Для определения глюкозы в моче рабочее место должно быть оснащено следующими элементами:
- Набор пипеток и пробирок.
- Воронки, колбы, фарфоровая ступка.
- Фильтровальная бумага.
- Спиртовка или газовая горелка.
- Сегнетовая соль.
- Сернокислая медь.
- Едкий натр.
- Лимоннокислый натрий.
- Углекислый натрий.
- Азотнокислый висмут.
- Дистиллированная вода.
В основу методик, используемых для качественного определения глюкозы в моче, положены ее восстанавливающие свойства.
В результате взаимодействия глюкозы с реактивом образуется окрашенное соединение, выпадающее в осадок. В реакциях Фелинга, Гайнеса-Акимова, Бенедикта сернокислая медь последовательно восстанавливается в закись меди — кирпично-красного цвета и в гидрат закиси меди — желтого цвета. В реакции Нилендера азотнокислый висмут восстанавливается в металлический висмут — черного цвета. Перед качественным определением глюкозы в моче выполняют следующую работу:
1. Мутную мочу фильтруют.
2. При большом содержании в моче белка (свыше 1%о) его удаляют. Для этого подкисляют мочу до слабокислой реакции, нагревают до кипения, затем охлаждают и фильтруют. Фильтрат должен быть прозрачным и при прибавлении к нему 20% раствора сульфосалициловой кислоты не давать помутнения.
Примечание. В редких случаях при наличии в моче большого количества восстанавливающих веществ (мочевая кислота, индикан, креатиннн, желчные пигменты и др.) их удаляют следующим образом. В пробирку наливают 8 мл мочи, прибавляют 1 мл 96° спирта и небольшое количество животного угля. Восстанавливающие вещества адсорбируются углем, оседающим на дно пробирки; глюкоза не адсорбируется, она остается в растворе.
При проведении качественного определения глюкозы с обработанной таким образом мочой в реакцию вступает только глюкоза.
Для качественного определения глюкозы в моче применяют следующие реакции:
- реакцию Фелинга;
- реакцию Гайнеса-Акимова (модифицированный капельный способ);
- реакцию Бенедикта;
- реакцию Нилендера;
- капельный способ качественного определения глюкозы в моче.
Рассмотрим данные реакции более подробно.
Для этой реакции готовят два реактива — № 1 и 2.
Реактив Фелинга № 1 (7% раствор сернокислой меди). 7 г сернокислой меди растворяют в дистиллированной воде, доводя объем растворителя до 100 мл. Реактив бледно-голубого цвета.
Реактив № 2. 8 г едкого натра и 35 г сегнетовой соли растворяют в воде, доведя объем растворителя до 100 мл. Реактив бесцветен.
Рабочий раствор реактива Фелинга готовят на 1-2 дня путем смешивания равных объемов реактива № 1 и 2.
Постановка реакции. 5-6 мл рабочего раствора реактива Фелинга помещают в химическую пробирку и смешивают с 5-6 мл профильтрованной мочи. Смесь приобретает синий цвет. Верхнюю часть пробирки с мочой нагревают над пламенем горелки и кипятят в течение 1-2 минут. При наличии глюкозы в нагретой части мочи образуется кирпично-красное окрашивание. При отсутствии глюкозы синий цвет не изменяется.
Для реакции готовят реактив Гайнеса (по прописи Акимова). Для этого 13,3 г химически чистой кристаллической сернокислой меди растворяют в 400 мл дистиллированной воды, в другой посуде растворяют 50 г едкого натра в 400 мл дистиллированной воды, в третьей — разводят 15 г глицерина в 200 мл дистиллированной воды. Смешивают первый и второй растворы и к этой смеси при постоянном помешивании прибавляют небольшими порциями третий реактив. Реактив Гайнеса синего цвета. Годен в течение длительного срока.
Постановка реакции. В пробирку помещают 8 капель реактива Гайнеса и 2 капли мочи. Пробирку нагревают над пламенем до закипания мочи или прогревают в кипящей водяной бане в течение 1-2 минут. При наличии глюкозы на дне пробирки образуется зеленоватый, коричнево-зеленоватый или красноватый осадок, а при ее отсутствии синий цвет реактива Гайнеса не изменяется.
