначается исследование?
- При подозрении на множественную миелому и другие заболевания из группы моноклональных гаммапатий (множественной миеломы, болезни легких цепей, макроглобулинемии Вальденстрема).
Парапротеина, представленного каппа/лямбда легкими цепями — не обнаружено.
- первичный амилоидоз;
- моноклональная гаммапатия неясного генеза;
- криоглобулинемия;
- синдром Фанкони;
- гиперпаратиреоз;
- множественная миелома;
- остеомаляция;
- макроглобулинемия Вальденстрема;
- медуллярный рак щитовидной железы;
- аденокарцинома поджелудочной железы;
- лимфома;
- лейкоз;
- идиопатическая протеинурия Бенс-Джонса.
- норма;
- эффективное лечение заболевания.
Что может влиять на результат?
- Стадия заболевания: белок Бенс-Джонса может не определяться в моче на ранней стадии заболевания;
- прием аспирина и пенициллина в высоких дозах может приводить к получению ложноположительного результата;
- наличие системных заболеваний (ревматоидный артрит, СКВ, полимиозит) и хронической почечной недостаточности может приводить к получению ложноположительного результата;
- наличие тетрамеров лямбда- или каппа-легких цепей (не попадающих в мочу) может приводить к получению ложноотрицательного результата.
- Рекомендуется проводить иммунофиксацию белков как мочи, так и крови;
- интерпретацию результатов следует проводить с учетом дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.
Кто назначает исследование?
Гематолог, онколог, терапевт, врач общей практики.
- NauKC, LewisWD. Multiplemyeloma: diagnosisandtreatment. Am Fam Physician. 2008 Oct 1;78(7):853-9. Review.
- Levinson SS, Keren DF. Free light chains of immunoglobulins: clinical laboratory analysis. Clin Chem. 1994 Oct;40(10):1869-78.
- Whicher JT, Hawkins L, Higginson J. Clinical applications of immunofixation: a more sensitive technique for the detection of Bence Jones protein. J Clin Pathol. 1980 Aug;33(8):779-80.
- Chernecky C. C. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures / С.С. Chernecky, В.J. Berger; 5th ed. — Saunder Elsevier, 2008.
источник
Электрофорез белковых фракций является незаменимым инструментом для скрининга и диагностики злокачественных моно- и поликлональных гаммапатий, сопутствующих иммунопролиферативные заболеваниям.
Моноклональная гаммапатия — это сборное наименование целого класса заболеваний, при котором происходит патологическая секреция аномальных, измененных по химическому строению, молекулярной массе или иммунологическим свойствам иммуноглобулинов (гамма-глобулинов) одним клоном плазматических клеток или B-лимфоцитов. Эти иммуноглобулины затем нарушают функции тех или иных органов и систем, например, почек, что и приводит к развитию симптомов заболевания.
ПАРАПРОТЕИНЫ ИЛИ МОНОКЛОНАЛЬНЫЙ КОМПОНЕНТ (МС)
Парапротеины или моноклональный компонент (МС) – иммуноглобулины одного класса и/или одного типа или их фрагменты, которые синтезируются в избыточном количестве. Структура иммуноглобулинов (Ig) МС при этом не нарушена, но синтез Ig или их отдельных компонентов превосходит уровень физиологической потребности организма. Обнаружение МС является диагностическим признаком моноклональной гаммапатии.
Моноклональная гаммапатия — это сборное наименование целого класса заболеваний, при котором происходит патологическая секреция аномальных, измененных по химическому строению, молекулярной массе или иммунологическим свойствам иммуноглобулинов (гамма-глобулинов) одним клоном плазматических клеток или B-лимфоцитов. Эти иммуноглобулины затем нарушают функции тех или иных органов и систем, например, почек, что и приводит к развитию симптомов заболевания.
Моноклональные гаммапатии могут быть доброкачественными, когда клональная популяция клеток, секретирующих аномальные иммуноглобулины, не проявляет тенденций к неконтролируемому росту и размножению или к неконтролируемому увеличению продукции аномального белка. А могут быть и злокачественными, когда клональная популяция, производящая аномальный белок, склонна к постоянному неконтролируемому росту и размножению и как следствие к увеличению секреции этого белка.
К злокачественным моноклональным гаммапатиям относятся, например, такие заболевания, как макроглобулинемия Вальденстрема, болезнь легких цепей и др.
