Определение количества микроорганизмов в моче

Получение из мочевого пузыря образца мочи без бактерий, которые могут попасть в порцию мочи из:

— Кожи
— Наружных половых органов
— Перианальной области
— Нижней трети уретры
— Окружающей среды (на любых поверхностях вне контейнера для сбора мочи)

Любые бактерии, находящиеся в уретре, вымываются первой порцией мочи при мочеиспускании (эту порцию не собирают для анализа). Другие потенциальные возможности попадания бактерий в образец мочи для анализа необходимо избегать путем соблюдения определенных правих асептики.

Протокол сбора мочи для женщин

1. Тщательно вымыть руки с мылом и высушить
2. Пальцами одной руки раздвинуть половые губы
3. Вымыть с мылом область вокруг отверстия уретры (мыть нужно в направлении спереди-назад) и высушить
4. При мочеиспускании небольшую порцию мочи (примерно 20 мл) выпустить в унитаз, остальную порцию мочи собрать в стерильный контейнер для сбора мочи
5. Сразу закрыть контейнер крышкой (пробкой), не касаясь при этом краев контейнера или внутренней поверхности крышки (пробки)

Протокол сбора мочи для мужчин

1. Тщательно вымыть руки с мылом и высушить
2. Отодвинуть крайнюю плоть и вымыть с мылом область отверстия уретры с мылом
3. При мочеиспускании небольшую порцию мочи (примерно 20 мл) выпустить в унитаз, остальную порцию мочи собрать в стерильный контейнер для сбора мочи
4. Сразу закрыть контейнер крышкой (пробкой), не касаясь при этом краев контейнера или внутренней поверхности крышки (пробки)

В свое время взятие мочи для микробиологического анализа проводили путем катетеризации. И эта методика была широко распространенной до тех пор, пока не обнаружили, что сам процесс катетеризации несет большой риск инфицирования. Тем не менее этот способ применяют и сегодня у пациентов с постоянным катетером. В дренажной сумке катетера любые бактерии в моче быстро размножаются. Поэтому забор мочи из дренажной сумки не проводят, поскольку это исказит показатель титра бактерий мочи в мочевом пузыре.

Для проведения микробиологического анализа при постоянной катетеризации пациента, забор мочи проводят из изолированного рукава дренажной трубки при помощи шприца и иглы, соблюдая правила асептики. В этом случае асептика очень важна по следующим причинам:

• Минимизация риска инфицирования пациента с установленным катетером
• Минимизация риска возможного перекрестного инфицирования медицинского персонала и окружающих (в том числе других пациентов)
• Минимизация риска попадания в образец мочи для анализа бактерий из окружающей среды.

Для микробиологического исследования мочи идеальным образцом считается моча, взятая непосредственно из мочевого пузыря. В здоровом состоянии моча всегда стерильна. Если в моче выявляют бактерии, это свидетельствует о патологическом процессе. С помощью аспирации путем надлобковой пункции можно получить мочу не загрязненную бактериями в дистальном отделе уретры.

Это инвазивная процедура, при которой в надлобковой области стерильной иглой прокалывают кожу и мышцы живота. Поскольку аспирация потенциально опасна, ее проводят только в случае, если невозможно получить чистую порцию мочи (например, у детей младшего возраста).

Для проведения микробиологического анализа мочу нужно собирать в стерильную посуду. Необходимое количество мочи для исследования – 5-10 мл, поэтому не обязательно полностью заполнять емкость.

Моча является подходящей средой для развития бактерий. То есть, любые бактерии, которые находятся в моче на момент ее сбора, продолжают размножение в лабораторной емкости. В результате такого роста результат анализа может быть ложным. Поэтому необходимо доставить в лабораторию образец мочи не позднее чем через 2-3 часа с момент сбора, а в направлении нужно указать время взятия образца. Если по каким-либо причинам образец невозможно доставить в лабораторию в указанный промежуток времени, либо доставка задерживается, мочу нужно хранить в холодильнике (при низких температурах рост бактерий замедляется).

Посев мочи непосредственно после ее сбора можно проводить с помощью современных методов. Для этого используют специальную пластинку, покрытую питательной средой (пластинка погружается в образец мочи, высушивается и отправляется в лабораторию).

Доставленный в лабораторию образец мочи для микробиологического исследования проходит следующие этапы:

• Макроскопический осмотр
• Микроскопическое исследование
• Посев на питательную среду с целью обнаружения бактерий

В случае выявления в моче патогенных микроорганизмов, проводят определение их устойчивости и чувствительности к ряду антибактериальных препаратов.

Моча здорового человека в норме прозрачная и имеет желтый или желто-соломенный цвет. Конечно, по внешнему виду мочи нельзя ставить диагноз или делать какое-либо заключений, но присутствие инфекции в моче можно предположить. Инфекция мочевыделительной системы, как и другая инфекция, сопровождается привлечением большого количества лейкоцитов для борьбы с микробами. В области инфекционного поражения выделяется гной – воспалительный экссудат, который содержит погибающие и мертвые клетки. Одной из причин помутнения мочи является наличие гноя – пиурия (лекоцитурия). Тем не менее, прозрачная моча (без мути) не гарантирует отсутствие инфекции, как и мутная моча не является точным признаком инфицирования (помутнение мочи может происходить по другим причинам). Кроме этого, при инфицировании некоторыми видами бактерий моча может приобретать неприятный запах.

Микроскопическое исследование мочи предполагает анализ определенного объема полученного образца под микроскопом на предмет наличия эритроцитов и лейкоцитов. В здоровом состоянии моча может содержать незначительное количество этих клеток. Значительное повышение количества лейкоцитов в моче свидетельствует об инфекционном процессе. Отметим, что повышение количества лейкоцитов в моче может наблюдаться при полном отсутствии бактерий, как и наличие явного очага инфекции в мочевыделительной системе без значительного повышения количества лейкоцитов. Гематурия (повышение количества эритроцитов в моче) может быть вызвана как инфекционным процессом, так и другими причинами (например, болезнь почек).

