Проба фелинга позволяет обнаружить в моче

Фенилкетонурия, или фенилпировиноградная олигофрения, – это наследственное заболевание, связанное с нарушением ферментного обмена преобразования фенилаланина в тирозин из-за отсутствия или крайне малой активности фермента печени фенилаланингидроксилазы (фенилаланин-4-гидроксилазы).

Заболевание передаётся по аутосомно-рецессивному типу. То есть ребёнок должен наследовать две копии мутантного гена: одну – от матери, вторую – от отца. При наследовании только одной копии ребёнок, как и его родители, будет носителем болезни. Если оба родителя являются носителями фенилкетонурии, то шансы родиться больными у их детей равны один к четырём – ровно столько же, как и возможность родиться абсолютно здоровым. Шанс родиться носителем болезни у детей таких родителей составляет 2/4.
Фенилаланингидроксилаза – очень важный печёночный фермент, который преобразует фенилаланин в тирозин. Вследствие мутации гена, который в норме должен контролировать синтез фенилаланингидроксилазы, образуется блок синтеза этого фермента или он синтезируется в критически малых количествах. Это приводит к тому, что фенилаланин начинает дезаминироваться (происходит процесс отщепления аминогрупп от молекулы органического соединения) и синтезировать очень токсичные вещества в организме: фенилуксусную, фенил-молочную и фенилпировиноградную кислоты.
Кроме того, недостаток тирозина приводит к нарушению образования меланина и катехоламинов – веществ, которые выполняют роль «управляющих» молекул в области межклеточных взаимодействий во всём организме и особенно в клетках головного мозга.
Очень редко (1% от всех случаев заболевания) фенилкетонурия развивается из-за мутации в генах, которые контролируют синтез кофактора фенилаланингидроксилазы — BH4 (тетрагидробиоптерина). В результате данной мутации в организме отсутствует или присутствует в очень малых количествах BH4, что приводит к невозможности выполнения своих функций фенилаланингидроксилазой и развитии всех вышеперечисленных вытекающих явлений. Данный тип фенилкетонурии также передаётся по аутосомно-рецессивному типу.

Симптомы возникают уже на первых неделях, реже – месяцах жизни ребёнка и проявляются в разных видах.
— Чрезмерная сонливость.
— Вялость, апатия.
— Вместо сонливости может быть, наоборот, плаксивость и капризность.
— Отмечается значительная отсталость в психическом и физическом развитии.
— В дальнейшем могут развиваться эпилептиформные припадки любого характера (судорожные, отключение сознания или бессудорожные движения конечностей или головы, вздрагивания).
— В процессе развития болезни возникает тонус отдельных определённых групп мышц, из-за чего ребёнок приобретает вынужденную позу «портного» – согнутые руки и поджатые ноги.
— В тяжёлых случаях могут развиваться тремор рук, гиперкинезы (непроизвольные, внезапно возникающие, резкие, хаотические движения), атаксия (нарушение координации движений).
— Обычно больные дети белокурые, с голубыми глазами и белой чувствительной кожей, склонной к экземам и дерматитам.
— Часто отмечается у детей сильная потливость с характерным «мышиным запахом».
— В процессе развития болезни моча приобретает «мышиный запах».
— Если не начать лечение, то развиваются имбецильность, или идиотия.

Для обнаружения заболевания до момента появления первых симптомов всем новорожденным проводят скрининг по специальным профаммам, позволяющий выявить повышенный уровень фенилаланина в крови ещё на первых неделях жизни ребёнка.
Если у ребёнка обнаруживаются самые минимальные признаки возможного наличия фенилкетонурии, необходимо немедленно сдать анализ на определение уровня фенилаланина в крови и/или сделать пробу Фелинга.
Проба Фелинга
К моче ребёнка (можно провести тест прямо на пелёнке, запачканной мочой малыша) добавляют уксусную кислоту и 5%-ный раствор треххлористого железа. Моча приобретает зелёный цвет.
Эти методы исследования считаются ориентировочными. При положительном результате необходимо дополнительное обследование, направленное на точное определение количества фенилаланина в моче и крови, если ребёнок старше двух недель жизни, или провести определение активности фенилаланингидроксилазы в биоптате (материале, взятом при помощи биопсии) печени и/или анализ ДНК на выявление мутантного гена, если ребёнок младше или старше двух недель.
При подозрении на фенилкетонурию, связанную с мутацией гена, регулирующего синтез кофактора BH4, необходимы дополнительные исследования. В частности, необходим анализ ДНК, нацеленный на поиск мутантного гена.

Направлено на снижение содержания фенилаланина в крови. Для этого ребёнку назначается специальная диета, исключающая продукты, содержащие фенилаланин, то есть вся пища животного происхождения. Дефицит белка восполняется белковыми гидролизатами (аминокислотными смесями) – лефанолаком, цимограном, гипофенатом, берлофеном. До полового созревания (до возраста не менее 18 лет) эти смеси становятся основным продуктом питания для ребёнка. Их можно вводить вместе с супами, фруктовыми соками, овощными пюре. Некоторые фрукты и овощи, содержащие фенилаланин, тоже исключаются из рациона питания. На протяжении всего лечения необходим строгий контроль уровня фенилаланина в крови. Многие учёные считают, что диета необходима больным на протяжении всей жизни.
Если болезнь определить в доклинической стадии и вовремя назначить лечение, то развития симптомов можно полностью избежать. При отсрочке терапии наступают необратимые повреждения тканей мозга.

Выявление носительства мутантного гена у обоих родителей и ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение), а также скрининг всех новорожденных для своевременного назначения лечения и недопущения развития болезни.