Диагноз моноклональной гаммапатии основан на обнаружении гомогенной М-полосы обычно в зоне ɣ-глобулинов при электрофорезе белковых фракций сыворотки крови или мочи. Тем не менее, достаточно часто М-полоса мигрирует от ɣ -глобулинов до альбумина. М-полоса (МС) может быть представлена целыми молекулами IgG, IgM, IgA, реже IgE, IgD; либо отдельными свободными легкими цепями (СЛЦ) – ƛ (лямбда) или ƙ (каппа), либо тяжелыми цепями. Класс и тип Ig или их компонентов в течение болезни не меняется.
Присутствие в сыворотке крови МС не всегда сопровождается появлением лишней полосы на электрофореграмме. В случае небольшой молекулярной массы они могут выделяться с мочой (димеры свободных легких цепей или белок Бенс-Джонса). На электрофореграмме МС может быть обнаружен в ƅ-ɑ2 – зоне, реже в зоне ɑ1-глобулинов.
По иммунохимическим различиям:
1. МС, соответствующая гиперпродукции целых молекул (IgG, IgM, IgA, реже IgE, IgD). Характерно для миеломы.
2. МС из свободных легких цепей лямбда или каппа (никогда вместе): обнаруживаются в сыворотке либо незначительно, либо при образовании конгломератов между собой при почечной недостаточности (нарушена их фильтрация). Сочетается с гипогаммаглобулинемией и встречается почти исключительно при злокачественной миеломе СЛЦ.
3. МС из свободных тяжелых цепей ɑ, ɤ или µ. Болезнь тяжелых цепей – крайне редкая.
Классификация на клинических критериях:
1. МС, связанные со злокачественными образованиями:
— миеломы (IgG, IgA, СЛЦ).
— Болезнь Вандельстрема с МС, представленным IgM.
— болезнь Франклина (МС из тяжелых цепей ɑ, ɤ или µ).
2. Неспецифические МС (IgG, IgM, реже IgA):
— МС, появляющиеся при некоторых злокачественных и доброкачественных заболеваниях.
— Идиопатические МС (у пожилых людей, бессимптомно).
Скрининг моноклональных компонентов: последовательность лаб. исследований.
С целью выявления моноклональных Ig рекомендована следующая последовательность лабораторных исследований:
Исследование сыворотки крови Измерение содержания общего белка
Измерение концентрации иммуноглобулинов (иногда отдельных классов Ig)
Электрофорез для выявления моноклонального компонента.
Измерение концентрации моноклонального компонента.
Иммуноэлектрофорез или иммунофиксация.
Исследование мочи Измерение общего белка мочи.
Электрофорез для выявления белка Бенс-Джонса.
Иммуноэлектрофорез или иммунофиксация.
Дополнительные методы исследования СОЭ.
Биохимические: измерение концентрации кальция, исследование функции почек.
Измерение концентрации бета 2-микроглобулина.
Измерение концентрации СРБ.
Исследование на криоглобулины.
Требования к исследуемому материалу:
Для проведения электрофоретического исследования необходимо использовать сыворотку крови, поскольку присутствующий в плазме фибриноген образует полосу, как и МС. Не рекомендуется использовать предварительно замороженные образцы. Образцы мочи должны быть собраны и направлены для исследования одновременно с образцами крови.
Периодичность исследований на МС:
Если МС обнаруживается в образце, но нет клинических и биологических признаков, анализ на МС повторяется через 3 и 6 месяцев, а затем через год.
Необходимо учитывать клиническую информацию, чтобы лучше планировать лабораторные исследования, особенно в случаях, когда патологические белки выявляются с трудом (например, легкие цепи при миеломе).
Исследование сыворотки крови. Замечания.
Измерение концентрации белка: это основное, хоть и неспецифическое скрининговое исследование. Если у пациента нет заболеваний почек, наличие гиперпротеинемии или протеинурии указывает на наличие гаммапатии.
• При миеломе и болезни Вальденстрема общий уровень белка чаще всего резко повышен > 100 г/л. Хотя на ранних стадиях развития патологии уровень может быть нормальным или немного завышенным.
• При неспецифических моногаммапатиях содержание общего белка остается в норме.
• При болезни легких цепей общий белок снижается.