Также в моче могут обнаруживаться эпителиальные клетки, которые слущиваются с поверхности отделов мочевыделительной системы. У женщин в моче могут быть обнаружены эпителиальные клетки, которые слущиваются с половых путей, что не имеет никакого отношения к патологии мочевыделительной системы, а лишь свидетельствует о нарушении правил сбора мочи и может содержать бактерии из женского полового тракта.

Микроскопическое исследование, которое входит в перечень общего анализа мочи, позволяет обнаруживать бактерии, если они содержатся в большом количестве.

Гарантированно подтвердить или опровергнуть наличие в моче бактерий можно только в культуре мочи (культура мочи – совокупность жизнеспособных бактерий в моче). Бактериологическое исследование подразумевает размещение определенного объема мочи в чашке Петри на плотной культуральной среде, содержащей все необходимые компоненты для роста бактерий. Затем закрытую чашку Петри помещают в термостат при температуре 37°C (оптимальная температура для роста бактерий) на 24 часа. На поверхности плотной культуральной среды рост любых бактерий проявляется в виде образования колоний. В каждой колонии содержится огромное количество бактерий, которые произошли от единственной клетки микроорганизма, которая находилась в моче. Таким образом, количество колоний на культуральной среде позволяет определить количество микробных клеток в образце мочи. Если культуральная среда с размещенным в ней образцом мочи не изменяется (колонии не образуются), значит моча стерильна.

Учитывая тот факт, что моча здоровых людей может содержать небольшое количество бактерий из нижней трети уретры (см статью «Инфекция мочевыводящих путей» ), бактериурия (наличие бактерий в образце) не является основанием для постановки диагноза инфекционного заболевания мочевыделительной системы. Впервые термин «значительная бактериурия» применили микробиологи Касс и Финленд в 1956 году при диагностике инфекционного поражения мочевого тракта. Ученые выяснили, что, за некоторым исключением, если количество бактерий в 1 мл мочи превышает показатель 100 000 (10 5 ), можно ставить диагноз инфекции мочевыделительной системы. Более поздние исследование показали, что симптомы инфекционного заболевания могут возникать при меньшем количестве бактерий (10 3 /мл), а также, что при количестве бактерий более 10 5 /мл у некоторых пациентов, какие-либо симптомы инфекционных заболеваний полностью отсутствовали. Несмотря на это критерий Касса до сих пор широко применяется и наличие в моче бактерий в количестве более 10 5 /мл является основанием для постановки диагноза.

Начальную концентрацию бактерий в образце мочи определяют путем подсчета образовавшихся колоний при посеве известного объема мочи. Каждая колония возникает в результате деления одной клетки микроорганизма, поэтому колонии получаются чистыми (состоят только из одного вида бактерий). Каждый вид бактерий имеет специфический макроскопический вид колоний. Несмотря на это, для точной идентификации вида бактерий проводят другие исследования.

Инфекционное заболевание мочевыводящих путей могут вызывать несколько типов бактерий (чаще всего – Escherichia Coli, также известная как Кишечная палочка). Очень редко встречаются случаи смешанной инфекции (смешанная инфекция часто обнаруживается у пациентов с постоянным катетером). При обнаружении нескольких видов бактерий, когда в посеве не доминирует ни один из них, вероятнее всего, что бактерии в мочу попали в нижней трети уретры или из аногенитальной области (то есть, образец мочи был неправильно собран). Если на культуральной среде наблюдается рост колоний одного вида бактерий (чистый рост), количество которых превышает 10 5 /л, можно ставить диагноз инфекции мочевыводящих путей (см таблицу 2).

Физиологическое присутствие

Случаи инфекционного поражения мочевыделительной системы, %

Доля пациентов, инфицированных в стационаре, %

источник

БАК анализ мочи – один из самых эффективных и точных видов диагностики ее пробы. Используется для выявления различного рода инфекций мочевыделительной системы организм человека. Такая система состоит из пары почек, мочеточников, мочевого пузыря и уретры. Основной функцией мочевыделительной системы организма человека является процесс образования мочи, а также ее накопление и вывод во внешнюю среду.

Как было отмечено выше,бактериологический анализ мочи дает возможность определить наличие инфекций в организме. Его основным отличием от других видов исследования является срок проведения, который составляет десять дней. Моча в лабораторных условиях помещается в агар или сахарный бульон, то есть в благоприятную для бактерий питательную среду. Она помогает их росту и развитию.

При БАК анализе мочи концентрация (количество) микроорганизмов в одной единице объема биоматериала устанавливается на колониеобразующих единицах (КОЕ). Они представляют собой одну живую клетку микробов, которая дальше вырабатывает уже целую колонию микроскопических организмов.

Такой вид диагностики мочи является самым достоверным. Он может предоставить данные, которые невозможно получить при иных исследованиях мочи. Но также отмечен и его недостаток. Он заключается в длительности проведения исследования, а также высоких требованиях при сборе материала.

БАК анализ мочи рекомендуют проводить в случаях:

• инфекций мочевыделительной системы;
• контроля лечебной терапии;
• уточнения выявленного заболевания;
• рецидива текущего заболевания;
• беременности;
• сахарного диабета и иммунодефицита;
• предположений на устойчивую флору к лечению антибиотиками.

Забор материала производится в стерильную пластиковую тару. Это должна быть утренняя средняя порция мочи (три-пять миллилитров). Емкость для сбора материала человеку выдается в лаборатории. А сама процедура забора мочи должна проводиться после правильного гигиенического туалета половых органов. При этом следует исключить антисептики. Материал для диагностики собирается до начала курса лечения препаратами антибиотиков или же в его промежутках. После такого лечения должно пройти две-три недели, прежде чем сдавать бактериологический анализ мочи.

Взятая порция мочи должна быть транспортирована в короткий период времени. Если проба материала хранится при температуре +18-20 градусов по Цельсию – на протяжении одного-двух часов. Если моча хранится в холодильной камере при температуре +4-8 градусов – в течение пяти-шести часов.

Среди бактериологического анализа мочи выделяют:

• БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к основному спектру антибиотиков;
• БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к широкому спектру антибиотиков;
• БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к основному спектру антибиотиков и бактериофагам;
• БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к широкому спектру антибиотиков и бактериофагам.