источник

A09 Тип — исследования биологических жидкостей, с помощью которых исследуются концентрации веществ в жидких средах организма и активность ферментативных систем
A09.28 Тип — исследования биологических жидкостей. Раздел — Почки и мочевыделительная система
A09.28.033 Исследование уровня фенилпировиноградной кислоты в моче (проба Фелинга) (Выбранный код из номенклатуры мед. услуг )
Смежные коды:
A09.28.002 Исследование аминокислот и метаболитов в моче
A09.28.003 Определение белка в моче
A09.28.004 Обнаружение миоглобина в моче
A09.28.005 Обнаружение гемоглобина в моче
A09.28.006 Исследование уровня креатинина в моче
A09.28.007 Обнаружение желчных пигментов в моче
A09.28.008 Исследование уровня порфиринов и их производных в моче
A09.28.009 Исследование уровня мочевины в моче
A09.28.010 Исследование уровня мочевой кислоты в моче
A09.28.011 Исследование уровня глюкозы в моче
A09.28.012 Исследование уровня кальция в моче
A09.28.013 Исследование уровня калия в моче
A09.28.014 Исследование уровня натрия в моче
A09.28.015 Обнаружение кетоновых тел в моче
A09.28.016 Исследование уровня лекарственных препаратов и их метаболитов в моче
A09.28.017 Определение концентрации водородных ионов (pH) мочи
A09.28.018 Анализ минерального состава мочевых камней
A09.28.019 Определение осмолярности мочи
A09.28.020 Обнаружение эритроцитов (гемоглобина) в моче
A09.28.023 Исследование уровня эстрогенов в моче
A09.28.024 Определение гемосидерина в моче
A09.28.025 Исследование уровня экскреции гормонов мозгового слоя надпочечников в моче
A09.28.026 Исследование уровня фосфора в моче
A09.28.027 Определение активности альфа-амилазы в моче
A09.28.028 Исследование мочи на белок Бенс-Джонса
A09.28.029 Исследование мочи на хорионический гонадотропин
A09.28.030 Исследование парапротеинов в моче
A09.28.031 Исследование уровня фенилаланина в моче
A09.28.032 Исследование уровня билирубина в моче
A09.28.034 Исследование уровня катехоламинов в моче
A09.28.035 Исследование уровня свободного кортизола в моче
A09.28.036 Исследование уровня 17-гидроксикортикостероидов (17-OKC) в моче
A09.28.037 Исследование уровня альдостерона в моче
A09.28.038 Исследование уровня индикана в моче
A09.28.039 Исследование уровня нитритов в моче
A09.28.040 Исследование уровня ванилилминдальной кислоты в моче
A09.28.041 Исследование уровня гомованилиновой кислоты в моче
A09.28.042 Исследование уровня 5-гидроксииндолуксусной кислоты (5-ОИУК) в моче
A09.28.043 Исследование уровня свободного и общего эстрадиола в моче
A09.28.044 Исследование уровня свободного эстриола в моче
A09.28.045 Исследование уровня эстрона в моче
A09.28.046 Исследование уровня прогестерона в моче
A09.28.047 Исследование уровня общего тестостерона в моче
A09.28.048 Исследование уровня дегидроэпианростерона в моче
A09.28.049 Исследование уровня дельта-аминолевуленовой кислоты (АЛК) в моче
A09.28.052 Исследование уровня диеновых конъюгатов мочи
A09.28.053 Исследование уровня малонового диальгида мочи
A09.28.054 Исследование уровня антигенов переходноклеточных раков в моче
A09.28.055 Определение психоактивных веществ в моче
A09.28.056 Исследование уровня малонового диальдегида мочи
A09.28.057 Исследование уровня лютеинизирующего гормона в моче
A09.28.058 Исследование уровня C-концевых телопептидов в моче
A09.28.059 Исследование уровня галогенпроизводных алифатических и ароматических углеводородов в моче
A09.28.060 Исследование уровня металлов в моче
A09.28.061 Исследование уровня свинца в моче
A09.28.062 Исследование уровня пестицидов в моче
A09.28.063 Исследование уровня оксипролина в моче
A09.28.064 Исследование уровня дезоксипиридинолина в моче
A09.28.065 Исследование уровня йода в моче
A09.28.066 Определение N-концевого телопептида в моче
A09.28.067 Исследование уровня хлоридов в моче
A09.28.068 Количественное определение котинина в моче
A09.28.069 Количественное определение этилглюкуронида в моче
A09.28.070 Исследование уровня бора в моче
A09.28.071 Исследование уровня алюминия в моче
A09.28.072 Исследование уровня кремния в моче
A09.28.073 Исследование уровня титана в моче
A09.28.074 Исследование уровня хрома в моче
A09.28.075 Исследование уровня марганца в моче
A09.28.076 Исследование уровня кобальта в моче
A09.28.077 Исследование уровня никеля в моче
A09.28.078 Исследование уровня меди в моче
A09.28.079 Исследование уровня цинка в моче
A09.28.080 Исследование уровня мышьяка в моче
A09.28.081 Исследование уровня селена в моче
A09.28.082 Исследование уровня молибдена в моче
A09.28.083 Исследование уровня кадмия в моче
A09.28.084 Исследование уровня сурьмы в моче
A09.28.085 Исследование уровня ртути в моче
A09.28.086 Экспресс-диагностика общего, рода и видов эндотоксинов в моче
A09.28.087 Исследование уровня антигена рака простаты 3 (PCA3) в моче

Расшифровка кода медицинской услуги: A 09 . 28 . 033
Класс медицинской услуги:	A	Медицинские услуги, представляющие собой определенные виды медицинских вмешательств, направленные на профилактику, диагностику и лечение заболеваний, медицинскую реабилитацию и имеющие самостоятельное законченное значение
Раздел медицинской услуги:	09	Исследования биологических жидкостей, с помощью которых исследуются концентрации веществ в жидких средах организма и активность ферментативных систем
Анатомо-функциоанльная область	28	Почки и мочевыделительная система
Вид медицинской услуги, имеющий законченное диагностическое или лечебное значение	033	Исследование уровня фенилпировиноградной кислоты в моче (проба Фелинга)

А/B ХХ.ХХХ.ХХХ.XXX
↑ ↑ ↑ ↑ ↑
| | | | |______ порядковый номер подгруппы
| | | |______________ порядковый номер группы
| | |_______________________ подраздел медицинской услуги
| |_____________________________ раздел медицинской услуги
|___________________________________ класс медицинской услуги

Код услуги состоит из буквенно-цифрового шифра от 8 до 11 (12*) знаков.
Первый знак обозначает класс услуги, второй и третий знаки — раздел (тип медицинской услуги), четвертый и пятый (шестой*) знаки — подраздел (анатомо-функциональная область и/или перечень медицинских специальностей), с шестого по одиннадцатый знаки (с седьмого по двенадцатый*) — порядковый номер (группы, подгруппы).

3. Перечень медицинских услуг разделен на два класса: «А» и «В», построенные по иерархическому принципу (описание выше).

источник

Известно достаточное количество нарушений обмена веществ, в том числе отдельных аминокислот. Большинстводанных нарушений обмена имеют наследственный или врожденный характер.Таким примером являетсяфенилкетонурия.

Фенилкетонурия (фенилпировиноградная олигофрения) – это заболевание с аутосомно-рецессивным типом наследования из группы ферментопатий, которое развивается в результате потери способности организма синтезировать фермент фенилаланин-4-монооксигеназу, способствующегопревращениюаминокислоты фенилаланина в тирозин, и приводит к тяжелому поражению центральной нервной системы (ЦНС) с нарушением умственного развития ребенка.

Средняя частота данной патологии у новорожденных составляет около 1:10 000; при этом мальчики и девочки одинаково частоболеют, но мужской пол чаще погибает на 1-м году жизни.

Типичная форма, или ФенилкетонурияI(недостаток фермента фенилаланин-4-монооксигеназы);
Атипичные формы:
- ФенилкетонурияII (дефицитдигидроптеридинредуктазы);
- ФенилкетонурияIII(недостаток 6-пирувоилтетрагидроптерин синтетазы).

Причина фенилпировинограднойолигофрении – аутосомно-рецессивно унаследованный недостаток фермента фенилаланин-4-монооксигеназы (-гидроксилазы), синтезируемого в печени, в результате чего метаболическое превращение аминокислоты фенилаланина в тирозин не происходит.

Результат этого блокирования – накопление фенилаланина и его кетопроизводных(фенилмолочной, фенилуксусной и фенилпировиноградной кислот) в организме с появлением их в очень большом количестве. В норме данные вещества не образуются. Кроме того, в головном мозге образуются ортофенилацетат и фенилэтиламин, избыток которых способствует нарушению липидного обмена в головном мозге.

