Определение глюкозы в моче реактивами

Для определения глюкозы в моче рабочее место должно быть оснащено следующими элементами:

Набор пипеток и пробирок.
Воронки, колбы, фарфоровая ступка.
Фильтровальная бумага.
Спиртовка или газовая горелка.
Сегнетовая соль.
Сернокислая медь.
Едкий натр.
Лимоннокислый натрий.
Углекислый натрий.
Азотнокислый висмут.
Дистиллированная вода.

В основу методик, используемых для качественного определения глюкозы в моче, положены ее восстанавливающие свойства.

В результате взаимодействия глюкозы с реактивом образуется окрашенное соединение, выпадающее в осадок. В реакциях Фелинга, Гайнеса-Акимова, Бенедикта сернокислая медь последовательно восстанавливается в закись меди — кирпично-красного цвета и в гидрат закиси меди — желтого цвета. В реакции Нилендера азотнокислый висмут восстанавливается в металлический висмут — черного цвета. Перед качественным определением глюкозы в моче выполняют следующую работу:
1. Мутную мочу фильтруют.
2. При большом содержании в моче белка (свыше 1%о) его удаляют. Для этого подкисляют мочу до слабокислой реакции, нагревают до кипения, затем охлаждают и фильтруют. Фильтрат должен быть прозрачным и при прибавлении к нему 20% раствора сульфосалициловой кислоты не давать помутнения.

Примечание. В редких случаях при наличии в моче большого количества восстанавливающих веществ (мочевая кислота, индикан, креатиннн, желчные пигменты и др.) их удаляют следующим образом. В пробирку наливают 8 мл мочи, прибавляют 1 мл 96° спирта и небольшое количество животного угля. Восстанавливающие вещества адсорбируются углем, оседающим на дно пробирки; глюкоза не адсорбируется, она остается в растворе.
При проведении качественного определения глюкозы с обработанной таким образом мочой в реакцию вступает только глюкоза.

Для качественного определения глюкозы в моче применяют следующие реакции:

реакцию Фелинга;
реакцию Гайнеса-Акимова (модифицированный капельный способ);
реакцию Бенедикта;
реакцию Нилендера;
капельный способ качественного определения глюкозы в моче.

Рассмотрим данные реакции более подробно.

Для этой реакции готовят два реактива — № 1 и 2.

Реактив Фелинга № 1 (7% раствор сернокислой меди). 7 г сернокислой меди растворяют в дистиллированной воде, доводя объем растворителя до 100 мл. Реактив бледно-голубого цвета.

Реактив № 2. 8 г едкого натра и 35 г сегнетовой соли растворяют в воде, доведя объем растворителя до 100 мл. Реактив бесцветен.

Рабочий раствор реактива Фелинга готовят на 1-2 дня путем смешивания равных объемов реактива № 1 и 2.

Постановка реакции. 5-6 мл рабочего раствора реактива Фелинга помещают в химическую пробирку и смешивают с 5-6 мл профильтрованной мочи. Смесь приобретает синий цвет. Верхнюю часть пробирки с мочой нагревают над пламенем горелки и кипятят в течение 1-2 минут. При наличии глюкозы в нагретой части мочи образуется кирпично-красное окрашивание. При отсутствии глюкозы синий цвет не изменяется.

Для реакции готовят реактив Гайнеса (по прописи Акимова). Для этого 13,3 г химически чистой кристаллической сернокислой меди растворяют в 400 мл дистиллированной воды, в другой посуде растворяют 50 г едкого натра в 400 мл дистиллированной воды, в третьей — разводят 15 г глицерина в 200 мл дистиллированной воды. Смешивают первый и второй растворы и к этой смеси при постоянном помешивании прибавляют небольшими порциями третий реактив. Реактив Гайнеса синего цвета. Годен в течение длительного срока.

Постановка реакции. В пробирку помещают 8 капель реактива Гайнеса и 2 капли мочи. Пробирку нагревают над пламенем до закипания мочи или прогревают в кипящей водяной бане в течение 1-2 минут. При наличии глюкозы на дне пробирки образуется зеленоватый, коричнево-зеленоватый или красноватый осадок, а при ее отсутствии синий цвет реактива Гайнеса не изменяется.

В реакции применяют реактив Бенедикта, который готовят следующим образом. В мерную колбу помещают 86,5 г лимоннокислого натрия и 100 г кристаллического углекислого натрия и растворяют при нагревании примерно в 350 мл дистиллированной воды. В другой посуде растворяют 8,65 г сернокислой меди в 50 мл дистиллированной воды. Оба раствора смешивают в мерной 500-миллилитровой колбе и доливают дистиллированной водой до метки. Реактив имеет синий цвет, достаточно стоек.

Постановка реакции. В пробирку наливают 5 мл реактива Бенедикта, прибавляют 8 капель мочи и кипятят над пламенем горелки 2 минуты или в кипящей бане 5 минут. При наличии глюкозы образуется зеленоватый желтый или красный осадок. При отсутствии глюкозы синий цвет реактива не изменяется. Пробу Бенедикта считают наиболее чувствительной и самой лучшей из проб, основанных на восстанавливающих свойствах глюкозы, ее отличает большая специфичность.

Для постановки реакции готовят реактив Нилендера. Для этого 2 г азотнокислого висмута и 4 г сегнетовой соли растирают в фарфоровои ступке, а затем растворяют в 1 мл 10% раствора едкого натра, который приливают небольшими порциями в ступку.

После этого реактив фильтруют в склянку из темного стекла и хранят на холоде, так как он нестоек. Годность реактива периодически проверяют. С этой целью 3 мл реактива разводят в 10 мл дистиллированной воды и 4 мл разведенного реактива нагревают в пробирке до кипения. Если жидкость не буреет, значит реактив годен для употребления.

Постановка реакции. В пробирку помещают 6 мл мочи, предварительно освобожденной от белка, прибавляют 3 мл реактива и перемешивают. Затем верхнюю часть пробирки нагревают и кипятят в течение 2-3 минут, пробе дают постоять в штативе в течение 10 минут, после чего учитывают результаты. При наличии глюкозы в моче образуется темно-бурый или черный осадок, а при ее отсутствии цвет смеси не изменяется.

В последнее время нашел применение сухой способ определения глюкозы в моче. Для этой реакции готовят следующий реактив: 1 г мелкорастертого медного купороса и 10 г углекислого натрия тщательно перемешивают и хранят в темной склянке с притертой пробкой при комнатной температуре. Щепотку порошкообразного реактива помещают на предметное стекло и пипеткой добавляют 2-3 капли исследуемой мочи. Затем смесь подогревают над пламенем горелки до закипания. Голубой цвет указывает на отсутствие глюкозы, зеленый — на содержание глюкозы около 0,1 %, желто-зеленый — на присутствие около 0,5 % глюкозы, желтый — около 1 %, коричневый — около 2% и кирпично-красный — около 3-4% глюкозы и более.
В последнем случае анализ мочи на глюкозу повторяют после разведения мочи в 2 раза.

Содержание глюкозы в моче можно установить с помощью индикаторной бумаги «глюкофан». В специальной инструкции, прилагаемой к каждой партии бумаги, подробно изложена техника определения. Кроме того, в настоящее время применяют индикаторную бумагу отечественного производства «глюкотест».

источник

В норме у всех здоровых людей в обычных общих анализах мочи могут обнаружить лишь следы глюкозы. Стандартное ее содержание не превышает 0,7 ммоль/литр или 2,8 ммоль/сутки.

Если в результате исследования было обнаружено, что у вас повышена глюкоза в моче, то вначале следует просто пересдать анализ. Если вы повторно получите плохой результат, то следует начинать искать причины возникновения проблем.

Нередко появление сахара сопровождает острый панкреатит. Но он может появиться и вследствие развития других болезней. Например, глюкозурию центрального генеза может вызвать менингит, геморрагический инсульт, энцефалит, черепно-мозговая травма. Лихорадка также является причиной увеличения концентрации сахара в моче. Отдельно выделяют и эндокринную глюкозурию. Она может развиться в результате скачков уровня адреналина, увеличении тироксина, соматотропина, глюкокортикоидных гормонов.