Все вышеперечисленные виды диагностик позволяют правильно установить тип антибиотика для дальнейшего лечения.

Бактериологическая диагностика при беременности входит в основной перечень проводимых исследований. У женщин материал для данного вида исследования могут брать из влагалища, носа и мочи. Из влагалища материал берут для установления заболеваний, которые передаются половым путем. Из носа – для определения золотистого стафилококка. А пробу мочи – для установления бессимптомной или скрытой бактериурии.

БАК анализ мочи при беременности необходимо проводить два раза. Первый – при постановке на учет в женской консультации, а второй – на 36 неделе срока беременности. Но существует вероятность сдачи анализа и большее количество раз, если у беременной женщины присутствуют заболевания почек, мочевого пузыря, а также повышенное количество белка или лейкоцитов при клиническом анализе мочи.

Для сбора материала на исследование беременной женщине необходимо приобрести стерильную емкость, куда следует поместить среднюю порцию утренней мочи. После этого биоматериал относится в медицинскую лабораторию.

Чтобы анализ показал достоверные результаты, следует придерживаться основных рекомендаций при заборе материала. К ним можно отнести:

• тщательный гигиенический туалет половых органов;
• сбор средней порции материала (при заборе мочи обязательный ввод тампона во влагалище);
• нормальный питьевой режим (обильное питье может развести концентрацию мочи и заранее вывести бактерии из организма);
• доставку биоматериала в лабораторию в течение часа.

В расшифровке результатов часто встречается аббревиатура КОЕ. Как было отмечено выше, КОЕ – это колониеобразующая единица. Если при исследовании ее количество обнаружено в пределах 1000 КОЕ\мл, то это будет свидетельствовать о наличии микробов в образце материала, которые случайно попали из половых органов. В этом случае никакого лечения не требуется.

Когда результат анализа показывает количество колониеобразующих единиц 1000000, значит, в наличии имеется воспалительный процесс, вызванный инфекциями половых органов. При помощи такого вида исследования определяется вид бактерий и чувствительность к препаратам антибиотиков.

Результат анализа может показать промежуточные границы, такие как 1000-10000 КОЕ\мл. Эта оценка ставится под сомнение, и саму диагностику следует провести повторно. Но в любом случае его интерпретацию должен проводить только лечащий врач.

Часто БАК анализ показывает присутствие бактерий в моче, которые попали в нее из толстого кишечника человека. Они перемещаются из области анального отверстия к мочеиспускательным каналам, после чего проникают в мочевой пузырь и далее. Этот путь проникновения бактерий принято называть восходящим. Наиболее часто такой вид попадания микробов встречается у женщин из-за их анатомического строения. Существует также и нисходящий путь, при котором микроорганизмы проникают в мочу во время возникновения инфекции в почках. При такой оценке анализа следует проводить лечебную терапию препаратами антибиотиков.

Симптомами наличия бактерий в моче выступают частые и болезненные процессы мочевыделения, боли внизу живота, резкий неприятный запах мочи, а также появление крови в моче. Кроме того, она может быть мутной с беловатым или красным оттенком. Также может содержать хлопья.

Обнаружение микроорганизмов в моче у беременных женщин вызвано бактериурией. Эта инфекция считается опасной, потому как плохо сказывается на состоянии будущего малыша. Бактерии у беременных женщин появляются намного чаще, чем у небеременных. Это явление связывают с тем, что матка непрерывно растет и постоянно оказывает давление на почки. Это нарушает нормальный ритм их работы. А заболевание пиелонефритом в период беременности может привести к преждевременным родам.

источник

Установлено, что микробы не проникают из крови в мочу через неповрежденные почки [Рябинский B.C., Родоман В.Е., 1969, и др.]. Под бактериурией понимают наличие бактерий в свежевыпущенной моче вследствие инфекционно-воспалительного процесса в органах мочевой системы иди половых органах мужчины.

Однако наличие микробов в моче не позволяет говорить о бактериурии, так как примерно у 10 % здоровых мужчин и женщин в переднем отделе мочеиспускательного канала вегетирует микрофлора. Поэтому бактериурию, обусловленную воспалительным процессом в мочевых путях, необходимо отличать от загрязнения мочи микрофлорой мочеиспускательного канала.

Идеальным методом выявления бактериурии является получение мочи для исследования путем надлобковой капиллярной пункции мочевого пузыря.

В практической работе для выявления бактериурии применяют методы определения количества микробов в 1 мл мочи, учитывая, что при гнойно-воспалительном процессе в почках или мочевых путях содержится 100 тыс. и больше микробов в 1 мл мочи, а при загрязнении ее микрофлорой мочеиспускательного канала — значительно меньше. Так, содержание 10 3 —10 4 бактерий в 1 мл мочи чаще всего не имеет диагностического значения.

У детей раннего возраста и новорожденных о бактериурии следует говорить при содержании 10 2 —10 3 микробных тел в 1 мл мочи [Михайлова З.М., 1982]. Определить степень бактериурии можно путем посева мочи, микроскопии осадка и с помощью химических реактивов.

Наиболее простым и достаточно точным оказался упрощенный метод посева мочи на агар в определенных секторах чашки Петри по Gould (1965). Методика заключается в следующем: стерильной платиновой петлей диаметром 2 мм берут мочу больного после тщательного смешивания ее и помещают в сектор А чашки Петри, где осторожно распределяют, сделав 40 движений петлей по поверхности агара. Петлю стерилизуют обжиганием и проводят ею 4 раза по поверхности агара через сектор А в сектор 1.

Петлю вновь обжигают и проводят 4 полосы через 1-й сектор во 2-й, затем аналогичным образом стерильной петлей из 2-го сектора в 3-й чашки Петри помещают в термостат при температуре 37 °С на 18—24 ч, после чего оценивают результаты по числу колоний бактерий в различных секторах чашки Петри. Преимущества данного посева мочи перед обычным — его экономичность, возможность определения степени бактериурии и одновременного получения роста изолированных колоний, необходимых для дальнейшего бактериологического исследования.