Все это ведет к прогрессирующему снижению интеллекта вплоть до идиотии у данных больных.

Обнаружены также дефекты обмена биоптерина – недостаток 6-пирувоилтетрагидроптерин синтетазы, которые приводят к развитию атипичных форм фенилпировинограднойолигофрении. Данные нарушения составляют не более 10% случаев фенилкетонурии.

замедление умственного развития ребенка;
выделение с мочой огромных количеств фенилпирувата(до 1–2 г/сут) и фенилацетилглутамата (до 2–3 г/сут).

Признаки заболевания появляются уже на первой неделе или месяце жизни ребенка. Дети резко отстают в умственном и нервно-психическом развитии. Отмечается сонливость, вялость, плаксивость, повышенная раздражительность. Если болезнь прогрессирует, то возможно развитие эпилептиформных припадков – поклоны, кивки, вздрагивания развернутого судорожного или бессудорожного типа. Возможно появление кратковременного отключения сознания.

Для ребенка характерна опреденная поза – поджатые ноги и согнутые руки («поза портного») из-за гипертонусаопреденных групп мышц. Могут появляться гиперкинезы, атаксия, тремор рук, парезы центрального типа.

Нередко дети имеют характерный внешний вид – светлокожие с голубыми глазами. У них часто отмечается развитие кожных заболеваний, таких как экзема, дерматиты. Кожа склонна к чрезмерной травматизации. Появляется своеобразный мышиный запах мочи и пота. Обнаруживается склонной к пониженному артериальному давлению (гипотензии). Нередко у детей обнаруживаются пороки сердца, гипофизарный нанизм, гипогонадизм, уменьшение размеров черепа, расстройства координации движений, вегетативные дисфункции, нарушения походки, поведения.

При отсутствии адекватного лечения развивается глубокая психическая инвалидность, имбецильность, идиотия.

Микробиологический тест Гатрии флюорометрический методы (важнейшее доказательство фенилкетонурии – данные о накоплении фенилаланина в тканях):
в крови количество фенилаланина может достигать 600 мг/л (когда в норме 15 мг/л);
в цереброспинальной (спинальной) жидкости– 80 мг/л (когда норма 1,5 мг/л).
- Характерная особенность болезни – это экскреция (выделение) с мочой огромных количеств фенилпирувата (до 1–2 г/сут) и фенилацетилглутамата (до 2–3 г/сут). Но этот тест проводится только с 10-12 дня после рождения ребенка.
- Проба Фелинга – обнаружениефенилкетонурии с помощью 5-10 % раствора хлорида железа (FeCl₃) и уксусной кислоты: появление оливково-зеленойокраски мочи спустя 2–3 мин после добавления в нее нескольких капель 5-10 % раствора FeCl₃и уксуской кислоты. Также применяются индикаторные бумажки «Биофан», «Фенистикс».
- Биопсия печени (взятие участка ткани печени) – исследование ткани печени на активность фермента фенилаланин-4-монооксигеназы.
- Хроматография аминокислот.
- Использование аминоанализаторов (количественнаяконцентрацияфенилаланина в крови).

Значительно снизив прием с пищей с самого рождения ребенка фенилаланина можно предотвратить развитие болезни.

Поздно начатое лечение часто даёт определённый эффект, но никогда не устраняет ранее развившихся измененийткани мозга, которые необратимы.

Строгое соблюдение диеты (от обнаружения болезни и как минимум до полового созревания ребенка): исключаются все молочные, мясные и рыбные продукты, которые содержат животный и , частично, растительный белок.
Восполнение белка аминокислотными смесями, в которых отсутствует фенилаланин (белковые гидролизаты:Лефанолак, Берлофен, Гипофенат).
Хороший эффект дает лечение атипичных форм фенилкетонурии фактором пораженного фермента – тетрагидробиоптерином.
Применяются новые методы лечения фенилпировиноградной олигофрении:
- заместительная терапия фенилаланинлиазой (PAL) – ферментом растительного происхождения, который превращает фенилаланин в безвредные продукты обмена;
- генотерапия- введение в организм больного вирусного вектора, который содержит ген фенилаланин-4-гидроксилазы.

Вас интересует лечение в Израиле?

Крупнейшие профессиональные больницы Израиля – «Ассута» в Тель-Авиве и «Хадасса» в Иерусалиме предлагают реальную возможность получить качественное и специально для вас подобранное лечение у замечательных специалистов по адекватным ценам.

Мы помогаем найти решение ваших проблем со здоровьем, а также предоставляем полную информацию о лучших израильских врачах.

Цена лечения играет решающую роль в принятии решения о поездке в Израиль.

Каждый медицинский случай уникален, поэтому мы предоставляем нашим пациентам ориентировочные цены на диагностику, реабилитацию и лечение в больницах, а также рассказываем о том, как правильно спланировать поездку и сэкономить деньги во время лечения в Израиле.

Наша главная цель — качественно составленная медицинская программа по доступной цене.

источник

(I.A. Fölling)
метод обнаружения фенилпировиноградной кислоты в моче, основанный на появлении сине-зеленой окраски после добавления к моче хлорида железа; применяется для диагностики фенилкетонурии.

Проба — ж. немецк. опыть, испытанье, испыт, попытка, искус, искушенье; всякое действие, для узнанья качества чего-либо, для опыта, каково что, или льзя ли, можно ли; | вещь, сделанная.
Толковый словарь Даля

Проба Ж. — 1. Проверка, испытание. // устар. Репетиция. 2. Предварительный экземпляр, образец. 3. Небольшая часть чего-л., взятая для определения качества, состава. 4. Количество весовых.
Толковый словарь Ефремовой

Проба — пробы, ж. (от латин. probo — испытываю). 1. только ед. Действие по глаг. пробовать; испытание, проверка. Взять на пробу. голосов. машины. 2. Небольшая часть какого-н. материала.
Толковый словарь Ушакова

Испытание, Опробование, Проба (металлов) — Проверка металла на чистоту для подтверждения того, что он удовлетворяет стандартам торговли на товарно-сырьевой бирже. Например, слиток очищенного золота весом 100.
Экономический словарь

Проба — -ы; ж.
1. к Пробовать (1-2 зн.); проверка, испытание. П. ружья. П. механизма. П. голоса. Первая п. Актёрская п. Взять на пробу. П. пера (о первом литературном опыте).
2. Предварительный.
Толковый словарь Кузнецова

Проба — — анализ металлов (особенно тех, которые используются для изготовления ювелирных изделий, монет или слитков) для определения их состава.
Экономический словарь

Проба Благородных Металлов — — количественное содержание золота, серебра и платины в лигатурном сплаве, из которого изготовляются ювелирные изделия и производится чеканка монет. П.б.м., принятая.
Экономический словарь

Проба — Это слово было заимствовано из немецкого, в котором Probe восходит к латинскому probus, образованному от probare – «исследовать, пробовать».
Этимологический словарь Крылова

Абурела Проба — (Е. A. Aburel) см. Окситоциновая проба.
Большой медицинский словарь

Авцына Проба — (А. П. Авцын) метод выявления кровоизлияний в гиперемированной конъюнктиве при сыпном тифе путем введения адреналина в конъюнктивальный мешок.
Большой медицинский словарь

