К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная кислота и бета-оксимаслянная кислота. Кетоновые тела в моче встречаются совместно, поэтому раздельное определение их клинического значения не имеет. В норме с мочой выделяется 20 — 50 мг кетоновых тел в сутки, которые не обнаруживаются обычными качественными реакциями, при повышении кетоновых тел в моче качественные реакции на них становятся положительными.
Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л.
К методам определения кетоновых тел в моче относятся:
- Проба Ланге
- Модифицированная проба Ротеры
- Проба Легаля
- Проба Лестраде
- Экспресс-тесты
К 12 – 15 мл мочи приливают около 1 мл уксусной кислоты и около 0,5 мл раствора нитропруссида натрия. Затем наслаивают аммиак. В положительном случае на границе двух жидкостей образуется фиолетовое кольцо. Кольцо может появиться не сразу, а в течение 2 – 3 мин.
Другая модификация этой пробы удобна тем, что можно использовать готовый реактив нитропруссида натрия.
6 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 30% уксусной кислоты.
К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива (до цвета чая) и наслаивают аммиак. В положительном случае на границе жидкостей появляется фиолетовое кольцо.
- Нитропруссид натрия, раствор 50 г/л; готовят перед употреблением.
- Аммония сульфат.
- Аммиак водный – 25% раствор.
Приблизительно 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора нитропруссида натрия тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь тщательно наслаивают 10 – 15 капель раствора водного аммиака. При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3 – 5 мин образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче (см. таблицу).
| Интенсивность окраски | Обнаруживаемые вещества, г/л Ацетоуксусная кислота |
|---|---|
| Следы | 0,05 |
| Умеренная | 0,3 |
| Интенсивная | 0,8 |
При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8 – 10 минуте.
- Свежеприготовленный 5% водный раствор нитропруссида натрия.
- 10 – 15% раствор едкого натрия.
- Уксусная кислота ледяная.
К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива № 1 и 0,5 мл реактива № 2. Получается красное окрашивание. Добавляют 0,5 – 1 мл реактива № 3. Если красный цвет исчезает, проба отрицательная, если сохраняется – положительная. Если получается слабо-розовая окраска, то проба считается также положительной.
Проба Лестраде — определение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива (или таблеток).
Приготовление сухого реактива: нитропруссида натрия 1 г, сульфата аммония 20 г, карбоната натрия безводного 20 г. Отвешенные реактивы тщательно растирают в ступке до получения мелкого однородного порошка. Порошок хранят в хорошо закупоренной стеклянной банке в сухом месте.
Предметное стекло кладут на лист фильтровальной бумаги. На стекло помещают небольшое количество (на кончике ножа) сухого реактива или таблетку и наносят на него 2 – 3 капли мочи. При наличии кетоновых тел получается окрашивание от розового до темно-фиолетового (появление окраски может наступить в течение 2 – 3 мин).
К экспресс-тестам определения кетоновых тел в моче относятся: набор для экспресс-анализа ацетона в моче и диагностические полоски. Исследование проводится согласно инструкции.
При оценке результатов проб на кетоновые тела в моче следует учитывать ряд факторов. Так, например, известно, что ацетоуксусная кислота в стерильной моче стабильна до 8 — 10 дней, при бактериурии или большом количестве дрожжевого грибка может полностью исчезнуть в течение 24 часов. Около 20% ацетона при комнатной температуре исчезает за 24 часа, но сохраняется в холодильнике. Поэтому важное значение имеет правильный сбор мочи, ее хранение и сроки выполнения анализа. Кроме того, кетоновые тела могут исчезать из мочи при бактериурии и in vivo, что может привести к ложноотрицательным результатам.
К ложноположительным результатам может привести использование месны, фенолфталеина, метаболитов некоторых препаратов (например, леводопы и каптоприла); кислая моча, повышенный удельный вес мочи. Все эти факторы приводят к химическому завышению результатов анализа, то есть непосредственно влияют на химическую реакцию определения кетоновых тел в моче, а количество самих кетоновых тел в моче может быть нормальным.
Необходимо помнить, что существуют также факторы, приводящие к клиническому повышению кетоновых тел в моче, то есть непосредственно влияющих на их уровень в моче за счет воздействия на обменные процессы, связанные с образованием кетоновых тел. К таким фактором относится прием некоторых лекарственных препаратов — инозитола, метионина, метформина, фенформина, феназопиридина, эфирного наркоза, интоксикация изониазидом, изопропиловым спиртом, ацетилсалициловой кислотой.
- Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под ред. Е. А. Кост. Москва «Медицина» 1975 г.
- Морозова В. Т., Миронова И. И., Марцишевская Р. Л. — Исследование мочи — Москва, РМАПО, 1996 г.
- Клиническая лабораторная аналитика — под редакцией Меньшикова В. В. Том III — Частные аналитические технологии в клинической лаборатории. — Москва, Лабпресс, 2000 г.
Кольцевая проба Геллера относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.
Раздел: Анализ мочи
Проба с 20% сульфосалициловой кислотой относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.
Раздел: Анализ мочи
Метод Брандберга–Робертса–Стольникова относится к полуколичественным методам определения общего белка в моче. В основу метода положена кольцевая проба Геллера, заключающаяся в том, что на границе азотной кислоты и мочи при наличии белка происходит его коагуляция и появляется белое кольцо.
Раздел: Анализ мочи
Запах особого диагностического значения не имеет. Свежевыпущенная нормальная моча без запаха.
Раздел: Анализ мочи
Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.
Раздел: Анализ мочи
источник
В нормальной моче содержится минимальное количество кетоновых тел (за сутки выделяется 20 — 54 мг), которое не обнаруживается обычными качественными пробами. При выделении с мочой большого количества кетоновых тел качественные реакции становятся положительными – это явление патологическое и называется кетонурией.
Кетоновые тела появляются в моче при нарушении обмена углеводов, жиров и белков, которое сопровождается увеличением кетогенеза в тканях и накоплением кетоновых тел в крови (кетонемия).
Положительные реакции на кетоновые тела появляются чаще всего при тяжелом сахарном диабете. Массивная кетонурия – признак декомпенсированного тяжелого сахарного диабета, нередко – гипергликемической комы.
Кетонурия при диабете развивается вследствие усиленного кетогенеза и нарушения кетолиза. К усиленному кетогенезу приводит повышенная мобилизация жиров из жировой ткани, уменьшение образования оксалацетата в цикле Кребса, снижение биосинтеза жирных кислот.
Отсутствие глюкозурии при наличии кетонурии исключает диабет. При диабетической кетонурии мочу исследуют каждые 4 часа и, в зависимости от результатов анализа, корректируют дозу инсулина. Ликвидировать кетонурию необходимо в течение 1 — 2 суток.