При измерении концентрации МС адекватным методом является количественный электрофорез с денситометрическим сканированием. Иммунохимические методы (радиальная иммунодиффузия, иммунотурбидиметрия, нефелометрия) наиболее подходят для количественной оценки поликлональной гаммапатии.
Определение соотношения между ƙ и ƛ свободными легкими цепями (СЛЦ) (ƙ/ƛ).
Измерение концентрации ƙ и ƛ СЛЦ позволяет выявлять избыточную продукцию СЛЦ и помогает в типировании моноклональных иммуноглобулинов, при низких концентрациях МС соотношение ƙ/ƛ может быть нормальным.
Электрофорез сыворотки крови. Примеры.
Необходимо различать ситуации подозрения на присутствие МС с гипергаммаглобулинемией и гипогаммаглобулинемией.
Гипергаммаглобулинемия имеет поликлональный характер и связана с повышенным синтезом Ig разных классов и субклассов. На электрофореграмме проявляется как повышенное окрашивание всей гамма-зоны.
Профиль гипергаммаглобулинемии свойственен образцам сыворотки пациентов с острым воспалительным ответом, системной красной волчанкой и ревматоидным артритом, острым и хроническим гепатопатиям.
Например, при алкогольном циррозе наблюдается повышенный синтез поликлональных IgA, которые при ЭФ образуют «бета-гамма мостик» — слияние полос между ƅ2-зоной и зоной фибриногена:
При определенных иммунопролиферативных нарушениях наблюдается олигоклональный профиль ЭФ разделения белков сыворотки, вызванный снижением гетерогенности синтезируемых Ig разного класса и субклассов вследствие дисфункции В-клеток. Возможны следующие варианты олигоклонального профиля:
• Моноклональный тип, когда в процесс включен один клон, характеризуется одной полосой в области ɤ-глобулинов. При типировании эта полоса, как правило, оказывается тяжелыми или легкими цепями, относящимися к моноклональному Ig данного типа.
• Олигоклональный тип, когда выявляется более двух полос на фоне ɤ-глобулинов., которые относятся к трем основным типам Ig G, A и М.
Олигоклональную гаммапатию необходимо дифференцировать от случаев, когда в сыворотке присутствуют моноклональные Ig из полимеризованных субъединиц или когда в избытке синтезируются СЛЦ, которые не выделяются с мочой из-за почечной недостаточности. Различить подобные случаи помогает предварительная обработка образца ƅ-меркаптоэтанолом. При наличии олигоклональной гаммапатии после обработки ƅ-меркаптоэтанолом количество полос остается таким же, как при иммунофиксации.
В сыворотке крови олигоклональная гаммапатия с помощью иммунофиксации обнаруживается при следующих иммунодефицитных состояниях:
• Врожденный комбинированный иммунодефицит у детей (редко).
• Вторичный иммунодефицит у пациентов с пересаженными органами, некоторыми формами рака и аутоиммунными заболеваниями, которым проводится иммуносупрессивная терапия.
• Вирусный иммунодефицит у больных СПИДом.
Гипогаммаглобулинемия вызвана сниженным синтезом Ig разных классов и субклассов, также носит поликлональный характер и проявляется заметно низким уровнем окрашивания гамма-зоны. Гипогаммаглобулинемия характерна при иммунопролиферативных нарушениях (например, иммунодефицитные состояния).
Тем не менее, гипогаммаглобулинемия наблюдается у 10% пациентов с множественной моногаммапатией без обнаружения МС при ЭФ белков сыворотки. Гипогаммаглобулинемия характерна для 20% пациентов с первичным амилоидозом.
Поэтому каждый случай гипогаммаглобулинемии требует последующей идентификации иммунопролиферативных нарушений конкретных Ig с помощью иммунофиксации.
В некоторых случаях на электрофореграммах могут появляться полосы, которые имитируют МС, хотя таковым не являются.
В зоне альфа-2 глобулинов:
• четкая полоса гаптоглобина в зоне альфа-2 глобулинов при выраженном воспалении. В отличие от миеломы при воспалении имеет место и гипер-альфа 1-глобулинемия.
• высокий уровень альфа-2 макроглобулина при нефротическом синдроме. Отличие от миеломы: синдром сочетается с гипопротеинемией.
