Количественное определение глюкозы в моче по способу А. Я. Альтгаузена основано на качественной пробе Моора-Геллера. В основу этой пробы положено свойство глюкозы при кипячении в щелочной среде превращаться в буроокрашенные гуммиповые вещества и молочную кислоту. Интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию глюкозы в исследуемой моче. А. Я. Альтгаузен предложил шкалу цветных стандартов (рис. 3), соответствующих определенному процентному содержанию глюкозы в моче.
Для определения количества глюкозы в моче методом А. Я. Альтгаузена необходимо иметь: 1) 10% раствор едкого натра (10 г едкого патра растворяют в 70-80 мл дистиллированной воды и ею доводят объем раствора до 100 мл); 2) сахариметр Альтгаузена.
В пробирку помещают 4 мл нефильтрованной мочи, прибавляют 1 мл 10% раствора едкого натра, смешивают содержимое пробирки и кипятят над пламенем горелки в течение одной минуты. Чтобы избежать выбрасывания жидкости, пробирку периодически выносят из пламени. После кипячения пробу оставляют на 10 минут, а затем помещают в проходящем дневном свете на полоску сахариметра Альтгаузена, интенсивность окраски которой соответствует окраске пробы. При этом если окраска исследуемой пробы интенсивнее или слабее стандарта, то пробирку располагают между двумя полосками сахариметра, одна из которых окрашена слабее, а другая интенсивнее. Количество глю¬козы в моче в таком случае будет равно среднему содержанию глюкозы, указанному на этих полосках.
В случае, если цвет исследуемой пробы интенсивнее окраски последней полоски сахариметра, соответствующей 4% глюкозы, мочу разводят в 2 раза и более. Затем определение повторяют. При этом полученный результат умножают на степень разведения.
Этот метод основан на сравнении исследуемой мочи с искусственно приготовленными стандартами из мочи, не содержащей глюкозы, после добавления к ней определенного количества глюкозы.
Приготовление стандартных разведений. Разводят 1 г глюкозы в 25 мл мочи, не содержащей глюкозы (это будет основное 4% разведение), и из этого раствора готовят следующие разведения: 3 мл раствора + + 1 мл мочи (3% глюкозы); 2 мл раствора+ 2 мл мочи (2% глюкозы); 1,5 мл раствора + 2,5 мл мочи (1,5% глю¬козы); 1 мл раствора + 3 мл мочи (1% глюкозы); 0,5 мл раствора + 3,5 мл мочи (0,5% глюкозы).
Техника определения. В отдельную пробирку наливают 4 мл исследуемой мочи, а в остальные пробирки — стандартные разведения, затем прибавляют по 1 мл 10% раствора едкого натра во все пробирки.
Содержимое пробирок одновременно кипятят в течение одной минуты и определяют, к какой из стандартных пробирок с глюкозой подходит по цвету исследуемая пробирка с мочой.
В бланке анализа мочи отмечают количество глюкозы в процентах.
Для правильного суждения о количестве выделенной из организма глюкозы содержание последней высчитывают в суточной порции мочи. С этой целью одним из описанных выше способов определяют содержание глюкозы в порции мочи (в процентах), взятой из суточного ее количества, и, кроме того, определяют суточный диурез. Суточное количество глюкозы выражают в граммах. Для этого процентное содержание глюкозы умножают на число миллилитров суточной мочи и делят на 100.
Помимо глюкозы, в моче определяют и другие виды углеводов (молочный сахар, фруктозу и др.), но определение последних производят значительно реже, главным образом в детской практике и с целью идентификации отдельных углеводов.
источник
1. Определение глюкозы в моче. Моча здорового человека содержит минимальное количество глюкозы (0,16—0,83 ммоль/л), которое нельзя обнаружить обычными качественными пробами. Появление сахара в моче (глюкозу-рия) может быть физиологическим. При нормально функционирующих почках глюкозурия наблюдается только в тех случаях, когда увеличивается концентрация сахара в крови, т. е. появляется гипергликемия. Так называемый почечный порог глюкозы —концентрация сахара в крови, выше которой отмечается глюкозурия, обычно не превышает 9,9 ммоль/л (1,8 г/л).
Физиологическую глюкозурию можно наблюдать при введении с пищей большого количества углеводов (алиментарная), после эмоционального напряжения (эмоциональная), приема некоторых лекарств (кофеин, стероидные гормоны). Реже наблюдают почечную (ренальная) глюкозурию, обуславливаемую нарушением реабсорбции глюкозы в канальцах, когда глюкозурия появляется при нормальной концентрации сахара в крови. Как первичное заболевание ренальную глюкозурию встречают в виде так называемого р е н а л ь -ного диабета. Вторичные ренальные глюкозурии могут встречаться при хронических нефритах, нефрозах, амилоидозе.
Патологическая глюкозурил чаще всего бывает диабетической (сахарный диабет), реже тиреогенной (тиреотоксикоз), гипофизарной (синдром Ицен-ко — Кушинга), печеночной (цирроз печени).
Для правильной оценки глюкозурии (особенно у больных диабетом) необходимо исследовать мочу, собранную за сутки, и вычислить суточную потерю сахара с мочой.
Большинство качественных проб, применямых для определения глюкозы в моче, основано на использовании редуцирующей способности глюкозы.
Проси Гайнеса. Основана на свойстве глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в основной среде в гидрат закиси меди (желтый цвет) или закись меди (красный цвет).
Проси Huлaндера. Основана на восстановлении глюкозой нитрата висмута в металлический висмут. В присутствии сахара появляется окраска от коричневой до черной.
При производстве редукционных проб моча не должна содержать белка. Если в моче есть белок, ею необходимо удалить. Посторонние восстанавливающие вещества (антипирин, бензойная кислота и др.). дающие ложную реакцию, могут быть удалены, если прибавить к 9 мл мочи 1 мл 95% спирта и небольшое количество животного угля, так как упомянутые посторонние вещества адсорбируются углем, а глюкоза не адсорбируется.
Наряду с редукционными пробами последнее время широко применяется глюкозооксидазная проба. Это энзимная проба, отличающаяся значительной специфичностью
и простой техникой. Глюкозооксидаза (нотатин) представляет собой ..—d-глюкозодегидрогеназу. На первом этапе пробы из глюкозы под воздействием фермента выделяется перекись водорода. На втором этапе устанавливается наличие перекиси водорода с помощью редокс-индикатора, подобно механизму бензидиновой пробы. Глюкозопероксидазная проба положена в основу метода индикаторных бумажек. В мочу погружают бумажку, пропитанную нотатином, пероксидазой и каким-нибудь производным бен-зидина. Через 30 с при наличии глюкозы появляется синяя окраска.
