Метод определения белка в моче пирогаллоловым красным

Патологическая протеинурия является одним из наиболее важных и постоянных признаков заболеваний почек и мочевых путей. Определение концентрации белка в моче является обязательным и важным элементом исследования мочи. Выявление и количественная оценка протеинурии важна не только в диагностике многих первичных и вторичных заболеваний почек, оценка изменения выраженности протеинурии в динамике несет информацию о течении патологического процесса, об эффективности проводимого лечения. Обнаружение белка в моче даже в следовых количествах должно настораживать в отношении возможного заболевания почек или мочевых путей и требует повторного анализа. Особо следует отметить бессмысленность исследования мочи и, в частности, определения белка мочи без соблюдения всех правил ее сбора.

Все методы определения белка в моче можно разделить на:

• Качественные,
• Полуколичественные,
• Количественные.

Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.

Условия определения белка в моче на основе реакции коагуляции:

1. Моча должна иметь кислую реакцию. Мочу щелочной реакции подкисляют несколькими (2 — 3) каплями уксусной кислоты (5 – 10%).
2. Моча должна быть прозрачной. Помутнение устраняется через бумажный фильтр. Если помутнение не исчезает, добавляют тальк или жженую магнезию (около 1 чайной ложки на 100 мл мочи), взбалтывают и фильтруют.
3. Качественную пробу следует проводить в двух пробирках, одна из них – контрольная.
4. Искать помутнение следует на черном фоне в проходящем свете.

К качественным методам определения белка в моче относятся:

Как показывают многочисленные исследования, ни один из большого числа известных методов качественного определения белка в моче не позволяет получать надежные и воспроизводимые результаты. Несмотря на это, в большинстве КДЛ в России эти методы широко используются в качестве скрининга – в моче с положительной качественной реакцией в дальнейшем проводят количественное определение белка. Из качественных реакций чаще используют пробу Геллера и пробу с сульфосалициловой кислотой, однако пробу с сульфосалициловой кислотой большей частью считают наиболее подходящей для выявления патологической протеинурии. Проба с кипячением в настоящее время практически не используется в связи с ее трудоемкостью и длительностью.

В основе метода Брандберга-Робертса-Стольникова лежит кольцевая проба Геллера, поэтому при данном методе наблюдаются те же ошибки, что и при пробе Геллера.

В настоящее время для определения белка в моче все чаще используются диагностические полоски. Для полуколичественного определения белка в моче на полоске в качестве индикатора чаще всего используется краситель бромфеноловый синий в цитратном буфере. О содержании белка в моче судят по интенсивности сине-зеленой окраски, развивающейся после контакта реакционной зоны с мочой. Результат оценивается визуально или с помощью анализаторов мочи. Несмотря на большую популярность и очевидные преимущества методов сухой химии (простота, скорость выполнения анализа) данные методы анализа мочи в целом и определения белка в частности не лишены серьезных недостатков. Одним из них, приводящих к искажению диагностической информации, является большая чувствительность индикатора бромфенолового синего к альбумину по сравнению с другими белками. В связи с этим, тест-полоски в основном приспособлены к обнаружению селективной гломерулярной протеинурии, когда практически весь белок мочи представлен альбумином. При прогрессировании изменений и переходе селективной гломерулярной протеинурии в неселективную (появление в моче глобулинов) результаты определения белка оказываются заниженными по сравнению с истинными значениями. Данный факт не дает возможности использовать данный метод определения белка в моче для оценки состояния почек (гломерулярного фильтра) в динамике. При тубулярной протеинурии результаты определения белка также оказываются заниженными. Определение белка с помощью диагностических полосок не является надежным индикатором низких уровней протеинурии (большинство выпускаемых в настоящее время диагностических полосок не обладают способностью улавливать белок в моче в концентрации ниже, чем 0,15 г/л). Отрицательные результаты определения белка на полосках не исключают присутствия в моче глобулинов, гемоглобина, уромукоида, белка Бенс-Джонса и других парапротеинов.

Хлопья слизи с высоким содержанием гликопротеидов (например, при воспалительных процессах в мочевых путях, пиурии, бактериурии) могут оседать на индикаторной зоне полоски и приводить к ложноположительным результатам. Ложноположительные результаты могут также быть связаны с высокой концентрацией мочевины. Плохое освещение и нарушение цветоощущения может быть причиной неточного результата.

В связи с этим, использование диагностических полосок следует ограничить скринирующими процедурами, а результаты, полученные с их помощью, следует рассматривать лишь как ориентировочные.

Корректное количественное определение белка в моче в ряде случаев оказывается непростой задачей. Трудности ее решения определяются следующим рядом факторов:

• низким содержанием белка в моче здорового человека, часто находящимся на пороге чувствительности большинства известных методов;
• присутствием в моче множества соединений, способных вмешиваться в ход химических реакций;
• значительными колебаниями содержания и состава белков мочи при различных заболеваниях, затрудняющими выбор адекватного калибровочного материала.

В клинических лабораториях преимущественно применяются так называемые «рутинные» методы определения белка в моче, однако они далеко не всегда позволяют получать удовлетворительные результаты.

С точки зрения специалиста-аналитика, работающего в лаборатории, метод, предназначенный для количественного определения белка в моче, должен отвечать следующим требованиям:

• обладать линейной зависимостью между поглощением образовавшегося в ходе химической реакции комплекса и содержанием белка в пробе в широком диапазоне концентраций, что позволит избежать дополнительных операций при подготовке пробы к исследованию;
• должен быть прост, не требовать высокой квалификации исполнителя, выполняться при малом количестве операций;
• обладать высокой чувствительностью, аналитической надежностью при использовании небольших объемов исследуемого материала;
• быть устойчивым к воздействию различных факторов (колебаниям состава образца, присутствию лекарственных препаратов и др.);
• обладать приемлемой стоимостью;
• быть легко адаптируемым к автоанализаторам;
• результат определения не должен зависеть от белкового состава исследуемого образца мочи.

Ни один из известных к настоящему времени методов количественного определения белка в моче не может в полной мере претендовать на роль «золотого стандарта».

Количественные методы определения белка в моче можно разделить на турбидиметрические и колориметрические.

К турбидиметрическим методам относятся:

• определение белка с сульфосалициловой кислотой (ССК),
• определение белка с трихлоруксусной кислотой (ТХУ),
• определение белка с бензетоний хлоридом.

Турбидиметрические методы основаны на снижении растворимости белков мочи вследствие образования суспензии взвешенных частиц под воздействием преципитирующих агентов. О содержании белка в исследуемой пробе судят либо по интенсивности светорассеяния, определяемого числом светорассеивающих частиц (нефелометрический метод анализа), либо по ослаблению светового потока образовавшейся суспензией (турбидиметрический метод анализа).

Величина светорассеяния в преципитационных методах обнаружения белка в моче зависит от множества факторов: скорости смешивания реактивов, температуры реакционной смеси, значения pH среды, присутствия посторонних соединений, способов фотометрии. Тщательное соблюдение условий реакции способствует образованию стабильной суспензии с постоянным размером взвешенных частиц и получению относительно воспроизводимых результатов.

Некоторые лекарственные препараты влияют на результаты турбидиметрических методов определения белка в моче, приводя к так называемым «ложноположительным», либо «ложноотрицательным» результатам. К ним относятся некоторые антибиотики (бензилпенициллин, клоксациллин и др.), рентгеноконтрастирующие йодсодержащие вещества, сульфаниламидные препараты.

Турбидиметрические методы плохо поддаются стандартизации, часто приводят к получению ошибочных результатов, но, несмотря на это, в настоящее время они широко используются в лабораториях из-за невысокой стоимости и доступности реактивов. Наиболее широко в России используется метод определения белка с сульфосалициловой кислотой.

Наиболее чувствительными и точными являются колориметрические методы определения общего белка мочи, основанные на специфических цветных реакциях белков.