Ренальная глюкозурия развивается из-за проблем с мочевыделительной системой. Это может быть последствием патологии клубочков и канальцев почек. Указанные поражения часто развиваются на фоне инфекционных заболеваний – гломерулонефрита или интерстициального нефрита. Отравление морфином, хлороформом, стрихнином, фосфором является токсической причиной появления сахара в исследуемом материале.

Также заболевание сопровождает акромегалию. Это непропорциональный рост внутренних органов, мягких тканей и скелета, вызванный избыточным продуцированием соматотропного гормона. При этом в общем анализе нередко наблюдается эозинофилия и анемия, а в моче — гиперкальциурия.

При феохромоцитоме также появляется глюкоза в моче. Причины кроются в том, что нарушается работа почек из-за развития опухоли мозгового слоя надпочечников.

Синдром Иценко-Кушинга характеризуется повышением функции надпочечников, они начинают продуцировать глюкокориткоиды в избыточном количестве. Это сопровождается появлением глюкозурии.

Также среди причин называют инфаркт, ожоги, демпинг-синдром.

Чаще всего повышение глюкозы в моче наблюдается у больных диабетом, гипертиреозом, у людей с тяжелыми поражениями печени. При этом процесс почечной фильтрации нарушается. Глюкоза, проходя через мембраны клубочков в почках, должна полностью всасываться обратно в канальцах и возвращаться в кровоток.

Для своевременного выявления заболеваний необходимо сдавать общий анализ мочи ежегодно. Ведь часто начало большинства болезней проходит практически бессимптомно.

Также важно знать, что существует 2 формы этого заболевания. Глюкоза в моче повышена может быть в результате наследственного дефекта, при котором нарушен механизм ее транспортировки. В таком случае говорят о первичной почечной глюкозурии. Схожий механизм развития наблюдается и при синдроме Фанкони или глюкоаминовом диабете. При первом заболевании нарушается работа почек, в моче обнаруживают глюкозу, избыток бикарбоната, аминокислот, фосфатов. Оно характеризуется повышенным выделением мочи, болями в костях, слабостью. Глюкоаминовый диабет проявляется сбоями в работе почек, при которых аминокислоты и сахар выводятся с мочой.

Вторичная форма может проявиться во время беременности или в результате отравления.

Для окончательной установки диагноза мало просто выслушать жалобы и собрать анамнез, необходимо достоверно определить, есть ли глюкоза в моче. Причины ее повышения устанавливаются позже. Сложность заключается в том, что глюкозурия часто протекает бессимптомно. Правда, при выраженной потере сахара с мочой некоторые пациенты жалуются на утомляемость, слабость, головокружения, чувство голода, повышение потоотделения. Также больные иногда отмечают боли в мышцах, увеличение суточной мочи, водянистый стул и нарушение сердцебиения.

Так, в рамках исследования назначаются дополнительные анализы. Проверяется количество сахара в сыворотке крови, исследуются все порции этой биологической жидкости, в том числе и суточная. Для анализов разработаны специальные методы определения глюкозы в моче.

Наиболее распространенным способом является выяснение концентрации сахара с помощью специальных полосок с реагентами. Также наличие глюкозы диагностируют, проведя пробу Гайнеса, исследование по методу Бенедикта, Нидлера. Выяснить точную концентрацию можно с помощью поляриметрического исследования или проведя анализ по Альтгаузену.

Если вам надо сдать обычный общий анализ или целенаправленно проверить наличие сахара в моче, то не забывайте об установленных правилах сбора биологического материала. Так, вначале необходимо провести тщательный туалет наружных половых органов с помощью нейтрального мыла. Иначе в биологический материал могут попасть вещества, способствующие быстрому разложению глюкозы.

Мочу необходимо собирать в чистую посуду, желательно использовать специальные аптечные контейнеры или тщательно вымытые и стерилизованные баночки. Закрыв емкость крышкой, ее необходимо доставить в лабораторию, в которой и будут определять содержание глюкозы в моче.

Если вам сказали собрать суточную мочу, то делается это следующим образом. Первая утренняя порция сливается. Сбор начинается со второго в день мочеиспускания в полном объеме. Не забудьте, что в суточный объем необходимо собрать утреннюю мочу следующего дня. Обязательно подмывайтесь перед каждым походом в туалет. Но не надо нести всю бутыль в лабораторию для того, чтобы определить, если ли у вас глюкоза в моче, повышена она или нет. Замеряйте общий объем, перемешайте биологическую жидкость в емкости и отберите до 100 мл в чистую баночку. На специальном листе необходимо указать ваш рост, вес и общее количество собранной мочи. Кстати, на протяжении суток хранить емкость необходимо в холодильнике. Это нужно для того, чтобы не снижалась концентрация глюкозы в моче.

Для диагностики предназначены особые полоски «Глюкотест» длиной 5 см и шириной 0,5 см со специальной светло-желтой полосой. Именно этот участок пропитан ферментами и красителями, он и окрашивается в случае возникновения реакции.

Определение глюкозы в моче проводится следующим образом. Индикаторная полоска помещается в биологическую жидкость так, чтобы реактивы полностью намокли, и сразу извлекается из нее. После этого ее оставляют на 2 минуты. Как пройдет указанное время, окрас полосы сравнивают со специальной шкалой, определяя приблизительную концентрацию сахара. Если она превышает 20 г/л, то цвет полоски становится предельно возможным и далее не изменяется.

Хранить полоски необходимо при температуре до +18 градусов так, чтобы на них не попадали солнечные лучи. Дотрагиваться до индикаторного участка нежелательно.

Для его проведения создают специальный реактив. В него входят кристаллический сульфат меди, едкий натр и глицерин, которые растворяются в дистиллированной воде по отдельности, а затем смешиваются.

Проводят исследование следующим образом: 20 капель реактива прибавляют к 8 мл мочи в пробирке. В результате должен появиться голубоватый окрас. Верхнюю часть пробирки греют до начала кипения. Нижний ее отдел остается холодным для контроля. Если при этом в нагретой части пробирки голубой окрас сменяется на желтый, то, значит, глюкоза в моче повышена.

Существует и другой метод проверки наличия избыточного количества сахара в моче, основанный на тех же свойствах глюкозы восстанавливать закись меди или гидрат закиси меди из гидрата окиси меди в щелочной среде. Для этих целей готовят специальный реактив из цитрата натрия, безводного карбоната натрия, сульфата меди и воды. Из них делают растворы, которые потом смешивают.

Для проведения исследования необходимо до 10 капель мочи и 5 мл готового реактива. Их смешивают в пробирке, нагревают ее на протяжении пары минут и дожидаются остывания. Если в результате появляется осадок, а жидкость окрашивается в желтый, красный или зеленый цвет, то глюкоза в моче есть.

Этот метод считается одним из самых надежных среди качественных исследований.

Метод разработан на основе того, что глюкоза может восстанавливать нитрат висмута в металлический. Для проведения исследования готовят специальный реактив. В него входит нитрат висмута, который растирается в сегнетовой соли, 10% едкий натр. Хранится приготовленный реактив только в бутылках из темного стекла.

Проводится анализ следующим образом. Моча и реактив смешиваются в соотношении 2:1 и варятся на протяжении 3-х минут. Если присутствует глюкоза в моче, то цвет поменяется на коричневый или даже черный, а при стоянии будет виден темный осадок. Но иногда положительный результат может возникнуть не из-за наличия сахара, а в результате реакции на белок или ряд лекарственных препаратов.

С помощью указанного метода проводится не только определение глюкозы в моче, но и выяснение ее концентрации. Делается это в специальном приборе – поляриметре.