Количественное определение глюкозы в моче. Поляриметрическим методом по углу вращения поляризованного луча (глюкоза вращает поляризованный свет вправо) можно определить концентрацию глюкозы в моче. Аппараты, при помощи которых определяют угол вращения поляризованного света, называются поляриметрами. Поле зрения поляриметра разделено на две или три части. При отсутствии оптически активной жидкости в трубке поляриметра анализатор не задерживает света и все части одинаково освещены. При наличии в трубке оптически активной жидкости плоскость поляризованного света отклоняется, и часть зрительного поля затемнена. Диском, к которому прикреплен анализатор, поворачивают его до тех пор, пока все зрительное поле не становится равномерно освещенным. Угол вращения анализатора отражает угол вращения плоскости поляризации, который пропорционален проценту содержания глюкозы в моче. Величину угла отмечают по шкале. Этот способ позволяет получить довольно точные данные.
Колориметрический метод Альтгаузена основан на цветной реакции, получаемой при нагревании раствора глюкозы с раствором едкого натра. К 4 мл мочи добавляют 1 мл 10% раствора едкого натра или едкого кали и кипятят 1 мин. Через 10 мин цвет жидкости в пробирке сравнивают с рядом цветных стандартов, по которому определяют результат. Колориметрию можно производить не только визуально, но и при помощи фотометра.
Определение кетоновых (ацетоновых) тел. Содержание в моче кетоновых тел называется кетонурией. К кетоновым телам относятся три соединения: ацетон, ацетоуксусная кислота и р-оксимасляная кислота. Большая часть жиров и некоторые белки способствуют образованию кетоновых тел. Кетоновые тела быстро окисляются в тканях до СО2 и воды, поэтому с мочой за сутки выводится около 20—50 мг кетоновых тел.
Кетонурия может быть следствием повышенного образования кетоновых тел и следствием нарушения их распада. Чаще всего кетонурию приходится наблюдать при тяжелом сахарном диабете, но она встречается и при углеводном голодании. Кетонурия на почве голода и истощения возможна при тяжелых токсикозах, продолжительных желудочно-кишечных расстройствах, дизентерии, а также может появляться в послеоперационном периоде, при сильном раздраженииЦНС.
В норме с мочой выделяются минимальные количества кетоновых тел, которые не обнаруживаются сущее твующими качественными пробами. Качественные реакции на кетоновые тела основаны па появлении цветной реакции при их взаимодействии с нитропруссидом натрия в основной среде. Наибольшее распространение получила проба Ланге, которая заключается в том, что на исследуемую мочу после добавления к пей нитропруссида и уксусной кислоты наслаивают аммиак; при положительной пробе па границе жидкостей образуется фиолетовое кольцо.
2. Отек легких:
— строфантин 0.05% — 0,25 мл до 1 мл
2. Диуретики: Диуретические и дегидратационные средства
· Фуросемид ( 20-60 мг до 160 мг)
Этакриновая кислота ( 50-100 мг в 50 – 100 мл 5% р-ра глюкозы)
3. Альфаадреноблокаторы: тропафен. Блокаторы альфа- адренорецепторов
4. Наркотические анальгетики:
— строфантин 0.05% — 0,25 мл до 1 мл
2. Альфаадреноблокаторы: тропафен.
3. ГК: Глюкокортикостероиды за 2-3 часа
преднизолон (60- 150 мг в 100 – 200 мл физ р-ра
studopedia.org — Студопедия.Орг — 2014-2019 год. Студопедия не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования (0.002 с) . 
источник
| Номер пробирки | Стандартный раствор, мл | 0,9%-ный раствор хлорида натрия, мл | Концентрация белка, г/л |
| 0,05 | 9,95 | 0,05 | |
| 0,1 | 9,9 | 0,1 | |
| 0,2 | 9,8 | 0,2 | |
| 0,5 | 9,5 | 0,5 | |
| 1,0 | 9,0 | 1,0 |
Из каждого полученного раствора берут 1,25 мл и обрабатывают так, как опытные пробы.
Прямолинейная зависимость при построении калибровочного графика сохраняется до 1 г/л. При более высоких концентрациях пробу следует разводить и учитывать разведение при расчете.
Ложноположительные результаты могут быть получены при наличии в моче контрастных веществ, содержащих органический’ йод. Поэтому тест нельзя использовать у лиц, принимающих препараты йода; ложноположительный результат может быть также обусловлен приемом сульфаниламидных препаратов, больших доз пенициллина и высокими концентрациями в моче мочевой кислоты.
2.Что такое ложная и истинная протеинурия , в каком случае они наступают?
3.Какими методами определяется качественно белок?
4.При каких патологиях обнаруживают белок?
5.В чем заключается принцип количественного метода определения белка в моче на ФЭКе?
6. Какой принцип заложен в метод Бранберга- Робертса- Стольникова?
Определение глюкозы в моче
В моче здорового человека глюкоза находится в столь незначительном количестве, что обычными качественными пробами не обнаруживается. Появление глюкозы в моче называется глюкозурией.
Глюкоза относится к веществам с высоким почечным порогом выделения. Почечный порог — это определенная концентрация вещества в’ крови, превышение которой ведет к прекращению его реабсорбции в почечных канальцах. В этих случаях процесс фильтрации преобладает над процессом реабсорбции. Эпителий канальцев почки обладает способностью к избирательному обратному всасыванию. В зависимости от степени обратного всасывания различают пороговые и непороговые вещества. Пороговыми называются такие вещества, которые в норме в конечной моче не содержатся, а появляются в ней только при превышении порога. К таким веществам относятся глюкоза, аминокислоты, калий, фосфаты. Обычно, при нормальном содержании их в плазме крови, они реабсорбируются в канальцах полностью.
Глюкоза появляется в моче при превышении порога, т. е. при гипергликемии, которая может быть связана с различными физиологическими и патологическими процессами.. Так, гипергликемия, а следовательно и глюкозурия, возникает при употреблении с пищей большого количества углеводов (алиментарная), эмоциональных напряжениях (эмоциональная). Эти глюкозурии принято называть физиологическими, быстропроходящими, в отличие от патологических. Патологические глюкозурии возникают при нарушении функции эндокринных желез, регулирующих уровень глюкозы крови, заболеваниях печени, нервной системы.