1. биуретовая реакция,
2. метод Лоури,
3. методы, основанные на способности различных красителей образовывать комплексы с белками:
   • Понсо S (Ponceau S),
   • Кумасси бриллиантовый синий (Coomassie Brilliant Blue)
   • пирогаллоловый красный (Pyrogallol Red).

С точки зрения исполнителя, в повседневной работе лаборатории при большом потоке исследований биуретовый метод является неудобным из-за большого числа операций. В то же время, метод характеризуется высокой аналитической надежностью, позволяет определять белок в широком диапазоне концентраций и выявлять альбумин, глобулины и парапротеины со сравнимой чувствительностью, вследствие чего биуретовый метод рассматривают в качестве референтного и рекомендуют для сравнения других аналитических методов обнаружения белка в моче. Биуретовый метод определения белка в моче предпочтительно выполнять в лабораториях, обслуживающих нефрологические отделения, и использовать в тех случаях, когда результаты определения с помощью других методов представляются сомнительными, а также для определения величины суточной потери белка у нефрологических больных.

Метод Лоури, обладающий более высокой чувствительностью по сравнению с биуретовым методом, сочетает биуретовую реакцию и реакцию Фолина на аминокислоты тирозин и триптофан в составе белковой молекулы. Несмотря на высокую чувствительность, данный метод не всегда обеспечивает получение надежных результатов при определении содержания белка в моче. Причиной тому служит неспецифическое взаимодействие реактива Фолина с небелковыми компонентами мочи (чаще всего аминокислотами, мочевой кислотой, углеводами). Отделение этих и других компонентов мочи путем диализа или осаждения белков позволяет с успехом использовать данный метод для количественного определения белка в моче. Некоторые лекарственные препараты – салицилаты, хлорпромазин, тетрациклины способны оказывать влияние на данный метод и извращать результаты исследования.

Достаточная чувствительность, хорошая воспроизводимость и простота определения белка по связыванию красителей делают эти методы перспективными, однако высокая стоимость реактивов препятствует более широкому их использованию в лабораториях. В настоящее время в России все большее распространение получает метод с пирогаллоловым красным.

Проводя исследование уровня протеинурии, нужно иметь ввиду, что различные методы определения протеинурии имеют разную чувствительность и специфичность к многочисленным белкам мочи.

Исходя из эмпирических данных, рекомендуется определять белок двумя разными методами и рассчитывать истинное значение по одной из приведенных формул:

протеинурия = 0,4799 B + 0,5230 L;
протеинурия = 1,5484 B – 0,4825 S;
протеинурия = 0,2167 S + 0,7579 L;
протеинурия = 1,0748 P – 0,0986 B;
протеинурия = 1,0104 P – 0,0289 S;
протеинурия = 0,8959 P + 0,0845 L;

где:
B – результат измерения с Кумасси G-250;
L — результат измерения с реактивом Лоури;
P — результат измерения с молибдатом пирогаллола;
S — результат измерения с сульфосалициловой кислотой.

Учитывая выраженные колебания уровня протеинурии в различное время суток, а также зависимость концентрации белка в моче от диуреза, различное его содержание в отдельных порциях мочи, в настоящее время при патологии почек принято оценивать выраженность протеинурии по суточной потере белка с мочой, то есть определять так называемую суточную протеинурию. Она выражается в г/сут.

При невозможности сбора суточной мочи рекомендуется определять в разовой порции мочи концентрации белка и креатинина. Поскольку скорость выделения креатинина в течение дня достаточно постоянна и не зависит от изменения скорости мочеотделения, отношение концентрации белка к концентрации креатинина постоянно. Данное отношение хорошо коррелирует с суточной экскрецией белка и, следовательно, может использоваться для оценки выраженности протеинурии. В норме отношение белок/креатинин должно быть менее 0,2. Белок и креатинин измеряют в г/л. Важным достоинством метода оценки выраженности протеинурии по соотношению белок-креатинин является полное исключение ошибок, связанных с невозможностью или неполным сбором суточной мочи.

• О. В. Новоселова, М. Б. Пятигорская, Ю. Е. Михайлов, «Клинические аспекты выявления и оценки протеинурии», Справочник заведующего КДЛ, № 1, январь 2007 г.
• А. В. Козлов, «Протеинурия: методы ее выявления», лекция, Санкт-Петербург, СПбМАПО, 2000 г.
• В. Л. Эмануэль, «Лабораторная диагностика заболеваний почек. Мочевой синдром», — Справочник заведующего КДЛ, № 12, декабрь 2006 г.
• В.И. Пупкова, Л.М. Прасолова — Определение белка в моче и спинномозговой жидкости. Кольцово, 2007 г.
• Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва, «Медицина», 1975 г.

Для количественного определения белка пригоден любой образец мочи. Большинство исследователей для выяснения величины суточной потери белка предпочитают определять содержание белка в моче, собранной за сутки.

Раздел: Анализ мочи

В настоящее время для определения белка в моче все чаще используются диагностические полоски. Для полуколичественного определения белка в моче на полоске в качестве индикатора чаще всего используется краситель бромфеноловый синий в цитратном буфере. О содержании белка в моче судят по интенсивности сине-зеленой окраски, развивающейся после контакта реакционной зоны с мочой.

Раздел: Анализ мочи

Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.

Раздел: Анализ мочи

Проба с 20% сульфосалициловой кислотой относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.

Раздел: Анализ мочи

Кольцевая проба Геллера относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.

Раздел: Анализ мочи

источник

Здоровый человек в сутки выделяет 1,0―1,5 л мочи. Содержание 8―10 мг/дл белка в ней — физиологическое явление. Суточная норма белка в моче 100―150 мг не должна вызывать подозрений. Глобулин, мукопротеин и альбумин — то из чего складывается общий белок в моче. Большой отток альбумина указывает на нарушения фильтрационного процесса в почках и называется протеинурией или альбуминурией.

Каждому веществу в моче отведена «здоровая» норма, а если колеблется показатель белка — это может говорить о патологии почек.

Общий анализ мочи подразумевает использование либо первой (утренней) порции, либо берут суточную пробу. Последняя предпочтительнее для оценки уровня протеинурии, так как содержание белка имеет выраженные суточные колебания. Мочу в течение суток собирают в одну емкость, измеряют общий объем. Для лаборатории, которая проводит анализ мочи на белок, достаточно стандартного образца (от 50 до 100 мл) из этой емкости, остальное количество не требуется. Для получения дополнительной информации дополнительно проводят пробу по Зимницкому, что показывает в норме ли показатели мочи в сутки.

Белок в моче в норме у взрослого человека не должен превышать 0,033 г/л. При этом суточная норма не выше 0,05 г/л. Для беременных норма белка в суточной моче больше — 0,3 г/л., а в утренней моче такая же — 0,033 г/л. Отличаются нормы белка в общем анализе мочи и у детей: 0,036 г/л для утренней порции и 0,06 г/л в сутки. Чаще всего в лабораториях анализ проводят двумя методами, что показывают, сколько содержится белковой фракции в урине. Приведенные выше значения нормы справедливы для анализа, проведенного с сульфосалициловой кислотой. Если же использовали пирогаллоловый красный краситель, значения будут отличаться в три раза.

Причиной содержания белка в моче могут быть патологические процессы в почках:

• фильтрация в почечных клубочках идет неправильным путем;
• всасывание в канальцах белка нарушено;
• некоторые заболевания оказывают на почки сильную нагрузку ― когда белок в крови повышен, почки банально «не успевают» его отфильтровать.

Остальные причины считаются непочечными. Так развивается функциональная альбуминурия. Белок в анализе мочи появляется при аллергических реакциях, эпилепсии, сердечной недостаточности, лейкозе, отравлениях, при миеломе, химиотерапии, системных заболеваниях. Чаще всего именно такой показатель в анализах пациента будет первым звоночком гипертонической болезни.