Для проведения исследования биологическую жидкость обесцвечивают и удаляют из нее белок. После этого ее заливают в аппарат, ждут несколько минут для затихания колебаний частиц и определяют концентрацию глюкозы. С помощью такого метода можно определить даже значимое повышение глюкозы в моче, ведь оно основано на свойствах этого вещества поворачивать поляризованный луч вправо. Угол вращения будет зависеть от концентрации раствора. Правда, на результаты могут повлиять β-оксимолярная кислота, стрептомицин, тетрациклиновые препараты.

Указанный способ позволяет достаточно точно определить, присутствует ли в глюкоза в моче. Для этого в биологическую жидкость добавляют 10% раствор едкого натра и кипятят ее в течение минуты. После этого ее цвет сравнивают со шкалой стандартов, приготовленной в пробирках. Этот способ используют как альтернативу полиметрическому исследованию, когда необходимо быстро выяснить уровень сахара, а необходимого оборудования нет.

Причиной появления глюкозы в моче у малышей может стать диабет. При этом у новорожденных снижена масса тела, а при появлении проблем замечается отставание в развитии. Но по одному анализу мочи диагноз не ставится, малыша тщательно обследуют, чтобы исключить другие возможные причины развития болезни.

Обнаруженная глюкоза в моче у ребенка вынуждает родителей более тщательно следить за питанием малыша. В его организм должно поступать достаточное количество углеводов, они необходимы для полноценного развития. Также важно следить, чтобы концентрация глюкозы в сыворотке крови находилась в пределах 3,5-5,5 ммоль/л. Для этого необходимо не только правильное питание, но и физические нагрузки.

Многие пациенты не знают, что значит глюкоза в моче. Они начинают паниковать и требовать назначения каких-то препаратов для нормализации состояния. Но наличие сахара в биологической жидкости является лишь сигналом проблем. Это значит, что необходимо проверить, нет ли у вас диабета, проблем с почками или надпочечниками. Также необходимо проконтролировать работу щитовидной железы. Не стоит забывать, что глюкозурия может развиться и из-за отравлений рядом веществ.

Если вы страдаете от глюкозурии и хотите узнать, как предотвратить развитие болезни у детей, то медицина тут бессильна. Никакой специфической профилактики не существует. Важно просто следить за питанием, давать необходимую физическую нагрузку, и тогда есть шанс, что организм будет работать нормально, несмотря на предрасположенность к развитию заболевания. Ведь чаще всего глюкоза в моче у ребенка появляется вследствие генных мутаций. А избежать этого нельзя. Как правило, ломается ген, отвечающий за белок, который необходим для всасывания в кровь сахара в почках. Даже если у родителей нет проблем, но у них есть малыш с глюкозурией, то при планировании следующих беременностей им в обязательном порядке необходимо посетить генетика для оценки возможных рисков.

источник

· Автоматизированные методы определения глюкозы. Уникальную специфичность глюкозооксидазной реакции использовали для создания анализатора ЭКСАН-Г и ЭКСАН-ГМ. Принцип метода: при иммобилизации глюкозооксидазы на одной стороне мембраны с небольшим размером пор и ее размещении поверх рабочего платинового электрода система начинает функционировать как биосенсор глюкозы: диффузия глюкозы через наружную мембрану к слою фермента приводит к образованию потока перекиси водорода к поверхности электрода, ее количество оценивается по увеличению тока электрода. Скорость нарастания тока прямо пропорциональна концентрации глюкозы.

· Определение глюкозы в крови с использованием портативных глюкометров. В настоящее время можно насчитать более 25 разных моделей глюкометров, которые широко используются больными сахарным диабетом для контроля глюкозы в крови. Большая часть глюкометров основана на технологии«сухой химии» и отражательной фотометрии. В данных анализаторах используются тест-полоски, содержащие глюкозооксидазу или гексокиназу. Каплю цельной крови наносят на полоску, которая содержит все реактивы, необходимые для реакции. Сам анализатор представляет собой миниатюрный фотометр, определяющий величину отраженного светового потока от реактивной зоны полоски, обусловленную изменением ее окраски в ходе ферментативной реакции. Вне зависимости от конструктивных особенностей анализатора, ход определения глюкозы с его помощью является несложной процедурой и состоит в получении капли крови пациента путем укола в палец, нанесением ее на полоску и размещением полоски в глюкометре. Через 20-30 с на экране указывается концентрация глюкозы. Большинство глюкометров способны определять концентрацию глюкозы в крови в пределах 1,7-33,3 ммоль/л. Широко популярными во всем мире в настоящее являются глюкометры One Touch и тест-полоски к ним производства компании Life Scan (США), которые удачно сочетают в себе аналитическую точность количественного ферментативного метода со скоростью и простотой «сухой химии».

· Применение тест-полосок.Для экспресс-выявления глюкозы в моче и ее полуколичественного определения используются тест-полоски: «Глюкотест» фирмы «Рош-Диагностика»; «Глюкофан» чешской фирмы «Лахема»; «Уритест-1», «Уритест-2» фирмы «Кормэй» и др. Для полуколичественного визуального определения глюкозы в капиллярной крови (1-14 ммоль/л) используют диагностические полоски: «ТриФАН», «Пентафан», «ГексаФАН», «Нона-ФАН», «МилиФАН», «Гемо-Глюкотест» и др. В основе определения лежит методология «сухой химии»: реагентные зоны тест-полосок содержат сухие реактивы (ферменты и/или неферменты), которые воздействуют на определяемое вещество с изменением окраски индикаторной зоны. Из использующих методологию «сухой химии» настольных, малогабаритных приборов известны анализаторы: “Reflotron Y”, “Clinitek”, «Мидитрон» и др., которые позволяют выполнить исследование как отдельных тестов (глюкозы, АЛТ, АСТ, ЩФ, α-амилазы, мочевины и др.), так и профилей: кардиального, печеночного и других.

3.Качественные реакции на глюкозу, фруктозу, пентозы и дисахариды в моче.

3.1. Реакция Троммера. Принцип метода:реакция основана на способности глюкозы (сахара) восстанавливать гидрат меди Cu(OH)₂ в гидрат закиси CuOH и закись меди Cu₂O – желто-красный осадок в щелочной среде при нагревании. Гидрат меди образуется при смешивании раствора CuSO₄ с раствором NaOH:CuSO₄ + 2 NaOH → Cu(OH)₂ + Na₂SO₄
затем C₆H₁₂O₆ + 2 Cu(OH)₂ → C₆H₁₂O₇ + Cu₂O + 2H₂O
Реакция Троммера лежит в основе пробы Фелинга и пробы Гайнеса-Акимова, которые используются для открытия глюкозы в моче.

3.2. Реакция Ниляндера. Принцип метода: реакция основана на способности сахара (глюкозы) восстанавливать азотнокислый висмут в металлический висмут, при этом образуется темно-бурый или черный осадок: Bi(OH₎₂N_O₃ + NaOH → Bi(OH₎₃ + NaNO₃ затем 3C₆H₁₂O₆ + 2 Bi(OH)₃ →3 C₆H₁₂O₇ + 2Bi + 3H₂O. Реакция проводится при 100 о С. Реакция Ниландера используется для открытия глюкозы в моче.

3.3. Экспресс-метод с применением готового набора реактивов.

3.4. Экспресс-тесты с использованием диагностических полосок. Диагностическое значение определения глюкозы в моче. В моче здорового человека содержится минимальное количество глюкозы, которое не обнаруживается качественными пробами. Глюкозурия – это выделение глюкозы с мочой. Появление глюкозы в моче зависит от ее концентрации в крови, от скорости клубочковой фильтрации и от состояния реабсорбции глюкозы в тубулярной части нефрона. Глюкоза появляется в моче, когда ее концентрация в крови превышаетпочечный порог, т.е. когда в крови ее больше8,88 — 9,99 ммоль/л (для взрослых). Глюкозурия может быть физиологической, обусловленной употреблением большого количества углеводов с пищей. Глюкозурия наблюдается после эмоциональных возбуждений, стрессовых состояний, после обширных хирургических вмешательств. Глюкозурия может быть инсулярной и экстраинсулярной. Инсулярная глюкозурия наблюдается при сахарном диабете и заболеваниях поджелудочной железы. Экстраинсулярная глюкозурия наблюдается при гиперпродукции АКТГ, глюкокортикоидов, адреналина, травмах ЦНС, судорогах и др. Глюкозурии почечной природы, связанные с нарушением реабсорбции глюкозы в проксимальном канальце могут носить наследственный характер или являться следствием хронических заболеваний почек, ОПН и др.