• Ложная МС полоса в результате выраженного гемолиза эритроцитов и выхода гемоглобина.
• немоноклональная гипер-ƅ-глобулинемия может быть вызвана повышением уровня трансферрина (при анемии), С3-компонента комплемента при нарушениях липидного обмена.
• ложная полоса МС, связанная с присутствием фибриногена, не полностью удаленного из сыворотки (присутствие в крови пациента антикоагулянтов).
Исследование мочи. Замечания
Измерение общего белка в моче: выявление выраженной протеинурии при отсутствии патологии почек указывает на наличие гаммапатии. Однако определение общего белка в моче не имеет решающего значения для диагностики и его необходимо сочетать с электрофоретическим исследованием спектра белков мочи.
Важным диагностическим признаком миеломы, когда МС в крови пациента выявить не удается, является наличие белка Бенс-Джонса в моче (димеры ƙ или ƛ свободных легких цепей иммуноглобулинов).
На электрофореграммах могут появляться полосы в зоне ƅ-глобулинов, которые ошибочно можно принять за МС:
• гемоглобинонурия и миоглобинонурия могут симулировать белок Бенс-Джонса. Но при этом розоватое окрашивание мочи видно невооруженным глазом.
• ƙ и ƛ поликлональные свободные цепи могут появляться в моче при тубулярной протеинурии. В этом случае в моче присутствуют оба типа свободных легких
цепей в низких концентрациях, а на электрофореграмме белков мочи в зоне бета-глобулинов обнаруживается диффузная полоса.
При наличии белка Бенс-Джонса в моче должна быть компактная четкая полоса. На рис. примеры подозрения на присутствие белка Бенс-Джонса, образцы 2 / 6 / 12.
Образец 5 – диффузная полоса соответствует трансферрину.
Поликлональные свободные легкие цепи (поли-СЛЦ) обнаруживаются в моче условно здоровых пациентов. Ниже таблица отражает уровни ежедневной экскреции поли-СЛЦ:
Поли-СЛЦ ƙ Поли-СЛЦ ƛ
3,1 мг/24 часа (от 1,9 до 7,1) 1,5 мг/24 часа (от 0,7 до 3,4)
Отношение ƙ / ƛ = 2,4 (от 1,2 до 3,7)
Данные экскреции поли-СЛЦ у пациентов без миеломных патологий с протеинурией
250 мг/24 часа:
Поли-СЛЦ ƙ Поли-СЛЦ ƛ
45 мг/24 часа (от 3,8 до 211) 35 мг/24 часа (от 12 до 59)
Отношение ƙ / ƛ = 1,3 (от 0,25 до 3,4)
Белок Бенс-Джонса в моче представлен интактной моноклональной свободной легкой цепью ƙ или ƛ, неполными цепями, фрагментами или полимерами. Поэтому его формы имеют разный молекулярный вес и могут быть представлены мономерами, димерами, триммерами и тетрамерами в силу полимеризации и иметь несколько полос на электрофореграмме.
B.J. белок MW (Da)
Мономер 25 000
Димер 50 000
Тример 75 000
Тетрамер 100 000
Фрагменты 100 мм в первый час). Однако этот тест не является специфичным и изменения могут быть обнаружены при воспалительных заболеваниях или значительной поликлональной гаммапатии. В то же время, нормальные показатели СОЭ имеют место при миеломе СЛЦ, несекреторной миеломе, при криоглобулиновой природе моноклональных иммуноглобулинов.
Биохимические тесты:
• измерение кальция в крови и моче, поскольку при миеломе часто наблюдается повреждение костей, то выявляется гиперкальциемия и гиперкальциурия.
• полное лаб. обследование функции почек, при котором можно обнаружить гиперкреатинемию, если у пациента уже развилась почечная недостаточность.
Измерение концентрации ƅ2-микроглобулина. При интерпретации повышения уровня ƅ2-микроглобулина, который является маркером пролиферации лимфо(плазма)цитов, необходимо учитывать состояние функции почек. Уровень ƅ2-микроглобулина определяют при мониторинге лечения миеломы, поскольку его содержание зависит от размеров опухоли.
Измерение концентрации С-реактивного белка. Опухолевая ткань множественной миеломы вырабатывает ИЛ-6, стимулирующий синтез СРБ, уровень которого является надежным критерием эффективности лечения.