В реакции применяют реактив Бенедикта, который готовят следующим образом. В мерную колбу помещают 86,5 г лимоннокислого натрия и 100 г кристаллического углекислого натрия и растворяют при нагревании примерно в 350 мл дистиллированной воды. В другой посуде растворяют 8,65 г сернокислой меди в 50 мл дистиллированной воды. Оба раствора смешивают в мерной 500-миллилитровой колбе и доливают дистиллированной водой до метки. Реактив имеет синий цвет, достаточно стоек.
Постановка реакции. В пробирку наливают 5 мл реактива Бенедикта, прибавляют 8 капель мочи и кипятят над пламенем горелки 2 минуты или в кипящей бане 5 минут. При наличии глюкозы образуется зеленоватый желтый или красный осадок. При отсутствии глюкозы синий цвет реактива не изменяется. Пробу Бенедикта считают наиболее чувствительной и самой лучшей из проб, основанных на восстанавливающих свойствах глюкозы, ее отличает большая специфичность.
Для постановки реакции готовят реактив Нилендера. Для этого 2 г азотнокислого висмута и 4 г сегнетовой соли растирают в фарфоровои ступке, а затем растворяют в 1 мл 10% раствора едкого натра, который приливают небольшими порциями в ступку.
После этого реактив фильтруют в склянку из темного стекла и хранят на холоде, так как он нестоек. Годность реактива периодически проверяют. С этой целью 3 мл реактива разводят в 10 мл дистиллированной воды и 4 мл разведенного реактива нагревают в пробирке до кипения. Если жидкость не буреет, значит реактив годен для употребления.
Постановка реакции. В пробирку помещают 6 мл мочи, предварительно освобожденной от белка, прибавляют 3 мл реактива и перемешивают. Затем верхнюю часть пробирки нагревают и кипятят в течение 2-3 минут, пробе дают постоять в штативе в течение 10 минут, после чего учитывают результаты. При наличии глюкозы в моче образуется темно-бурый или черный осадок, а при ее отсутствии цвет смеси не изменяется.
В последнее время нашел применение сухой способ определения глюкозы в моче. Для этой реакции готовят следующий реактив: 1 г мелкорастертого медного купороса и 10 г углекислого натрия тщательно перемешивают и хранят в темной склянке с притертой пробкой при комнатной температуре. Щепотку порошкообразного реактива помещают на предметное стекло и пипеткой добавляют 2-3 капли исследуемой мочи. Затем смесь подогревают над пламенем горелки до закипания. Голубой цвет указывает на отсутствие глюкозы, зеленый — на содержание глюкозы около 0,1 %, желто-зеленый — на присутствие около 0,5 % глюкозы, желтый — около 1 %, коричневый — около 2% и кирпично-красный — около 3-4% глюкозы и более.
В последнем случае анализ мочи на глюкозу повторяют после разведения мочи в 2 раза.
Содержание глюкозы в моче можно установить с помощью индикаторной бумаги «глюкофан». В специальной инструкции, прилагаемой к каждой партии бумаги, подробно изложена техника определения. Кроме того, в настоящее время применяют индикаторную бумагу отечественного производства «глюкотест».
источник
В норме у всех здоровых людей в обычных общих анализах мочи могут обнаружить лишь следы глюкозы. Стандартное ее содержание не превышает 0,7 ммоль/литр или 2,8 ммоль/сутки.
Если в результате исследования было обнаружено, что у вас повышена глюкоза в моче, то вначале следует просто пересдать анализ. Если вы повторно получите плохой результат, то следует начинать искать причины возникновения проблем.
Нередко появление сахара сопровождает острый панкреатит. Но он может появиться и вследствие развития других болезней. Например, глюкозурию центрального генеза может вызвать менингит, геморрагический инсульт, энцефалит, черепно-мозговая травма. Лихорадка также является причиной увеличения концентрации сахара в моче. Отдельно выделяют и эндокринную глюкозурию. Она может развиться в результате скачков уровня адреналина, увеличении тироксина, соматотропина, глюкокортикоидных гормонов.