Адаптационная Проба — метод раннего выявления туберкулезного хориоидита, основанный на нарушении в этом случае темновой адаптации при внутрикожном введении туберкулина.
Большой медицинский словарь

Аддиса-каковского Проба — (Th. Addis, 1881-1949, амер. врач; А. Ф. Каковский, отеч. врач) см. Каковского-Аддиса проба.
Большой медицинский словарь

Адреналиновая Проба — (син. адреналовая проба) общее название группы диагностических методов, основанных на исследовании физиологических реакций различных систем организма на введение адреналина.
Большой медицинский словарь

Адреналовая Проба — см. Адреналиновая проба.
Большой медицинский словарь

Аллена Проба — (W. М. Allen, род. в 1904 г., амер. гинеколог; син. Аллена-Хейуэрда-Пинто метод) метод изучения функционального состояния коры надпочечников, основанный на определении количества.
Большой медицинский словарь

Аллергическая Диагностическая Проба — метод диагностики аллергических болезней или болезней с аллергическим компонентом в патогенезе, основанный на обнаружении местной или общей реакции организма на.
Большой медицинский словарь

Амидопириновая Проба — (син.: Голло проба, пирамидоновая проба) метод дифференциальной диагностики затяжного субфебрилитета, основанный на том, что прием дробных доз амидопирина нормализует.
Большой медицинский словарь

Проба Благородных Металлов — — количественное содержание золота, серебра и платины в лигатурном сплаве, из которого изготовляются ювелирные изделия и производится чеканка монет. В РФ для ювелирных.
Юридический словарь

Аппликационная Проба — см. Кожная проба аппликационная.
Большой медицинский словарь

Апта-даунера Проба — (L. Apt, род. в 1922 г., амер. педиатр; Downer) метод определения происхождения крови, обнаруженной в стуле новорожденного, основанный на том, что при прибавлении щелочи материнская.
Большой медицинский словарь

Арендта Проба — (А. А. Арендт, 1890-1965, сов. нейрохирург) метод дифференциального диагноза закрытой и открытой гидроцефалии, основанный на сравнении результатов одновременного измерения.
Большой медицинский словарь

Антиглобулиновал Проба — антиглобулиновал пробаСм. Кумбса реакция
Словарь микробиологии

Бюрне Проба — кожно-аллергическая проба при бруцеллезе (см.).
Словарь микробиологии

Астахова Проба — (С. Н. Астахов) метод установления повышенной внушаемости и гипнабельности, основанный на том, что легкое надавливание на веки в области надбровных дуг (после соответствующего.
Большой медицинский словарь

Атропиновая Проба — общее название методов диагностики нарушений функции различных органов и систем по их реакции на парентеральное введение атропина; применяется для тех органов и систем.
Большой медицинский словарь

Дерматонекротическая Проба — внутрикожное (реже подкожное) введение 0,1 -0,2 мл взвеси микробных к-р или токсинов, к-рое в положительных случаях обусловливает местное воспаление с некрозом кожи. Применяют.
Словарь микробиологии

Дика Проба — внутрикожный тест на присутствие в организме Ат против эритрогенного токсина S. pyogenes. Для постановки Д. п. внутрь кожи ладонной поверхности предплечья вводят 0,1 мл стандартного.
Словарь микробиологии

Лепроминовая Проба — внутрикожная проба с лепромином, используют для дифференциации клин, форм лепры. Лепромин представляет собой автоклавированный гомогенат кожных поражений б-ных лепроматозной.
Словарь микробиологии

источник

Для определения глюкозы в моче рабочее место должно быть оснащено следующими элементами:

Набор пипеток и пробирок.
Воронки, колбы, фарфоровая ступка.
Фильтровальная бумага.
Спиртовка или газовая горелка.
Сегнетовая соль.
Сернокислая медь.
Едкий натр.
Лимоннокислый натрий.
Углекислый натрий.
Азотнокислый висмут.
Дистиллированная вода.

В основу методик, используемых для качественного определения глюкозы в моче, положены ее восстанавливающие свойства.

В результате взаимодействия глюкозы с реактивом образуется окрашенное соединение, выпадающее в осадок. В реакциях Фелинга, Гайнеса-Акимова, Бенедикта сернокислая медь последовательно восстанавливается в закись меди — кирпично-красного цвета и в гидрат закиси меди — желтого цвета. В реакции Нилендера азотнокислый висмут восстанавливается в металлический висмут — черного цвета. Перед качественным определением глюкозы в моче выполняют следующую работу:
1. Мутную мочу фильтруют.
2. При большом содержании в моче белка (свыше 1%о) его удаляют. Для этого подкисляют мочу до слабокислой реакции, нагревают до кипения, затем охлаждают и фильтруют. Фильтрат должен быть прозрачным и при прибавлении к нему 20% раствора сульфосалициловой кислоты не давать помутнения.

Примечание. В редких случаях при наличии в моче большого количества восстанавливающих веществ (мочевая кислота, индикан, креатиннн, желчные пигменты и др.) их удаляют следующим образом. В пробирку наливают 8 мл мочи, прибавляют 1 мл 96° спирта и небольшое количество животного угля. Восстанавливающие вещества адсорбируются углем, оседающим на дно пробирки; глюкоза не адсорбируется, она остается в растворе.
При проведении качественного определения глюкозы с обработанной таким образом мочой в реакцию вступает только глюкоза.

Для качественного определения глюкозы в моче применяют следующие реакции:

реакцию Фелинга;
реакцию Гайнеса-Акимова (модифицированный капельный способ);
реакцию Бенедикта;
реакцию Нилендера;
капельный способ качественного определения глюкозы в моче.

Рассмотрим данные реакции более подробно.

Для этой реакции готовят два реактива — № 1 и 2.

Реактив Фелинга № 1 (7% раствор сернокислой меди). 7 г сернокислой меди растворяют в дистиллированной воде, доводя объем растворителя до 100 мл. Реактив бледно-голубого цвета.

Реактив № 2. 8 г едкого натра и 35 г сегнетовой соли растворяют в воде, доведя объем растворителя до 100 мл. Реактив бесцветен.

Рабочий раствор реактива Фелинга готовят на 1-2 дня путем смешивания равных объемов реактива № 1 и 2.

Постановка реакции. 5-6 мл рабочего раствора реактива Фелинга помещают в химическую пробирку и смешивают с 5-6 мл профильтрованной мочи. Смесь приобретает синий цвет. Верхнюю часть пробирки с мочой нагревают над пламенем горелки и кипятят в течение 1-2 минут. При наличии глюкозы в нагретой части мочи образуется кирпично-красное окрашивание. При отсутствии глюкозы синий цвет не изменяется.

Для реакции готовят реактив Гайнеса (по прописи Акимова). Для этого 13,3 г химически чистой кристаллической сернокислой меди растворяют в 400 мл дистиллированной воды, в другой посуде растворяют 50 г едкого натра в 400 мл дистиллированной воды, в третьей — разводят 15 г глицерина в 200 мл дистиллированной воды. Смешивают первый и второй растворы и к этой смеси при постоянном помешивании прибавляют небольшими порциями третий реактив. Реактив Гайнеса синего цвета. Годен в течение длительного срока.