3.5. Проба Селиванова на фруктозу. Принцип метода: метод основан на превращении фруктозы при нагревании и в присутствии соляной кислоты в гидроксиметилфурол, который конденсируется с резорцином, образуя соединение красного цвета. Оценку пробы проводят в момент закипания, при более длительном нагревании положительную реакцию может давать и глюкоза. Проба Селиванива используется для обнаружения фруктозы в моче при наследственных нарушениях обмена фруктозы.

3.6. Проба Биаля на пентозы. Принцип метода: метод основан на образовании яркой желто-зеленой окраски при взаимодействии пентоз с орциновым реактивом при нагревании. Проба Биаля используется для открытия пентоз в моче. Пентозурия возникает из-за недостатка белка, участвующего в транспорте пентоз и способствующего их реабсорбции в канальцах почек.

3.7. Обнаружение лактозы и мальтозы в моче. Проба Велька. Принцип метода:лактоза и мальтоза в щелочной среде образуют при нагревании соединения красно-коричневого цвета. В работе используют концентрированный раствор аммиака и 20% раствор KOH. Лактоза (молочный сахар) и мальтоза появляются в моче при нарушении переваривания этих дисахаридов под действием кишечных ферментов: лактазы и мальтазы, соответственно (как правило, недостаточность пищеварительных ферментов носит врожденный характер).

источник

Унифицированный метод определения с помощью индикаторных полосок
Метод основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы; образовавшаяся при этом перекись водорода разлагается пероксидазой и окисляет краситель. Изменение окраски красителя при окислении свидетельствует о присутствии глюкозы в моче.

Реактивная бумага “Глюкотест” представляет собой полоски бумаги 0,5 ґ 5 см, имеющие поперечную полосу светло-желтого цвета, пропитанную раствором ферментов и красителя. С помощью бумаги “Глюкотест” можно обнаружить глюкозу в моче и ориентировочно определить ее концентрацию.

Ход исследования
Индикаторную бумагу погружают в исследуемую мочу так, чтобы желтая полоса с реактивами оказалась смоченной, после этого ее немедленно извлекают из мочи и на 2 мин оставляют на пластмассовой пластинке. По истечении 2 мин сразу же сравнивают изменившуюся окраску цветной полосы на бумаге со шкалой, имеющейся в комплекте.

Содержание глюкозы в моче определяют по наиболее совпадающему со шкалой цвету полоски.

Полоски хранят при температуре от +8 до +18 °С, избегая попадания на них прямых солнечных лучей; не рекомендуется дотрагиваться рукой до цветной шкалы полоски. Исследуют свежесобранную мочу; при содержании в моче глюкозы более 20 г/л интенсивность окраски цветной полосы становится предельной (соответствует 2% по шкале) и далее не меняется.

Унифицированные методы обнаружения глюкозы в моче. Проба Гайнеса
Можно использовать готовый набор реактивов.

Метод основан на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси меди (желтого цвета) и закись меди (красного цвета). Для того чтобы из гидрата окиси меди при нагревании не образовался черный осадок окиси меди, к реактиву добавляют глицерин, гидроксильные группы которого связывают гидрат окиси меди.

Необходимые реактивы
1. Реактив Гайнеса: 13,3 г кристаллического сульфата меди (СuSO4 ґ 5Н2О) растворяют в 400 мл дистиллированной воды.

2. 50 г едкого натра растворяют в 400 мл дистиллированной воды.

3. 15 г глицерина растворяют в 200 мл дистиллированной воды. Далее первый и второй растворы смешивают и тотчас же приливают третий раствор. Реактив стоек.

Ход исследования
К 6—8 мл мочи прибавляют 20 капель реактива до появления голубоватой окраски, смешивают и нагревают верхнюю часть пробирки до начала кипения. Нижняя часть пробирки — контроль. При наличии глюкозы в моче появляется желтая окраска в верхней части пробирки.

При бактериурии глюкоза мочи быстро разлагается.

Проба Бенедикта
Реакция основана на свойстве глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в щелочной среде в гидрат закиси меди (желтый цвет) или закись меди (красный цвет).

Необходимые реактивы
1. В однолитровую мерную колбу наливают 700 мл воды, добавляют 173 г цитрата натрия, 100 г безводного (или 200 г кристаллического) карбоната натрия. Нагревают до растворения.

2. Отдельно растворяют 17,3 г сульфата меди в 100 мл воды.

Смешивают оба раствора, непрерывно взбалтывая, после охлаждения доливают водой до 1 л.

Ход исследования
В пробирку наливают 5 мл реактива и прибавляют 8—10 капель мочи. Пробу нагревают в течение 2 мин на пламени или 5 мин в кипящей водяной бане. Дают пробирке остыть в течение 5—7 мин. При наличии сахара появляется зеленая, желтая или красная окраска жидкости с осадком. При зеленой окраске без наличия осадка проба считается отрицательной.

Проба Бенедикта является самой надежной, так как при большом разведении мочи (8—10 капель мочи на 5 мл реактива) восстанавливающее действие других редуцирующих веществ мочи выражено слабо.

Проба Нилендера
Проба основана на восстановлении глюкозой нитрата висмута в металлический.

Унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы
Метод основан на использовании свойства раствора глюкозы вращать плоскость поляризованного луча вправо. Угол вращения пропорционален концентрации глюкозы в растворе.
Точность поляриметра проверяют, исследуя стандартный раствор глюкозы, но этот раствор годен для работы только через 24 ч после его приготовления.
Определению могут мешать β-оксимасляная кислота, препараты тетрациклинового ряда, стрептомицин.

Дата добавления: 2015-09-20 ; просмотров: 967 | Нарушение авторских прав

источник

Метод основан на цветной реакции, получаемой при нагревании раствора глюкозы со щелочью. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы в моче.

Реактивы: 10% раствор едкого натра, дист. вода.

Ø К 2 мл мочи в пробирке добавить 1 мл 10% р-р едкого натра

Ø Выдержать 5 минут на кипящей водяной бане. При наличии глюкозы в моче образуется окрашивание (от жёлтого до бурого).

Ø Добавить 4 мл дист. воды

Ø ФЭК: кювета 10 мм, зеленый светофильтр, контроль дист. вода

Ø Расчет по калибровочному графику

Можно приготовить цветную шкалу в пробирках (стандарты). Готовят следующие растворы глюкозы: 0,5; 1; 1,5; 2; 3 и 4% и обрабатывают их так же, как исследуемую мочу.

БИОМЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ: Фотоэлектроколориметрический метод анализа относится к методам определения концентрации вещества в окрашенном растворе по интенсивности окраски. Метод широко применяется в медицине для определения концентраций окрашенных веществ в биологических жидкостях и тканях. Он может быть использован для измерения концентраций и неокрашенных веществ, если эти вещества могут быть переведены в окрашенное состояние с помощью подходящего реагента.

Читайте также: Что такое убг в моче

Самостоятельная работа с исследовательским этапом

ü прочитать и законспектировать методы определения глюкозы в моче в рабочих тетрадях;

ü затем получить у преподавателя образцы биологического материала;

ü провести самостоятельную исследовательскую работу пользуясь методическим материалом;

ü полученные результаты исследования оформить согласно требованиям заполнения бланков анализа.

Задание №1. Качественное определение глюкозы в моче методом Гайнеса-Акимова

Примечание:Моча должна быть прозрачной и не содержать белок.

Посуда, оборудование и реактивы:

· химические пробирки · штативы для пробирок · градуированные пипетки · пастеровские пипетки · резиновые груши · реактив Гайнеса · водяная баня

Ход исследования:

Ø В пробирку наливают 3-4 мл реактива Гайнеса и добавляют 8-12 капель мочи. Ø Нагревают на водяной бане 1 минуту.