У детей кетонурия может быть при различных заболеваниях ввиду лабильности углеводного обмена. Поэтому даже незначительные погрешности в диете, в особенности при наличии острой инфекции, нервного возбуждения, переутомления и т. п. могут привести к кетозу. Кетонурия в раннем детском возрасте может наблюдаться при токсикозах, длительных желудочно-кишечных расстройствах, дизентерии и других заболеваниях. У новорожденных повышение кетонов в моче почти всегда вызывается недокормленностью.
Присутствие кетоновых тел наблюдается также при голодании, беременности, безуглеводной диете, лихорадке, гиперинсулинизме, почечной глюкозурии, болезни Иценко-Кушинга, эклампсии, при употреблении пищи, богатой кетогенными веществами, алкогольной интоксикации, отравлениях (например, свинцом), при приеме значительных количеств слабощелочных продуктов, послеоперационных состояниях (кетонурия в послеоперационном периоде объясняется распадом белка вследствие операционной травмы), гликогенозах I, II и VI типов (нарушен кетолиз). Кетонурия наблюдается также при заболеваниях, связанных с усиленным расходом углеводов, например, при тиреотоксикозе, а также подпаутинных кровоизлияниях, черепно-мозговых травмах, сильном возбуждении или раздражении центральной нервной системы. Кетонурия нередко наблюдается при инфекционных заболеваниях: скарлатине, гриппе, туберкулезе, менингите. При этих заболеваниях кетонурия не имеет диагностического значения и является вторичным явлением.
При оценке кетонурии не следует также забывать и факторах, которые влияют на обнаружение кетоновых тел в моче.
К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная кислота и бета-оксимаслянная кислота. Кетоновые тела в моче встречаются совместно, поэтому раздельное определение их клинического значения не имеет. В норме с мочой выделяется 20 — 50 мг кетоновых тел в сутки, которые не обнаруживаются обычными качественными реакциями, при повышении кетоновых тел в моче качественные реакции на них становятся положительными.
Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л.
К методам определения кетоновых тел в моче относятся:
источник
Работа №1. Определение общего холестерина крови ферментативным методом
Принцип метода. Определение холестерина основано на использовании сопряженных ферментативных реакций, катализируемых холестеролэстеразой, осуществляющей гидролиз эфиров холестерина до свободного холестерина; холестеролоксидазой, осуществляющей превращение холестерина в холестенон с образованием Н2О2; пероксидазой, осуществляющей окисление перекисью 4-аминоантипирина и фенола с образованием окрашенного продукта розово-малинового цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации холестерина.
А) Рабочий реагент — смесь лиофильно высушенных ферментов, буферного раствора, фенола, аминоантипирина
Б) Калибратор – калибровочный раствор холестерина 4,65 ммоль/л
Порядок выполнения работы:
1. По 1 мл рабочего реагента наливают в пробирку №1 (опыт) и
пробирку №2 (калибровочная проба), затем прогревают 5 минут при 37 0 С
2. В пробирку №1 (опыт) добавляют 0,01 мл сыворотки крови,
в пробирку №2 (калибр. проба) — 0,01 мл калибратора
3. Пробирки выдерживают 20 минут в термостате при 37 0 С
4. Измеряют оптическую плотность растворов на ФЭКе против Н2О при длине
волны 490 нм в кювете 0,3 см
5. Расчет проводят по формуле: х = (Аопыт : Акалибр.) × 4,65 ммоль/л,
где А – оптическая плотность растворов (показания ФЭКа)
Уровень холестерина в норме (сыворотка) – 3,63 — 8,03 ммоль/л
Рекомендуемые пределы (желательные) для взрослых —
Клинико-диагностическое значение. Дислипопротеинемия – нарушение физиологического соотношения классов липопротеинов с повышением содержания определенного класса. Гиперлипопротеинемия – повышение концентрации в крови определенных классов липопротеинов, чаще всего — атерогенных (ЛПНП, ЛПОНП). Увеличение концентрации ЛПНП наблюдается при атеросклерозе, холестазе, острых гепатитах, диабете, ожирении и др.
Работа №3. Определение кетоновых тел в моче
Принцип метода: Ацетоуксусная кислота и ацетон в щелочной среде реагируют с нитрозогруппой нитропруссида натрия, образуя четырех валентные комплексные анионы вишнево-красной окраски. В работе используется индикаторные бумажные тест-полоски, пропитанные соответствующими реактивами, и приложенная к ним стандартная цветная шкала.
Порядок выполнения работ:
- Конец индикаторной бумаги, пропитанной реактивами, опускают в исследуемую мочу, вынимают и кладут на стеклянную пластинку или чашку Петри.
- Через 1-2 минуты сравнивают полученное окрашивание бумаги со стандартной цветной шкалой.
Интенсивность окрашивания зависит от количества кетоновых тел. Сопоставление полученной окраски с цветной шкалой позволяет сделать полуколичественное определение (+, ++, +++). Чувствительность тест полоски на ацетоуксусную кислоту (0,1 г/л) выше, чем на ацетон (0,4 г/л). В норме содержание кетоновых тел в моче минимальное (0,02-0,05 г/сут) и они не обнаруживаются применяемыми качественными пробами.нтенсивность окрашивания зависит от количества кетоновых тел. ндартной чветной шкалой четырех валентные комплексые анионы
Клинико-диагностическое значение. Кетоновые тела в значительных количествах (до 300-400 мг на 100 мл) появляются в крови в патологических случаях, например при сахарном диабете (кетонемия). Следствием этого является кетоацидоз и кетонурия – появление кетоновых тел в моче в количествах, определяемых тест-реакциями (10-50 г/сут). При сахарном диабете определение кетоновых тел в моче особенно важно не только для диагностики заболевания, но и для контроля эффективности лечения. Кетонемия и кетонурия может также наблюдаться при длительном голодании, неправильном пищевом режиме, в раннем детском возрасте и др.
Таблица 1. «Рекомендуемые уровни липидов крови»
| Показатель | Оптимум |
| Холестерин общий (ммоль/л) | 1 |
Задание на самоподготовку:
Перечень контрольных вопросов:
1. Обмен и функции холестерина. Биосинтез холестерина в организме: последовательность реакций до образования мевалоновой кислоты, представления о дальнейших этапах, регуляция синтеза. Гиперхолестеринемия.
2. Транспортные липопротеины крови: особенности строения, состава, функций различных классов. Аполипопротеины. Липопротеинлипазы. Роль липопротеинов в обмене холестерина. Изменение концентрации липопротеинов и холестерина в крови, гиперлипопротеинемии, дислипопротеинемии.