Гутман и Нейлор [Guttman, Naylor, 1966] предложили определять степень бактериурии путем погружения в мочу больного стеклянной пластинки, напоминающей предметное стекло, покрытой с обеих сторон агаром и последующей инкубации ее в термостате в течение 18—24 ч при температуре 37 0 С.

Фармацевтическая фирма «Орион» (Финляндия) усовершенствовала данный метод исследования, после чего он нашел широкое применение в клинической практике под названием «Урикульт». Специальную пластинку, с обеих сторон покрытую питательной средой, после погружения в мочу помещают в герметичный пластмассовый контейнер и инкубируют 18—24 ч. Степень бактериурии определяют путем сравнивания количества выросших колоний микробов с данными специальной шкалы.

У ряда больных с лейкоцитурией при посеве мочи на обычную питательную среду рост колоний микробов отсутствует. В этом случае говорят о так называемой асептической пиурии. Это может быть обусловлено несколькими причинами: 1) наличием L-форм бактерий и протопластов; 2) отсутствием роста микробов вследствие проводимой интенсивной антибактериальной терапии; 3) наличием воспалительного процесса, вызванного специфической микрофлорой, главным образом туберкулезными микобактериями, хламидиями, вирусной инфекцией или грибами типа Candida. Это требует проведения специальных исследований мочи с целью выявления возбудителей болезни.

В нецентрифугированной моче степень бактериурии путем микроскопии можно установить только при содержании 10 млн или больше микробов в 1 мл мочи. Поэтому для установления меньшей степени бактериурии необходимо исследование осадка центрифугированной мочи: 10 мл ее помещают в стерильную коническую пробирку и центрифугируют в течение 5 мин при 2500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают и оставляют 0,5 мл осадка вместе с мочой. Микропипеткой переносят 0,01 мл осадка мочи на предметное стекло и накрывают покровным размером 18 х 18 мм.

Как предметные, так и покровные стекла содержат в смеси спирта с эфиром, откуда вынимают непосредственно перед использованием. Препараты исследуют под микроскопом, лучше с помощью светлопольного фазово-контрастного устройства (ФК-4) или темнопольного фазово-контрастного устройства (МФА-2) при увеличении в 800 раз (объектив 40, окуляр 20). Содержание бактерий в 1 мл мочи можно определить по таблице, разработанной В.С.Рябинским и В.Е.Родоманом (1965).

Результаты определения степени бактериурии путем микроскопии осадка мочи показали, что стойкие достоверные результаты, сходные с результатами посева мочи, можно получить лишь при содержании 10 4 и больше микробов в 1 мл мочи. Имеются затруднения в подсчете количества микробов при выраженной лейкоцитурии в связи с содержанием в моче большого количества ядер и гранул разрушенных лейкоцитов, а также определения кокковой флоры, прежде всего стафилококков, которые легко принять за частицы осадка мочи. В этих случаях проводят прижизненную окраску микробов по методу М. Н. Лебедевой (1963).

На чистое предметное стекло наливают водный раствор метиленовой сини и дают ему высохнуть. Затем стекло протирают чистой сухой марлевой салфеткой до тех пор, пока налет краски на нем не примет светло-голубого оттенка. На данное стекло наносят каплю осадка мочи и накрывают покровным стеклом. При этом бактерии принимают голубую окраску; их легче увидеть и определить их форму. При фазово-контрастной микроскопии микробы, окрашенные метиленовой синью, имеют ярко-малиновую окраску в центре с ровным четким ободком темно-синего цвета по окружности, что позволяет отличить их от других патологических примесей.

Нитритный тест был разработан Гриссом [Griss, 1879] для определения загрязненности воды. Тест Грисса для диагностики инфекции мочевых путей впервые применил Weltmann в 1926 г. Принцип, на котором основано применение реактива Грисса для выявления бактериурии, заключается в следующем. В норме с мочой выделяется минимальное количество нитритов, которые нельзя определить количественными пробами. При бактериурии под воздействием бактерий происходит восстановление нитратов мочи в нитриты, которые определяются с помощью реактива Грисса.

Реактив Грисса в модификации Илосвая состоит из двух растворов: А — 0,5 г сульфаниловой кислоты, растворенной в 150 мл 30 % уксусной кислоты; Б — 0,1 г альфа-нафтиламина, растворенного в 20 мл теплой дистиллированной воды. Раствор доводят до кипения и фильтруют. Фильтрат дополняют до 150 мл 30 % уксусной кислотой. Затем оба раствора (А и Б) смешивают друг с другом и сохраняют в темной посуде, поскольку реактив нестоек. Пробу на нитриты проводят следующим образом. Берут 3 мл реактива Грисса-Илосвая и прибавляют к нему стерильной пипеткой 1 мл мочи больного.

При положительной пробе сразу же появляется стойкое ярко-красное окрашивание. Нитритный тест не бывает положительным при отсутствии микробов в моче и сравнительно редко становится положительным при содержании меньше 10 4 микробов в 1 мл мочи. Таким образом, нитритный тест позволяет легко и быстро выявлять высокую степень бактериурии, наблюдающуюся при инфекции мочевых путей.

Трифенилтетразолий-хлорид (ТТХ) представляет собой органическое вещество, являющееся окислительно-восстановительным индикатором, которое под действием дегидрогеназ, образующихся в процессе жизнедеятельности бактерий, восстанавливается в течение 4—10 ч из бесцветного растворимого в воде вещества в красный трифенилформазан, не растворяющийся в воде. Впервые ТТХ-тест для определения степени бактериурии применили Simmons и Williams в 1962 г. Предложенная ими методика заключается в следующем.

Растворяют 750 мг ТТХ в 100 мл насыщенного раствора двузамещенного фосфата натрия (Na2HPО4) — основной раствор. Берут 4 мл основного раствора ТТХ и добавляют насыщенный раствор Na2HPО4 до 100 мл. Оба раствора стерилизуют фильтрацией через фильтр Зейца и хранят в темноте и холоде, поскольку ТТХ чувствителен к действию света и тепла. Основной раствор стабилен в течение 2 мес; рабочий — 2 нед. Каждые 2 нед. приготавливают свежий рабочий раствор ТТХ. Степень бактериурии с ТТХ определяют следующим образом. К 2 мл мочи в стерильной пробирке добавляют 0,5 мл рабочего раствора ТТХ, хорошо смешивают и инкубируют в термостате в течение 4—6 ч при температуре 37 0 С.