Интерпретация полученных результатов:

При наличии глюкозы в моче цвет синего реактива меняется от зеленого, желтого до кирпично- красного и появляется осадок

Задание №2. Качественное определение глюкозы в моче с тест полосками (полуколичественное).

Примечание: Полоски хранят при температуре от +8 до +18 °С, избегая попадания на них прямых солнечных лучей; не рекомендуется дотрагиваться рукой до цветной шкалы полоски. ВНИМАНИЕ! При наличии на посуде для сбора мочи остатков моющих средств (плохо вымытая и отмытая посуда) существует большая вероятность возникновения ложноположительных или ложноотрицательных результатов исследования.

Посуда, оборудование, реактивы

· тест-полоски для определения глюкозы

Ход определения:

Мочу перемешивают. Тест-полоску погружают в исследуемую мочу так, чтобы полоса с реактивами оказалась смоченной, после этого ее немедленно извлекают из мочи и на 2 мин оставляют на пластмассовой пластинке.

Интерпретация полученных результатов:

По истечении 2 мин сразу же сравнивают изменившуюся окраску цветной полосы на бумаге со шкалой, имеющейся в комплекте

Задание №3. Запишите полученные данные анализа мочи на глюкозу в рабочих тетрадях

Проба мочи № ___

Показатели	Результат
Количество доставленной мочи на анализ	Диагностического значения не имеет
Цвет мочи	Различные оттенки жёлтого цвета
Прозрачность мочи	Прозрачная
Запах мочи	Специфический
Реакция мочи или рН	Слабо-кислая
Удельный вес (относительная плотность) мочи	1,026
Белок в моче	«+» или отсутствует
Глюкоза в моче	«+» или отсутствует

Задание №4. Количественное определение глюкозы в моче на ФЭКе

Примечание:Моча должна быть прозрачной и не содержать белок, т.к. белок является оптически активным веществом и коагулирует по действием реактивов и нагревания.

Посуда, оборудование, реактивы

· химические пробирки · штативы для пробирок · градуированные пипетки на 1 мл · резиновые груши · 10% раствор едкого натра · дистиллированная вода · водяная баня · песочные часы на 5 минут · ФЭК (фотоэлектроколориметр) · кювета 10 мм

Ход определения:

К 2 мл мочи в пробирке добавить 1 мл 10% р-р едкого натра. Выдержать 5 минут на кипящей водяной бане. Добавить 4 мл дист. воды Измерить на фотоэлектроколориметре (зеленый светофильтр) против контроля в кювете длиной оптического пути 10 мм. Контролем дист. водой. Из 40% раствора глюкозы (можно использовать ампулы глюкозы для инъекций) приготовить 20 мл 4% раствора (в качестве разводящей жидкости использовать мочу, не содержащую глюкозу). Из 4% раствора приготовить разведения: 4%, 3%, 2%, 1,5%, 1%, 0,5% по схеме:

Концентрация	4%	3%	2%	1,5%	1,0%	0,5%
Объем 4%р-ра в мл	4,0	3,0	2,0	1,5	1,0	0,5
Объем разводящей жидкости (мочи) мл	—	1,0	2,0	2,5	3,0	3,5

Интерпретация полученных результатов:

Расчет ведут по калибровочному графику, учитывая показания экстинции (оптическая плотность).

Задание №5. Запишите полученные данные анализа мочи на глюкозу в рабочих тетрадях

Проба мочи № ___

Показатели	Результат
Количество доставленной мочи на анализ	диагностического значения не имеет
Цвет мочи	водянистая
Прозрачность мочи	прозрачная
Запах мочи	специфический
Реакция мочи или рН	Кислая
Удельный вес (относительная плотность) мочи	1,035
Белок в моче	0,25г\л
Глюкоза в моче	0,5%

В нормальной моче глюкоза содержится в минимальных количествах, которые не обнаруживаются обычными методами, применяемыми в лаборатории.

Глюкозы в моче в норме НЕТ.

Контрольные вопросы и задания

А. Ответьте на поставленные вопросы, используя рабочую тетрадь

1. Раскройте понятие «глюкозурия».

2. Назовите классификацию глюкозурий.

3. Назовите причины развития алиментарной глюкозурии.

4. Назовите причины развития эмоциональной глюкозурии.

5. Перечислите патологические глюкозурии и причины их развития.

6. При какой концентрации глюкозы в крови она начинает фильтроваться в мочу?

7. Какой вид глюкозурии можно предположить при следующих лабораторных показателях: уровень глюкозы в крови – 5,0 ммоль/л; реакция на сахар в моче положительная?

8. Расскажите методику обнаружения глюкозы в моче реакцией Гайнеса – Акимова.

9. Принцип метода Гайнеса- Акимова, реактивы, особенности их приготовления.

10. Как сделать цветную шкалу Альтгаузина.

11. Сбор мочи больного сахарным диабетом на анализ.

12. Что может повлиять на анализ глюкозы в моче?

13. Как приготовит 4% раствор глюкозы 10 мл?

14. Почему белок в моче мешает определению глюкозы на ФЭКе?

15. Почему моча больного сахарным диабетом водянистого цвета.

Б.Запишите в рабочей тетради термины и дайте им обозначение, используя изученный материал

№	Термин	Обозначение
Глюкозурия
Гликемия	Наличие глюкозы в крови
Гипергликемия
Сахарный диабет	Заболевание, обусловленное абсолютной или относительной недостаточностью инсулина и характеризующееся нарушением обмена углеводов с повышением количества глюкозы в крови и моче, а также другими нарушениями обмена веществ
Инсулин
Глюкурез
Полиурия
Панкреатит	Воспаление поджелудочной железы
Суточный диурез
Почечный диабет	Заболевание, для которого характерно повышенное содержание глюкозы в моче при нормальном уровне сахара в крови. Данная аномалия связана с дисфункцией транспорта глюкозы в канальцевой системе почек

1. Знать теоретический и практический материал.

2. Отвечать на контрольные вопросы.

4. Подготовить лекционный материал:

— причины и виды глюкозурий.

Литература для самостоятельной подготовки:

Камышников В.С. Методы клинических лабораторных исследований М: МЕДпресс-информ, 2011. Стр. 37-41, 57-63

Кишкун А.А. Клиническая лабораторная диагностика. – М.: ГЭОТАР – Медиа, 2008.

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ — конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Папиллярные узоры пальцев рук — маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

источник

Диагностическое значение. Увеличение содержания глюкозы в крови выше пределов нормы носит название «гипергликемия», появление же глюкозы в моче именуется глюкозурией. Если в результате проведенных исследований выявляется повышение концентрации глюкозы в крови и наличие глюкозы и кетоновых тел в моче, этого достаточно для подтверждения диагноза сахарного диабета (СД). Заболевания других внутренних органов не дают всей триады: гипергликемии, глюкозурии и кетонурии. Присутствие кетоновых тел в моче свидетельствует о грубых нарушениях не только углеводного, но и липидного обмена, что имеет место главным образом при заболеваниях поджелудочной железы. Таким образом, определение содержания глюкозы в крови, моче и выявление гипер- и гипогликемии, глюкозурии имеют важное клинико-диагностическое значение.

Гипергликемия. Повышение уровня глюкозы в крови обусловлено множеством причин, в соответствии с которыми различают две основные группы гипергликемий (ГГК):

инсулярные — связанные с недостаточным содержанием в организме инсулина или обусловленные неэффективностью его действия;

экстраинсулярные (внеинсулярные) — не зависящие от влияния инсулина.

Иначе говоря, гипергликемии подразделяются на панкреатические, возникающие при поражении поджелудочной железы и ее инсулярного аппарата, и непанкреатические, включайте алиментарные, нервные, печеночные и гормональные (при гиперпродукции гормонов, приводящих к повышению содержания глюкозы в крови).