3. Биохимия атеросклероза (гиперхолестеринемия, дислипопротеинемия, ПОЛ). Биохимические подходы к профилактике заболевания и его осложнений (ИБС, инфаркт миокарда, инсульт и др.)
4. Основные фосфолипиды тканей человека, их физиологическое значение. Представления о катаболизме фосфолипидов (роль фосфолипазы А2, лизофосфолипиды). Биосинтез фосфолипидов, значение липотропных факторов. Жировая инфильтрация печени. Липоидозы.
Задания для самоконтроля:
Тестовый контроль знаний по теме:
1. Выберите один правильный ответ.
а) используются для глюконеогенеза при голодании
б) являются источниками энергии для мозга
в) являются источниками энергии в мышцах в первые минуты
г) окисляются в анаэробных условиях
д) в абсортивный период синтезируются в печени после приема пищи,
2. Выберите правильные ответы.
а) повышается секреция инсулина
б) в крови увеличивается концентрация свободных жирных кислот
в) в крови увеличивается содержание ЛПОНП и хиломикронов
г) повышается активность триацилглицероллипазы
д)повышается активность ЛП-липазы
3. Выберите один правильный ответ.
Циклооксигеназа участвует в синтезе:
а) тромбоксанов из арахидоновой кислоты
б) лейкотриенов из арахидоновой кислоты
в) арахидоновой кислоты из линолевой
г) эйкозапентаеновой кислоты
д) простациклинов из тромбаксанов
4. Выберите один неправильный ответ.
а) является структурным компонентом мембран
б) используется как субстрат для синтеза кортизола
в) используется как субстрат для синтеза холевой кислоты
г) окисляется в организме до СО2 и Н2О
д) используется как субстрат для синтеза витамина Д3
5. Выберите один неправильный ответ.
а) находится в матриксе митохондрий
б) катализирует образование мевалоната
в) регулируется путем фосфорилирования-дефосфорилирования
г) является регуляторным ферментом синтеза холестерина
д) использует в качестве субстрата НАДФ
6. Выберите один правильный ответ.
Липопротеины, обеспечивающие удаление избытка холестерина из тканей:
7. Выберите правильные ответы.
Укажите причины, по которым ЛПВП называют «антиатерогенными»:
а) собирают избыток ХС с поверхности клеток периферических тканей
г) транспортируют холестерин в печень
д) постоянно циркулируют в крови
8. Выберите один неправильный ответ.
б) дефект ГМГ-КоА- редуктазы
в) избыточное потребление углеводов
г) снижение активности ЛХАТ
д) гликозилирование белков в составе ЛПНП
9. Выберите один неправильный ответ.
Для снижения концентрации холестерина в крови рекомендуется:
а) диета с повышенным содержанием крахмала
б) диета с повышенным содержанием клетчатки
в) диета с ограничением животных жиров
д) интенсивные физические нагрузки
10. Выберите правильные ответы.
Факторы, вызывающие жировую дегенерацию печени:
а) недостаток в пище холина и метионина
б) недостаток в пище жирорастворимых витаминов
в) накопление ТАГ в печени
Решить задачи:
Задача №1. При диспасеризации сотрудников «Дальзавода» проведено биохимическое исследование крови. У рабочего С., 40 лет, уровень холестерина составил 10 ммоль/л, ЛПНП – 6 ммоль/л. Дайте оценку полученным результатам.
Задача №2. При обследовании коллектива рабочих промышленного предприятия выявлено повышенное содержание ЛПНП в плазме крови у 25% обследованных мужчин в возрасте 20-40 лет. Каковы ваши заключения и рекомендации по коррекции этого состояния с биохимических позиций?
Задача №3. Воздействие различных токсических веществ может привести к развитию ожирения печени. Для профилактики патологии в условиях промышленного производства рабочие получают в качестве дополнительного питания молоко – ценный белковый продукт, богатый метионином. Объясните, почему метионин используется в качестве вещества, уменьшающего риск развития липоидоза печени?
Задача №4. Диета с пониженным содержанием углеводов и жиров является профилактикой атеросклероза и ожирения. Объясните влияние такого питания на концентрацию холестерина в крови.
Задача №5. Потребление жира рыб северных морей, богатых омега-3 ПНЖК, рекомендуется больным с гиперхолестеринемией и повышенным риском тромбообразования. Объясните, как изменится метаболизм холестерина и синтез эйкозаноидов при переходе на такую диету?
ВОПРОСЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ УМЕНИЙ И НАВЫКОВ ПО ТЕМЕ
1.Приведите примеры заболеваний, патогенез которых можно объяснить нарушением обмена холестерина.
2.В составе, каких фракций липопротеинов крови, осуществляется транспорт холестерина?
3.Почему при атеросклерозе рекомендуется заменять животные жиры пищи растительными жирами?
4.Что такое кетоацидоз и каковы его последствия?
5.Из чего состоят желчные мицеллы и каково их значение в обмене холестерина в организме?
6.Перечислите условия, способствующие образованию желчных камней.
7.Перечислите липотропные факторы и пищевые продукты, богатые ими.
8.Каковы причины и следствия развития жировой инфильтрации печени?
9.Какие липиды обладают атерогенностью?
10.Каковы последствия инфильтрации сосудистой стенки ЛПНП?
11.Почему атеросклероз у мужчин встречается чаще, возникает раньше и протекает тяжелее?
Тема: «Обмен и функции липидов»
(учебно-научно-практическая конференция)
Мотивация:Знание механизмов регуляции и биохимических параметров обмена липидов, понимание механизмов развития патологии липидного обмена необходимо для профилактики и коррекции этих состояний
Цель обучения, воспитания и развития:Закрепить знания о структуре и биологической роли липидов тканей и крови, рассмотреть механизмы регуляции липидного обмена в норме и его нарушениях при патологии с учетом современных достижений в липидологии.
Задачи, обучения, воспитания и развития:
Использование знаний раздела в медицинской практике:полученные по данной теме знания и умения формируют профессиональную базу, необходимую в последующем для изучения вопросов:
-кардиологии (патогенез атеросклероза и его осложнений)
-гастроэнтерологии (патогенез желчнокаменной болезни и др.)
-инфекционных болезней (патогенез гепатитов)
-диетологии (патогенез и профилактика ожирения и др.)
-педиатрии (патогенез наследственных заболеваний обмена липидов)
-патофизиологии (роль эйкозаноидов в развитии воспалительной реакции)
-фармации (введение лекарственных веществ в форме липосом)
-эндокринологии (нарушение метаболизма липидов при сахарном диабете и др.)