Повышение белка в урине может быть обусловлено факторами непатологической природы, поэтому потребуются дополнительные анализы.Вернуться к оглавлению

Количественные методы определения белка в моче дают погрешности, поэтому рекомендуют проводить несколько анализов, а затем использовать формулу для расчета корректного значения. Содержание белка в моче измеряют в г/л или в мг/л. Эти показатели белка дают возможность определить уровень протеинурии, предположить причину, оценить прогноз и определиться со стратегией.

Для полноценного функционирования организма необходим постоянный обмен между кровью и тканями. Он возможен только при условии наличия в кровеносных сосудах определенного осмотического давления. Белки плазмы крови как раз и поддерживают такой уровень давления, когда низкомолекулярные вещества легко переходят из среды с высокой их концентрацией в среду с более низкой. Потеря молекул белка ведет к выходу крови из своего русла в ткани, что чревато сильными отеками. Так проявляется умеренная и выраженная протеинурия.

Начальные стадии альбуминурии протекают бессимптомно. Пациент обращает внимание только на проявления основного заболевания, которое и является причиной появления в моче белка.

Следовой протеинурией именуют повышение уровня белка в урине из-за употребления определённых продуктов.Вернуться к оглавлению

Мочу для анализа собирают в чистую, обезжиренную емкость. Перед сбором показан туалет промежности, подмываться нужно с мылом. Женщинам рекомендуют закрыть влагалище кусочком ваты или тампоном, чтобы влагалищные выделения не повлияли на результат. Накануне лучше не употреблять спиртное, минеральную воду, кофе, острое, соленое и пищу, которая придает урине окраску (чернику, свеклу). Сильные физические нагрузки, длительная ходьба, стресс, повышенная температура и потоотделение, чрезмерное употребление белковой пищи или лекарственных препаратов перед сдачей мочи провоцируют появление белка в анализе мочи вполне здорового человека. Это допустимое явление называется следовой протеинурией.

Болезни почек, приводящие к потере белка:

• Амилоидоз. Нормальные клетки в почках замещаются амилоидами (белково-сахаридный комплекс), что не дает органу нормально работать. На протеинурической стадии амилоиды откладываются в почечных тканях, разрушают нефрон и, как следствие, почечный фильтр. Так белок попадает из крови в мочу. Эта стадия может продолжаться более 10-ти лет.
• Диабетическая нефропатия. Из-за неправильного обмена углеводов и липидов происходит разрушение кровеносных сосудов, клубочков и канальцев в почке. Белок в моче является первым признаком прогнозируемого осложнения сахарного диабета.
• Заболевания воспалительного генеза — нефриты. Чаще всего поражения затрагивают кровеносные сосуды, клубочки и чашечно-лоханочные системы, нарушая нормальный ход фильтрационной системы.
• Гломерулонефрит в большинстве случаев носит аутоиммунный характер. Больной жалуется на уменьшение количества мочи, боль в пояснице и повышение давления. Для лечения гломерулонефрита рекомендуют диету, режим и медикаментозную терапию.
• Пиелонефрит. В остром периоде протекает с симптоматикой бактериальной инфекции: озноб, тошнота, головная боль. Это инфекционное заболевание.
• Поликистоз почек.

В здоровом организме молекулы белка (а они довольно крупные по размеру) не способны пройти через фильтрационную систему почек. Поэтому белка в моче быть не должно. Этот показатель одинаковый и у мужчин, и у женщин. Если же анализ указывает на протеинурию, важно обратиться к врачу для выяснения причин. Специалист оценит, насколько повышен уровень белка, есть ли сопутствующая патология, как восстановить нормальное функционирование организма. Согласно статистическим данным, у женщины риск заболевания мочеполовой системы выше, чем у мужчины.

Принцип метода основан на коагуляции белка в моче в присутствии азотной (или 20% раствора сульфосалициловой) кислоты.

Ход работы: к 5 каплям мочи добавляют 1-2 капли азотной (или сульфосалициловой) кислоты. При наличии белка в моче появляется мутность.

Таблица. Обнаружение патологических компонентов мочи.

Примечание: при наличии в исследуемой моче глюкозы и белка определяют их количественное содержание.

Принцип метода: при взаимодействии белка с пирогаллоловым красным и молибдатом натрия образуется окрашенный комплекс, интенсивность окраски, которого пропорциональна концентрации белка в пробе.

Реактивы: Рабочий реагент – раствор пирогаллолового красного в сукцинат-ном буфере, калибровочный раствор белка с концентрацией 0,50 г/л

Пробы перемешать, выдержать 10 мин. при комнатной температуре (18 -25ºС). Измерить оптическую плотность опытной (Dоп) и калибровочной пробы (Dк) против контрольной пробы при λ=598 (578-610) нм. Окраска стабильна в течении 1 ч.

Расчет: концентрацию белка в моче (С) г/л рассчитать по формуле:

Нормальные величины: до 0,094 г/л, (0,141 г/сут)

Принцип метода: При окислении D-глюкозы кислородом воздуха под действием глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты (смесь фенола и 4 аминоантипирина — 4ААП) с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы.

Глюкоза + О2 + Н2О глюконолактон + Н2О2

2Н2О2 + фенол + 4ААП окрашенное соединение + 4Н2О

Ход работы: в две пробирки вносят по 1 мл рабочего раствора и по 0,5 мл фосфатного буфера. В первую пробирку добавляют 0,02 мл мочи, во вторую – 0,02 мл калибратора (калибровочный, стандартный раствор глюкозы, 10 ммоль/л). Пробы перемешивают, выдерживают 15 мин при температуре 370С в термостате и измеряют оптическую плотность опытной (Dоп) и калиб-ровочной (Dк) проб против рабочего реагента при длине волны 500-546 нм.

Расчет: С = Dоп/Dк  10 ммоль/л Dоп= Dк =

Содержание глюкозы в суточной моче ммоль/сутки определяют, умножая полученный результат на объем собранной за сутки мочи.

Примечание. При содержании сахара в моче более 1% ее необходимо разводить.

В настоящее время в биохимических лабораториях используется унифи-цированный экспресс-метод анализа мочи на глюкозу с помощью реактив-ной бумаги на глюкозу Глюкотест или с использованием комбиниро-ванных тест-полосок на РН, белок, глюкозу, кетоновые тела и кровь. Тест-полоски, опускают в сосуд с мочой на 1сек. и сравнивают окраску по шкале.

Принцип метода основан на фотометрическом измерении оптической плотности раствора окрашенного комплекса, образующегося при взаимодействии молекул белка с молекулами комплекса красителя пирогаллоловый красный и молибдата натрия (Pyrogallol Red-Molybdate complex) в кислой среде. Интенсивность окраски раствора пропорциональна содержанию белка в исследуемом материале. Наличие детергентов в реактиве обеспечивает равнозначное определение белков разной природы и строения.

Реактивы. 1) 1,5 ммоль/л раствор пирогаллолового красного (ПГК): 60 мг ПГК растворяют в 100 мл метанола. Хранят при температуре 0–5 °С; 2) 50 ммоль/л сукцинатный буферный раствор pH 2,5: 5,9 г янтарной кислоты (НООС–СН2–СН2–СООН); 0,14 г оксалата натрия (Na2C2O4) и 0,5 г натрия бензоата (C6H5COONa) растворяют в 900 мл дистиллированной воды; 3) 10 ммоль/ л раствор кристаллогидрата молибдата натрия (Na2MoO4 × 2H2O): 240 мг молибдата натрия растворяют в 100 мл дистиллированной воды; 4) Рабочий реактив: к 900 мл сукцинатного буферного раствора добавляют 40 мл раствора ПГК и 4 мл раствора молибдата натрия. pH раствора устанавливают 2,5 с помощью 0,1 моль/л раствора соляной кислоты (НСl) и доводят его объем до 1 л. Реактив в таком виде готов к использованию и стабилен при хранении в защищенном от света месте и температуре 2–25 °С в течение 6 мес; 5) 0,5 г/л стандартный раствор альбумина.