При значительной бактериурии моча окрашивается в красный цвет. Следует помнить, что при содержании менее 10 4 и особенно 10 3 бактерий в 1 мл мочи образование трифенилформазана и окрашивание мочи в красный цвет бывает весьма незначительным или отсутствует. Поэтому данный тест должен применяться главным образом для выявления значительной бактериурии.

Впервые определение каталазы в моче с целью выявления бактериурии использовал Braude (1959). Около 5 мл мочи смешивают с равным объемом свежеприготовленной 3 % перекиси водорода в стерильной пробирке и оставляют в штативе при комнатной температуре на 15 мин. Если в моче есть микробы, то под воздействием выделяемой ими каталазы перекись водорода разлагается с выделением кислорода. При положительном тесте появляются пузырьки газа и на поверхности мочи образуется слой пены, количество которой позволяет ориентировочно судить о степени бактериурии.

Тест, как правило, положительный лишь при содержании 100 тыс. и больше микробов в 1 мл мочи. При наличии гематурии проводить данный тест не следует, поскольку он будет положителен за счет содержания в моче эритроцитов. Таким образом, упрощенные и ускоренные методы позволяют с уверенностью высказаться о высокой степени бактериурии (100 тыс. и больше микробов в 1 мл мочи) и, следовательно, о гнойно-воспалительном процессе в почках или мочевых путях.

Однако высокая степень бактериурии наблюдается далеко не во всех стадиях острого и тем более хронического пиелонефрита (в среднем у 60—70 % больных). В отдельных случаях у больного хроническим пиелонефритом может быть всего несколько тысяч микробов в 1 мл мочи. В этих случаях выявить бактериурию можно путем определения содержания бактерий в начальной и средней порциях мочи [Рябинский B.C., 1969]. Наиболее удобен для этой цели упрощенный метод посева мочи по методу Гоулда.

В случае загрязнения мочи микрофлорой мочеиспускательного канала рост колоний бактерий будет лишь в первой чашке Петри или количество колоний во 2-й чашке Петри будет значительно меньше. В противоположность этому при воспалительном процессе в мочевом пузыре и вышележащих отделах мочевого тракта количество микроорганизмов будет приблизительно одинаковым как и начальной, так и средней порциях мочи. Кроме этого, данная методика позволяет определить возбудителя пиелонефрита при смешанной флоре мочи.

В последние годы усилия исследователей направлены на разработку и внедрение автоматизированных методов исследования, дающих возможность проводить массовое обследование с целью выявления скрытых заболеваний при диспансеризации населения.

Данные методы выявления бактериурии основаны на определении самих бактерий или их метаболитов, продуктов жизнедеятельности в питательных средах. По принципу выявления и методу регистрации их можно разделить на фото- и кондуктометрические, электрохимические, колориметрические, газово-хроматографические, биолюминесцентные, радиометрические и др.

Основным недостатком ускоренных методов определения бактериурии является тот факт, что достоверные результаты получаются только при высоких титрах бактериурии (больше 10 4 ), поэтому они показаны лишь для всеобщей диспансеризации населения.

В последние годы с целью определения источника бактериурии при меняется метод исследования бактерий мочи, покрытых антителами, внедренный Thomas и соавт. (1974). Метод основан на том, что при почечной инфекции бактерии, находясь в контакте с иммунологически активными тканями, покрываются антителами, чего не наблюдается при локализации инфекции в мочевом пузыре.

Покрытые антителами бактерии обнаруживаются в моче иммунофлюоресцентным методом. Бактерии — носители антител хорошо выявляются при флюоресцентной микроскопии осадка мочи. После добавления к нему антисыворотки к человеческому у-глобулину, меченной изотиоцинатом флюоресцеина, появляется отчетливая флюоресценция, окаймляющая бактериальные клетки.

Применяемые в настоящее время методы определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам (метод диффузии в агар с использованием стандартных бумажных дисков, пропитанных антибиотиками, таблеток, цилиндриков, канавок, агаровых лунок) имеют ряд существенных недостатков. Во-первых, окончательные результаты могут быть получены лишь через 2—4 сут после начала исследования. Во-вторых, невозможно выявить «зависимые» формы микробов (размножающихся только или лучше при наличии того или иного антибактериального препарата).

Эти методы сложны, трудоемки и неэкономичны. В связи с этим разработаны и внедрены в клиническую практику упрощенные ускоренные методы опредения чувствительности микрофлоры мочи к антибактериальным препаратам. В.С.Рябинский (1967) использовал для этих целей ТТХ-тест. Он основан на восстановления бесцветного растворимого в воде ТТХ в красный трифенилформазан под воздействием дегидрогеназ, образующихся в процессе роста и размножения бактерий.

Если микроорганизмы, содержащиеся в моче больного, чувствительны к испытуемому антибиотику или антибактериальному препарату, то обмен веществ и рост бактерий задерживаются и восстановления ТТХ в трифенилформазан не происходит. В зависимости от чувствительности микробов к антибактериальному препарату наблюдается различная степень угнетения жизнедеятельности микробов и, следовательно, интенсивность образования трифенилформазана и окрашивания мочи в красный цвет. Методика может быть применена даже к тем антибактериальным препаратам, к которым нет стандартных бумажных дисков.

Мочу собирают из средней порции при самостоятельном мочеиспускании или катетеризации мочевого пузыря, В стерильные пробирки наливают по 2 мл мочи и добавляют по 0,5 мл рабочего раствора ТТХ. Затем в каждую из пробирок, кроме первой (контроль), добавляют то или иное антибактериальное вещество в количестве, нужном для создания определенной концентрации в моче. Пробирки встряхивают для смешивания содержимого и помещают в термостат на 6—9 ч при температуре 37 °С, а затем оценивают полученные результаты.