Этапы проведения занятия:
2. Основная часть занятия: конференция
(доклады студентов по теме с последующим обсуждением)
3. Заключительная часть занятия (тест-контроль)
Задание на самоподготовку:
Дата добавления: 2016-07-29 ; просмотров: 495 | Нарушение авторских прав
источник
Экспресс-метод определения «сахара» в моче
Экспресс методы обнаружения «сахара» и кетоновых тел в моче
Кетоновые тела.
а) Реакция образования йодоформа: В щелочной среде йод взаимодействует с ацетоном, образуя йодоформ, который обнаруживают по характерному запаху и иногда – по появлению мути, возникающей в следствие плохой растворимости йодоформа в воде:
Для выполнения реакции в пробирку к 3 мл мочи добавляют по 5 капель реактива Люголя и 10% р-ра NaOH. Содержимое пробирки перемешивают и отмечают результат.
б) В щелочной среде кетоновые тела дают с нитропруссидом натрия оранжево-красную окраску. Уравнение химической реакции следующее:
При добавлении к реакционной смеси концентрированной уксусной кислоты образуется соединение, окрашенное в темно-красный цвет. Уравнение реакции:
6. Проба Гмелина на желчные пигменты.В пробирку наливают 10 капель концентрированной HNO3, содержащей следы азотистой кислоты, и осторожно, пипеткой наслаивают на нее исследуемую мочу (примерно 1 мл). При наличии в моче желчных пигментов на границе кислоты и мочи появляется слой цветных колец, возникающих в результате образования продуктов окисления билирубина. Особенно характерным является зеленое кольцо.
Экспресс методы — это лабораторные методы диагностики, применяемые врачом у постели больного без лабораторного оборудования. Эти методы — простые и быстрые, но недостаточно точные. Наиболее часто применяются экспресс методы определения «сахара» и кетоновых тел в мочепри необходимости срочной диагностики сахарного диабета.
Метод основан на реакции Фелинга (восстановление гидрата окиси меди в гидрат закиси меди). Реактив А содержит безводную сернокислую медь, реактив Б содержит сухой гидроксид натрия. В пробирку опускают таблетку реактива А и 1-2 таблетки реактива Б и приливают 10 капель мочи. За счет растворения щелочи происходит нагревание содержимого пробирки и при наличии глюкозы в моче синий цвет жидкости в пробирке меняется на зеленый, затем на желтый. По прилагаемой полоске бумаги с цветной шкалой находят приблизительную концентрацию глюкозы в моче.
Метод основан на реакции с нитропруссидом натрия. В фарфоровую чашку насыпают специальный порошок (содержит нитропруссид натрия) и на него наносят 2-3 капли мочи. Через 1-2 минуты при наличии кетоновых тел появляется фиолетовое окрашивание. По прилагаемой полоске бумаги с цветной шкалой находят приблизительное содержание кетоновых тел в моче.
Клинико-диагностическое значение определения патологических элементов мочи:
1. Белок. Ренальная протеинурия отмечается при пиелонефрите, амилоидозе почек, почечно-каменной болезни, абсцессе почек, туберкулёзе, опухолях почек, при остром и хроническом нефрите, неврозах, эклампсии, невропатии беременных.
Застойная протеинурия — при декомпенсации деятельности сердца и опухолях в брюшной полости.
Токсическая протеинурия может быть после употребления больших доз салициловых препаратов, аналъгетиков, препаратов золота.
Лихорадочная протеинурия возникает при заболеваниях с повышением температуры.
Экстратенальная протеинурия наблюдается при циститах, уретритах, пиелитах, простатитах, длительных запорах, тяжелых поносах.
Нейрогенная протеинурия встречается при травме черепа, кровоизлиянии, инфаркте миокарда, почечной колике.
2. Сахар. Чаще наблюдается панкреатическая глюкозурия вследствие недостаточности островного аппарата поджелудочной железы при диабете.
Почечная глюкозурия в раннем возрасте — признак аномалии обмена веществ.
Печеночная глюкозурия встречается при заболеваниях печени вследствие нарушения гликопексической её функции.
Глюкозурия может быть при инсульте, менингите, иногда после сотрясении головного мозга.
3. Кетоновые тела. Кетоновые тела чаще определяются при средних и тяжелых формах сахарного диабета, а также при лихорадочных состояниях, неукротимой рвоте, поносе, длительном введении избытка инсулина.
4. Желчные пигменты. Желчные пигменты находят при болезни Боткина, гепатитах, механической желтухе, циррозе печени.
5. Кровь. Определяется при остром и хроническом гломерулонефрите, пиелите, хронической почечной недостаточности, травмах мочевого пузыря, почек, мочевых путей, а так же после приема больших доз антикоагулянтов, сульфаниламидных препаратов, уротропина.
6. Реакция рН. Щелочная реакция наблюдается при инфекциях мочевых путей (циститах, пиелитах, распаде опухолей), а так же при гематурии, рассасывании выпотных жидкостей, после рвоты и поносов.
Кислая бывает при острой и хронической почечной недостаточности, туберкулезе почек, остром и хроническом гломерулонефритах, лихорадочном состоянии, мочекаменной болезни.
Норма рН 5,3 – 6,5. Кислая реакция рН
Дата добавления: 2015-07-02 ; Просмотров: 1289 ; Нарушение авторских прав? ;
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
источник
Задание. Провести качественные реакции на кетоновые тела в моче.
А) Проба Легаля на ацетон и ацетоуксусную кислоту (АУК).
Принцип. Ацетон и АУК образуют с нитропруссидом натрия оранжево-красное окрашивание в щелочной среде. После подкисления ледяной уксусной кислотой образуется соединение вишневого цвета.
Ход работы. На стекло наносят 1 каплю мочи, 1 каплю 10% раствора натрия гидроксида и 1 каплю свежеприготовленного 10% раствора нитропруссида натрия, появляется оранжево-красное окрашивание. Прибавляют 3 капли ледяной уксусной кислоты, появляется вишнево-красное окрашивание.
Б) Реакция Герхарда на АУК.
Принцип. Метод базируется на взаимодействии Fe 3+ с енольной формой АУК с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.
Ход работы. К 5 каплям мочи прибавляют каплями 5% раствор феррум (III) хлорида; при этом выпадает осадок фосфатов в форме феррум (III) фосфата. При наличии АУК от дальнейшего добавления феррум (III) хлорида появляется вишнево-красное окрашивание. При стоянии окраска бледнеет вследствие спонтанного декарбоксилирования АУК. Реакция неспецифичная. Креатин мочи с нитропруссидом натрия дает аналогичное окрашивание, но в этом случае при добавлении концентрированной уксусной кислоты жидкость не окрашивается в вишневый цвет.