Ход определения. В первую пробирку вносят 0,05 мл исследуемой мочи, во вторую пробирку — 0,05 мл стандартного раствора альбумина и в третью пробирку (контрольная проба) — 0,05 мл дистиллированной воды, затем в эти пробирки добавляют по 3 мл рабочего реактива. Содержимое пробирок перемешивают и через 10 минут фотометрируют пробу и стандарт против контрольной пробы при длине волны 596 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм.

Расчет концентрации белка в исследуемой пробе мочи осуществляют по формуле:

где С — концентрация белка в исследуемой пробе мочи, г/л; Апр и Аст— экстинкция исследуемой пробы мочи и стандартного раствора альбумина, г/л; 0,5 — концентрация стандартного раствора альбумина, г/л.

• окраска раствора (цветного комплекса) стабильна в течение одного часа;
• прямо пропорциональная зависимость между концентрацией белка в исследуемой пробе и поглощением раствора зависит от типа фотометра;
• при содержании белка в моче выше 3 г/л пробу разводят изотоническим раствором натрия хлорида (9 г/л) и повторяют определение. Степень разведения учитывают при определении концентрации белка.

• Определение белка в моче
• Унифицированная проба с сульфосалициловой кислотой
• Унифицированный метод Брандберга–Робертса–Стольникова
• Определение количества белка в моче по реакции с сульфосалициловой кислотой
• Биуретовый метод
• Обнаружение в моче белка Бенс–Джонса

Протеинурия — явление, при котором в моче определяется белок, что указывает на возможность поражения почек, служит фактором развития болезней сердца, кровеносных, лимфатических сосудов.

Обнаружение белка в урине не всегда указывает на болезнь. Подобное явление свойственно даже для абсолютно здоровых людей, в урине которых может определяться белок. Переохлаждение, физические нагрузки, употребление белковой пищи приводит к появлению в моче белка, который без всякого лечения исчезает.

Во время скрининга у 17% практически здоровых людей определяется белок, но только 2% от этого числа людей положительный результат анализа служит признаком болезни почек.

Белковые молекулы не должны попадать в кровь. Они жизненно необходимы организму — являются строительным материалом для клеток, участвуют в реакциях в качестве коферментов, гормонов, антител. И у мужчин, и у женщин норма — полное отсутствие белка в моче.

Функция предотвращения потери организмом белковых молекул выполняется почками.

Фильтрацией мочи занимаются две системы почек:

1. почечные клубочки – не пропускают крупные молекулы, но не удерживают альбумины, глобулины – мелкую фракцию белковых молекул;
2. почечные канальца – адсорбируют белки, отфильтрованные клубочками, возвращают обратно в кровеносную систему.

В моче обнаруживаются альбумины (около 49%), мукопротеины, глобулины, из которых на долю иммуноглобулинов приходится около 20%.

Глобулины — сывороточные белки в большой молекулярной массой, которые вырабатываются в иммунной системе и печени. Большая их часть синтезируется иммунной системой, относится к иммуноглобулинам или антителам.

Альбумины — фракцию белков, которые первыми появляются в моче уже при незначительных поражениях почек. Некоторое количество альбуминов есть и в здоровой моче, но оно столь незначительно, что не выявляется с помощью лабораторной диагностики.

Нижний порог, который можно обнаружить при помощи лабораторной диагностики, составляет 0,033 г/л. Если в сутки теряется более 150 мг белка, то говорят о протеинурии.

Основные данные о белке в моче

Заболевание при легкой степени протеинурии протекает бессимптомно. Визуально мочу, не содержащую белка, невозможно отличить от урины, в которой есть незначительное количество белка. Несколько пенистой урина становится уже при высокой степени протеинурии.

Предположить активное выведение белка с мочой можно по внешнему виду больного лишь при средней или тяжелой степени болезни по появлению отеков конечностей, лица, живота.

На ранних стадиях заболевания косвенными признаками протеинурии могут служить симптомы:

• изменения окраски мочи;
• усиливающейся слабости;
• отсутствия аппетита;
• тошноты, рвоты;
• боли в костях;
• сонливости, головокружениям;
• повышенной температуры.

Появление подобных признаков нельзя оставлять без внимания, особенно при беременности. Подобное может означать и незначительное отклонение от нормы, а может оказаться симптомом развивающегося гестоза, преэклампсии.

Количественная оценка потери белка – задача непростая, для достижения более полного представления о состоянии больного пользуются несколькими лабораторными анализами.

Трудности в выборе способа выявления избыточного белка в моче объясняются:

• низкой концентрацией белка, для распознавания которой требуются высокоточные приборы;
• составом мочи, усложняющим задачу, так как она содержит вещества, искажающие результат.

Наибольшую информацию позволяет получить анализ первой утренней порции мочи, которую собирают после пробуждения.

Накануне проведения анализа необходимо соблюдать условия:

• не употреблять острой, жареной, белковой пищи, алкоголь;
• исключить прием диуретиков за 48 часов;
• ограничить физическую активность;
• тщательно соблюдать правила личной гигиены.

Утренняя моча наиболее информативна, так как длительно находится в мочевом пузыре, в меньшей степени зависит от приема пищи.

Анализировать количество белка в моче можно по случайной порции, которую отбирают в любое время, но такой анализ менее информативен, выше вероятность ошибки.

Для количественной оценки суточных потерь белка делают анализ общей суточной мочи. Для этого в течение 24 часов собирают в специальный пластиковый контейнер всю мочу, выделенную за день. Начинать сбор можно в любой момент времени. Главное условие – ровно сутки сбора.

Качественное определение протеинурии основано на свойстве белка денатурировать под действием физических или химических факторов. Качественные методы относятся к скрининговым, позволяющим установить наличие белка в моче, но не дающим возможности точно оценить степень протеинурии.

Используется пробы:

• с кипячением;
• сульфосалициловой кислотой;
• азотной кислотой, реактивом Ларионовой при кольцевой пробе Геллера.

Пробу с сульфосалициловой кислотой выполняют, сравнивая контрольный образец мочи с опытным, в котором к урине добавляют 7-8 капель 20% сульфосалициловой кислоты. Вывод о присутствии белка делают по интенсивности опалесцирующей мути, появляющейся в пробирке в ходе реакции.

Чаще применяют пробу Геллера с использованием 50% азотной кислоты. Чувствительность метода составляет 0,033 г/л. При такой концентрации белка в пробирке с образцом мочи и реагентом на 2-3 минутах после начала опыта появляется нитевидное кольцо белого цвета, образование которого и указывает на присутствие белка.

К полуколичественным методам относятся:

• способ определения белка в моче тест-полосками;
• метод Брандберга-Робертса-Стольникова.

Способ определения по методу Брандберга-Робертса-Стольникова основан на кольцевом методе Геллера, но позволяет более точно оценить количество белка. При выполнении теста по этой методике несколькими разведениями урины добиваются появления нитевидного белкового кольца во временном промежутке между 2- 3 минутами с начала тестирования.

В практике используется метод тест-полосок с нанесенным красителем бромфеноловым синим в качестве индикатора. Недостатком тест-полосок является избирательная чувствительность к альбумину, что приводит к искажению результата в случае повышения в моче концентрации глобулинов или других белков.

К минусам метода относится также относительно низкая чувствительность теста к белку. Реагировать на присутствие белка в моче тест полоски начинают при концентрации белка, превышающей 0,15 г/л.

Методы количественной оценки можно разделить условно на:

Методы основаны на свойстве белков снижать растворимость под действием связывающего агента с образованием малорастворимого соединения.

Агентами, вызывающими связывание белка, могут выступать:

• сульфосалициловая кислота;
• трихлоруксусная кислота;
• бензетоний хлорид.