Наиболее стойкая патологическая глюкозурия наблюдается при недостатке в организме инсулина — гормона поджелудочной железы, понижающего уровень глюкозы в крови. Недостаточная секреция инсулина отмечается при сахарном диабете, остром панкреатите. Глюкозурии, возникающие при этих заболеваниях, называют инсулярными в отличие от экстраинсулярных, которые наблюдаются при повышении деятельности щитовидной железы, коры и мозгового слоя надпочечников, передней доли гипофиза, травмах и опухолях мозга.
Иногда глюкозурия наблюдается и без гипергликемии, т. е. при нормальном уровне глюкозы в крови, что связано с нарушением реабсорбции глюкозы в канальцах почки (почечный диабет).
Наряду с определением глюкозы в моче определяют лактозу , фруктозу , галактозу ти т.д. Повышенная концентрация в моче этих видов сахаров называется соответственно лактозурией, фруктозурией, галактозурией и т. д.
Работа № 9 Качественное определение глюкозы пробой Гайнеса
Метод основан на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди ( синего цвета) в гидрат закиси меди ( желтого цвета) и закись меди ( красного цвета)
К 6-8 мл мочи прибавляют 20 капель реактива Гайнеса , смешивают и нагревают пробирку до начала кипения. При наличии глюкозы появляется: желтая окраска
Работа № 10 Качественное определение глюкозы индикаторными экспресс- полосками
Метод основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы. Изменение окраски красителя свидетельствует о присутствии глюкозы в моче.
Индикаторную бумагу погружают в исследуемую мочу, так чтобы желтая полоса с реактивами оказалась смоченной , после этого ее немедленно извлекают из мочи и на 2-3 мин оставляют на пластмассовой пластинке. По истечении времени сразу же сравнивают изменившуюся окраску цветной полосы на бумаге со шкалой , имеющейся в комплекте.
Работа № 11 Количественное определение глюкозы колориметрическим методом Альтгаузена
Используется цветная реакция, получаемая при нагревании раствора глюкозы со щелочью.
К 4 мл мочи приливают 1 мл 10% щелочи. Кипятят в течение 1 мин. Через 10 мин после кипячения цвет жидкости сравнивают с цветной шкалой. На шкале соответственно каждой окрашенной полоске обозначено процентное содержание сахара. Можно приготовить цветную шкалу в пробирках ( стандарт) . Приготавливают следующие растворы : 0,5 % , 1% , 1,5 % , 2 % , 3 % и 4% и обрабатывают их также , как исследуемую мочу. Пробирки закрывают пробками . Таким стандартом можно пользоваться примерно 7-10 дней , что удобнее , чем бумажная шкала.
2.Какую роль играют пороговые и непороговые вещества?
3.Какова роль инсулина при появление глюкозы в моче?
4.Что такое колориметрическим метод при определении глюкозы?
5.При каких лабораторных показателях следует определять сахар в моче?
источник
Метод основан на цветной реакции, получаемой при нагревании раствора глюкозы со щелочью. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы в моче.
Реактивы: 10% раствор едкого натра, дист. вода.
Ø К 2 мл мочи в пробирке добавить 1 мл 10% р-р едкого натра
Ø Выдержать 5 минут на кипящей водяной бане. При наличии глюкозы в моче образуется окрашивание (от жёлтого до бурого).
Ø Добавить 4 мл дист. воды
Ø ФЭК: кювета 10 мм, зеленый светофильтр, контроль дист. вода
Ø Расчет по калибровочному графику
Можно приготовить цветную шкалу в пробирках (стандарты). Готовят следующие растворы глюкозы: 0,5; 1; 1,5; 2; 3 и 4% и обрабатывают их так же, как исследуемую мочу.
БИОМЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ: Фотоэлектроколориметрический метод анализа относится к методам определения концентрации вещества в окрашенном растворе по интенсивности окраски. Метод широко применяется в медицине для определения концентраций окрашенных веществ в биологических жидкостях и тканях. Он может быть использован для измерения концентраций и неокрашенных веществ, если эти вещества могут быть переведены в окрашенное состояние с помощью подходящего реагента.
Самостоятельная работа с исследовательским этапом
ü прочитать и законспектировать методы определения глюкозы в моче в рабочих тетрадях;
ü затем получить у преподавателя образцы биологического материала;
ü провести самостоятельную исследовательскую работу пользуясь методическим материалом;
ü полученные результаты исследования оформить согласно требованиям заполнения бланков анализа.