Клиническое значение обнаружения МС в сыворотке крови и моче.
Обнаружение моноклонального компонента или МС в сыворотке крови или моче свидетельствует о наличии той или иной формы следующих заболеваний:
А) Бессимптомные или пресимптоматические формы, клинически неопределенные:
Неспецифические моноклональные гаммапатии:
• Хроническое воспаление и инфекционные процессы, в том числе остеомиелит, туберкулез, хронические желчные инфекции, пиелонефрит, ревматоидный артрит и др.
• Саркома капоши и СПИД.
• Неретикулярная неоплазия, в особенности интенстинальная, рак легких и желчь выводящих путей; липодистрофия, особенно болезнь Гаучера, наследственная гиперхолестеринемия и ксантоматоз.
Преходящие моноклональные гаммапатии, связанные с:
• Гиперчувствительностью к наркотикам, дифенилгидантоину и сульфамидам.
• Вирусными инфекциями.
• Кардиохирургией, в том числе протезирование сосудов.
Б) Клинически установленные формы, связанные с неопластической клональной пролиферацией:
• Множественная миелома.
• Солитарная миелома.
• Экстрамедуллярная плазмоцитома.
• Плазмацеллюлярная лейкемия.
• Макроглобулинемия Вальденстрема.
• Болезнь тяжелых цепей.
• Болезнь ɑ-тяжелых цепей.
• Болезнь µ-тяжелых цепей.
• Болезнь делеции H и L цепей.
В) Клинически установленные формы, обусловленные патологическими эффектами моноклональных компонентов:
• Амилоидоз.
• Болезнь отложения иммуноглобулинов или их цепей.
• Папулезный муциноз.
• Синдром Фалькони.
• Полинейропатии.
• POEMS синдром (от английского Polyneuropathy, Organomegaly, Endocrinopathy, Monoclonal protein, Skin changes).
• SCLS синдром (от английского systemic capillary leak syndrome).
Критерии различия между неспецифическими гаммапатиями и множественной миеломой.
Критерий Неспецифические гаммапатии Множественная миелома
Прогрессирование Отсутствует наличие
Нарушения костной ткани Отсутствует Очень общего характера
Протеинурия Бенс-Джонса Отсутствует или 20%
Индекс проявления 3%
Интраплазмацеллюлярная активность кислой фосфатазы Отрицательная Выраженно положительная
Концентрация МС в сыворотке (IgG, IgA) Обычно 30 г/л
Концентрация поликлональных Ig Нормальная Сниженная
Тест на кальцитонин-индуцированную гипокальциемию Отрицательный Положительный
Как видно из таблицы, обнаружение МС не является фактом наличия злокачественных изменений.
В действительности, только менее чем у 20% пациентов с неспецифическими моноклональными гаммапатиями развивается множественная миелома, амилоидоз или лимфома даже по истечении более 10 лет наблюдения.
Критерии, указанные в таблице, носят ориентировочный характер.
1. О.П. Шевченко, В.В. Долгов, Г.А. Олефиренко Электрофорез в клинической практике, 2008.
2. Andrea Ciapini and INTERLAB scientific team Protein electrophoresis and immunofixation: from laboratory to clinical practice.
3. Andrea Ciapini Atlante Di Quadri Proteici Elettroforetici Ed Immunofissativi Di Siero Proteine, Proteine Urinarie E Crioglobuline
Официальный дилер компании “INTERLAB” (Италия) в России
источник
МИЕЛОМА, МНОЖЕСТВЕННАЯ МИЕЛОМА, МИЕЛОМНАЯ БОЛЕЗНЬ, СЕКРЕТИРУЮЩАЯ ЛИМФОМА, ПЛАЗМАЦИТОМА, БОЛЕЗНЬ РУСТИЦКОГО и т.д. – все это синонимы одного заболевания, которое обусловлено неконтролируемым ростом плазматических клеток, продуцируемым костным мозгом. Плазматические клетки, в свою очередь, являются конечной стадией дифференциации В-лимфоцитов – основного звена клеточно-гуморального иммунитета, основная функция которых – продукция иммунных белков – иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM, IgE, IgD, участвующих в гуморальном иммунитете. Поэтому в норме костный мозг всегда содержит некоторое количество плазматических клеток. Однако, в случае их неконтролируемого роста увеличение количества плазматических клеток приводит к их сосредоточению в виде плазмацитомы в костном мозге, особенно в позвоночном столбе, тазовых костях, ребрах, плоских костях черепа, головках тазобедренных суставов, в результате чего нормальная костная ткань и костный мозг разрушаются. Очаги деструкции видны при рентгеновском исследовании, но, к сожалению, разрешающая способность рентгена позволяет выявить разрежение костной ткани, если порядка 30% ее уже разрушено. Миеломные клетки продуцируют иммуноглобулин одного вида (моноклональный), который при специфическом электрофоретическом исследовании сыворотки крови и мочи проявляется пиком, называемым М-градиентом, где М — означает моноклональный или миеломный. Отсюда происходит название болезни – миелома. Моноклональные белки (протеины), продуцируемые миеломными клетками, имеют измененную структуру, не выполняют функций иммунитета и называются «парапротеинами». Иногда они теряют какую-то свою часть и могут продуцироваться только моноклональные легкие цепи (белок Бенс-Джонса), или моноклональные тяжелые цепи.