Полное отсутствие покраснения мочи говорит о высокой чувствительности, менее интенсивное покраснение, по сравнению с контрольной пробиркой, — о слабой чувствительности, а более интенсивное — о благоприятных условиях для развития микробов в присутствии данного антибактериального препарата. В.Е.Родоман (1976) разработал методику полуавтоматического определения чувствительности микрофлоры мочи к антибактериальным препаратам. Сущность ее заключается в следующем.

В расплавленный агар перед разливанием его в чашки Петри добавляют определенный антибиотик или антибактериальный препарат в дозе 5—20 ЕД или 10—30 мкг в 1 мл среды. Для ускоренного определения чувствительности микрофлоры мочи в питательную среду вносят еще раствор ТТХ из расчета 2 мл рабочего раствора на 10 мл питательной среды. Мочу от 7 больных заливают в отдельные лунки специальной металлической чашки Петри. Затем с помощью полосок фильтровальной бумаги (1,2×0,9 см), закрепленных в специальном штампе, одновременно мочу всех 7 больных переносят на поверхность агара в определенные сектора чашки Петри.

Чашку Петри помешают в термостат на 18 ч при температуре 37 0 С. При добавлении в агар раствора ТТХ результат исследования можно оценивать через 9 ч по окраске среды в местах будущего роста колоний микробов. Отсутствие роста микробов в секторах с добавлением определенного антибиотика или антибактериального препарата при наличии роста микроба в контрольной чашке Петри свидетельствует о высокой степени чувствительности флоры мочи к данному препарату.

Ю.М.Фельдман и М.С.Мельник (1981) предложили простой и эффективный способ определения чувствительности микрофлоры мочи к антибиотикам, основанный на способности патогенных и условно-патогенных бактерий разлагать глюкозу, изменяя при этом рН среды. Для приготовления питательной среды к 100 мл дистиллированной воды добавляют 4 г агара Эндо и кипятят 3—5 мин. В горячую среду вносят глюкозу (1 г на 100 мл). Среду разливают в чашки Петри, которые могут храниться в холодильнике 5—7 дней.

Исследуемую мочу центрифугируют в течение 5 мин при 3000 об/мин и оставляют в пробирке 1 мл мочи вместе с осадком. Осадок смешивают с оставшейся мочой и равномерно распределяют его по поверхности чашки. После контакта в течение 5-10 мин мочу сливают, чашку подсушивают 20-30 мин и на поверхность среды накладывают диски с соответствующими антибиотиками или антибактериальными веществами. Результаты оценивают через 3 1/2—5 ч.

При размножении микробов среда приобретает красный цвет. Если микрофлора мочи чувствительна к определенному антибиотику, то вокруг диска четко видна прозрачная, не изменившая цвета зона задержки роста микробов. По ее диаметру определяют чувствительность возбудителя к данному препарату: диаметр до 10 мм — микрофлора нечувствительна; 11-15 мм — слабочувствительна; 16 — 25 мм — чувствительна; более 25 мм — высокочувствительна.

К недостаткам метода следует отнести невозможность определения чувствительности к антибактериальным препаратам при содержании меньше 50 тыс. микробных тел в 1 мл мочи, а также отсутствие стандартных дисков с некоторыми антибактериальными препаратами.

Основной недостаток ускоренных методов определения антибиотикочувствительности микроорганизмов — это работа не с чистыми культурами микроорганизмов, а с нативным материалом, который используется только у тяжелых больных до получения результатов посева чистой культуры.

В настоящее время считается доказанным, что микобактерии туберкулеза, как и другие микроорганизмы, не проникают в мочу через неповрежденные почки. Поэтому важное значение в диагностике туберкулеза почек приобретает выявление микобактерий туберкулеза в моче путем микроскопии осадка мочи, окрашенного по Цилю—Нильсену (бактериоскопический метод) и посева мочи на специальную питательную среду Прейс—Школьниковой (бактериологический метод).

При исследовании мочи на туберкулезные микобактерии следует считаться с тем, что их с мочой выделяется относительно мало и небольшое количество обычно содержится в утренней моче. Поэтому для исследования собирают утреннюю порцию или мочу, выделенную больным за сутки. При отрицательном результате бактериоскопии обычного мазка исследуют мочу методом флотации.

Нередко вызывают воспалительные заболевания слизистых оболочек мочеполовых органов. Хламидийная инфекция распространяется половым, бытовым путем, а также путем инфицирования детей при родах, во время прохождения плода по инфицированным родовым путям.

Один из методов выделения хламидий основан на использовании желточных мешков куриных эмбрионов, другой — на выделении хламидий в культуре клеток. С.И.Соловьева и И.И.Ильин (1985) использовали три метода лабораторной диагностики хламидиозов: выявление морфологических структур микроорганизмов в соскобах из уретры при окраске по Романовскому-Гимзе, определение антигенов хламидий в соскобах из уретры при окраске методом флюоресцирующих антител в прямой модификации (МПФА) по общепринятой методике и выделение микроорганизмов в культуре клеток 929. По их мнению, для более надежного и достоверного анализа клинического материала необходимо комплексное применение обоих методов: выделение в культуре клеток и индикации хламидий при окраске соскобов методом МПФА.

В последние годы широкое распространение получил метод ДНК-диагностики возбудителей специфической инфекции, основанный на применении полимеразной цепной реакции.

источник

Моча здорового человека стерильна и не содержит в своем составе никаких микроорганизмов. Бактерии, выявленные в ходе анализа урины, в большинстве случаев указывают на развитие воспалительного процесса в мочеполовой системе. Присутствие патогенной микрофлоры в моче носит название — бактериурия. Данный признак является серьезным основанием для более тщательной диагностики организма, поиска локализации воспаления и подбора эффективных методов терапии.

Главными органами, которые занимаются выработкой и фильтрацией мочи являются почки. Под действием некоторых негативных факторов, способность почек фильтровать урину снижается, в результате чего патогенная микрофлора оказывается в моче.