Постановка реакции. В пробирку помещают 8 капель реактива Гайнеса и 2 капли мочи. Пробирку нагревают над пламенем до закипания мочи или прогревают в кипящей водяной бане в течение 1-2 минут. При наличии глюкозы на дне пробирки образуется зеленоватый, коричнево-зеленоватый или красноватый осадок, а при ее отсутствии синий цвет реактива Гайнеса не изменяется.

В реакции применяют реактив Бенедикта, который готовят следующим образом. В мерную колбу помещают 86,5 г лимоннокислого натрия и 100 г кристаллического углекислого натрия и растворяют при нагревании примерно в 350 мл дистиллированной воды. В другой посуде растворяют 8,65 г сернокислой меди в 50 мл дистиллированной воды. Оба раствора смешивают в мерной 500-миллилитровой колбе и доливают дистиллированной водой до метки. Реактив имеет синий цвет, достаточно стоек.

Постановка реакции. В пробирку наливают 5 мл реактива Бенедикта, прибавляют 8 капель мочи и кипятят над пламенем горелки 2 минуты или в кипящей бане 5 минут. При наличии глюкозы образуется зеленоватый желтый или красный осадок. При отсутствии глюкозы синий цвет реактива не изменяется. Пробу Бенедикта считают наиболее чувствительной и самой лучшей из проб, основанных на восстанавливающих свойствах глюкозы, ее отличает большая специфичность.

Для постановки реакции готовят реактив Нилендера. Для этого 2 г азотнокислого висмута и 4 г сегнетовой соли растирают в фарфоровои ступке, а затем растворяют в 1 мл 10% раствора едкого натра, который приливают небольшими порциями в ступку.

После этого реактив фильтруют в склянку из темного стекла и хранят на холоде, так как он нестоек. Годность реактива периодически проверяют. С этой целью 3 мл реактива разводят в 10 мл дистиллированной воды и 4 мл разведенного реактива нагревают в пробирке до кипения. Если жидкость не буреет, значит реактив годен для употребления.

Постановка реакции. В пробирку помещают 6 мл мочи, предварительно освобожденной от белка, прибавляют 3 мл реактива и перемешивают. Затем верхнюю часть пробирки нагревают и кипятят в течение 2-3 минут, пробе дают постоять в штативе в течение 10 минут, после чего учитывают результаты. При наличии глюкозы в моче образуется темно-бурый или черный осадок, а при ее отсутствии цвет смеси не изменяется.

В последнее время нашел применение сухой способ определения глюкозы в моче. Для этой реакции готовят следующий реактив: 1 г мелкорастертого медного купороса и 10 г углекислого натрия тщательно перемешивают и хранят в темной склянке с притертой пробкой при комнатной температуре. Щепотку порошкообразного реактива помещают на предметное стекло и пипеткой добавляют 2-3 капли исследуемой мочи. Затем смесь подогревают над пламенем горелки до закипания. Голубой цвет указывает на отсутствие глюкозы, зеленый — на содержание глюкозы около 0,1 %, желто-зеленый — на присутствие около 0,5 % глюкозы, желтый — около 1 %, коричневый — около 2% и кирпично-красный — около 3-4% глюкозы и более.
В последнем случае анализ мочи на глюкозу повторяют после разведения мочи в 2 раза.

Содержание глюкозы в моче можно установить с помощью индикаторной бумаги «глюкофан». В специальной инструкции, прилагаемой к каждой партии бумаги, подробно изложена техника определения. Кроме того, в настоящее время применяют индикаторную бумагу отечественного производства «глюкотест».

источник

Фенилкетонурия – наиболее распространенное нарушение обмена аминокислот. В среднем фенилкетонурии подвержен 1 из 8000 человек.

В основе болезни лежит дефицит фермента, осуществляющего превращение фенилаланина в тирозин (тирозин препятствует отложению жиров, снижает уровень аппетита, улучшает функции гипофиза, щитовидной железы и надпочечников).

Фенилкетонурия проявляется на первом году жизни. Основными симптомами в этом возрасте являются:

вялость ребенка;
отсутствие интереса к окружающему;
иногда повышенная раздражительность;
беспокойство;
срыгивания;
нарушения мышечного тонуса (чаще мышечная гипотония);
судороги;
признаки аллергического дерматита;
появляется характерный «мышиный» запах мочи.

В более позднем возрасте для больных фенилкетонурией характерна задержка психоречевого развития, нередко отмечается микроцефалия.

При фенилкетонурии характерны следующие фенотипические особенности: гипопигментация кожи, волос, радужной оболочки глаз. У некоторых больных одним из проявлений патологии может быть склеродермия.

Эпилептические приступы встречаются почти у половины больных фенилкетонурией и в некоторых случаях могут служить первым признаком болезни.

Диагноз при подозрении на фенилкетонурию основывается на совокупности генеалогических данных, результатов клинического и биохимического обследования:

возможный родственный брак родителей больного ребенка;
аналогичная патология у родных или двоюродных сибсов (братьев или сестер);
судороги, нарушение мышечного тонуса;
экзематозные изменения кожи;
гипопигментация волос, кожи, радужной оболочки глаз;
своеобразный «мышиный» запах мочи;
повышенный уровень фенилаланина в крови > 900 мкмоль/л;
присутствие в моче фенилпировиноградной, фенилмолочной, фенилуксусной кислот;
положительная проба Феллинга.

В настоящее время для диагностики фенилкетонурии разработаны и внедрены молекулярно-генетические методы выявления генного дефекта.

Диагностика у новорожденных (скрининг)

В связи с достаточной распространенностью фенилкетонурии, тяжестью клинических проявлений и реальной возможностью профилактического лечения, фенилкетонурия в числе первых наследственных нарушений обмена веществ была включена в список наследственных заболеваний, рекомендованных Всемирной организацией здравоохранения для раннего выявления среди новорожденных.

Для ранней диагностики фенилкетонурии в России осуществляется массовое обследование детей в родильных домах с определением уровня фенилаланина в крови.

Забор крови производится у новорожденных в возрасте 4–5 дней. Реже объектом исследования является моча.

Главным способом лечения фенилкетонурии является диетотерапия, ограничивающая поступление в организм белка и фенилаланина.

Основным критерием адекватности диеты при фенилкетонурии служит уровень фенилаланина в крови, который должен:

в раннем возрасте составлять 120–240 мкмоль/л;
у детей дошкольного возраста – не превышать 360 мкмоль/л;
у школьников – не превышать 480 мкмоль/л;
у детей старшего школьного возраста допустимо увеличение содержания фенилаланина в крови до 600 мкмоль/л.

Пищевой рацион строится путем резкого ограничения поступления белковых продуктов животного и растительного происхождения и, следовательно, фенилаланина. Для облегчения расчетов принято считать, что 1 г условного белка содержит 50 мг фенилаланина.

При лечении фенилкетонурии полностью исключают продукты, богатые белком и фенилаланином: мясо, рыбу, сыр, творог, яйца, бобовые и др. В пищевой рацион больных входят овощи, фрукты, соки, а также специальные малобелковые продукты – амилофены.