Ренальная глюкозурия развивается из-за проблем с мочевыделительной системой. Это может быть последствием патологии клубочков и канальцев почек. Указанные поражения часто развиваются на фоне инфекционных заболеваний – гломерулонефрита или интерстициального нефрита. Отравление морфином, хлороформом, стрихнином, фосфором является токсической причиной появления сахара в исследуемом материале.
Также заболевание сопровождает акромегалию. Это непропорциональный рост внутренних органов, мягких тканей и скелета, вызванный избыточным продуцированием соматотропного гормона. При этом в общем анализе нередко наблюдается эозинофилия и анемия, а в моче — гиперкальциурия.
При феохромоцитоме также появляется глюкоза в моче. Причины кроются в том, что нарушается работа почек из-за развития опухоли мозгового слоя надпочечников.
Синдром Иценко-Кушинга характеризуется повышением функции надпочечников, они начинают продуцировать глюкокориткоиды в избыточном количестве. Это сопровождается появлением глюкозурии.
Также среди причин называют инфаркт, ожоги, демпинг-синдром.
Чаще всего повышение глюкозы в моче наблюдается у больных диабетом, гипертиреозом, у людей с тяжелыми поражениями печени. При этом процесс почечной фильтрации нарушается. Глюкоза, проходя через мембраны клубочков в почках, должна полностью всасываться обратно в канальцах и возвращаться в кровоток.
Для своевременного выявления заболеваний необходимо сдавать общий анализ мочи ежегодно. Ведь часто начало большинства болезней проходит практически бессимптомно.
Также важно знать, что существует 2 формы этого заболевания. Глюкоза в моче повышена может быть в результате наследственного дефекта, при котором нарушен механизм ее транспортировки. В таком случае говорят о первичной почечной глюкозурии. Схожий механизм развития наблюдается и при синдроме Фанкони или глюкоаминовом диабете. При первом заболевании нарушается работа почек, в моче обнаруживают глюкозу, избыток бикарбоната, аминокислот, фосфатов. Оно характеризуется повышенным выделением мочи, болями в костях, слабостью. Глюкоаминовый диабет проявляется сбоями в работе почек, при которых аминокислоты и сахар выводятся с мочой.
Вторичная форма может проявиться во время беременности или в результате отравления.
Для окончательной установки диагноза мало просто выслушать жалобы и собрать анамнез, необходимо достоверно определить, есть ли глюкоза в моче. Причины ее повышения устанавливаются позже. Сложность заключается в том, что глюкозурия часто протекает бессимптомно. Правда, при выраженной потере сахара с мочой некоторые пациенты жалуются на утомляемость, слабость, головокружения, чувство голода, повышение потоотделения. Также больные иногда отмечают боли в мышцах, увеличение суточной мочи, водянистый стул и нарушение сердцебиения.
Так, в рамках исследования назначаются дополнительные анализы. Проверяется количество сахара в сыворотке крови, исследуются все порции этой биологической жидкости, в том числе и суточная. Для анализов разработаны специальные методы определения глюкозы в моче.
Наиболее распространенным способом является выяснение концентрации сахара с помощью специальных полосок с реагентами. Также наличие глюкозы диагностируют, проведя пробу Гайнеса, исследование по методу Бенедикта, Нидлера. Выяснить точную концентрацию можно с помощью поляриметрического исследования или проведя анализ по Альтгаузену.
Если вам надо сдать обычный общий анализ или целенаправленно проверить наличие сахара в моче, то не забывайте об установленных правилах сбора биологического материала. Так, вначале необходимо провести тщательный туалет наружных половых органов с помощью нейтрального мыла. Иначе в биологический материал могут попасть вещества, способствующие быстрому разложению глюкозы.
Мочу необходимо собирать в чистую посуду, желательно использовать специальные аптечные контейнеры или тщательно вымытые и стерилизованные баночки. Закрыв емкость крышкой, ее необходимо доставить в лабораторию, в которой и будут определять содержание глюкозы в моче.