О результатах тестов делают выводы на основании степени ослабления светового потока в образце с суспензией по сравнению с контрольным. Результаты этого метода не всегда можно отнести к достоверным из-за различий в условиях проведения: скорости смешивания реагентов, температуры, кислотности среды.

Влияют на оценку прием лекарственных препаратов накануне, перед проведением тестов по данным методам нельзя принимать:

• антибиотики;
• сульфаниламиды;
• йодсодержащие препараты.

Метод относится к доступным по себестоимости, что позволяет его широко использовать для скрининга. Но более точные результаты можно получить с помощью более дорогостоящих колориметрических методик.

К чувствительным методам, позволяющим точно определить концентрацию белка в моче, относятся колориметрические методики.

Сделать это с высокой точностью позволяют:

• биуретовая реакция;
• методика Лоури;
• окрашивающие методики, в которых используются красители, образующие с белками мочи комплексы, отличающиеся от образца визуально.

Колориметрические методы выявления белка в моче

Метод относится к надежным, обладающим высокой чувствительностью, позволяющий определять в моче альбумин, глобулины, парапротеины. Используется в качестве основного способа уточнения спорных результатов анализов, а также суточного белка в моче у больных нефрологических отделений стационаров.

Еще более точных результатов позволяет добиться метод Лоури, который основан на биуретовой реакции, а также реакции Фолина, распознающей триптофан и тирозин в молекулах белков.

Для исключения возможных ошибок пробу урину очищают с помощью диализа от аминокислот, мочевой кислоты. Ошибки возможны при употреблении салицилатов, тетрациклинов, хлорпромазина.

Наиболее точный способ определения белка основан на его свойстве связываться с красителями, из которых используются:

• понсо;
• кумасси бриллиантовый синий;
• пирогалловый красный.

В течение дня количество белка, выделяемое с мочой, изменяется. Чтобы более объективно оценить потери белка с мочой, вводят понятие суточного белка в моче. Эта величина измеряется в г/сутки.

Для быстрой оценки суточного белка в моче, в разовой порции мочи определяют количество белка и креатинина, затем по соотношению белок/креатинин делают вывод о потери белка в сутки.

Метод основан на том, что скорость выведения с мочой креатинина — величина постоянная, не изменяется в течение суток. У здорового человека в норме соотношение белок : креатинин в моче составляет 0,2.

Этот способ исключает возможные ошибки, которые могут возникнуть при сборе суточной мочи.

Качественные пробы чаще, чем количественные тесты, дают ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Ошибки возникают в связи с приемом лекарств, особенностями питания, физической нагрузки накануне сдачи анализа.

Расшифровка этого качественного теста дается по визуальной оценке помутнения в пробирке в сравнении результата теста с контрольной:

1. слабоположительная реакция оценивается, как +;
2. положительная ++;
3. резко положительная +++.

Кольцевая проба Геллера более точно оценивает присутствие белка в моче, но не позволяет дать количественную оценку белка в моче. Как и тест с сульфосалициловой кислотой, проба Геллера дает лишь приблизительное представление о содержании белка в урине.

Метод позволяет оценить степень протеинурии количественно, но слишком трудоемок, неточен, так как при сильном разведении точность оценки снижается.

Чтобы вычислить белок, нужно умножить степень разведения мочи на 0, 033 г/л:

Проведение теста не требует специальных условий, эту процедуру легко проделать в домашних условиях. Для этого необходимо тест-полоску опустить в мочу на 2 минуты.

Результаты будут выражаться количеством плюсов на полоске, расшифровка которой содержится в таблице:

1. Результаты тестирования, соответствующие значением до 30 мг/100 мл соответствуют физиологической протеинурии.
2. Значения на тест-полосках 1+ и 2++ означают значительную протеинурию.
3. Значения 3+++, 4++++ отмечаются при патологической протеинурии, вызванной заболеваниями почек.

Тест-полоски позволяют лишь приблизительно определить повышенный белок в моче. Для точной диагностики их не используют, а уж тем более они не могут сказать что это значит.

Не позволяют тест-полоски адекватно оценить количество белка в моче у беременных. Более надежным способом оценки служит определение белка по суточной моче.

Определение белка в моче при помощи тест-полоски:

Суточный белок в моче служит более точной диагностикой оценки функционального состояния почек. Для этого необходимо собрать всю мочу, выделяемую почками за сутки.

Содержание белка в моче можно узнать по соотношению белок: креатинин, данные приведены в таблице:

Допустимыми значениями для соотношения белок/креатинин считаются данные, приведенные в таблице:

При потере более 3,5 г белка в сутки состояние называется массивной протеинурией.

Если в моче много белка требуется повторное обследование через 1 месяц, затем через 3 месяца, по результатам, которых устанавливается почему норма превышена.

Причинами повышенного белка в моче является его увеличенное производство в организме и нарушение работы почек, различают протеинурию:

• физиологическую – незначительные отклонения от нормы вызываются физиологическими процессами, разрешаются самопроизвольно;
• патологическую – изменения вызываются в результате патологического процесса в почках или других органах тела, без лечения прогрессирует.

Небольшое повышение белка может наблюдаться при обильном белковом питании, механические ожогах, травмах, сопровождающихся усилением выработки иммуноглобулинов.

Легкая степень протеинурии может быть вызвана физической нагрузкой, психо-эмоциональным напряжением, приемом некоторых лекарств.

К физиологической протеинурии относится повышение белка в моче у детей в первые дни после рождения. Но уже после недели жизни содержание белка в моче у ребенка рассматривается, как отклонение от нормы и указывает на развивающуюся патологию.

Заболевания почек, инфекционные заболевания также иногда сопровождаются появлением белка в моче.

Подобные состояния соответствуют обычно легкой степени протеинурии, являются преходящими явлениями, быстро самостоятельно проходят, не требуя специального лечения.

Более тяжелые состояния, выраженная протеинурия отмечается в случае:

• гломерулонефрита;
• диабета;
• болезней сердца;
• раке мочевого пузыря;
• множественной миеломе;
• инфекции, лекарственном поражении, поликистозе почек;
• высоком кровяном давлении;
• системной красной волчанке;
• синдроме Гудпасчера.

Вызвать следы белка в моче может кишечная непроходимость, сердечная недостаточность, гипертиреоз.

Разновидности протеинурии классифицирует несколькими способами. Для качественной оценки белков, воспользоваться можно классификацией Ярошевского.

По систематике Ярошевского, созданной в 1971 году, различают протеинурию:

1. ренальную – куда входит нарушение клубочковой фильтрации, выделение белка канальцев, недостаточность реадсорбции белков в канальцах;
2. преренальная – возникает вне почек, выведение из организма гемоглобина, белков, возникающих в избытке в крови в результате множественной миеломы;
3. постренальная – возникает на участке мочевыводящих путей после почек, выведение белка при разрушении мочевыводящих органов.

Для количественной оценки происходящего выделяют условно степени протеинурии. Нужно помнить, что они могут легко переходить в более тяжелую без лечения.

Самая тяжелая стадия протеинурии развивается при потере более 3 г белка в сутки. Потеря белка от 30 мг до 300 мг в сутки соответствует умеренной стадии или микроальбумнурии. До 30 мг белка в суточной моче означает легкую степень протеинурии.

Норма белка в моче сколько ?

В норме белок в моче практически отсутствует (менее 0,002 г/л) . Однако при некоторых состояниях небольшое количество белка может появляться в моче у здоровых лиц после приема большого количества белковой пищи, в результате охлаждения, при эмоциональных стрессах, длительной физической нагрузки (так называемая маршевая протеинурия) .