Для коррекции белкового питания и восполнения недостатка аминокислот при фенилкетонурии назначаются специальные лечебные продукты:

белковые гидролизаты: нофелан (Польша), апонти (США), лофенолак (США);
смеси L-аминокислот, лишенные фенилаланина, но содержащие все другие незаменимые аминокислоты: фенил-фри (США), тетрафен (Россия), П-АМ универсальный (Великобритания).

Несмотря на обогащение аминокислотных смесей и белковых гидролизатов минеральными и другими веществами, больные фенилкетонурией нуждаются в дополнительном назначении витаминов, в частности группы В, минеральных соединений, особенно содержащих кальций и фосфор, препаратов железа и микроэлементов.

В последние годы для страдающих фенилкетонурией была обоснована необходимость применения препаратов карнитина (L-карнитин, элькар в средней суточной дозе 10–20 мг/кг массы в течение 1–2 мес. 3–4 курса в год) для профилактики его недостаточности.

Параллельно лечение фенилкетонурии осуществляется медикаментозным патогенетическим и симптоматическим лечением ноотропными средствами, препаратами, улучшающими сосудистую микроциркуляцию, по показаниям – антиконвульсантами.

Широко используется лечебная гимнастика, общий массаж и др. Комплексная реабилитация детей с фенилкетонурией предусматривает специальные методы педагогических воздействий в процессе подготовки к школе и школьного обучения. Больные нуждаются в помощи логопеда, педагога, в ряде случаев – дефектолога.

Большие споры вызывает вопрос о длительности диетотерапии в лечении фенилкетонурии. В последнее время большинство врачей принимает точку зрения о необходимости продолжительного выполнения диетических рекомендаций. Обследование детей, прекративших соблюдать диету в школьном возрасте, и детей, продолжавших получать диетотерапию, однозначно показало значительно более высокий уровень интеллектуального развития последних.

У больных фенилкетонурией старшего возраста, в том числе подростков, безусловно, возможно постепенное расширение диеты в связи с улучшением толерантности к фенилаланину. Коррекция питания осуществляется, как правило, путем введения в рацион ограниченного количества круп, молока и некоторых других натуральных продуктов, содержащих относительно умеренное количество фенилаланина. В период расширения рациона проводятся оценка нервно-психического статуса детей, контроль электроэнцефалограммы, уровня фенилаланина в крови.

В возрасте старше 18–20 лет проводится дальнейшее расширение диеты, однако и во взрослом периоде пациентам рекомендуется отказаться от высокобелковых продуктов животного происхождения.

Особенно строго подходят к диетотерапии девочек, страдающих фенилкетонурией, и женщин в репродуктивном периоде. Такого рода больным фенилкетонурией необходимо продолжать диетическое лечение для обеспечения рождения здорового потомства.

В последние годы разрабатывается способ снижения уровня фенилаланина в крови путем приема препарата, содержащего фенилаланингидроксилазу растительного происхождения.

Данная статья опирается на статью из книги «Врожденные и наследственные заболевания» под редакцией профессора П.В.Новикова, М., 2007

Важно! Все материалы носят справочный характер и ни в коей мере не являются альтернативой очной консультации специалиста.

Этот сайт использует cookie-файлы для идентификации посетителей сайта: Google analytics, Yandex metrika, Google Adsense. Если для вас это неприемлемо, пожалуйста, откройте эту страницу в анонимном режиме.

источник

Гипераминоацидурии . О гипераминоацидуриях говорят в том случае, когда выведение одной или нескольких аминокислот с мочой превышает физиологические значения.
В зависимости от происхождения можно выделить: 1. метаболические или преренальные и 2. ренальные аминоацидурий.

При метаболических аминоацидуриях одной или нескольких аминокислот образуется больше, нежели в норме, или метаболизируется меньшее их количество. Избыток превышает реабсорбционную способность канальцев, поэтому аминокислоты «переливаются через край», выделяются с мочой. В этих случаях наряду с повышенной аминоацидурией обнаруживается повышенная концентрация соответствующих аминокислот в крови.

С симптоматическими формами метаболических аминоацидурий можно встретиться при тяжелых поражениях печени.

Однако в большинстве случаев метаболические аминоацидурий представляют собой наследственные энзимопатии: межуточный обмен какой-либо аминокислоты нарушается вследствие недостатка определенного энзима. Продукты обмена веществ, образовавшиеся до энзиматического блока, накапливаются в крови и в большом количестве выделяются с мочой.

При почечной аминоацидурий аминокислоты синтезируются в нормальном количестве, однако вследствие врожденного или приобретенного повреждения почечных канальцев они в большом количестве выделяются с мочой. Эти аномалии более подробно описаны в главе о заболеваниях почек. Здесь будет уделено внимание только врожденным метаболическим аминоацидуриям.

Фенилкетонурия . Фенилпировиноградная олигофрения (болезнь Фёллинга). Энзимопатия, наследуемая по аутосомно-рецессивному типу. Ее биохимической сущностью является невозможность превращения фенилаланина в тирозин вследствие отсутствия фермента фенилаланин-оксидазы. Клинические проявления этой аномалии связаны с выраженным повреждением мозга, сопровождающимся умственной отсталостью. Это нередкое заболевание — одна из наиболее частых причин олигофрении. Среди населения встречается с частотой 1:10 000-1 : 20 000.

Патогенез . Из-за отсутствия фермента, участвующего в обмене фенилаланина — фенилаланин-оксидазы, в крови накапливается фенилаланин и продукт его метаболизма — фенилпировиноградная кислота. Накопление этих веществ является причиной ведущего клинического симптома — поражения мозга, вызываемого, по-видимому, тормозящим влиянием этих метаболитов на другие энзиматические процессы в мозгу. Кроме того, в формировании болезни определенную роль играет также нарушение нормального синтеза тирозина, который является основным материалом для производства адреналина, норадреналина и дийодтирозина.

Клиническая картина . Ведущим признаком фенилкетонурии является олигофрения, проявляющаяся уже в раннем грудном возрасте и быстро прогрессирующая. Нередко встречается гипертония мышц, в части случаев наблюдаются эпилептиформные судороги.

Среди прочих изменений, связанных с дефектом обмена веществ, следует упомянуть недостаточную пигментацию больных. Многие из них голубоглазы, имеют светлую кожу и белокурые волосы. Часто встречаются брахицефалия и гипертейлоризм. Артериальное давление обычно низкое. Пот больных имеет неприятный («мышиный») запах.

Диагноз . В связи с возможностью лечения заболевания большое значение имеет раннее распознавание носителей аномалии. Фенилаланин и продукты его обмена можно обнаружить в крови и моче. Концентрация фенилаланина в крови во много раз превышает верхний предел нормы (1,5 мг%). В моче с помощью пробы Фёллинга можно качественно показать присутствие фенилпировиноградной кислоты: при прибавлении раствора хлорида железа моча приобретает темно-зеленый цвет.