| Задание №1. Качественное определение глюкозы в моче методом Гайнеса-Акимова | Примечание:Моча должна быть прозрачной и не содержать белок. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Посуда, оборудование и реактивы: | · химические пробирки · штативы для пробирок · градуированные пипетки · пастеровские пипетки · резиновые груши · реактив Гайнеса · водяная баня | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Ход исследования: | Ø В пробирку наливают 3-4 мл реактива Гайнеса и добавляют 8-12 капель мочи. Ø Нагревают на водяной бане 1 минуту. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Интерпретация полученных результатов: | При наличии глюкозы в моче цвет синего реактива меняется от зеленого, желтого до кирпично- красного и появляется осадок | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Задание №2. Качественное определение глюкозы в моче с тест полосками (полуколичественное). | Примечание: Полоски хранят при температуре от +8 до +18 °С, избегая попадания на них прямых солнечных лучей; не рекомендуется дотрагиваться рукой до цветной шкалы полоски. ВНИМАНИЕ! При наличии на посуде для сбора мочи остатков моющих средств (плохо вымытая и отмытая посуда) существует большая вероятность возникновения ложноположительных или ложноотрицательных результатов исследования. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Посуда, оборудование, реактивы | · тест-полоски для определения глюкозы | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Ход определения: | Мочу перемешивают. Тест-полоску погружают в исследуемую мочу так, чтобы полоса с реактивами оказалась смоченной, после этого ее немедленно извлекают из мочи и на 2 мин оставляют на пластмассовой пластинке. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Интерпретация полученных результатов: | По истечении 2 мин сразу же сравнивают изменившуюся окраску цветной полосы на бумаге со шкалой, имеющейся в комплекте | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Задание №3. Запишите полученные данные анализа мочи на глюкозу в рабочих тетрадях | Проба мочи № ___
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Задание №4. Количественное определение глюкозы в моче на ФЭКе | Примечание:Моча должна быть прозрачной и не содержать белок, т.к. белок является оптически активным веществом и коагулирует по действием реактивов и нагревания. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Посуда, оборудование, реактивы | · химические пробирки · штативы для пробирок · градуированные пипетки на 1 мл · резиновые груши · 10% раствор едкого натра · дистиллированная вода · водяная баня · песочные часы на 5 минут · ФЭК (фотоэлектроколориметр) · кювета 10 мм | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Ход определения: | К 2 мл мочи в пробирке добавить 1 мл 10% р-р едкого натра. Выдержать 5 минут на кипящей водяной бане. Добавить 4 мл дист. воды Измерить на фотоэлектроколориметре (зеленый светофильтр) против контроля в кювете длиной оптического пути 10 мм. Контролем дист. водой. Из 40% раствора глюкозы (можно использовать ампулы глюкозы для инъекций) приготовить 20 мл 4% раствора (в качестве разводящей жидкости использовать мочу, не содержащую глюкозу). Из 4% раствора приготовить разведения: 4%, 3%, 2%, 1,5%, 1%, 0,5% по схеме: | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Интерпретация полученных результатов: | Расчет ведут по калибровочному графику, учитывая показания экстинции (оптическая плотность). | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Задание №5. Запишите полученные данные анализа мочи на глюкозу в рабочих тетрадях | Проба мочи № ___
В нормальной моче глюкоза содержится в минимальных количествах, которые не обнаруживаются обычными методами, применяемыми в лаборатории. Глюкозы в моче в норме НЕТ. Контрольные вопросы и задания А. Ответьте на поставленные вопросы, используя рабочую тетрадь 1. Раскройте понятие «глюкозурия». 2. Назовите классификацию глюкозурий. 3. Назовите причины развития алиментарной глюкозурии. 4. Назовите причины развития эмоциональной глюкозурии. 5. Перечислите патологические глюкозурии и причины их развития. 6. При какой концентрации глюкозы в крови она начинает фильтроваться в мочу? 7. Какой вид глюкозурии можно предположить при следующих лабораторных показателях: уровень глюкозы в крови – 5,0 ммоль/л; реакция на сахар в моче положительная? 8. Расскажите методику обнаружения глюкозы в моче реакцией Гайнеса – Акимова. 9. Принцип метода Гайнеса- Акимова, реактивы, особенности их приготовления. 10. Как сделать цветную шкалу Альтгаузина. 11. Сбор мочи больного сахарным диабетом на анализ. 12. Что может повлиять на анализ глюкозы в моче? 13. Как приготовит 4% раствор глюкозы 10 мл? 14. Почему белок в моче мешает определению глюкозы на ФЭКе? 15. Почему моча больного сахарным диабетом водянистого цвета. Б.Запишите в рабочей тетради термины и дайте им обозначение, используя изученный материал
1. Знать теоретический и практический материал. 2. Отвечать на контрольные вопросы. 4. Подготовить лекционный материал: — причины и виды глюкозурий. Литература для самостоятельной подготовки: Камышников В.С. Методы клинических лабораторных исследований М: МЕДпресс-информ, 2011. Стр. 37-41, 57-63 Кишкун А.А. Клиническая лабораторная диагностика. – М.: ГЭОТАР – Медиа, 2008. Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим. Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰). источник Колориметрия применяет измерение плотности окраски раствора, а по плотности окраски вычисляют концентрацию вещества. При этом специальный прибор – колориметр измеряет плотность окраски раствора. Колориметрические методы определения общего белка Биуретовый метод.Основан на образовании биуретового комплекса (имеет фиолетовый цвет) пептидных связей белков с двухвалентными ионами меди. В методе используют биуретовый реактив, состоящий из KOH, CuSO4 и цитрата. Оптическую плотность раствора определяют при 540-560 нм. Метод Лоури.В щелочной среде ионы Cu +2 образуют комплекс с пептидными связями, переходя в Cu + . Одновалентные ионы меди реагируют с реактивом Фолина, образуя нестабильный продукт, переходящий в молибденовую синь, с максимумом адсорбции при 750 нм. Увеличение адсорбции при 750 нм пропорционально концентрации белка. Метод Бредфорда.Метод основан на реакции красителя кумасси с аргинином и гидрофобными аминокислотными остатками. Связанная форма имеет голубую окраску с максимумом поглощения при 595 нм Колориметрические методы определения мочевины Ксантгидриловый метод.Гетероциклический спирт ксантгидрол вступает в реакцию с мочевиной и образует нерастворимую диксантилмочевину, которую в дальнейшем определяют гравиметрически, нефелометрически, колориметрически или титрометрически. Методы точны, но трудоёмки Гипохлоритный методсостоящий в появлении характерной окраски при взаимодействии мочевины с гипохлоритом натрия и фенолом, практически не применяется из-за разного оттенка опытных и контрольных проб, частого появления мути при добавлении HCl. Колориметрические методы определения креатинина Метод Поппера, основанный на реакции Яффе.