В. Экспресс-тест на ацетон и АУК.
Принцип. Полуколичественное определение кетоновых веществ в моче и сыворотке крови проводят с помощью диагностических полосок «Кетофан». Кетофан содержит щелочной буфер в смеси с нитропрусси-дом натрия, что дает с ацетоном и АУК фиолетовое окрашивание, интенсивность которого прямопропорциональна концентрации кетоновых тел в исследуемой жидкости.
Ход работы. Полоску погружают на 1-2 с в исследуемую жидкость и через 1 мин сравнивают окрашивание зоны индикации с цветной шкалой сравнения, которая напечатана на этикетке. Отдельные оттенки шкалы сравнения от едва фиолетового до темно-фиолетового соответствуют приблизительно от 1,2 до 1,5 г/л и выше АУК.
Клинико-диагностическое значение. Содержание кетоновых тел в крови здорового человека составляет 0,85-1,70 ммоль/л. В нормальной моче их количество незначительное (не больше 0,01 г/сут) и не выявляются качественными реакциями; эти реакции являются положительными лишь при выведении большого количества кетоновых тел при сахарном диабете, голодании, исключении углеводов из пищи. Кетонурия может наблюдаться при заболеваниях, связанных с усиленной затратой углеводов (тиреотоксикоз), кровоизлияниях, черепно-мозговых травмах, инфекционных заболеваниях (скарлатина, грипп, туберкулёз, менингит). В раннем детском возрасте продолжительные заболевания пищеварительного тракта (дизентерия, токсикозы) могут сопровождаться кетонемией и кетонурией в результате голодания и истощения.
1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 194-209.
2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 241-259.
3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 366-377.
4. Вороніна Л.М. та ін. Біологічна хімія. – Харків: Основа, 2000. – С. 306-313.
5. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 373-389.
6. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 399-417.
7. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.: ООО Медицинское информационное агентство, 1998. – С. 271-279.
8. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Кобилянська Л.І. /За ред.О.Я. Склярова. – К.: Здоров’я, 2002. – С. 119-145.
Тема: Обмен холестерола. Регуляция и нарушения обмена липидов. Определение содержания холестерола в сыворотке крови.
Актуальность. Холестерол составляет основную массу всех стероидов организма, он является предшественником в синтезе других стероидов – желчных кислот, гормонов, витамина Д3, а также структурным компонентом клеточных мембран. Фонд холестерола создаёт холестерол пищи и его синтез в самом организме. Такие патологические состояния, как атеросклероз, желчнокаменная болезнь, гиперлипопротеинемии сопровождаются нарушением обмена холестерола.
Регуляция липидного обмена осуществляется нейрогуморальным путем. Кора головного мозга влияет на обмен липидов через симпатическую и парасимпатическую нервную систему, эндокринные железы. Знание особенностей метаболизма липидов в условиях нормы и патологии имеет большое практическое значение для будущих врачей, в частности, для правильной диагностики и рационального выбора лекарственных препаратов с целью коррекции разнообразных нарушений обмена липидов. Наиболее распространенными среди населения развитых стран мира являются болезни, связанные с нарушением липидного обмена (атеросклероз, ожирение, инфаркт миокарда), что с каждым годом требует уделять большого внимания в их лабораторной диагностике. Эта проблема становится все более актуальной, особенно с учётом того, что без исследования показателей липидного обмена невозможно иметь объективное представление и о функциональной способности целого ряда жизненно важных органов (например, печени и почек) при разнообразных болезнях. Увеличение количества липидов в крови является симптомом некоторых заболеваний, при которых вторично нарушается обмен липидов (сахарный диабет, гипотериоз, панкреатит, алкоголизм и др.). Основным биологическим материалом для проведения биохимической диагностики липоидоза (нарушения постоянства обмена жиров и липоидов – жи-рообразных веществ) является кровь больного, главными липидными компонентами которой выступают свободный холестерол и его эфиры, общие липиды, фосфолипиды, липопротеины.
Цель.Выучить особенности специфики обмена холестерола в ус-ловиях нормы и патологии; ознакомиться с регуляцией и нарушениями липидного обмена. Уметь применять знания теоретического материала с результатами лабораторного практикума и возможностью использования тестов липидного обмена в качестве продиагностических показателей. Оз-накомиться с методом количественного определения холестерола в сыворотке крови и его клинико-диагностическим значением.
ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ
1. Биосинтез холестерола: локализация, схема реакций, регуляция процесса.
2. Пути биотрансформации холестерола, локализация в организме: этерификация, образование желчных кислот, стероидных гормонов, активных форм витамина Д3.
3. Биохимические механизмы развития атеросклероза. Коэффициент атерогенности. Атерогенные и антиатерогенные липопротеины.
4. Регуляция обмена липидов.
5. Патологии липидного обмена: стеаторея, ожирение, атеросклероз, гиперлипопротеинемии.
6. Нарушение обмена липидов при ожирении, сахарном диабете.
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Какой процесс изменяется при большом поступлении холестерола с пищей?
А. Ускоряется синтез эндогенного холестерола.
В. Активируется катаболизм холестерола до СО2 и Н2О.
С. Снижается синтез холестерола в печени.
D. Повышается активность оксиметилглутарил-КоА-редуктазы.
Е. Снижается активность оксиметилглутарил-КоА-синтетазы.
2. Основным конечным продуктом обмена холестерола в печени является:
| А. Витамин Д3. | С. Индикан. | Е. Скатол. |
| В. Гиппуровая кислота. | D. Желчные кислоты. |
3. Назовите регуляторный фермент синтеза холестерола.
4. Назовите продукты, которые не образуются при катаболизме холестерола.
| А. СО2 и Н2О. | С. Витамин Д3. | Е. Половые гормоны. |
| В. Желчные кислоты. | D. Кортикостероиды. |
5. Выберите транспортную форму холестерола из тканей в печень.
А. ЛПОНП. В. Хиломикроны. С. ЛПНП. D. ЛПВП. Е. ЛППП.
6. Укажите конечный продукт, в который превращается мевалоновая кислота на второй стадии синтеза холестерола.
| А. Ланостерин. | С. Фарнезилпирофосфат. | Е. Геранилпирофосфат. |
| В. Изопрен. | D. Сквален. |
7. Назовите орган, где наиболее активно осуществляется синтез холестерола.
| А. Почки. | С. Кишечник. | Е. Репродуктивные органы. |
| В. Печень. | D. Кора надпочечников. |
8. Назовите соединение, из которого синтезируется холестерол.
| А. Кротонил-КоА. | С. Оксибутирил-КоА. | Е. Бутирил-КоА. |
| В. Пальмитил-КоА. | D. Ацетил-КоА. |
9. Укажите, какие функции выполняет холестерол в организме человека.