Наиболее существенное значение в формировании ГГК имеют следующие процессы: усиленный распад гликогена; повышенный неоглюкогенез (образование глюкозы из продуктов распада липидов и белков, т.е. неуглеводов); торможение синтеза гликогена; снижение утилизации глюкозы тканями под влиянием гормональных антагонистов инсулина: соматотропина, глюкагона, адреналина, кортикотропина, глюкокортикоидов, тироксина, тиротропина.

Алиментарные гипергликемии отмечаются при избыточном поступлении глюкозы в кровь.

«Печеночные» гипергликемии встречаются при диффузных поражениях печени.

Стойкая и выраженная гипергликемия чаще всего сопровождает сахарный диабет. Принято выделять инсулинзависимый сахарный диабет и инсулиннезависимый сахарный диабет.

На уровень глюкозы в крови влияет и состояние клубочковой фильтрации.

Гипергликемия вызывает гликозилирование различных белков — гемоглобина, альбумина, белков базальной мембраны, что приводит к изменению их свойств, повышению иммуногенности и развитию сосудистых поражений.

Избыток глюкозы «вступает» на сорбитоловый путь обмена, что приводит к отложению сорбита в мембранах клубочков почек (это обусловливает повышение почечного порога для глюкозы, исчезновение ее из мочи), в хрусталике глаза (вследствие чего развивается катаракта), в стенках сосудов (формируется артериолосклероз).

Уровень глюкозы в крови повышается также при некоторых заболеваниях печени, гемохроматозе (пигментном циррозе печени).

Выделяют гипергликемии центрального происхождения — вследствии механического, токсического, гипоксическо-го раздражения клеток головного мозга. Неврогенные ГГК наблюдаются при травме головного мозга, внутричерепном кровоизлиянии, энцефалите, шоке, тяжелой интоксикации, лихорадке, энцефалопатиях и некоторых других состояниях.

Повышение концентрации глюкозы в крови отмечается в результате парентерального введения углеводов, а также при введении гормональных препаратов — кортикостероидов, кортикотропина; диуретиков, гипотензивных средств, салицилатов и других препаратов, блокирующих процессы фосфорилирования глюкозы.

Гипогликемия (ГПГ) — снижение содержания глюкозы в крови — чаще всего связана с абсолютным или относительным повышением уровня инсулина в крови.

Гиперинсулинемия ингибирует гликогенолиз и тормозит процессы глюконеогенеза. Снижение продукции глюкозы в условиях продолжающейся утилизации ее мозгом и другими тканями приводит к гипогликемии.

Первичная гиперинсулинемия наблюдается при заболеваниях поджелудочной железы, сопровождающихся гиперсекрецией инсулина (гиперплазия бета-клеток островков Лангерганса, дегенерация альфа-клеток и др.). Выявляется, прежде всего, при инсулинпродуцирующих опухолях островков поджелудочной железы.

Вторичная гиперинсулинемия развивается у больных с поражением печени, желудочно-кишечного тракта, центральной нервной системы, а также при недостаточной выработке контринсулярных гормонов.

Внепанкреатическая гипогликемия отмечается в результате нарушения баланса между выраженностью процессов гликогенолиза и глюконеогенеза в печени при острых и хронических гепатитах, циррозах, острой и подострой дистрофии печени, отравлениях мышьяком, фосфором, при длительной механической желтухе, застойной печени, первичном или метастатическом раке печени.

Снижение концентрации глюкозы в крови часто наблюдается у больных животных при неукротимой рвоте, анорексии, уремии, обильной лактации и глюкозурии у беременных. Гипогликемия может возникать при поражении желудка и кишечника, при хирургическом удалении части тонкого кишечника; при нарушении всасывания глюкозы в кишечнике (энтериты, энтероколиты, синдром мальабсорбции, целиакия, муковисцидоз, дисбактериозы, длительные поносы), лихорадке, интенсивной физической нагрузке, голодании, переохлаждении.

Гипогликемия сопровождает многие эндокринные заболевания, в том числе гипофизарную и надпочечниковую недостаточность, гипофункцию щитовидной железы (микседема). Она встречается и при сахарном диабете: быстрое снижение концентрации глюкозы в крови больных животных приводит к развитию гипогликемической комы, тогда как при медленном уменьшении ее коматозное состояние не возникает.

Гипогликемия может быть центрального при энцефалите, опухоли мозга.

Встречается и спонтанная гипогликемия, возникающая после кратковременной алиментарной гипергликемии, вызванной обильным потреблением корма, богатой углеводами.

Гипогликемия, сопровождающаяся кетозом, обнаруживается у новорожденных животных (поросят) вследствие дефицита аминокислоты аланина, отравлениях хлороформом и его солями недостатке в организме микроэлементов, ацидозе, гипокенезии, остеодистрофии..

Для дифференциальной диагностики гипогликемических состояний используют различные нагрузочные пробы — тесты толерантности к глюкозе, пробы с адреналином, преднизолоном и др.

Глюкозурия. В моче здоровых животных глюкоза практически не обнаруживается. Профильтровавшись через мембраны клубочков, глюкоза вновь реабсорбируется в проксимальных канальцах нефронов. В этом процессе принимают участие ферменты гексокиназа (глюкокиназа), фосфорилирующая глюкозу, и щелочная фосфатаза. Под влиянием последней происходит отщепление остатка фосфорной кислоты и глюкоза поступает в кровоток.

В том случае, когда гипергликемия достигает величины почечного порога, может присоединиться глюкозурия. Однако появление глюкозы в моче зависит не только от концентрации ее в крови. Это определяется также соотношением между количеством профильтровавшейся и реабсорбируемой в канальцах клубочков глюкозы за 1 мин.

Почечный порог глюкозы зависит от многих факторов: величины гипергликемии, продолжительности ее, состояния почек и многих других причин.

Различают две группы глюкозурии: гипергликемическую и нормогликемическую.

Гипергликемическая глюкозурия наблюдается при эндокринных заболеваниях (сахарный диабет, тиреотоксикоз); поражении центральной нервной системы (травмы, опухоли головного мозга, энцефалиты); заболеваниях поджелудочной железы (панкреатиты, опухоли); болезнях печени (гепатиты, циррозы, гемохроматоз); заболеваниях сердечнососудистой системы; интоксикации (воспаление легких, инфекционные заболевания, диспепсии новорожденных, ожоги, отморожения); лечении глюкокортикоидами и адренокортикотропным гормоном. Потребление корма, богатой углеводами, может вызвать алиментарную глюкозурию, которая исчезает через 2—3 ч после появления.

Нормогликемическая глюкозурия связана, главным образом, с нарушением реабсорбции глюкозы в почечных канальцах. Основными причинами ее являются интоксикация ртутью, окисью углерода, стрихнином, снотворными препаратами, хлороформом, морфином, кодеином и др. Нормогликемическая глюкозурия встречается при гломерулонефрите, хроническом пиелонефрите, нефросклерозе; беременности.

Выделение глюкозы с мочой сопровождается высоким диурезом, поскольку глюкоза как осмотически активное вещество увлекает с собой жидкость. Этому способствует и снижение реабсорбции воды в почечных канальцах.

Хотя глюкоза (как и белок) в моче здоровых животных обычными методами исследования не выявляется, она может обнаруживаться в ней при некоторых физиологических состояниях (физиологическая глюкозурия): при потреблении большого количества углеводов (алиментарная глюкозурия), а также от воздействия некоторых лекарственных препаратов (преднизолона, кофеина и др.)

При обнаружении глюкозы в моче следует установить ее содержание в крови: тем самым можно составить представление о величине порога реабсорбции глюкозы.

К наиболее важным в диагностическом отношении метаболитам углеводного обмена следует отнести пировиноградную и молочную кислоту.

Пировиноградная кислота (ПВК) — один из центральных метаболитов углеводного обмена. Она образуется в процессе распада гликогена и глюкозы в тканях, при окислении (дегидрировании) молочной кислоты (МК), а также в результате превращения ряда аминокислот. При окислительном декарбоксилировании ПВК возникает ацетил-КоА, который вступает в цикл Кребса. Окисление ацетил-КоА в цикле трикарбоновых кислот обеспечивает синтез АТФ.