В щелочной среде пикриновая кислота взаимодействует с креатинином с образованием оранжево-красной окраски (реакция Яффе — образование таутомера пикрата креатинина), которую измеряют фотометрически при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) против холостой пробы. Колориметрические методы определения глюкозы в крови Метод Сомоджи.Используется способность глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в закись меди, превращающей, в свою очередь, арсено-молибденовую кислоту в молибденовую лазурь. Метод Фолина-Ву.Состоит в определении окраски молибдена синего, который образуется в результате восстановления тартрата меди в окись меди. Последняя, взаимодействуя с молибдотустенгоновой кислотой, дает цветную реакцию. Метод Крезелиуса – Зейферта. Основан на восстановлении пикриновой кислоты в пикраминовую с последующим ее колориметрированием. Метод быстр, но не очень точен. Ошибка может превышать 10-20%. В связи с этим указанный метод имеет ориентировочное значение; Анилиновый метод. Основан на взаимодействии глюкозы с анилином с образование окрашенного продукта. Колориметрические методы определения глюкозы в моче Метод Альтгаузена.Основан на осмолении редуцирующих сахаров при кипячении со щелочью. К 4 мл мочи приливают 1 мл 10%-ной щелочи. Кипятят в течение 1 мин. Через 10 мин после кипячения цвет жидкости сравнивают с цветной шкалой. На шкале соответственно каждой окрашенной полоске обозначено процентное содержание сахара. Колориметрические методы определения ТГ Метод определения содержания триглицеридов в сыворотке крови с ацетилацетон.Триглицериды экстрагируются из сыворотки крови. Освобожденный в результате щелочного гидролиза глицерин окисляют до формальдегида с помощью метаперйодата натрия. Образовавшийся формальдегид образует с ацетилацетоном в слабом уксусном растворе 3,5-диацетил-1,4-дигидролютидин, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию триглицеридов. Колориметрические методы определения ХС Реакция Биоля-Крофта.Основана на взаимодействии холестерина, при использовании персульфата калия, с уксусной и серной кислоты, в результате которого появляется красное окрашивание. Реакция Ригли.Основана на взаимодействии холестерина с реактивом, в составе которого имеются метанол и серная кислота. Реакция Чугаева.Основана на взаимодействии холестерина с ацетилхлоридом и хлористым цинком, в результате появляется красное окрашивание. Колориметрические методы определения ФЛ Цитохимическое определение фосфолипидов в лейкоцитах суданом черным Б.Выявление фосфолипидов основано на применении липофильных красителей, растворяющихся и избирательно концентрирующихся во внутриклеточных липидах. Метод определения суммарного азота.Метод основан на способности фосфора, соединяясь с молибденом аммония, образовывать фосфорно-молибденовую кислоту, которая восстанавливается амидоловым реагентом и дает голубое окрашивание. Колориметрический метод определения ЛПВП Ферментативный метод. антитела к бета-липопротеинам человека, содержащиеся в реактиве 1, образуют иммунные комплексы со всеми липопротеидами, за исключением ХС-ЛПВП. Последнее изменение этой страницы: 2017-01-24; Нарушение авторского права страницы источник В норме у всех здоровых людей в обычных общих анализах мочи могут обнаружить лишь следы глюкозы. Стандартное ее содержание не превышает 0,7 ммоль/литр или 2,8 ммоль/сутки. Если в результате исследования было обнаружено, что у вас повышена глюкоза в моче, то вначале следует просто пересдать анализ. Если вы повторно получите плохой результат, то следует начинать искать причины возникновения проблем. Нередко появление сахара сопровождает острый панкреатит. Но он может появиться и вследствие развития других болезней. Например, глюкозурию центрального генеза может вызвать менингит, геморрагический инсульт, энцефалит, черепно-мозговая травма. Лихорадка также является причиной увеличения концентрации сахара в моче. Отдельно выделяют и эндокринную глюкозурию. Она может развиться в результате скачков уровня адреналина, увеличении тироксина, соматотропина, глюкокортикоидных гормонов. Ренальная глюкозурия развивается из-за проблем с мочевыделительной системой. Это может быть последствием патологии клубочков и канальцев почек. Указанные поражения часто развиваются на фоне инфекционных заболеваний – гломерулонефрита или интерстициального нефрита. Отравление морфином, хлороформом, стрихнином, фосфором является токсической причиной появления сахара в исследуемом материале. Также заболевание сопровождает акромегалию. Это непропорциональный рост внутренних органов, мягких тканей и скелета, вызванный избыточным продуцированием соматотропного гормона. При этом в общем анализе нередко наблюдается эозинофилия и анемия, а в моче — гиперкальциурия. При феохромоцитоме также появляется глюкоза в моче. Причины кроются в том, что нарушается работа почек из-за развития опухоли мозгового слоя надпочечников. Синдром Иценко-Кушинга характеризуется повышением функции надпочечников, они начинают продуцировать глюкокориткоиды в избыточном количестве. Это сопровождается появлением глюкозурии. Также среди причин называют инфаркт, ожоги, демпинг-синдром. Чаще всего повышение глюкозы в моче наблюдается у больных диабетом, гипертиреозом, у людей с тяжелыми поражениями печени. При этом процесс почечной фильтрации нарушается. Глюкоза, проходя через мембраны клубочков в почках, должна полностью всасываться обратно в канальцах и возвращаться в кровоток. Для своевременного выявления заболеваний необходимо сдавать общий анализ мочи ежегодно. Ведь часто начало большинства болезней проходит практически бессимптомно. Также важно знать, что существует 2 формы этого заболевания. Глюкоза в моче повышена может быть в результате наследственного дефекта, при котором нарушен механизм ее транспортировки. В таком случае говорят о первичной почечной глюкозурии. Схожий механизм развития наблюдается и при синдроме Фанкони или глюкоаминовом диабете. При первом заболевании нарушается работа почек, в моче обнаруживают глюкозу, избыток бикарбоната, аминокислот, фосфатов. Оно характеризуется повышенным выделением мочи, болями в костях, слабостью. Глюкоаминовый диабет проявляется сбоями в работе почек, при которых аминокислоты и сахар выводятся с мочой. Вторичная форма может проявиться во время беременности или в результате отравления. Для окончательной установки диагноза мало просто выслушать жалобы и собрать анамнез, необходимо достоверно определить, есть ли глюкоза в моче. Причины ее повышения устанавливаются позже. Сложность заключается в том, что глюкозурия часто протекает бессимптомно. Правда, при выраженной потере сахара с мочой некоторые пациенты жалуются на утомляемость, слабость, головокружения, чувство голода, повышение потоотделения. Также больные иногда отмечают боли в мышцах, увеличение суточной мочи, водянистый стул и нарушение сердцебиения. Так, в рамках исследования