Появление значительного количества белка в моче (протеинурия) является патологией. Причиной протеинурии могут быть заболевания почек (острый и хронический гломерулонефрит, пиелонефрит, нефропатия беременных и др. ) или же мочевыводящих путей (воспаление мочевого пузыря, предстательной железы, мочеточников) . Почечная протеинурия может быть органической (клубочковая, канальцевая и избыточная ) и функциональной (лихорадочная протеинурия, ортостатическая у подростков, при перекармливании грудных детей, у новорожденных) . Функциональная протеинурия не связана с почечной патологией. Суточное количество белка колеблется у больных от 0,1 до 3,0 г и более. Состав белков мочи определяется с помощью электрофореза. Появление в моче белка Бенс-Джонса характерно для миеломной болезни и макроглобулинемии Вальденстрема, #223;2 микроглобулина при повреждении почечных канальцев.

В норме белок в моче практически отсутствует (менее 0,002 г/л).

Основные признаки болезней, выявляемые при исследовании мочи.

SG Удельный вес. Снижение удельного веса говорит об уменьшении способности почек концентрировать мочу и выводить из организма шлаки, что бывает при почечной недостаточности. Увеличение удельного веса связано с большим количеством в моче сахара, солей. Следует отметить, что оценивать удельный вес только по одному исследованию мочи нельзя, могут быть случайные изменения, надо повторно выполнить 1-2 раза анализ мочи.

Proteine Белок в моче — протеинурия. Причиной протеинурии могут быть поражения самих почек при нефритах, амилоидозе, повреждении ядами. Белок в моче может появиться и вследствие болезней мочевыводящих путей (пиелонефрит, цистит, простатит) .

Читайте также:  Нет напора мочи у мужчины причины

Glucose Глюкоза (сахар) в моче — глюкозурия — чаще всего обусловлено сахарным диабетом. Более редкая причина — поражение почечных канальцев. Очень тревожно, если вместе с сахаром в моче определяются кетоновые тела. Это бывает при тяжелом, разрегулированном сахарном диабете и является предвестником самого тяжелого осложнения диабета — диабетической комы.

Bilirubin, Urobilinogen Билирубин и уробилин определяются в моче при различных формах желтух.

Erythrocytes Эритроциты в моче — гематурия. Это бывает или при поражении самих почек, чаще всего при их воспалении, или у больных с заболеваниями мочевых путей. Если, к примеру, по ним движется камень, он может ранить слизистую, в моче будут эритроциты. Распадающаяся опухоль почки тоже может привести к гематурии.

Leukocytes Лейкоциты в моче — лейкоцитурия, чаще всего является следствием воспалительных изменений в мочевыводящих путях у больных пиелонефритом, циститом. Лейкоциты нередко определяются при воспалении женских наружных половых органов, у мужчин — при воспалении предстательной железы.

Cylindrs Цилиндры — это своеобразные микроскопические образования. Гиалиновые цилиндры в количестве 1-2 могут быть у здорового человека. Они образуются в почечных канальцах, это слипшиеся между собой частички белка. Но увеличение их количества, цилиндры других видов (зернистые, эритроцитарные, жировые) всегда указывают на поражение самой ткани почки. Встречаются цилиндры при воспалительных заболеваниях почек, обменных поражениях, например, сахарном диабете.

Информативность метода и его пределы. Информативность общего анализа мочи для распознавания конкретных заболеваний почек невысока, обычно требуется проведение дополнительных, более точных исследований. Но исследование это очень важно, особенно при проведении профилактических исследований, так как позволяет выявить ранние признаки заболеваний почек. Известно также, что нередко заболевания почек протекают скрыто, и только исследование мочи позволяет их заподозрить и провести дальнейшее необходимое обследование.

В большинстве лабораторий при исследовании мочи на белок сначала пользуются качественными реакциями, которые не обнаруживают белок в моче здорового человека. Если же белок в моче обнаружен качественными реакциями, проводят количественное (или полуколичественное) его определение. При этом имеют значение особенности используемых методов, охватывающих различный спектр уропротеинов. Так, при определении белка с помощью 3% сульфосалициловой кислоты, нормальным считается количество белка до 0,03 г/л, при использовании же пирогаллолового метода, граница нормальных значений белка повышается до 0,1 г/л. В связи с этим в бланке анализа необходимо указывать нормальное значение белка для того метода, которым пользуется лаборатория.

При определении минимальных количеств белка рекомендуется повторить анализ, в сомнительных случаях следует определять суточную потерю белка с мочой. В норме суточная моча содержит белок в незначительных количествах. В физиологических условиях профильтровавшийся белок практически полностью реабсорбируется эпителием проксимальных канальцев и содержание его в суточном количестве мочи колеблется по разным авторам от следов до 20 50, 80 100 мг и даже до 150 200 мг. Некоторые авторы считают, что суточная экскреция белка в количестве 30 50 мг/сут является физиологической нормой для взрослого человека. Другие полагают, что выделение белка с мочой не должно превышать 60 мг/м2 поверхности тела в сутки, исключая первый месяц жизни, когда величина физиологической протеинурии может в четыре раза превышать указанные значения.

Общим условием появления белков в моче здорового человека являются достаточно высокая их концентрация в крови и молекулярная масса не более 100 200 кДа.

это не норма, при вашем диагнозе такое возможно, другое дело, что для нефротического синдрома это вообще-то небольшой показатель.. смотрите на клинику — отеки, давление и т. д. продолжайте принимать назначенное лечение..

и все таки я скажу: в норме его НЕ дожно быть!

источник

Принцип метода: при взаимодействии белка с пирогаллоловым красным и молибдатом натрия образуется окрашенный комплекс, интенсивность окраски, которого пропорциональна концентрации белка в пробе.

Реактивы: Рабочий реагент – раствор пирогаллолового красного в сукцинат-ном буфере, калибровочный раствор белка с концентрацией 0,50 г/л

Пробы перемешать, выдержать 10 мин. при комнатной температуре (18 -25ºС). Измерить оптическую плотность опытной (D_оп) и калибровочной пробы (D_к) против контрольной пробы при λ=598 (578-610) нм. Окраска стабильна в течении 1 ч.

Расчет: концентрацию белка в моче (С) г/л рассчитать по формуле:

Нормальные величины: до 0,094 г/л, (0,141 г/сут)

Количественное определение глюкозы в моче

Принцип метода: При окислении D-глюкозы кислородом воздуха под действием глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты (смесь фенола и 4 аминоантипирина — 4ААП) с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы.

Глюкоза + О₂ + Н₂О глюконолактон + Н₂О₂

2 Н₂О₂ + фенол + 4ААП окрашенное соединение + 4Н₂О

Ход работы: в две пробирки вносят по 1 мл рабочего раствора и по 0,5 мл фосфатного буфера. В первую пробирку добавляют 0,02 мл мочи, во вторую – 0,02 мл калибратора (калибровочный, стандартный раствор глюкозы, 10 ммоль/л). Пробы перемешивают, выдерживают 15 мин при температуре 37 0 С в термостате и измеряют оптическую плотность опытной (D_оп) и калиб-ровочной (D_к) проб против рабочего реагента при длине волны 500-546 нм.

Содержание глюкозы в суточной моче ммоль/сутки определяют, умножая полученный результат на объем собранной за сутки мочи.

Примечание. При содержании сахара в моче более 1% ее необходимо разводить.

В настоящее время в биохимических лабораториях используется унифи-цированный экспресс-метод анализа мочи на глюкозу с помощью реактив-ной бумаги на глюкозу ²Глюкотест² или с использованием комбиниро-ванных тест-полосок на РН, белок, глюкозу, кетоновые тела и кровь. Тест-полоски, опускают в сосуд с мочой на 1сек. и сравнивают окраску по шкале.

Тестовый контроль по теме: ²Физико-химические свойства, нормальные и патологические компоненты мочи, качественный и количественный анализ патологических компонентов мочи².