А. Обязательный компонент биологических мембран.
В. Из холестерола синтезируются желчные кислоты.
С. Предшественник кортикостероидов, половых гормонов.
D. Предшественник витамина Д3.
10. Укажите соединение, которое образуется после конденсации трех молекул ацетил-КоА и дальнейшего восстановления в процессе синтеза холестерола.
| А. Масляная кислота. | D. Фумаровая кислота. |
| В. Мевалоновая кислота. | Е. Лимонная кислота. |
| С.Оксиметилглутарил-КоА. |
11. При воспалительных процессах в желчном пузыре нарушаются коллоидные свойства желчи, что может привести к образованию желчных камней. Кристаллизация какого вещества является основной причиной их образования?
А. Уратов. В. Хлоридов. С. Холестерола. D. Оксалатов. Е. Фосфатов.
12. Главным восстановительным агентом в синтезе холестерола является:
13. Больная, 46 лет, жалуется на сухость в ротовой полости, жажду, общую слабость. При биохимическом исследовании в крови выявлена гипергликемия, гиперкетонемия. В моче найдены кетоновые тела, глюкоза. На электрокардиограмме наблюдаются диффузные изменения в миокарде. Какой вероятный диагноз?
| А. Алиментарная гипергликемия. | D. Ишемическая болезнь сердца. |
| В. Острый панкреатит. | Е. Сахарный диабет. |
| С. Несахарный диабет. |
14. Атерогенными факторами, содержащими холестерол являются:
| А. Хиломикроны. | С. ЛПНП. | Е. Альбумины. |
| В. ЛПВП. | D. ЛПОНП. |
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
Лучшие изречения: Да какие ж вы математики, если запаролиться нормально не можете. 8380 — 
| 7303 — 
или читать все.
195.133.146.119 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.
Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно
источник
Для дошкольников и учеников 1-11 классов
16 предметов ОРГВЗНОС 25 Р.
Тема: «Определение кетоновых тел в моче» 
Цель: Изучить исследование химических свойств мочи.
Изучить полуколичественные и качественные методы определения кетоновых тел в моче;
Изучить основные принципы работы с диагностическими тест-полосками
Тип занятия: практическое (6ч)
Причины появления кетоновых тел в моче;
Методы диагностики кетоновых тел в моче;
Клинико-диагностическое значение исследования показателей.
Подготовить рабочее место к исследованию мочи.
Приготовить реактивы, посуду и оборудование к исследованию.
Определять химические свойства мочи (кетоновые тела в моче качественными и полуколичественными методами).
Работать с бланочной продукцией (оформление бланков анализа).
Правильно интерпретировать полученные результаты исследования.
Средства достижения поставленной цели:
1. Работа с конспектами, учебной и специальной литературой.
2. Подготовка к практическим занятиям с использованием методических рекомендаций преподавателя, выполнение и оформление практических работ.
3. Работа с информационными средствами обучения на электронных и бумажных носителях.
4. Демонстрация качественной реакции определения кетоновых тел в моче (Лестраде, Ланге).
Оборудование учебного кабинета и рабочих мест кабинета:
посадочные места по количеству обучающихся;
рабочее место преподавателя;
специализированная мебель и оборудование.
Технические средства обучения:
компьютеры для оснащения рабочего места преподавателя и обучающихся;
технические устройства для аудиовизуального отображения информации;
аудиовизуальные средства обучения (презентация, учебный видеосюжет).
Результатом освоения урока является:
Формирование практических профессиональных умений и первоначального практического опыта, в том числе профессиональными ( ПК ) и общими ( ОК ) компетенциями:
ПК 1.1 . Готовить рабочее место для проведения лабораторных общеклинических исследований.
ПК 1.2 . Проводить лабораторные общеклинические исследования биологических материалов.
ПК 1.3 . Регистрировать результаты проведенных исследований.
ПК 1.4. Проводить утилизацию отработанного материала, дезинфекцию и стерилизацию использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.
ОК 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей профессии, проявлять к ней устойчивый интерес.
ОК 2 . Организовывать собственную деятельность, выбирать типовые методы и способы выполнения профессиональных задач, оценивать их эффективность и качество.
ОК 6. Работать в коллективе и команде, эффективно общаться с коллегами, руководством, пациентами.
ОК 9 . Ориентироваться в условиях смены технологий в профессиональной деятельности.
ОК 13. Организовывать рабочее место с соблюдением требований охраны труда, производственной санитарии, инфекционной и противопожарной безопасности.
I Модуль. Теоретическая часть с элементами самостоятельной работы
Задание №1. Изучите и законспектируйте учебный материал в рабочие тетради.
Обнаружение кетоновых тел в общем анализе мочи называют — кетонурия . В норме кетоновые тела в моче не обнаруживаются, так как ежедневно выводятся из организма органами выделения, в количестве 25-50 мг в сутки. К таким телам относятся ацетон, уксусная и бета-осмолярная кислоты. Кетоновые тела в моче встречаются совместно, поэтому раздельное определение их клинического значения не имеет. В моче здорового человека медики не выявляют кетоновых тел.
Причины появления кетоновых тел
К причинам накапливания в моче кетоновых тел относятся многие причины, некоторые из них несут угрозу нормальной жизнедеятельности организма. Вот одни из причин:
длительное голодание организма;
чрезмерное употребление белков с пищей;
Если кетонурия спровоцирована сахарным диабетом, то наличие кетоновых тел в моче является своеобразным сигналом для организма о том, что нужно пересмотреть свой рацион питания.
Часто такая патология встречается, если нарушен баланс между употребляемыми жирами и углеводами. Если кетонурия сопровождается сильно выраженным плодовым запахом мочи (чаще яблочным), то это говорит о высоком содержании глюкозы в моче при сахарном диабете.
При обнаружении кетоновых тел в моче при сахарном диабете, медики говорят о переходе заболевания в более тяжелую стадию. Очень большое содержание в моче ацетона и уксусной кислоты при сахарном диабете, свидетельствует о приближении состояния гипергликемической комы у больного.
Если при исследовании анализа мочи больного, в ней обнаружен только ацетон без содержания глюкозы, то речь идёт о другом заболевании, не имеющем отношения к диабету.
Отсутствие глюкозурии при наличии кетонурии исключает диабет. При диабетической кетонурии мочу исследуют каждые 4 часа и, в зависимости от результатов анализа, корректируют дозу инсулина. Ликвидировать кетонурию необходимо в течение 1-2 суток.