ПВК — один из основных субстратов гликонеогенеза. Она принимает участие в биосинтезе N-ацетилнейраминовой кислоты, глюкозы, гликогена, оказывает большое влияние на протекание процессов обмена веществ в центральной нервной системе.

Молочная кислота, будучи конечным продуктом гликолиза и гликогенолиза, образуется в организме в результате восстановления пировиноградной кислоты в анаэробных условиях. С током крови она поступает в печень, где снова может быть превращена в глюкозу или гликоген.

Клиника-диагностическое значение исследования пировиноградной кислоты в крови. Содержание ПВК увеличивается при гипоксических состояниях, вызванных тяжелой сердечно-сосудистой, легочной, кардиореспираторной недостаточностью, анемиями; при злокачественных новообразованиях, остром гепатите (в поздних стадиях) и других заболеваниях печени (наиболее выражено в терминальных стадиях цирроза печени), токсикозах, инсулинзависимом сахарном диабете, уремии, гепатоцеребральной дистрофии, а также после введения камфары, стрихнина, адреналина и при больших физических нагрузках, тетании, судорогах (при эпилепсии).

К увеличению уровня ПВК приводят В₁-витаминная недостаточность, токсическое действие ацетилсалициловой кислоты (аспирина), вызывающее при введении в большой дозе метаболический ацидоз; отравления ртутью, мышьяком, сурьмой.

Содержание ПВК в спинномозговой жидкости резко повышается при травматических заболеваниях ЦНС, воспалительных процессах — менингите, абсцессе мозга.

Все факторы, обусловливающие увеличение концентрации ПВК, обычно приводят к возрастанию уровня молочной кислоты.

Клиника-диагностическое значение определения содержания молочной кислоты в крови. Молочная кислота является конечным продуктом гликолиза и гликогенолиза. Значительное количество ее образуется в мышцах. Из мышечной ткани МК с током крови поступает в печень, где используется для образования гликогена. Кроме того, часть молочной кислоты из крови поглощается сердечной мышцей, утилизирующей ее в качестве энергетического материала.

Уровень МК в крови увеличивается при гипоксических состояниях (вследствие неадекватной доставки кислорода к тканям), в том числе вызванных внезапно развывшимся большим кровотечением, тяжелой анемией, острой застойной сердечной недостаточностью, циркуляторным коллапсом и другими заболеваниями сердечно-сосудистой системы, сопровождавшимися цианозом (лактатацидоз); при экстракорпоральном кровообращении, остром гнойном воспалительном поражении тканей (особенно много МК накапливается в воспалительном экссудате), острых гепатитах, циррозе печени, почечной недостаточности, злокачественных новообразованиях, сахарном диабете, легкой степени уремии, инфекциях (особенно пиелонефрите), остром септическом эндокардите, полиомиелите, тяжелых заболеваниях сосудов, лейкозах, интенсивных и продолжительных мышечных нагрузках, эпилепсии, тетании, столбняке, судорожных состояниях, гипервентиляции.

Уровень лактата быстро нарастает и в неправильно хранящихся (без охлаждения) пробах биоматериала.

источник

Что представляет собой определение глюкозы в моче?

Исследование мочи на глюкозу (сахар) – лабораторное исследование, в ходе которого с помощью особых реакций и реактивов в моче выявляют глюкозу. Обнаружение её считается патологией, так как в норме почки практически полностью фильтруют кровь от глюкозы – важного питательного вещества, сохраняя её в организме с целью энергообеспечения последнего.

В современной медицинской практике используют два анализа для определения глюкозы в моче. Первый (ориентировочный) – общий анализ утренней мочи. Второй (более точный) – суточный анализ, учитывающий колебания глюкозы в моче в течение дня.

В каких случаях требуется определение глюкозы в моче?

В качестве скрининга проводят общий анализ мочи. Это исследование показано при подозрении на инфекции мочевых путей, другие инфекционные и неинфекционные заболевания, при оформлении справок, медицинских книжек, в ходе диспансеризации, при поступлении на стационарное лечение. Направление на общий анализ мочи дают врачи всех специальностей. Чаще других это делают участковые терапевты, врачи общей практики.

Суточный тест мочи на сахар более специфичен, и назначают его при подозрении на изменения в поджелудочной железе (панкреатит, опухоли), эндокринологическую патологию (синдром Иценко-Кушинга, акромегалию, феохромоцитому, тиреотоксикоз). Главным показанием для проведения анализа является сахарный диабет (подозрение на него, контроль течения заболевания).

Глюкоза начинает выделяться с мочой, если её уровень в крови значительно повышен, и почки не справляются с фильтрацией. Это состояние сопровождается жаждой, сухостью во рту, употреблением большого количества жидкости, обильным мочеиспусканием. Работает с такими пациентами врач-диабетолог или эндокринолог, но заподозрить заболевание может врач любой специальности (чаще терапевт).

Как правильно подготовиться к исследованию и собрать материал?

Если планируется анализ утренней мочи, то после туалета наружных половых органов пациент спускает первую порцию мочи в унитаз, а в чистую сухую посуду (небольшую баночку или специальный контейнер) собирает среднюю порцию мочи, завершая мочеиспускание снова в унитаз. Для исследования достаточно собрать 150–200 мл материала.

Если требуется провести суточный анализ, то мочу собирают в чистый большой контейнер (обычно это трехлитровая банка) в течение суток. В 6 часов утра первых суток первую порцию мочи спускают в унитаз. Последний забор мочи производят в 6 часов утра вторых суток. После этого фиксируют общий объём полученной мочи, далее собранную мочу перемешивают и 150–200 мл отливают в небольшой чистый контейнер, который доставляют в лабораторию для исследования. Посуда, в которую собирают мочу, все это время должна храниться в холодильнике.

Нормальным считается отсутствие глюкозы в моче (допускается до 0,8 ммоль/л или до 1,6 ммоль за сутки). Следует помнить, что повышение уровня сахара в моче может стать следствием употребления большого количества сладостей, приёма гормональных препаратов, беременности.

Анализ утренней мочи на глюкозу не всегда является показательным, так как утром количество глюкозы в моче может быть несколько повышенным даже при отсутствии патологии. Суточный анализ связан с некоторыми неудобствами (при посещении работы, общественных мест) из-за необходимости сбора мочи только в одну специальную ёмкость.

Что делать при «плохом» анализе?

При обнаружении глюкозы в моче диагностический поиск не заканчивается, а только начинается. Если не были проведены ранее, врач назначает биохимический анализ крови на содержание глюкозы, тест с сахарной нагрузкой. По показаниям исследуют гормональный статус, выполняют УЗИ щитовидной, поджелудочной желез, почек и надпочечников.

Информация размещена на сайте только для ознакомления. Обязательно необходима консультация со специалистом.
Если вы нашли ошибку в тексте, некорректный отзыв или неправильную информацию в описании, то просим вас сообщать об этом администратору сайта.

Отзывы размещенные на данном сайте являются личным мнением лиц их написавших. Не занимайтесь самолечением!

источник

В моче здорового человека глюкоза содержится в очень низкой концентрации (0,06 — 0,083 ммоль/л). Поэтому, а также из-за низкой чувствительности методов, она не выявляется при исследовании мочи в клинико-диагностических лабораториях. Появление глюкозы в моче называется глюкозурией. Глюкозурия обычно сопровождается полиурией при повышении осмолярности мочи, поскольку глюкоза — осмотически активное вещество. Между степенью глюкозурии и полиурии обычно наблюдается параллелизм.

Глюкоза является пороговым веществом, то есть для нее имеется «почечный порог выведения» — та концентрация вещества в крови и «первичной» моче, при которой оно уже не может быть полностью реабсорбировано в канальцах и появляется в конечной моче. Почечный порог определяется ферментной системой почечного эпителия и, следовательно, в значительной степени индивидуален. По данным разных авторов почечный порог для глюкозы у взрослого человека с нормально функционирующими почками составляет 8,8 — 10 ммоль/л и снижается с возрастом (из-за снижения реабсорбции). У ребенка почечный порог выше (10,45 — 12,65 ммоль/л).