Если вам сказали собрать суточную мочу, то делается это следующим образом. Первая утренняя порция сливается. Сбор начинается со второго в день мочеиспускания в полном объеме. Не забудьте, что в суточный объем необходимо собрать утреннюю мочу следующего дня. Обязательно подмывайтесь перед каждым походом в туалет. Но не надо нести всю бутыль в лабораторию для того, чтобы определить, если ли у вас глюкоза в моче, повышена она или нет. Замеряйте общий объем, перемешайте биологическую жидкость в емкости и отберите до 100 мл в чистую баночку. На специальном листе необходимо указать ваш рост, вес и общее количество собранной мочи. Кстати, на протяжении суток хранить емкость необходимо в холодильнике. Это нужно для того, чтобы не снижалась концентрация глюкозы в моче.
Для диагностики предназначены особые полоски «Глюкотест» длиной 5 см и шириной 0,5 см со специальной светло-желтой полосой. Именно этот участок пропитан ферментами и красителями, он и окрашивается в случае возникновения реакции.
Определение глюкозы в моче проводится следующим образом. Индикаторная полоска помещается в биологическую жидкость так, чтобы реактивы полностью намокли, и сразу извлекается из нее. После этого ее оставляют на 2 минуты. Как пройдет указанное время, окрас полосы сравнивают со специальной шкалой, определяя приблизительную концентрацию сахара. Если она превышает 20 г/л, то цвет полоски становится предельно возможным и далее не изменяется.
Хранить полоски необходимо при температуре до +18 градусов так, чтобы на них не попадали солнечные лучи. Дотрагиваться до индикаторного участка нежелательно.
Для его проведения создают специальный реактив. В него входят кристаллический сульфат меди, едкий натр и глицерин, которые растворяются в дистиллированной воде по отдельности, а затем смешиваются.
Проводят исследование следующим образом: 20 капель реактива прибавляют к 8 мл мочи в пробирке. В результате должен появиться голубоватый окрас. Верхнюю часть пробирки греют до начала кипения. Нижний ее отдел остается холодным для контроля. Если при этом в нагретой части пробирки голубой окрас сменяется на желтый, то, значит, глюкоза в моче повышена.
Существует и другой метод проверки наличия избыточного количества сахара в моче, основанный на тех же свойствах глюкозы восстанавливать закись меди или гидрат закиси меди из гидрата окиси меди в щелочной среде. Для этих целей готовят специальный реактив из цитрата натрия, безводного карбоната натрия, сульфата меди и воды. Из них делают растворы, которые потом смешивают.
Для проведения исследования необходимо до 10 капель мочи и 5 мл готового реактива. Их смешивают в пробирке, нагревают ее на протяжении пары минут и дожидаются остывания. Если в результате появляется осадок, а жидкость окрашивается в желтый, красный или зеленый цвет, то глюкоза в моче есть.
Этот метод считается одним из самых надежных среди качественных исследований.
Метод разработан на основе того, что глюкоза может восстанавливать нитрат висмута в металлический. Для проведения исследования готовят специальный реактив. В него входит нитрат висмута, который растирается в сегнетовой соли, 10% едкий натр. Хранится приготовленный реактив только в бутылках из темного стекла.
Проводится анализ следующим образом. Моча и реактив смешиваются в соотношении 2:1 и варятся на протяжении 3-х минут. Если присутствует глюкоза в моче, то цвет поменяется на коричневый или даже черный, а при стоянии будет виден темный осадок. Но иногда положительный результат может возникнуть не из-за наличия сахара, а в результате реакции на белок или ряд лекарственных препаратов.
С помощью указанного метода проводится не только определение глюкозы в моче, но и выяснение ее концентрации. Делается это в специальном приборе – поляриметре.
Для проведения исследования биологическую жидкость обесцвечивают и удаляют из нее белок. После этого ее заливают в аппарат, ждут несколько минут для затихания колебаний частиц и определяют концентрацию глюкозы. С помощью такого метода можно определить даже значимое повышение глюкозы в моче, ведь оно основано на свойствах этого вещества поворачивать поляризованный луч вправо. Угол вращения будет зависеть от концентрации раствора. Правда, на результаты могут повлиять β-оксимолярная кислота, стрептомицин, тетрациклиновые препараты.
Указанный способ позволяет достаточно точно определить, присутствует ли в глюкоза в моче. Для этого в биологическую жидкость добавляют 10% раствор едкого натра и кипятят ее в течение минуты. После этого ее цвет сравнивают со шкалой стандартов, приготовленной в пробирках. Этот способ используют как альтернативу полиметрическому исследованию, когда необходимо быстро выяснить уровень сахара, а необходимого оборудования нет.