Выберите правильный ответ

Глюкоза в крови в пределах нормы, в моче проба на глюкозу положительна. Это объясняется нарушением в почках процесса:

Выберите правильный ответ

Повышение содержания аммонийных солей и снижение количества мочевины в моче происходит при заболевании:

Выберите ВСЕ правильнЫе ответы

Кетонурия наблюдается при:

Выберитеь все правильные ответы

Кровь в форме красных кровяных клеток появляется в моче вследствие:

а) воспалительного процесса в нефроне

б) воспалительного процесса мочевых путей

в) травмы мочевыводящих путей

г) воспалительного процесса в селезенке

Выберите все правильные ответы

Появление прямого билирубина и уробилиногена в моче наблюдается:

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Понижение плотности мочи наблюдается при:

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Полиурия наблюдается при:

Выберите все правильные ответы

Патологические компоненты мочи:

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Индикаторные ферменты, определяемые в моче для диагностики различных заболеваний:

Выберите все правильные ответы

Бурый или коричневый цвет мочи вызывают компоненты:

Выберите все правильные ответы

Белок попадает в мочу вследствие:

б) увеличения размеров пор почечного фильтра

в) поражения мочевых путей

г) повышения белков в питании

Выберите ВСЕ правильные ответы

Креатинурия наблюдается при:

б) поражении мочевых путей

г) в первые годы жизни ребенка

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Повышение плотности мочи наблюдается при:

в) большой физической нагрузке

д) распаде тканевых белков

Выберите все правильные ответы

Нормальные компоненты мочи:

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Патологические компоненты мочи при сахарном диабете:

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Повышение аминокислот в моче:

«для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз»

«для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз или не использован совсем»

«для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз, несколько раз или не использован совсем»

«для каждого вопроса – один или несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз»

«для каждого вопроса – один или несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз»

«для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз или не использован совсем»

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ

Процессы концентрирования и разведения мочи в почках влияют на показатель ­­­­­_________ мочи.

Кровь в моче (гематурия) имеет разное происхождение и подразделяется на 2 вида: _______ и _________.

В зависимости от локализации патологии протеинурии делятся на 2 группы:_______ и _____________.

Причиной гемоглобинурии является ______ _______.

Ответы по теме: ²Физико-химические свойства, нормальные и патологические компоненты мочи, качественный и количественный анализ патологических компонентов мочи²

1. Тема 31. ²Биохимическая оценка состояния функции почек².

Самостоятельная работа студентов в аудиторное время

Место проведения — кафедра биохимии

Продолжительность занятия — 180 минут

Необходимое оснащение:

Папки с дополнительной литературой для решения ситуационных задач.

Мотивация: знания, полученные на занятии необходимы для оценки функцио-нального состояния почек, а также для оценки тяжести состояния больного.

Цель занятия: приобретение знаний и навыков по оценке данных биохимического анализа крови и анализа мочи с целью оценки функционального состояния почек.

Конкретные задачи:

· Процесс образования мочи (фильтрация, секреция, реабсорбция).

· Основные функции почек в организме.

· Нормальные и патологические компоненты мочи.

· Основные группы заболеваний почек: гломерулонефрит, пиелонефрит, острая и хроническая почечная недостаточность, мочекаменная болезнь, токсическая нефропатия.

· Функциональные пробы оценки состояния почек.

· Анализировать, обобщать и излагать литературный материал.

· Оценивать данные биохимических и других лабораторных исследований.

· Проводить оценку функционального состояния почек.

· Проводить дифференциальную диагностику заболеваний почек.

Развивающая цель:развитие способностей анализировать информацию, обосновывать принятое решение.

Воспитательная цель: воспитание ответственности и внимательного отношения к обследованию пациента.

Внутрипредметные связи:

оценка функционального

ферментысостояния почекобмен

хромопротеинов

обмен обмен обмен гормоны биохимия

белков липидов углеводов крови

Межпредметные связи:

терапия урология акушерство и эндокринология хирургия

гинекология

Оценка функционального

состояния почек

физиология анатомия гистология

Вопросы для самоподготовки:

1. Особенности строения почек.

2. Механизм образования мочи (фильтрация, реабсорбция, секреция).

3. Основные функции почек в организме.

4. Роль почек в регуляции артериального давления.

5. Роль почек в поддержании кислотно-основного равновесия.

6. Роль почек в поддержании водно-электролитного баланса.

8. Химический состав мочи. Нормальные компоненты мочи.

9. Патологические компоненты мочи.

10. Методы оценки функционального состояния почек.

11. Основные заболевания почек: гломерулонефрит, пиелонефрит, острая и хрони-ческая почечная недостаточность, мочекаменная болезнь, токсическая нефропатия.

Задание для самоподготовки:

1. Изучить рекомендуемую литературу, используя вопросы для самоподготовки.

2. Нарисовать в рабочей тетради схему строения нефрона.

3. Перечислить в рабочей тетради основные функции почек.

4. Перечислить в рабочей тетради общие свойства мочи, нормальные и патологические компоненты мочи. Основные причины их изменений.

1) Березов Т.Т., Коровкин Б. Ф. «Биологическая химия», 1998, стр. 446-451, 559-561, 608-625.

2) Медведев В. В., Волчек Ю. З. «Клиническая лабораторная диагностика» Справочник для врачей, 1995.

Этапы занятия и контроль их усвоения:

Пример проверочной работы:см. Тестовый контроль.

Словарь терминов

Азотемия – увеличение в крови количества небелковых азотсодержащих веществ

Анурия – отсутствие выделения мочи

Гематурия – обнаружение в моче эритроцитов (или крови)

Гиперстенурия – увеличение относительной плотности мочи

Гипостенурия – снижение относительной плотности мочи (максимальные значения плотности мочи не превышают 1,014 г/мл)

Глюкозурия — обнаружение в моче глюкозы

Диурез – количество выделяемой за сутки мочи

Изостенурия – отсутствие или незначительные колебания относительной плотности мочи в течение суток (разница между максимальным и минимальным значениями плотности не более 10)

Кетонурия – обнаружение в моче кетоновых тел

Никтурия – состояние, при котором количество мочи выделенное ночью преобладает над дневным диурезом

Олигурия — уменьшение суточного объема мочи

Полиурия – увеличение суточного объема мочи

Протеинурия – обнаружение в моче белка

Алгоритм решения задач.

1. Рассчитать клиренс креатинина.

2. Сравнить с нормой и проанализировать биохимические показатели крови и мочи.

3. Оценить результаты функциональных проб.

4. На основании представленных данных сделать вывод о состоянии основных функций почек: есть их нарушение или нет; если есть, то какие функции нарушены, какие показатели на это указывают.

5. Оценить течение процесса: острое или хроническое.

6. Имеется ли почечная недостаточность (оценивается по следующим показателям: клиренс креатинина, характер изменений азотсодержащих компонентов крови и мочи, проба Зимницкого).

7. Поставить и обосновать предварительный диагноз.

8. Ответить на теоретические вопросы, поставленные в задаче.

1. Мужчина, 35 лет, рост 170 см, вес 96 кг, проходит обследование в связи с поступлением на работу на вредное производство. Жалоб нет.

2. Проба Зимницкого, порядок выполнения, клинико-диагностическое значение.

1. Мужчина, 40 лет, рост 179 см, вес 93 кг. Жалобы: на головную боль, чаще в утреннее время или после тяжелой физической нагрузки; иногда сопровождаются тошнотой, сердцебиением, мельканием ²мушек² перед глазами. При физической нагрузке – давящие боли в области сердца, которые проходят после отдыха. Объективно: АД 190/100 мм рт.ст., расширение границ сердца влево на 1 см от среднеключичной линии в 5-ом межреберье. Почки не пальпируются, отеков нет.

2. Клубочковая фильтрация, критерий оценки, клинико – диагностическое значение этого показателя.

1. Женщина, 20 лет, рост 172 см, вес 67 кг. Беременность 28 недель. Жалобы на тошноту, отвращение к некоторым продуктам, слабость, головокружение, боли в поясничной области. Объективно: АД 150/90

2. Эффективный почечный плазмоток, критерий оценки, клинико – диагностическое значение этого показателя.