Однако эта проба становится положительной только в возрасте 3-4 недель и, кроме того, не является специфической. Более точные результаты уже в конце первой недели дает проба Гутри: микробиологический метод, основанный на влиянии, которое оказывает фенилаланин на рост сенной палочки. Безусловно, этот метод наиболее приемлем для обследования популяции младенцев. Его недостатком является необходимость взятия крови, проведение которого в широких масштабах пока затруднительно. До тех пор, пока этот анализ не станет всеобщим, необходимо в 3-4-недельном возрасте производить феррохлоридную пробу и в подозрительных случаях подтвердить диагноз путем исследования спектра аминокислот крови и мочи методом хроматографии на бумаге. При отягощенной наследственности анализ крови следует производить уже на первой неделе жизни.

Лечение . При рано начатой терапии, по возможности уже в период новорожденности, можно добиться успеха путем снижения до минимума содержания фенилаланина в диете. Однако применение казеингидролизата, который составляет основу диеты, обеспечивая ограничение фенилаланина, затруднительно и дорого. В настоящее время предложены специальные препараты для лечения фенилкетонурии — берлофен, лофеналак, минафен, гипофенат, — которые удовлетворительно переносятся больными. При лечении, начатом в позднем грудном возрасте, можно добиться только прекращения дальнейшего прогрессирования идиотии.

Алкаптонурия . Заболевание характеризуется темно-коричневой окраской мочи, которая появляется при стоянии на воздухе. Наследственная энзимопатия, у больных отсутствует фермент гомогентизиназа. Гомогентизиновая кислота, выделяемая в большем количестве, на воздухе окисляется, приобретая коричневый цвет. Пеленки и нижнее белье ребенка также окрашиваются, что облегчает постановку диагноза.

Кроме описанной выше особенности мочи, при этой аномалии имеются только два других симптома: появляющаяся в более позднем возрасте артропатия и синеватая окраска хрящей, легко обнаруживаемая на ушной раковине. Лечения нет.

Альбинизм также является наследственной аномалией обмена ароматических аминокислот. При этом отсутствует энзим тирозиназа, который катализирует превращение тирозина в ДОФА — диоксифенилаланиц. Так как ДОФА — основа для синтеза меланина, то носители аномалии светлокожие, светловолосые люди, у которых через лишенную пигментации радужную оболочку просвечивает красноватая сосудистая сеть.

Альбинизм неизлечим. Больным следует избегать прямого солнечного света.

Болезнь кленового сиропа. Рецессивно наследуемая редкая энзимопатия. При этом заболевании отсутствует специфическая декарбоксилаза, которая необходима для метаболизма трех важных аминокислот: валина, лейцина и изолейцина. Эти аминокислоты и их метаболиты накапливаются в крови и в значительных количествах выделяются с мочой. Продукты обмена придают моче особенный запах, напоминающий запах сиропа, приготовленного из кленового сока.

Основным проявлением заболевания является поражение мозга, сопровождающееся судорогами, развивающееся уже в первые недели жизни и заканчивающееся смертью в раннем грудном возрасте.

При постановке диагноза имеет значение проба Фёллинга, ибо если она положительна, то указывает направление дальнейших исследований; точный диагноз устанавливается с помощью исследования аминокислот крови и мочи методом хроматографии на бумаге.

Для лечения предпринимаются попытки добиться улучшения обмена с помощью синтетической диеты.

Болезнь Хэртнапа. Очень редкое наследственное заболевание, которое сопровождается почечной гипераминоацидурией. Большое количество индикана, обнаруживаемое в моче, указывает на нарушение обмена триптофана. Клинически характеризуется мозжечковой атаксией и изменениями кожи, напоминающими пеллагру.

Оксалоз. Редкое наследственное заболевание. Вследствие энзиматического блока в обмене гликокола образуется большое количество щавелевой кислоты, которая накапливается в организме и выделяется с мочой.

Клинически ведущими признаками являются боли вследствие камнеобразования в почках, кровь и гной в моче. Кроме почек кристаллы оксалата кальция откладываются в мозгу, селезенке, лимфатических узлах и костном мозге.

Диагноз основывается на обнаружении гипероксалурии и кристаллов оксалата н костном мозге и лимфатических узлах.

В лечении — наряду с симптоматической терапией — перспективным представляется постоянный прием бензоата натрия, который образует вместе с гликоколом гиппуровую кислоту и уменьшает продукцию щавелевой кислоты.

Цистиноз. Наследственное, аутосомно-рецессивное заболевание, в основе которого лежит накопление кристаллов цистина в ретикулоэндотелии и отдельных органах и развивающаяся в связи с этим тяжелая нефропатия.

Патогенез заболевания недостаточно ясен, по-видимому, речь идет о метаболическом блоке в катаболизме цистина.

Клиническая симптоматика. К числу начальных изменений принадлежит увеличение размеров селезенки и печени, развивающееся в первые месяцы жизни. Решающая судьбу больного нефропатия проявляется во втором полугодии жизни. Появляются признаки, указывающие на начальные канальцевые повреждения: гипераминоацидурия, глюкозурия, протеинурия. Позднее положение отягощается полиурией, почечным канальцевым ацидозом, а также гипокалиемией и гипофосфатемией почечного происхождения. Полиурия вызывает эксикоз и гипертермию, фосфат-диабет становится причиной рахита и карликового роста, дефицит калия проявляется параличами. В конечной стадии заболевания к канальцевой недостаточности присоединяется клубочковая недостаточность, развивается уремия.

Диагноз. Канальцевая недостаточность, глюкозурия, ацидоз, гипераминоацидурия, гиперфосфатурия, сопровождающиеся остеопатией и карликовым ростом, в развернутой фазе заболевания дают в совокупности характерную картину. Эти сдвиги соответствуют картине синдрома Де Тони-Дебре-Фанкони, который, однако, может иметь иное происхождение.

При дифференциальной диагностике решающее значение имеет обнаружение кристаллов цистина в роговице с помощью щелевой лампы либо в биоптическом препарате лимфатических желез.

Для лечения назначают диету с ограничением метионина и цистина. С целью симптоматической терапии применяются высокие дозы витамина D, введение щелочных растворов и компенсация недостатка калия, увеличенное количество воды в рационе ребенка и, наконец, пеницилламин.

Гомоцистинурия. Клиническая симптоматика аномалии характеризуется олигофренией различной степени, эктопией хрусталиков, обращают на себя внимание белокурые волосы. В крови повышено содержание метионина и гомоцистина, с помощью специальных методов в моче обнаруживают гомоцистин.

Лечение — бедная метионином диета, однако она не очень эффективна.

источник

Представленный фрагмент произведения размещен по согласованию с распространителем легального контента ООО «ЛитРес» (не более 20% исходного текста). Если вы считаете, что размещение материала нарушает чьи-либо права, то сообщите нам об этом.