Причиной появления глюкозы в моче у малышей может стать диабет. При этом у новорожденных снижена масса тела, а при появлении проблем замечается отставание в развитии. Но по одному анализу мочи диагноз не ставится, малыша тщательно обследуют, чтобы исключить другие возможные причины развития болезни.
Обнаруженная глюкоза в моче у ребенка вынуждает родителей более тщательно следить за питанием малыша. В его организм должно поступать достаточное количество углеводов, они необходимы для полноценного развития. Также важно следить, чтобы концентрация глюкозы в сыворотке крови находилась в пределах 3,5-5,5 ммоль/л. Для этого необходимо не только правильное питание, но и физические нагрузки.
Многие пациенты не знают, что значит глюкоза в моче. Они начинают паниковать и требовать назначения каких-то препаратов для нормализации состояния. Но наличие сахара в биологической жидкости является лишь сигналом проблем. Это значит, что необходимо проверить, нет ли у вас диабета, проблем с почками или надпочечниками. Также необходимо проконтролировать работу щитовидной железы. Не стоит забывать, что глюкозурия может развиться и из-за отравлений рядом веществ.
Если вы страдаете от глюкозурии и хотите узнать, как предотвратить развитие болезни у детей, то медицина тут бессильна. Никакой специфической профилактики не существует. Важно просто следить за питанием, давать необходимую физическую нагрузку, и тогда есть шанс, что организм будет работать нормально, несмотря на предрасположенность к развитию заболевания. Ведь чаще всего глюкоза в моче у ребенка появляется вследствие генных мутаций. А избежать этого нельзя. Как правило, ломается ген, отвечающий за белок, который необходим для всасывания в кровь сахара в почках. Даже если у родителей нет проблем, но у них есть малыш с глюкозурией, то при планировании следующих беременностей им в обязательном порядке необходимо посетить генетика для оценки возможных рисков.
источник
В статье рассмотрим, что такое проба Бенедикта.
Сдавать кал на углеводы периодически полезно каждому ребенку. Хотя бы изредка делать это нужно даже взрослым, потому что копрограмма позволяет получить полноценную информацию и вовремя диагностировать определенные патологии, нарушения и развитие болезней. Одним из самых распространенных исследовательских методов для выявления у ребенка в кале углеводов является проба Бенедикта.
Проба на содержание в кале углеводов обладает самостоятельным значением при диагностике, однако часто применяется наряду с копрограммой, анализами на кишечный дисбактериоз и наследственным маркером непереносимости лактозы. Исследование назначается для выявления лактазной недостаточности у грудничков и определения у взрослых происхождения болей в животе, чрезмерного метеоризма или хронического поноса.
В кале углеводы преобладают в форме молочного сахара (лактозы). Определенная доля лактозы остается в нерасщепленном виде в кишечном просвете, именно она вызывает развитие поноса, удержание жидкости, спастические боли в зоне живота и чрезмерное образование газов. В результате формируется лактазная недостаточность, характеризующаяся уменьшением активности этого фермента.
Активность ее у взрослых в норме равна примерно 8 % от начальной степени. По выраженности классифицируются частичная (гиполактазия) и полная (алактазия) лактазная недостаточность. Заболевание по происхождению может быть врожденным (первичным) или приобретенным (вторичным). Второй вариант нарушения формируется, когда повреждаются энтероциты.
Проба Бенедикта имеет целью исследование масс кала на дисахара, сахара, природный дисахар (мальтозу), поли- и моносахариды. Самыми опасными являются восстанавливающие дисахариды – галактоза, лактоза и мальтоза.
Исследование кала у грудничков на углеводы определяет наличие или отсутствие нарушений процессов всасывания или расщепления углеводов и лактозы.
Существует два фермента (лактоза и лактаза), которые тесно взаимосвязаны. Если ребенок ощущает нехватку лактазы, которая расщепляет лактозу, то грудное молоко в рационе малыша не всасывается в полном объеме и усваивается не до конца. На этом фоне происходит развитие лактозной непереносимости, заключающейся в неспособности организма обрабатывать лактозу, из-за чего провоцируются определенные нарушения.