Существует несколько путей проникновения бактерий в биологическую жидкость:

1. Восходящий — патогенные микроорганизмы внедряются в мочеполовую систему человека через мочевой канал (уретру). В основном такой путь проникновения бактерий наблюдается у женской половины человечества. Мочеиспускательный канал женщин гораздо короче и шире мужской уретры, поэтому болезнетворным микроорганизмам легче в него проникнуть. В связи с тем, что у прекрасного пола уретра расположена вблизи влагалища и анального отверстия, риск возникновения инфекционных процессов в мочеполовой системе значительно возрастает.
2. Нисходящий — болезнетворные бактерии присутствуют в почках или в мочевом пузыре. Воспалительный процесс как бы опускается вниз из инфицированных верхних органов мочеполовой системы.
3. Лимфогенный — если в организме человека присутствует какая-либо инфекция, микробы попадают в мочевую систему вместе с лимфатической жидкостью.
4. Гематогенный — патогенная микрофлора способна разноситься с током крови из отдаленных очагов воспалительного процесса, протекающего в любом органе или системе организма (больное горло, бронхит, насморк и т. д.).

Врачи подразделяют бактериурию на 3 вида:

• Истинная — вследствие проникновения бактерий в мочеполовую систему, возникает воспалительный процесс, который определяется по ряду характерных симптомов.
• Ложная — микрофлора в моче выявляется, но воспаления, как такового не наблюдается. Такой вид бактериурии может быть связан с хорошей защитной реакцией организма человека, применением различных противомикробных препаратов, несоблюдением отбора проб мочи.
• Бессимптомная — чаще всего данным видом страдают беременные женщины. Скрытая бактериурия опасна тем, что в любом органе мочевыводящей системы может возникнуть воспалительный процесс (в том числе и опасный для будущей мамы пиелонефрит), но характерная симптоматика полностью отсутствует.

В большинстве случаев при бессимптомном виде бактериурии, беременные женщины обращаются за помощью, когда воспаление уже приняло острую (тяжелую) форму. Скрытая бактериурия считается очень опасным состоянием и может угрожать здоровью матери и жизни будущего ребенка.

Каждому человеку необходимо тщательно следить за своим здоровьем и регулярно сдавать общий анализ мочи. У совершенно здоровых людей бактерии в моче, как правило, не обнаруживаются. Но иногда, лабораторное исследование урины определяет наличие небольшого количества микрофлоры в биологической жидкости. В этом случае анализ необходимо провести еще раз, для того чтобы подтвердить, или исключить бактериурию.

Если содержание микроорганизмов в 1 мл мочи превышает 100 000 КОЕ (колониеобразующих единиц), можно смело утверждать, что в органах мочеполовой системы протекает воспалительный процесс.

Причинами бактериурии принято считать:

• инфекции мочевыделительных и половых органов (цистит, уретрит, пиелонефрит, везикулит, простатит);
• заболевания, передающиеся при половых контактах (хламидиоз, трихомониаз, уреаплазмоз);
• снижение иммунитета;
• несоблюдение гигиены половых органов;
• эндокринные заболевания (сахарный диабет).

Ложная бактериурия, при которой микрофлора не имеет особенности к размножению, диагностируется, если количество микроорганизмов не превышает 50 000 КОЕ/мл мочи. Данное состояние означает, что бактерии попали в организм человека извне (например, некачественный сбор материала для анализа). Ложная бактериурия не требует дальнейшего обследования и лечения человека, но в обязательном порядке подлежит повторной сдаче анализа мочи.

В период вынашивания малыша, женщина постоянно посещает своего ведущего гинеколога и неоднократно сдает анализ мочи. Вы можете узнать, что делать, если у беременной нашли бактерии в моче?

При истинной бактериурии в моче обнаруживаются следующие микроорганизмы:

• Кишечные палочки — являются грамотрицательными бактериями, живущими в кишечнике человека. При несоблюдении правил личной гигиены, кишечная палочка может проникнуть в мочеполовые пути и привести к инфекционным процессам в уретре, мочевом пузыре или почках.
• Протей — бактерии, обитающие в пищеварительном тракте. Внедряясь в мочевые пути, микроорганизмы провоцируют развитие воспалительного процесса. Урина приобретает резкий неприятный запах и темный оттенок.
• Клебсиелла — патогенные микроорганизмы, которые обитают в пораженных органах (бронхах, гортани, легких) и стремительно размножаются, если иммунитет человека сильно ослаблен. Клебсиелла может проникать в мочеполовую систему с током лимфы или крови.
• Энтерококк фекальный — присутствует в кишечнике у каждого человека. Попадая в мочевыделительную систему, микроорганизмы начинают активно плодиться, приводя тем самым к развитию инфекционного заболевания.

Если у здорового человека обнаружена ложная бактериурия, терапия не назначается, исключение составляют лишь пожилые люди, беременные женщины, маленькие дети и лица с ослабленным иммунитетом. В этом случае проводится тщательное обследование и повторная пересдача анализа.

Чаще всего признаки бактериурии напрямую зависят от заболевания, протекающего в мочеполовой системе, но существуют и общие симптомы присутствия бактерий в моче:

• самопроизвольное выделение урины;
• частое мочеиспускание, сопровождающееся сильными болями;
• резкий зловонный запах урины;
• болезненность в нижней части живота;
• появление в моче слизи или крови;
• чувство неопорожненного мочевого пузыря;
• жжение и зуд при мочеиспускании;
• боль в области промежности;
• изменение цвета мочи (появление мутного осадка, темный оттенок урины).

При развитии уретрита больной страдает от болей:

1. возникающих в области лобка;
2. зуда в зоне промежности;
3. жгучих болей во время мочеиспускания;
4. присутствия в моче гноя, крови;
5. ощущения склеенности мочеиспускательного канала (особенно по утрам).

Наличие цистита сопровождается:

1. частыми ночными походами в туалет;
2. болезненными и тянущими ощущениями вначале опорожнения мочевого пузыря, и в конце процесса выведения мочи;
3. у больного наблюдается помутнение биологической жидкости;
4. чувство не опустошенности мочевого пузыря;
5. слабость и повышение температуры тела.

1. сильная боль в области спины;
2. высокая температура тела и озноб;
3. приступы тошноты, рвоты;
4. учащенное мочеиспускание;
5. слабость организма.

Бактериологический анализ мочи проводится несколькими способами — экспресс-диагностиками и более тщательными и длительными методами.