Как для любого порогового вещества, появление глюкозы в моче зависит от трех факторов: от концентрации глюкозы в крови, от процесса фильтрации ее в клубочках (гломерулярный клиренс) и от реабсорбции глюкозы в канальцах нефрона.

В норме объем клубочковой фильтрации составляет 130 мл/мин. Реабсорбция глюкозы почечным эпителием за 1 мин колеблется от 200 до 350 мг. Если при таком же клубочковом фильтрате концентрация глюкозы в крови превысит 10 ммоль/л, то в канальцы поступит глюкозы больше и часть ее не сможет реабсорбироваться и выделится с мочой.

Снижение объема клубочковой фильтрации (например до 50 мл/мин) не будет сопровождаться глюкозурией даже при 15 ммоль/л (300 мг/%) глюкозы в крови, так как в канальцы поступает количество глюкозы, не превышающее их резорбционной способности. Поэтому при некоторых хронических заболеваниях почек порог глюкозы повышается. В случае нефропатии, сопровождающейся нарушением резорбции глюкозы (ренальный диабет) возможна глюкозурия и при нормальном или пониженном уровне глюкозы в крови.

Сахарный диабет — наиболее частая причина глюкозурии. При этом заболевании наблюдается абсолютная или относительная недостаточность инсулина — гормона, который определяет потребление глюкозы тканями (гликолиз) и образование гликогена из глюкозы в печени. Эти процессы поддерживают нормальный уровень глюкозы в крови. При дефиците инсулина гликолиз и синтез гликогена снижаются, что приводит к повышению глюкозы в крови и появлению ее в моче. Количество глюкозы в моче может колебаться в больших пределах от следов до 1,2%. Следует отметить, что глюкозурия у больных с инсулярной недостаточностью при нормально функционирующих почках наблюдается при гораздо меньших концентрациях глюкозы в крови, чем пороговая. Дело заключается в том, что почечный порог для глюкозы при диабете снижается. Процесс реабсорбции глюкозы в почечных канальцах не является простой диффузией: глюкоза переносится через почечные мембраны активно и первым этапом этого переноса является ее фосфорилирование, то есть превращение в глюкозо-6-фосфат. Данная реакция контролируется гексокиназой, активируемой инсулином. Поэтому при диабете снижается интенсивность реабсорбции глюкозы в почках и она появляется в моче при концентрации в крови, значительно меньшей, нежели соответствующей почечному порогу. Правда, при оценке этого явления следует помнить, что существуют здоровые люди с врожденным снижением почечного порога для глюкозы, у которых глюкозурия может возникнуть при приеме больших количеств углеводной пищи. Не следует также забывать, что встречаются больные сахарным диабетом с высоким уровнем глюкозы в крови, не сопровождающимся глюкозурией. Это объясняется тем, что на заключительной стадии сахарного диабета, когда к основному процессу присоединяются поражения почек, характеризующиеся в числе других проявлений и снижением уровня клубочковой фильтрации, уровень глюкозурии может снизиться вплоть до полного отсутствия глюкозы в моче.
Глюкозурия, наблюдающаяся при остром панкреатите, носит преходящий характер и исчезает при стихании воспалительного процесса.
Глюкоза появляется в моче при продолжительном голодании и прекращается через несколько дней после возобновления приема пищи.
У людей в преклонном и старческом возрасте возможно снижение функции поджелудочной железы, сопровождающееся глюкозурией.
Алиментарная глюкозурия, появляющаяся через 30 — 60 мин после приема пищи, богатой углеводами, исчезает через 3 — 5 часов. Наблюдается чаще у детей грудного возраста и при беременности.
Глюкозурия может наблюдаться после повышенной физической нагрузки.
Глюкозурия нервного происхождения возникает вследствие усиленного гликогенолиза в печени и гипергликемии. Она наблюдается при черепно-мозговых травмах, опухолях мозга, менингитах, токсикозах, энцефалитах, судорогах, внутричерепных кровоизлияниях, наркозе.
Эмоциональная глюкозурия — при плаче, страхе, истерике и т. д.
Токсическая глюкозурия возможна при отравлениях морфином, стрихнином, хлороформом, фосфором и др.
Глюкозурия после приема некоторых лекарств (диуретин, кофеин, фенамин, кортикостероиды).
Глюкоза может появляться в моче при лихорадочных состояниях (лихорадочная глюкозурия).
Глюкозурия при сильном психическом возбуждении.
Эндокринная глюкозурия возникает в результате нарушения секреции адреналина, тироксина, глюкокортикоидных гормонов, при акромегалии, синдроме Иценко-Кушинга, феохромоцитоме, гипернефроме, передозировке АКТГ, препаратов кортизола или их продолжительном приеме.
Почечная (ренальная) глюкозурия развивается в результате нарушения реабсорбции глюкозы в канальцах. Различают первичную и вторичную ренальную глюкозурию. Первичная глюкозурия, так называемый ренальный диабет — это аномалия механизма реабсорбции глюкозы в проксимальных канальцах почек. Почечный порог глюкозы снижается до 6,32 — 0,82 ммоль/л (125 — 25 мг/%) без нарушения промежуточного обмена углеводов. Наблюдается главным образом у детей. Для ренального диабета свойственна постоянная глюкозурия, нормальный или несколько сниженный уровень глюкозы крови, отсутствие патологических отклонений при сахарной нагрузке и других симптомов диабета. Вторичная ренальная глюкозурия может встречаться при различных органических поражениях почек (хронический нефрит, нефроз, острая почечная недостаточность, гликогеновая болезнь и др.).

Оценка глюкозурии должна производиться с учетом принятых с пищей углеводов и количества суточной мочи.

А. Я. Любина, Л. П. Ильичева и соавт. «Клинические лабораторные исследования», М., «Медицина», 1984 г.
Фролов В. А., Дроздова Г. А., Казанская Т. А., Билибин Д. П., Демуров Е. А. Патологическая физиология. — М.: ОАО «Издательство «Экономика», 1999. — 616 с.
Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике под редакцией Базарновой М. А., Морозовой В. Т. — Киев, «Вища школа», 1988 г.
Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под редакцией Кост Е. А. — Москва, «Медицина», 1975 г.
Морозова В. Т., Миронова И. И., Марцишевская Р. Л. — Исследование мочи — Москва, РМАПО, 1996 г.

Определение концентрации мочевины в крови широко используется в диагностике, применяется для оценки тяжести патологического процесса, для наблюдения за течением заболевания и оценки эффективности проводимого лечения.

Раздел: Клиническая биохимия

В нормальной моче содержится минимальное количество кетоновых тел (за сутки выделяется 20 — 54 мг), которое не обнаруживается обычными качественными пробами. При выделении с мочой большого количества кетоновых тел качественные реакции становятся положительными – это явление патологическое и называется кетонурией.

Раздел: Анализ мочи

Определение концентрации мочевины в моче проводится значительно реже, чем определение уровня мочевины в крови и используется обычно при при обнаружении повышенного уровня мочевины в крови и решении вопроса о состоянии выделительной функции почек. При этом определяют суточную экскрецию мочевины с мочой. Повышенное содержание мочевины крови при снижении суточной экскреции с мочой чаще свидетельствует о нарушении азотовыделительной функции почек.

Раздел: Клиническая биохимия

В настоящее время в моче обнаружено более 150 различных химических веществ. Одни из них (например, мочевина) присутствуют в нормальной моче в достаточном количестве и определяются обычными биохимическими методами. При патологии может наблюдаться как увеличение, так и снижение уровня этих веществ в моче.

Раздел: Анализ мочи

Запах особого диагностического значения не имеет. Свежевыпущенная нормальная моча без запаха.

Раздел: Анализ мочи

источник