Для того, чтобы подтвердить лактазную недостаточность, чаще всего используют определение концентрации углеводов в кале пробой Бенедикта. Такое исследование позволяет получить сведения об общей способности организма к усвоению сахаров. Методика пробы Бенедикта основывается на проведении реакции, которая позволяет установить наличие углеводов со способностью восстановления меди посредством редуцирующих веществ из степени окисления 2+ в 1+. Эти функции есть у мальтозы, фруктозы, галактозы, лактозы и глюкозы. Сроки проведения исследования колеблются от одного до двух суток.
Для сдачи пробы Бенедикта нужен кал пациента. У ребенка сбирать его следует соответствующим образом. Для анализа подходит материал, собранный с учетом нескольких рекомендаций.
Поэтому нужно ознакомиться заранее с правилами сбора испражнений. Но в них нет ничего сложного. Следует придерживаться следующих простых правил:
- для выхода испражнений нельзя пользоваться клизмой;
- не давать слабительное ребенку;
- образцы следует доставить для анализа максимум через четыре часа после взятия;
- за два-три дня до забора образцов нельзя давать лекарственные препараты;
- придерживаться установленного режима кормления;
- для анализа понадобится как минимум одна чайная ложка биоматериала;
- в питание перед анализом не добавляются новые продукты;
- биоматериал нужно приносить в специальной стерильной емкости, приобрести ее можно в аптеке;
- не подойдут образцы из памперса или пеленки, так как есть вероятность получения неправильных результатов, из-за чего исследование материала на углеводы будет неправильным.
Только при соблюдении этих рекомендаций количество углеводов будет отражать реальное положение дел. В кале углеводы могут поведать об определенных дефектах, с которыми необходимо сразу же бороться. При превышении нормы и содержании их в большем количестве, чем полагается, специалист назначит пациенту индивидуальную терапию.
Какова норма пробы Бенедикта?
В кале углеводы присутствуют почти всегда. Но существует конкретная норма их наличия. В фекалиях может быть патологический уровень, когда нужно оперативно начинать лечиться.
Сверить результат можно или по таблице, или обратившись к врачу после того, как он получит сведения о копрограмме. Углеводы в результатах указываются в процентах.
Норма пробы Бенедикта у грудничка интересует многих родителей.
Для малыша в возрасте от трех месяцев до года показателем нормы выступает значение от 0 до 0,25 %. Результат более 0,25 % является патологией, небольшое отклонение при этом – 0,3-0,5, среднее – свыше 0,6, высокое – больше 1 %. Результаты у грудных детей от рождения до трех месяцев могут быть ложноположительными. У детей после года и взрослых в норме углеводы не обнаруживаются.
Анализ «проба Бенедикта» имеет очень простую расшифровку, поэтому родители могут сами догадаться, показатели в норме или же понадобится пролечиться и восстановить систему пищеварения.
Нужно понимать, что высокое содержание углеводов – не диагноз, а результат исследования. Диагностировать по нему лактазную недостаточность окончательно нельзя. Такое нарушение характерно для дисбаланса микрофлоры и не сформированной ферментальной системы. Главная задача специалиста состоит в том, чтобы привести в норму работу системы пищеварения. Как это будет сделано, определяется особенностями детского организма и конкретной ситуацией.
Определение углеводов в кале выступает довольно специфическим тестом, поскольку данный способ не позволяет дифференцировать разные виды непереносимости углеводов из-за дисахаридазной недостаточности. У исследования есть самостоятельное диагностическое значение при контроле выбора диеты, нужной пациенту и скрининге недостаточности лактазы.
С результатом анализа нужно обратиться к терапевту, гастроэнтерологу или педиатру. Обычно лечащий врач после этого направляет пациента на дополнительные исследования – водородный тест и копрограмму. Чтобы скорректировать небольшие отклонения, важно привести в норму питание посредством адаптированных или безлактозных смесей питания, содержащих мало лактозы и исключить аллергены из рациона.
Мы рассмотрели, что представляет собой проба Бенедикта.
источник
анализ мочи «на аминокислоты» Как расшифровать анализ в домашних условиях. |
Сейчас эту тему просматривают: Нет
На сайте с 02.02.08 |
Вернуться к началу | |
|