назначаются дополнительные анализы. Проверяется количество сахара в сыворотке крови, исследуются все порции этой биологической жидкости, в том числе и суточная. Для анализов разработаны специальные методы определения глюкозы в моче. Наиболее распространенным способом является выяснение концентрации сахара с помощью специальных полосок с реагентами. Также наличие глюкозы диагностируют, проведя пробу Гайнеса, исследование по методу Бенедикта, Нидлера. Выяснить точную концентрацию можно с помощью поляриметрического исследования или проведя анализ по Альтгаузену. Если вам надо сдать обычный общий анализ или целенаправленно проверить наличие сахара в моче, то не забывайте об установленных правилах сбора биологического материала. Так, вначале необходимо провести тщательный туалет наружных половых органов с помощью нейтрального мыла. Иначе в биологический материал могут попасть вещества, способствующие быстрому разложению глюкозы. Мочу необходимо собирать в чистую посуду, желательно использовать специальные аптечные контейнеры или тщательно вымытые и стерилизованные баночки. Закрыв емкость крышкой, ее необходимо доставить в лабораторию, в которой и будут определять содержание глюкозы в моче. Если вам сказали собрать суточную мочу, то делается это следующим образом. Первая утренняя порция сливается. Сбор начинается со второго в день мочеиспускания в полном объеме. Не забудьте, что в суточный объем необходимо собрать утреннюю мочу следующего дня. Обязательно подмывайтесь перед каждым походом в туалет. Но не надо нести всю бутыль в лабораторию для того, чтобы определить, если ли у вас глюкоза в моче, повышена она или нет. Замеряйте общий объем, перемешайте биологическую жидкость в емкости и отберите до 100 мл в чистую баночку. На специальном листе необходимо указать ваш рост, вес и общее количество собранной мочи. Кстати, на протяжении суток хранить емкость необходимо в холодильнике. Это нужно для того, чтобы не снижалась концентрация глюкозы в моче. Для диагностики предназначены особые полоски «Глюкотест» длиной 5 см и шириной 0,5 см со специальной светло-желтой полосой. Именно этот участок пропитан ферментами и красителями, он и окрашивается в случае возникновения реакции. Определение глюкозы в моче проводится следующим образом. Индикаторная полоска помещается в биологическую жидкость так, чтобы реактивы полностью намокли, и сразу извлекается из нее. После этого ее оставляют на 2 минуты. Как пройдет указанное время, окрас полосы сравнивают со специальной шкалой, определяя приблизительную концентрацию сахара. Если она превышает 20 г/л, то цвет полоски становится предельно возможным и далее не изменяется. Хранить полоски необходимо при температуре до +18 градусов так, чтобы на них не попадали солнечные лучи. Дотрагиваться до индикаторного участка нежелательно. Для его проведения создают специальный реактив. В него входят кристаллический сульфат меди, едкий натр и глицерин, которые растворяются в дистиллированной воде по отдельности, а затем смешиваются. Проводят исследование следующим образом: 20 капель реактива прибавляют к 8 мл мочи в пробирке. В результате должен появиться голубоватый окрас. Верхнюю часть пробирки греют до начала кипения. Нижний ее отдел остается холодным для контроля. Если при этом в нагретой части пробирки голубой окрас сменяется на желтый, то, значит, глюкоза в моче повышена. Существует и другой метод проверки наличия избыточного количества сахара в моче, основанный на тех же свойствах глюкозы восстанавливать закись меди или гидрат закиси меди из гидрата окиси меди в щелочной среде. Для этих целей готовят специальный реактив из цитрата натрия, безводного карбоната натрия, сульфата меди и воды. Из них делают растворы, которые потом смешивают. Для проведения исследования необходимо до 10 капель мочи и 5 мл готового реактива. Их смешивают в пробирке, нагревают ее на протяжении пары минут и дожидаются остывания. Если в результате появляется осадок, а жидкость окрашивается в желтый, красный или зеленый цвет, то глюкоза в моче есть. Этот метод считается одним из самых надежных среди качественных исследований. Метод разработан на основе того, что глюкоза может восстанавливать нитрат висмута в металлический. Для проведения исследования готовят специальный реактив. В него входит нитрат висмута, который растирается в сегнетовой соли, 10% едкий натр. Хранится приготовленный реактив только в бутылках из темного стекла. Проводится анализ следующим образом. Моча и реактив смешиваются в соотношении 2:1 и варятся на протяжении 3-х минут. Если присутствует глюкоза в моче, то цвет поменяется на коричневый или даже черный, а при стоянии будет виден темный осадок. Но иногда положительный результат может возникнуть не из-за наличия сахара, а в результате реакции на белок или ряд лекарственных препаратов. С помощью указанного метода проводится не только определение глюкозы в моче, но и выяснение ее концентрации. Делается это в специальном приборе – поляриметре. Для проведения исследования биологическую жидкость обесцвечивают и удаляют из нее белок. После этого ее заливают в аппарат, ждут несколько минут для затихания колебаний частиц и определяют концентрацию глюкозы. С помощью такого метода можно определить даже значимое повышение глюкозы в моче, ведь оно основано на свойствах этого вещества поворачивать поляризованный луч вправо. Угол вращения будет зависеть от концентрации раствора. Правда, на результаты могут повлиять β-оксимолярная кислота, стрептомицин, тетрациклиновые препараты. Указанный способ позволяет достаточно точно определить, присутствует ли в глюкоза в моче. Для этого в биологическую жидкость добавляют 10% раствор едкого натра и кипятят ее в течение минуты. После этого ее цвет сравнивают со шкалой стандартов, приготовленной в пробирках. Этот способ используют как альтернативу полиметрическому исследованию, когда необходимо быстро выяснить уровень сахара, а необходимого оборудования нет. Причиной появления глюкозы в моче у малышей может стать диабет. При этом у новорожденных снижена масса тела, а при появлении проблем замечается отставание в развитии. Но по одному анализу мочи диагноз не ставится, малыша тщательно обследуют, чтобы исключить другие возможные причины развития болезни. Обнаруженная глюкоза в моче у ребенка вынуждает родителей более тщательно следить за питанием малыша. В его организм должно поступать достаточное количество углеводов, они необходимы для полноценного развития. Также важно следить, чтобы концентрация глюкозы в сыворотке крови находилась в пределах 3,5-5,5 ммоль/л. Для этого необходимо не только правильное питание, но и физические нагрузки. Многие пациенты не знают, что значит глюкоза в моче. Они начинают паниковать и требовать назначения каких-то препаратов для нормализации состояния. Но наличие сахара в биологической жидкости является лишь сигналом проблем. Это значит, что необходимо проверить, нет ли у вас диабета, проблем с почками или надпочечниками. Также необходимо проконтролировать работу