(ДИАГНОСТИКУ МИЕЛОМНОЙ БОЛЕЗНИ СМ. ВНИЗУ СТРАНИЦЫ)
* — скидка 3% при оформлении заказа на сайте
Неконтролируемый рост плазматических клеток приводит к множеству тяжелых последствий, из которых наиболее характерные:
- Разрушение костной ткани скелета;
- Нарушения кроветворения в костном мозг;
- Увеличение вязкости крови из-за большого количества парапротеинов;
- Снижение иммунитета из-за подавления продукции нормальных иммуноглобулинов;
- Развитие почечной недостаточности из-за оседания нарушений в почечных клубочках и канальцах;
Миеломная болезнь может развиваться долгое время бессимптомно, но становится понятным, почему одними из первых характерных клинических симптомов Миеломы являются:
- Боли различной интенсивности в нижней части спины, ребрах или других участках скелета;
- Анемия, сопровождающаяся одышкой, слабостью, потерей зрения, болями в области сердца;
- В крови наблюдается повышенное СОЭ;
- Повышение содержания кальция в крови и моче из-за разрушения костной ткани;
- Появляется белок в моче, что приводит к серьезным нарушениям функции почек, особенно опасно появление белка Бенс-Джонса.
Понятно и то, что из-за незнания о существовании такого заболевания пациент идет к врачам другого профиля и часто теряет драгоценное время из-за отсутствия целенаправленного и компетентного обследования. Диагностика миеломной болезни зачастую проводится уже в последнюю очередь. Что еще хуже, с проблемами в костной ткани часто больные приходят к мануальным терапевтам, не зная, что миелома – это прямое противопоказание для мануальных процедур.
При наличии одного или нескольких из перечисленных выше симптомов абсолютно необходимо обследоваться в специализированной лаборатории для исключения миеломы, поскольку раннее выявление гарантирует успешное лечение. Следует помнить, что диагноз Миеломы не может быть установлен без результатов иммунохимической диагностики крови и мочи. Своевременная диагностика миеломной болезни – залог вашего выздоровления.
Если же диагностирована множественная миелома, то для пациентов с таким диагнозом нормальным поведением является систематическое рациональное обследование и определение прогностических факторов (бета2-микроглобулин в сыворотке крови и в моче, СРБ, белок Бенс-Джонса в моче, тип парапротеина), чтобы судить о развитии миеломы, ее агрессивности и контролировать эффективность выбранной схемы лечения. Такой контроль необходимо осуществлять не реже, чем 1 раз в 3 месяца во время лечения и 1 раз в 6-12 месяцев при стойкой ремиссии.
Пациенты должны также знать о том, что специализированная иммунохимическая диагностика Миеломы осуществляется только в трех медицинских учреждениях страны, одним из которых является «Иммунотест» — автор основных патентов и методик в этой области, постоянно обновляющий диагностическую базу современными методами, что создает оптимистичное будущее для больных Миеломой. Лечение миеломной болезни – это вполне реально, и шансы на выздоровление очень высоки, особенно на ранних стадиях. Успешное лечение миеломной болезни также во многом зависит от профессионализма лечащего врача, который, исходя из своих знаний и опыта, может прописать или порекомендовать действительно эффективное средство. Множественная миелома – это не приговор!
источник