У детей кетонурия может быть при различных заболеваниях ввиду лабильности углеводного обмена. Поэтому даже незначительные погрешности в диете, в особенности при наличии острой инфекции, нервного возбуждения, переутомления и т. п. могут привести к кетозу. Кетонурия в раннем детском возрасте может наблюдаться при токсикозах, длительных желудочно-кишечных расстройствах, дизентерии и других заболеваниях. У новорожденных повышение кетонов в моче почти всегда вызывается недокормленностью.
Как образуются кетоновые тела?
Чаще всего кетоновые тела образуются при нарушении обменных процессов белков, жиров и углеводов в организме человека. После перенесенного хирургического вмешательства, кетонурия встречается из-за распада белка, вследствие операционной раны. Наряду с ростом кетоновых тел в моче, наблюдается увеличение кетогенеза в тканях организма и накопление ацетона и уксусной кислоты в крови, что носит название кетонемия.
Методы диагностики кетоновых тел
Кетонурия диагностируется как в условиях стационара, так и дома. Для того чтобы определить наличие ацетона в моче в домашних условиях, используют специальные тест-полоски, которые продаются в аптеке. Например, «Ацетон тест», «Кетостикс», «Кетур-Тест», «КетоглюкоФАН».
Тест-полоски для домашнего определения в моче ацетона, могут давать ложноположительный результат. Это наблюдается в тех случаях, когда больной принимает каптоприл или лекарственные средства, с содержанием в них фталеина.
Существует ещё один способ определения кетоновых тел в моче. Для этого можно добавить в емкость с мочой несколько капель 5% раствора нитропруссида или раствора нашатырного спирта. Если кетоновые тела присутствуют в моче, то она окрасится в ярко-красный цвет.
Существует ещё одна разновидность кетонурии — лейциноз , или врождённое заболевание, передающееся по наследству. Другое название этой патологии – разветвленноцепочечная кетонурия . Встречается у новорожденных детей, в соотношении 1/120000-300000 случаев.
Лейциноз, вызван нарушением обменных процессов, очень тяжело протекает и заканчивается смертельным исходом. У таких больных параллельно присутствуют и симптомы расстройства центральной нервной системы, нарушение развития, пониженное содержание глюкозы в крови, пониженный тонус мышц, а также может развиться летаргическое состояние. Моча больного лейцинозом имеет ярко выраженный запах кленового сиропа.
II Модуль. Самостоятельная работа с исследовательским этапом
Изучите и законспектируйте качественные и количественные методы определения кетоновых тел в моче;
Разбейтесь на группы по 2-3 человека и получите образцы биологической жидкости (мочи) у преподавателя, пронумеруйте образцы;
Проведите исследование мочи с помощью диагностических тест-полосок;
Оцените полученный результат (норма, патология).
Результат запишите в бланки анализа, сдайте их преподавателю.
К методам определения кетоновых тел в моче относятся:
1гр.: качественные методы (пробы)
Модифицированная проба Ротеры
2 гр.: полуколичественные методы
Экспресс-тесты (диагностические тест-полоски)
Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л.
Принцип метода: Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.
Посуда, реактивы, оборудование:
Нитропруссид натрия (свежеприготовленный 10% раствор).
К 12 – 15 мл мочи приливают около 1 мл уксусной кислоты и около 0,5 мл раствора нитропруссида натрия. Затем наслаивают аммиак.
Интерпретация полученных результатов:
В положительном случае на границе двух жидкостей образуется фиолетовое кольцо. Кольцо может появиться не сразу, а в течение 2 – 3 мин.
Другая модификация этой пробы удобна тем, что можно использовать готовый реактив нитропруссида натрия.
6 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 30% уксусной кислоты.
К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива (до цвета чая) и наслаивают аммиак.
В положительном случае на границе жидкостей появляется фиолетовое кольцо.
Принцип метода: интенсивность окраски рабочего раствора позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче.
Посуда, реактивы, оборудование:
Нитропруссид натрия, раствор 50 г/л; готовят перед использованием.
Аммиак водный – 25% раствор.
Приблизительно 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора нитропруссида натрия тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь тщательно наслаивают 10 – 15 капель раствора водного аммиака.
Интерпретация полученных результатов:
При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3 – 5 мин образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче (см. таблицу).
При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8 – 10 минуте.
Ориентировочная количественная оценка кетоновых тел в моче.
Обнаруживаемые вещества, г/л Ацетоуксусная кислота
Принцип метода: нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комплекса слабо-розового или красного цвета.
Посуда, реактивы, оборудование:
Свежеприготовленный 5% водный раствор нитропруссида натрия.
10 – 15% раствор едкого натрия.
К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива № 1 и 0,5 мл реактива № 2. Получается красное окрашивание. Добавляют 0,5 – 1 мл реактива № 3.
Интерпретация полученных результатов:
Если красный цвет исчезает, проба отрицательная, если сохраняется – положительная. Если получается слабо-розовая окраска, то проба считается также положительной.
Принцип метода: определение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива (или таблеток).
Посуда, реактивы, оборудование:
нитропруссида натрия 1 г, сульфата аммония 20 г, карбоната натрия безводного 20 г. Отвешенные реактивы тщательно растирают в ступке до получения мелкого однородного порошка. Порошок хранят в хорошо закупоренной стеклянной банке в сухом месте.
Предметное стекло кладут на лист фильтровальной бумаги. На стекло помещают небольшое количество (на кончике ножа) сухого реактива или таблетку и наносят на него 2 – 3 капли мочи.
Интерпретация полученных результатов:
При наличии кетоновых тел получается окрашивание от розового до темно-фиолетового (появление окраски может наступить в течение 2 – 3 мин).
К экспресс-тестам определения кетоновых тел в моче относятся: набор для экспресс-анализа ацетона в моче и диагностические полоски. Исследование проводится согласно инструкции.
Изучите инструкцию к диагностическим тест-полоскам фирмы ФАН и БИОСЕНСОР АН, перепишите её в тетрадь;
Получите образцы биологической жидкости и тест-полоски у преподавателя и проведите самостоятельное исследование мочи;
Результат запишите в бланки анализа;
Оцените полученный результат с позиции «норма-патология» и сдайте преподавателю.
Принцип определения кетоновых тел с использованием тест-полосок ФАН
Принцип основан на: 
полуколичественном определении кетонов. Диагностическая зона пропитана щелочным буфером и нитропруссидом натрия, который при низких величинах ph (в щелочной среде) вступает в реакцию с ацетоуксусной кислотой и ацетоном, вследствии чего образуется комплекс коричневато-красного цвета. Интенсивность окраски прямопропорциональна количеству кетонов в исследуемой моче.