щитовидной железы. Не стоит забывать, что глюкозурия может развиться и из-за отравлений рядом веществ. Если вы страдаете от глюкозурии и хотите узнать, как предотвратить развитие болезни у детей, то медицина тут бессильна. Никакой специфической профилактики не существует. Важно просто следить за питанием, давать необходимую физическую нагрузку, и тогда есть шанс, что организм будет работать нормально, несмотря на предрасположенность к развитию заболевания. Ведь чаще всего глюкоза в моче у ребенка появляется вследствие генных мутаций. А избежать этого нельзя. Как правило, ломается ген, отвечающий за белок, который необходим для всасывания в кровь сахара в почках. Даже если у родителей нет проблем, но у них есть малыш с глюкозурией, то при планировании следующих беременностей им в обязательном порядке необходимо посетить генетика для оценки возможных рисков. источник При повышенной концентрации глюкозы в моче у мужчин или женщин можно говорить о скрытом протекании или предрасположенности к некоторым болезням. Важно вовремя обнаружить это с помощью специальных анализов, выявить причину и устранить проблему. Пренебрежение методами диагностики и терапии может привести к отрицательным факторам, сахарному диабету, зависимости от инсулина. Появление в моче глюкозы – это веский повод для беспокойства и дальнейшего обследования, так как в состоянии нормы сахар после процесса фильтрации через мембрану системы почечных клубочков абсорбируется в проксимальных канальцах. При наличии уровня концентрации сахара, превышающем норму, почки перестают справляться с его переработкой (обратным всасыванием глюкозы) и выделяют с мочой. Это всего одна причина патологического состояния, которое носит название глюкозурия и является критерием для определения успешности борьбы с диабетом. Знание нормы сахара в крови важно с точки зрения предотвращения эндокринных расстройств, ведущих ко многим опасным заболеваниям, например, сахарному диабету, панкреатиту, нарушениям работы поджелудочной железы. Для взрослых мужчин и женщин норма глюкозы примерно одинакова и находится в диапазоне от 0,06 до 0,08 ммоль/литр. Предельно допустимой нормой считается предел 1,7 ммоль/л. Для детского организма этот предел выше – 2,8 ммоль/л. Это высший допустимый предел. Стандартная норма для ребенка – до 1,7 ммоль/л. Снижение способности почек всасывать сахар, тем самым нормализуя показатели крови, оценивается по порогу критического уровня глюкозы. Достижение данного порога позволяет констатировать наступление в организме человека патологического дисбаланса. У взрослых мужчин и женщин такой уровень глюкозы составляет 8,9-10 ммоль/л. У детей – 10,45-12,65 ммоль/л. Превышение указанных показателей приводит к тому, что почечные канальцы не могут справиться с объемами глюкозы, и она начинает выводиться из организма с мочой. Состояние показателей человеческого организма зависит от факторов взаимодействия с внешней средой: еда, нагрузки, лекарства. Это способно отразиться на объективности лабораторных исследований сахара (сахарная нагрузка), поэтому необходимо придерживаться правил сбора мочи. Оптимальным временем является утро. Необходимо учитывать следующие факторы:
Уровень глюкозы можно определить самостоятельно, воспользовавшись специальными полосками, которые нужно смочить мочой и через две минуты сопоставить цвет со шкалой значений. К более точным методам относятся следующие:
Высокий сахар в моче – это симптом, который указывает на влияние того или иного деструктивного фактора на организм. К данным показателям относятся:
Причина повышения в моче глюкозы при сахарном диабете имеет отличный, присущий только диабету, механизм, основой которого является дефицит инсулина. Выделение сахара из первичной мочи происходит в результате фосфорилирования. Данный процесс возможен только при условии наличия фермента гексокиназы, активатором которого является инсулин. Недостаток инсулина нарушает биохимический метаболизм глюкозы. Предельная норма глюкозы в моче у детей равна 2,8 ммоль/л. Показатели выше этой нормы могут быть сигналом к углубленным тестам. При выявлении завышенного количества сахара в моче педиатры отправляют малышей на повторный лабораторный анализ, который выявит, закономерность это или случайность. Показатель могут повысить следующие факторы:
Если норма сахара в моче у женщин или мужчин превышена, это может быть разовое проявление или хроническое заболевание. Колебания глюкозы вызывают возраст, рацион, образ жизни, беременность. Нарушение проявляется следующими симптомами:
Норма сахара в моче у мужчин и женщин может быть повышена по разным причинам, которые зависят от вида скрытой патологии. Выделяют первичный и вторичный ренальный тип глюкозурии. При первом (ренальном диабете) причиной появления симптомов служит сбой механизма резорбции глюкозы в проксимальных канальцах почек. При этом снижается почечный порог глюкозы без нарушения промежуточного углеводного обмена. При вторичном ренальном типе наблюдаются органические поражения почек, нефрит, недостаточность, гликогеновая болезнь. Вариантами почечной глюкозурии могут быть:
Повышенный сахар в моче диагностируется на основании двукратного анализа мочи. Если установлено отклонение от нормы, прибегают к следующим методам:
Повышенный сахар в моче на профессиональном сленге терапевтов называется липкая моча и предполагает коррекцию плана питания. Перейдите на небольшие порции, дробное принятие пищи (каждые 2-3 часа). Под запретом находятся простые углеводы (сахар, продукты на его основе, шоколад), которые резко повышают уровень глюкозы. Старайтесь есть углеводы сложного типа, продукты с калием и белком:
Сведите до минимума прием сахара и соли, следите за весом, не нервничайте без повода. Укрепляйте здоровье употреблением поливитаминных комплексов. Откажитесь от еды быстрого приготовления, жареного, жирного, острого, копченого. Под запретом находятся все алкогольные напитки, включая пиво, сладкая газировка. Пейте в течение дня больше жидкости, больше ходите пешком. Понизить содержание глюкозы в моче могут средства народной медицины, которые нормализуют работу почек и обмен углеводов:
источник СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮКОЗЫ В МОЧЕ, ПОЛУЧЕННЫХ РАЗНЫМИ МЕТОДАМИ Смирнов Илья Алексеевич студент 2 курса отделения Лабораторной диагностики ГБОУ СПО «Медицинское училище № 4 ДЗМ», РФ, г. Москва Меклер Наталия Николаевна научный руководитель, канд. биол. наук, доцент, преподаватель ПМ01 ГБОУ СПО «Медицинское училище № 4 ДЗМ», РФ, г. Москва Исследование мочи часто позволяет выявить как заболевания мочевых путей, так и протекающие без первичного поражения почек, заболевания внутренних органов, метаболические расстройства. Анализируя состав и свойства мочи в динамике, можно получить информацию о состоянии различных систем органов пациента, оценить степень тяжести заболевания, а также сделать заключение об эффективности проводимого лечения. Одним из важнейших показателей анализа мочи, который исследуется в условиях лаборатории, является глюкоза. Стратегия получения этой информации менялась в ходе развития медицины. В 1776 году Мэттью Добсон определил, что моча диабетиков содержит сахар. В 1815 году Джин Биот предложил поляриметрический способ определения содержания оптически активных веществ в жидкости, что позволило измерять содержание глюкозы в растворах. В 1908 году американский химик Стенли Бенедикт предложил метод, обнаружения в моче глюкозы, основанный на ее способности восстанавливать окись меди в щелочной среде сопровождающаяся появлением красного, синего или зеленовато-желтого осадка. В 1911 году американский химик Хейнц Гайнес, основываясь на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси меди (желтого цвета) и закись меди (красного цвета), предложил способ определения глюкозы в моче, названный в его честь пробой Гайнеса. В 1959 г советским ученым А.Я. Альтгаузеном, предложен метод количественного определения сахара в моче, который основан на взаимодействии глюкозы со щелочью при нагревании с образованием окрашенных соединений. В 1972 в Советском Союзе был унифицирован метод, основанный на использовании свойства раствора глюкозы вращать плоскость поляризованного луча вправо, угол вращения которого зависит от концентрации вещества [3]. Указанные физико-химические исследования мочи представляют собой достаточно длительный и, в целом, сложный процесс, требующий множества реактивов, лабораторной посуды и другого оборудования. Сегодня исследование мочи на содержание глюкозы упростилось, стало легко выполнимым, благодаря появлению тест-полосок для исследования мочи, и более объективным благодаря применению анализаторов мочи, которые заменили процедуру визуальной оценки тест-полосок. Скрининговое исследование с помощью тест-полосок на анализаторе позволяет быстро выявить патологические образцы мочи, требующие последующего количественного определения концентрации белка, глюкозы и обязательного тщательного микроскопического анализа. Такой порядок работы сокращает общее время исследования и повышает ее качество. Простота работы на приборе и его обслуживания, в сочетании с доступностью расходных материалов и технической поддержкой производителя делают данный прибор весьма привлекательным [2]. Цель работы: сопоставимость результатов определения концентрации глюкозы в моче методом «сухой химии» (тест-полоски Uriscan10) визуально и с помощью анализатора DocUReader (Венгрия). 1. Проанализировать сведения об истории исследования изучаемого показателя в моче; 2. Освоить алгоритм проведения исследования концентрации глюкозы в моче с помощью «сухой химии» и на анализаторе DocUReader; 3. Провести исследования концентрации глюкозы в моче заявленными способами; 4. Сравнить результаты, полученные при проведении исследований. Материалы и методы Изучен показатель состава мочи — глюкоза в пяти пробах, отобранных случайным образом, поступивших на исследование в клинико-диагностическую лабораторию ГБУЗ «ГП № 67» 28 апреля 2015 года. Анализ проводили в течение 1-го часа после поступления биологического материала в лабораторию. Сначала исследования проводили визуально, а затем на анализаторе DocUReader. Определение глюкозы основано на специфической глюкозооксидазной реакции. D-глюкоза при участии фермента глюкозоксидазы превращается в глюконовую кислоту с образованием перекиси водорода, которая в присутствии пероксидазы окисляет индикатор с образованием окрашенного соединения. Анализ мочи с применением диагностических тест-полосок визуально. Исследования проводились в соответствии с положениями инструкции к тест-полоскам. Каждую пробу мочи тщательно перемешивали перед анализом. Диагностическую полоску Uriscan10 погружали в мочу. Избыток мочи удаляли прикосновением к мягкой бумаге, далее тест-полоску соотносили с оценочной шкалой и фиксировали результат. Анализ мочи с применением диагностических тест-полосок на анализаторе DocUReader Исследования проводились в соответствии с положениями инструкции к анализатору и тест-полоскам. Каждую пробу мочи тщательно перемешивали перед анализом. Диагностическую полоску Uriscan10 погружали в мочу. Избыток мочи удаляли прикосновением к мягкой бумаге, далее диагностическую полоску помещали на направляющую панель анализатора DocUReader. Принцип действия прибора: интенсивность света, отраженного от поверхности полоски, регистрируется специальными датчиками прибора. В отраженном свете определяется доля трех основных цветовых составляющих, которая, наряду с компенсационной цветовой составляющей, используется для расчета изменения коэффициента отражения (КО в %). Последний показатель преобразуется в соответствующий интервал (в условных единицах +,-), который и выводится на чек [2; 3]. Интервалы диагностических полосок Uriscan10 и соответствующие им концентрационные диапазоны определяемых показателей представлены в таблице 1. Интервалы тест-полосок Uriscan10 (в условных единицах +,-) и соответствующие им концентрационные диапазоны, определяемые в моче источник Унифицированный метод определения с помощью индикаторных полосок Реактивная бумага “Глюкотест” представляет собой полоски бумаги 0,5 ґ 5 см, имеющие поперечную полосу светло-желтого цвета, пропитанную раствором ферментов и красителя. С помощью бумаги “Глюкотест” можно обнаружить глюкозу в моче и ориентировочно определить ее концентрацию. Ход исследования Содержание глюкозы в моче определяют по наиболее совпадающему со шкалой цвету полоски. Полоски хранят при температуре от +8 до +18 °С, избегая попадания на них прямых солнечных лучей; не рекомендуется дотрагиваться рукой до цветной шкалы полоски. Исследуют свежесобранную мочу; при содержании в моче глюкозы более 20 г/л интенсивность окраски цветной полосы становится предельной (соответствует 2% по шкале) и далее не меняется. Унифицированные методы обнаружения глюкозы в моче. Проба Гайнеса Метод основан на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси меди (желтого цвета) и закись меди (красного цвета). Для того чтобы из гидрата окиси меди при нагревании не образовался черный осадок окиси меди, к реактиву добавляют глицерин, гидроксильные группы которого связывают гидрат окиси меди. Необходимые реактивы 2. 50 г едкого натра растворяют в 400 мл дистиллированной воды. 3. 15 г глицерина растворяют в 200 мл дистиллированной воды. Далее первый и второй растворы смешивают и тотчас же приливают третий раствор. Реактив стоек. Ход исследования При бактериурии глюкоза мочи быстро разлагается. Проба Бенедикта Необходимые реактивы 2. Отдельно растворяют 17,3 г сульфата меди в 100 мл воды. Смешивают оба раствора, непрерывно взбалтывая, после охлаждения доливают водой до 1 л. Ход исследования Проба Бенедикта является самой надежной, так как при большом разведении мочи (8—10 капель мочи на 5 мл реактива) восстанавливающее действие других редуцирующих веществ мочи выражено слабо. Проба Нилендера Унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы Дата добавления: 2015-09-20 ; просмотров: 962 | Нарушение авторских прав источник |