Для данного метода диагностики используются специальные соли — трифенилтетразолия хлориды. Если бактерии в моче присутствуют, то бесцветные соли окрасятся в синий оттенок. Тест имеет достаточно высокую точность — более 70-85%.

Другое название метода — нитритный тест. Присутствующие в урины нитраты под действием патогенной микрофлоры преобразуются в нитриты. Тест имеет вид полосок, пропитанных специальным реагентом, также к методике прилагается цветовая шкала, по которой определяется концентрация нитритов. Экспресс-диагностика обладает невысокой точностью (около 50-60%), поэтому применяется в редких случаях и только для быстрого анализа.

Глюкозно-редукционный тест основывается на выявлении содержания глюкозы, которую способны редуцировать патологические микроорганизмы. Для диагностики применяются специальные тест-полоски. В порцию утренней мочи опускают тест-полоску и смотрят на количество содержащейся в урине глюкозы. Если уровень сахара в моче ниже нормы, значит присутствующие в мочеполовых органах бактерии поглощают глюкозу. Достоверность результата — около 90%. Однако такой способ диагностики не подходит людям, имеющим сахарный диабет, в моче которых содержится всегда большое количество глюкозы.

Под микроскопом (с 400-кратным увеличением) исследуется моча больного. Если в поле зрения окажется один и более микроорганизм, лаборант подтверждает наличие бактериурии.

Данным способом определяется наличие бактерий в урине и содержание в ней лейкоцитов. Повышенный показатель лейкоцитов является свидетельством того, что в организме человека протекает инфекционный процесс.

Наиболее достоверный метод определения бактериурии. Мочу высеивают на питательную среду, после чего подсчитывают колонии выросших в ней микроорганизмов. Сама диагностика довольно длительная и занимает не менее 2 дней, однако существуют быстрые анализы бактериологического посева:

1. Метод Гоулда — чашку Петри с питательной средой делят на 4 сектора, затем выполняют посев мочи. Чашка Петри убирается на 24 часа в термостат, температура в котором не более 37ᵒC. После того как колонии микроорганизмов проявятся на питательной среде, их количество подсчитывают по специальной таблице.
2. Другой быстрый способ выполняется с помощью пластины, с нанесенной на нее питательной средой. Пластину опускают в мочу, затем вытаскивают и убирают в специальный контейнер. Выдерживают пластину около 16 часов, после чего достают и сравнивают результат с таблицей.

С помощью бактериологического посева определяют не только присутствие патогенной микрофлоры в моче, но также идентифицируют вид бактерий и их устойчивость к тому или иному противомикробному препарату.

По результатам исследований мочи в анализе подсчитывается не только КОЕ/мл бактерий, но также обращается внимание и на другие показатели:

• Обнаруженные в моче лейкоциты и бактерии указывают на протекание таких заболеваний как пиелонефрит, везикулит, цистит, атероэмболия почечных артерий, уретрит, нефросклероз.
• В ходе исследования в урине кроме микроорганизмов может присутствовать и слизь. Если анализ показывает в моче слизь и бактерии, что это значит? Одновременное появление в урине микрофлоры и слизи указывает на воспалительные патологии почек, развитие мочекаменной болезни, заболевания мочевого пузыря и мочеточников. Но слизь может попасть в мочу и при неправильной подготовке проб для анализа, когда эпителиальные клетки попадают в урину со слизистой стенки наружных половых органов.
• Обнаруженные в моче белок и бактерии свидетельствуют о нарушении фильтрации урины почками. Причиной данной патологии могут быть такие болезни как туберкулез почки, пиелонефрит, рак органа, гломерулонефрит.
• Найденные в моче нитриты и бактерии также указывают на бактериурию и развитие инфекционного процесса в органах малого таза. При употреблении растительной пищи в организме человека образуются нитраты, которые затем выводятся с мочой. Если в мочеполовых органах происходит активное размножение патогенной микрофлоры, бактерии перерабатывают нитраты в нитриты. Таким образом с уриной выводятся нитриты.
• Диагностированные в моче единичные бактерии свидетельствуют о ложной форме бактериурии. Такой показатель наблюдается, если у человека сильная защитная реакция организма.

Терапия бактериурии проводится только после выяснения локализации воспаления и определения вида микроорганизмов, ставших причиной конкретного заболевания. После того как выявлен возбудитель инфекции, определяется его чувствительность к тому или иному антибиотику. Только таким способом можно добиться полного выздоровления больного и исключения повторных рецидивов. Для лечения бактериурии применяются противомикробные препараты разных групп:

• сульфаниламиды;
• нитрофураны;
• фторхинолоны;
• цефалоспорины.

Кроме того, во время лечения необходимо строго следить за питанием, исключить:

Пить больше чистой воды. Для лучшего оттока мочи назначаются травяные сборы и чаи, фитопрепараты. Для поддержания нормальной кислотности урины потребуется как можно чаще пить морс из клюквенных ягод. Если человека мучают сильные болезненные ощущения во время мочеиспускания, доктор прописывает обезболивающие препараты. Так же рекомендуется принимать средства, способствующие укреплению иммунитета, витаминно-минеральные комплексы.

Терапия антибиотиками проводится только по строгой схеме, указанной лечащим врачом:

1. Длительность курса составляет от 3 до 10 дней, в зависимости от тяжести заболевания.
2. После завершения терапии врач повторно направляет больного на анализ мочи, для того чтобы определить эффективность лечения.
3. Если после курса антибиотиков в моче присутствуют бактерии, доктор подбирает другой противомикробный препарат.

Бактерии в моче не всегда свидетельствуют о развитии воспалительного процесса. Только качественный анализ урины способен выявить патологическую цифру содержания микроорганизмов в моче, определить вид возбудителя инфекции и составить эффективную схему лечения. Поэтому при наличии микрофлоры в биологической жидкости требуется более тщательное обследование больного, только таким способом можно вовремя распознать серьезное заболевание мочеполовых органов.

Также вы можете узнать, посмотрев данный видеоролик, где вам расскажут о самом популярном анализе — общий анализ мочи, а также как надо правильно собрать мочу.

источник