Чувствительность и специфичность:
Чувствительность зоны к ацетоуксусной кислоте составляет 0,5 ммоль/л, для ацетона – 10 ммоль/л.
Цветная шкала диагностической тест полоски с 2004 года представлена 4 зонами:
1 зона: бледно-желтая – отрицательная;
2 зона: розово-бежеватого цвета – соответствует15 ммоль/л (16мг/дл);
3 зона: насыщенного бежевато-розоватого цвета –5,0 ммоль/л (53 мг/дл);
4 зона: коричневато-красного цвета – соответствует 15 ммоль/л (160 мг/дл).
Интерпретация полученных результатов: Реакция оценивается через 60 сек после погружения диагностической полоски в мочу, путем сравнения образовавшейся окраски реагентной зоны с цветовой шкалой (стандартом). Если результат лежит между двумя цветовыми квадратами, то результат оценивают по наиболее близкой по окраске зоне цветовой шкалы.
Положительным результат считается, если диагностическая зона при контакте с исследуемой мочой принимает тот или иной оттенок цветной шкалы.
Принцип определения кетоновых тел с использованием тест-полосок фирмы БИОСЕНСОР АН
Данные тест-полоски предназначены для определения двух важных показателей (глюкозы и кетоновых тел в моче), что очень важно в диагностике и контроле показателей у больных Сахарным диабетом. 
Тщательно перемешайте мочу стеклянной палочкой;
Произведите отбор 10мл мочи для исследования мочевого осадка;
Затем возьмите строго необходимое количество тест-полосок для исследования мочи (ровно столько сколько у Вас образцом мочи);
Закройте пенал фабричной крышкой;
Опустите тест-полоску в мочу на 2-3 сек, так чтобы все реагентные зоны были в моче;
Выньте тест-полоску из мочи, убрав излишки жидкости ребром полоски о край посуды или промокните ребром полоски о фильтровальную бумагу;
Положите тест-полоску на ровную поверхность диагностическими зонами вверх;
Оцените полученный результат через 60 сек с цветовой шкалой (стандартом) на пенале.
Запишите полученный результат в бланки анализа.
Диапазон определяемых концентраций глюкозы в моче:
0,0 2,8 5,6 14,0 28,0 56,0 ≥ 112,0 ммоль/л
0,0 50 100 250 500 1000 ≥ 2000 мг/дл
Диапазон определяемых концентраций кетоновых тел в моче:
0,0; 0,5; 1,5; 4,0; 8,0; 16,0 ммоль/л
0,0 0,5 1,5 4,0 8,0 ≥ 16.0 ммоль/л
Факторы, влияющие на определение кетоновых тел в моче
При оценке результатов проб на кетоновые тела в моче следует учитывать ряд факторов. Так, например, известно, что ацетоуксусная кислота в стерильной моче стабильна до 8 — 10 дней, при бактериурии или большом количестве дрожжевого грибка может полностью исчезнуть в течение 24 часов. Около 20% ацетона при комнатной температуре исчезает за 24 часа, но сохраняется в холодильнике. Поэтому важное значение имеет правильный сбор мочи, ее хранение и сроки выполнения анализа. Кроме того, кетоновые тела могут исчезать из мочи при бактериурии и invivo, что может привести к ложноотрицательным результатам. 
К ложноположительным результатам может привести использование месны, фенолфталеина, метаболитов некоторых препаратов (например, леводопы и каптоприла, капотена, менса и др.); кислая моча, повышенный удельный вес мочи. Все эти факторы приводят к химическому завышению результатов анализа, то есть непосредственно влияют на химическую реакцию определения кетоновых тел в моче, а количество самих кетоновых тел в моче может быть нормальным.
Необходимо помнить, что существуют также факторы, приводящие к клиническому повышению кетоновых тел в моче, то есть непосредственно влияющих на их уровень в моче за счет воздействия на обменные процессы, связанные с образованием кетоновых тел. К таким фактором относится прием некоторых лекарственных препаратов — инозитола, метионина, метформина, фенформина, феназопиридина, эфирного наркоза, интоксикация изониазидом, изопропиловым спиртом, ацетилсалициловой кислотой.
III Модуль. Контрольные вопросы и задания
Ответьте на поставленные вопросы, используя рабочую тетрадь
1. Как называется состояние, когда в моче обнаруживаются кетоновые тела?
2. Обнаруживаются ли в норме кетоновые тела? В каком количестве? Как называется такое количество в клинической практике?
3. Какие кетоновые тела Вам известны?
4. Какие факторы способствуют появлению в моче кетоновых тел? Разделите их на группы с позиции «физиологические состояния» и «патологические состояния».
5. Какие изменения в крови и моче характерны для больного сахарным диабетом?
6. Какие изменения в крови и моче характерны для больного лейцинозом?
7. Как образуются кетоновые тела?
8. Какие существуют методы определения кетоновых тел в моче?
9. Расскажите метод определения кетоновых тел с помощью пробы Лестраде? На чем основан принцип метода? Ход определения?
10. Расскажите метод определения кетоновых тел с помощью пробы Ланге? На чем основан принцип метода? Ход определения?
11. Расскажите метод определения кетоновых тел с помощью пробы Легаля? На чем основан принцип метода? Ход определения?
12. Расскажите метод определения кетоновых тел с помощью пробы Ротеры? На чем основан принцип метода? Ход определения?
13. Расскажите метод определения кетоновых тел с помощью диагностических тест-полосок?
14. Назовите основные принципы работы с тест-полосками?
15. Какие факторы, влияют на определение кетоновых тел в моче?
16. Дайте определение понятиям: кетонемия, кетонурия, лейциноз.
Запишите в рабочей тетради термины и дайте им обозначение , используя изученный материал
1. Появление ацетона в моче называется?
2. Реакция на кетоновые тела основаны на получении окраски?
3. Ацетонурия характерна для?
4. Для какого состояния характерна, ацетонурия без глюкозурии?
5. При какихсстояниях появляется ацетон в моче?
6. Кетоновые тела сдвигают рн крови в сторону?
Знать теоретический и практический материал.
Отвечать на контрольные вопросы.
Литература для самостоятельной подготовки:
Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под ред. Е. А. Кост. Москва «Медицина» 1975 г.
Морозова В. Т., Миронова И. И., Марцишевская Р. Л. — Исследование мочи — Москва, РМАПО, 1996 г.
Клиническая лабораторная аналитика — под редакцией Меньшикова В. В. Том III — Частные аналитические технологии в клинической лаборатории. — Москва, Лабпресс, 2000 г.
источник