1. Женщина, 21 год, рост 164 см, вес 72 кг. Жалобы на головную боль, слабость, чувство тяжести в поясничной области, отеки лица и конечностей, уменьшение количества мочи. Из анамнеза: 2 недели назад перенесла ангину. Объективно: АД 150/100, моча мутная, красная (цвета ²мясных помоев²).

2. Проба Адисса – Каковского в модификации Амбурже: порядок ее выполнения, критерии оценки, клинико – диагностическое значение (дифференциальная диагностика заболеваний почек).

1. Мужчина, 36 год, рост 185 см, вес 82 кг. Жалобы: ухудшение состояния в течение последних 2-х месяцев, повышенная утомляемость, головная боль, тошнота, сонливость; ноющие боли в поясничной области, не связанные с движением, отечность лица по утрам. Из анамнеза жизни: 1-2 раза в год болел ангиной, лечился самостоятельно. При обследовании после ангины была обнаружена протеинурия и гематурия, но состояние было удовлетворительное, поэтому обследование и лечение не проходил.

Объективно: АД 170/90 мм рт. ст., пульс 72 уд/мин, ритмичный. Границы сердца смещены влево на 1,5 см.

2. Канальцевая секреция, критерий оценки, клинико – диагностическое значение этого показателя.

1. Женщина, 29 лет, рост 170 см, вес 59 кг. Жалобы: после переохлаждения появились озноб, головная боль, болезненное мочеиспускание малыми порциями, постоянные боли в поясничной области, слабость, потливость. Объективно: кратковременные подъемы АД до 150/100 мм рт.ст., температура тела 38,4 0 С, отеков нет.

2. Канальцевая реабсорбция, критерий оценки, клинико – диагности-ческое значение этого показателя.

1. Мужчина, 29 лет, рост 181 см, вес 76 кг. В течение 2-х лет работает в гальваническом цехе, где используются соли ртути. Жалобы: слабость, металлический привкус во рту, болезненность в поясничной области, не связанная с движениями, тошнота.

Объективно: отечность лица и конечностей. При лабораторном исследовании обнаружено наличие ртути в моче.

2. Нефротоксические, гепатотоксические, гемолитические вещества.

1. Мужчина, 40 лет, рост 180 см, вес 82 кг. Жалобы: после сдавления обеих нижних конечностей вследствие автомобильной травмы появились отечность лица, слабость, головная боль, болезненность в поясничной области, не связанная с движениями, сухость во рту, повышение температуры тела.

2. Токсическая нефропатия при «синдроме длительного раздавливания мышц» (Crush – syndrom), причины возникновения.

1. Мужчина, 32 года, рост 166 см, вес 80 кг. Поступил в связи с тяжелым термическим ожогом кожи. При обследовании установлено:

2. Причины интоксикации организма при ожогах. Токсическая нефропатия при химическом и термическом ожоге. Роль белков теплового шока при интоксикациях.

1. Мужчина, 36 лет, рост 176 см, вес 65 кг. Страдает хроническим гломерулонефритом в течение 5-ти лет. Жалобы: частый диурез в ночное время (никтурия), слабость, снижение аппетита, тошноту, сердцебиение, кожный зуд. Объективно: АД 170/90 мм рт.ст., отеки, рентгенографически: остеопороз.

2. Лабораторные критерии стадий хронической почечной недостаточности (креатинин крови, клубочковая фильтрация).

1. Мужчина, 45 лет, рост 173 см, вес 87 кг. Жалобы на приступообразные боли в правой поясничной области, иррадиирующие в правую паховую область. Приступы купируются спазмолитиками. После приступов моча красного цвета. Объективно: АД 130/65.

2. Неорганизованные осадки мочи. Мочекаменная болезнь.

1. Мужчина, 43 года, рост 171 см, вес 80 кг. В связи с подозрением на

острое производственное отравление ССl₄, был госпитализирован в

клинику внутренних болезней. Объективно:

2. Индикаторные ферменты в диагностике заболеваний почек.

1. Мужчина, 45 лет, рост 175 см, вес 93 кг. Работает на химическом производстве. Неделю назад участвовал в ликвидации аварии на трубопроводе этиленгликоля. Поступил в клинику с жалобами на слабость, головную боль, ноющие боли в поясничной области, одутловатость лица.

1. Мужчина, 27 лет, рост 180 см, вес 75 кг. После перехода на работу в горячий цех появились слабость, быстрая утомляемость и головная боль. Объективно:

2. Регуляция водно-солевого обмена. Альдостерон, вазопрессин.

Некоторые формы гипертензии возникают вследствие различных почечных нарушений, например при сдавлении опухолью почечной артерии. Основным методом лечения в подобных случаях является удаление органа (почки). Однако улучшение состояния больных отмечается при назначении больным препаратов, являющихся ингибиторами карбоксидипептидил-пептидазы (ангиотензинпревращающего фермента). В результате каких изменений наступает улучшение состояния больных?

НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ

Анализ крови

Анализ мочи

Функциональные пробы

Проба Зимницкого: дневной диурез (ДД) больше ночного диуреза (НД) обычно в 2 раза. Колебания относительной плотности в течении суток в среднем 10-12 единиц (см. выше).

Клиренс эндогенного креатинина (Ccr)

мужчины от 21 до 40 в среднем 133, 2 мл/мин

женщины от 21 до 40 в среднем 142,9 мл/мин

Клиренс парааминогиппуровой кислоты (С РАН)

Максимальный транспорт парааминогиппуровой кислоты ( Тм РАН)

В среднем значении 60 – 80 мг/мин

Максимальный транспорт глюкозы (Тм G)

мужчины 2,08 ± 0,44 ммоль/мин

женщины 1,68 ± 0,31 ммоль/мин

Ионограмма крови и мочи и суточная экскреция электролитов.

Цитировано по: Медведев В.В., Волчек Ю.З. Клиническая лабораторная диагностика: Справочник для врачей.- СПб.: ²Гиппократ²., 1995г.- с. 60 — 91.

Наточин Ю.В. Почка. Справочник врача.- СПб.: Изд-во СПбГУ, 1997г.- 208 Энциклопедия клинических лабораторных тестов под. ред. Н. Тица /Перевод с англ. под ред. В.В. Меньшикова; М.: Изд- во ²Лабинформ², — 1997г. – 960 с.

Тестовый контроль по теме: ²Биохимическая оценка состояния функции почек².

Выберите правильнЫЙ ответ

Клубочковая фильтрация оценивается по величине:

б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

г) максимального транспорта глюкозы

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

Выберите правильнЫЙ ответ

Почечный плазмоток оценивается по величине:

б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы

г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

Выберите правильнЫй ответ

Канальцевая секреция оценивается по величине:

б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы

г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

Выберите правильнЫЙ ответ

Канальцевая реабсорбция оценивается по величине:

б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы

г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

Выберите правильнЫЙ ответ

Концентрационная функция почек оценивается по величине:

б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы

г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

ВыбЕРИТЕ правильнЫЙ ответ

Причиной остеопороза при ХПН яляется снижение образования:

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ

Нарушение реабсорбции в почечных канальцах характеризуется:

а) снижением мочевины в крови

б) повышением глюкозы в крови

в) снижением креатинина в моче

г) появление глюкозы в моче

д) появлением белка в моче

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ

Функция ренина заключается в:

а) стимуляции выработки вазопрессина

б) усилении реабсорбции натрия

в) активации ангиотензиногена

г) превращении ангиотензина-1 в ангиотензин-2

д) снижении выработки альдостерона

Выберите Все правильнЫе ответы

Белки в моче при селективной почечной протеинурии:

Выберите все правильныЕ ответЫ

Признаки почечной недостаточности:

Дата добавления: 2016-10-06 ; просмотров: 1667 | Нарушение авторских прав

источник