Текущая страница: 13 (всего у книги 39 страниц) [доступный отрывок для чтения: 26 страниц]

Реакция мочи зависит от количества свободных ионов водорода, выделенных при диссоциации органических кислот и кислых солей. В нормальных условиях у здорового человека реакция мочи слабокислая, pH колеблется в зависимости от режима питания между 4,5 и 8. При богатой белками пище моча обычно дает кислую, а при растительной пище – щелочную реакцию. При выделении дифосфатов наблюдается слабощелочная реакция. В патологических условиях моча также может дать сильно выраженную щелочную реакцию, и в таком случае обыкновенно мутна. При дыхательном алкалозе (гипервентиляции) или метаболическом алкалозе, потере кислот с желудочным соком, уменьшении количества калия в крови реакция мочи становится щелочной. Кислая реакция мочи наблюдается при голодании, тяжелых поносах, ацидозе или после принятия внутрь подкисляющих лекарственных средств (хлористого аммония). Исследования производят лишь со свежевыпущенной мочой. Проще всего производить исследования посредством синей и красной лакмусовой бумажки. Кислая моча меняет синий цвет лакмуса на красный, а щелочная – красный на синий. Истинная реакция мочи лучше определяется универсальной индикаторной бумагой с диапазоном от 1—14.

Для измерения pH используются лакмусовая бумага и другие индикаторы широкого диапазона, индикатор бромтимоловый синий, узкодиапазонные pH-индикаторные бумаги, или метод ионометрии.

Определение pH индикаторами (жидкие индикаторы или индикаторная бумага). При помощи индикаторной бумаги исследование производят следующим образом. При светлой моче бумагу погружают в нее на 2–3 с, а при мутной или сильно окрашенной моче 1–2 капли помещают на индикаторную бумагу, и ее цвет с обратной стороны сравнивают со стандартной цветовой шкалой. Точность определения этим методом – 0,2–0,5 pH единиц.

Удельный вес измеряют пикнометром, ареометром-урометром, весами Мора – Вестфаля.

Исследование удельного веса урометром. В мочу, доведенную предварительно до комнатной температуры (20–25 °C) и налитую в цилиндрический сосуд (образовавшуюся пену следует удалять фильтровальной бумагой), погружают урометр. Удельный вес отсчитывают по шкале урометра, причем отмечается деление, соответствующее уровню нижнего мениска жидкости. Обычно урометры снабжены шкалой с делениями от 1000 до 1040. Во время отсчитывания ареометр не должен соприкасаться со стенками и дном цилиндрического сосуда. В случае, если температура измеряемой мочи отличается от температуры, на которую рассчитаны показания урометра (обычно 15 °C – это обозначено на каждом урометре), то приходится вносить поправки, причем на каждые 3 °C повышения или понижения по сравнению с температурой калибрации добавляют или соответственно вычитают 0,001 величины установленного удельного веса. Нулевой пункт урометра проверяется периодически дистиллированной водой. При протеинурии или глюкозурии удельный вес увеличивается в зависимости от количества выделенных веществ (белка или сахара). Для практического клинического применения определяют удельный вес цельной мочи и количество белка, а затем рассчитывают теоретический удельный вес «безбелковой мочи». Более точные результаты получаются при применении пикнометра, однако этот метод, будучи много сложнее, реже применяется в практике. Необходимо помнить, что повышение температуры мочи на каждые 3 °C снижает удельный вес на 0,001, а присутствие белка до 4 г/л повышает на 0,001. Но при значительном содержании белка рекомендуется в величину удельного веса вносить следующие поправки: при наличии белка 4–7 г/л вычитать 0,001, при белке 8—11 г/л – 0,002, 12–15 г/л – 0,003, 16–20 г/л – 0,004 и свыше 20 г/л – 0,005. Удельный вес утренней мочи, превышающий 1,018, свидетельствует о сохраненной концентрационной способности почек.

При выделении с мочой контрастных веществ при рентгенологическом исследовании удельный вес может достигнуть 1040–1060.

На основании удельного веса можно вычислить приблизительное количество растворенных в моче плотных веществ. Путем умножения двух последних цифр величины удельного веса суточного количества мочи на 2,6 (коэффициент Haser) получается приблизительное количество растворенных субстанций (выраженное в граммах) в 1000·мл мочи.

Существуют качественные и количественные методы определения протеина в моче.

Качественные методы: проба с сульфосалициловой кислотой; нагревание мочи в уксуснокислой среде; обнаружение белка с помощью индикаторной бумаги и др.

Количественные методы: унифицированный метод Брандберга – Робертса – Стольникова; проба с сульфосалициловой кислотой; биуретовый метод и др.

Качественные пробы определения белков в моче основаны на принципе денатурации и преципитации (осаждения) белков посредством прибавления реактива. Результаты качественных проб отмечают следующим образом: (-), опалесценция (+), (++), (+++).

Проба с сульфосалициловой кислотой. Проба с сульфосалициловой кислотой весьма чувствительна. Она дает положительную реакцию при содержании в моче 0,015 % белка. Одновременно с протеинами при этой пробе осаждаются также и пептоны (продукты распада белков под воздействием ферментов желудочного сока при пищеварении), которые, однако, при нагревании снова переходят в раствор. Положительный результат пробы можно получить при высокой концентрации мочевой кислоты, а также и при употреблении сульфанилурейных препаратов.

Унифицированный метод Брандберга – Робертса – Стольникова. Метод основан на кольцевой пробе Геллера, которая заключается в том, что при добавлении к моче азотной кислоты при наличии белка на границе сред происходит его свертывание с появлением белого кольца.

Биуретовый метод. Учитывается, что структурные связи белка образуют в щелочной среде с солями меди соединение фиолетового цвета.

Определение уропротеинов Бенса – Джонса (Bence – Jones). Этот белок представляет собой белковое тело группы глобулинов с молекулярным весом 35 000—44 000. Белок Бенса – Джонса – иммуноглобулин, продуцируемый клетками миеломы. В настоящее время определяется иммунологическими методами. Белка Бенса – Джонса не может быть при отрицательной реакции с сульфосалициловой кислотой и при отрицательной пробе Геллера. Пробирку с несколькими миллилитрами мочи помещают в водяную баню, снабженную термометром. Воду нагревают постепенно. Реакция считается положительной, если при температуре около 40 °C появляется мутный осадок, который исчезает при нагревании выше 60 °C. Более четкий результат можно получить, если перед нагреванием мочу подкислить уксусной кислотой и прибавить несколько капель 1 %-ного раствора хлорида кальция (CaCl₂).

Обнаружение в моче белка Бенса – Джонса на основе реакции термопреципитации с помощью 2М ацетатного буфера pH 4,9. Если концентрация белка менее 3 г/л, то проба может быть отрицательной. Это встречается нечасто, так как концентрация белка Бенса – Джонса в моче обычно значительна.

В норме за сутки здоровый человек через мочевыделительную систему теряет менее 2,78 ммоль глюкозы.

Качественные методы: с помощью индикаторных полосок; проба Фелинга; проба Бенедикта и др.

Унифицированный метод определения глюкозы с помощью индикаторных полосок. Метод основан на окислении глюкозы при помощи фермента глюкозооксидазы. В процессе окисления образуется перекись водорода (Н₂О₂) и разлагается пероксидазой, а затем дает реакцию с красителем. Изменение окраски красителя говорит о присутствии глюкозы в исследуемой моче. Пропитанную смесью красителя и ферментов реактивную бумагу применяют для определения наличия глюкозы в моче в виде полосок.

Количественные методы: глюкозооксидантный метод; ортотолуидиновый метод; унифицированный поляриметрический.

Унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы

Метод основан на свойстве раствора D-глюкозы поворачивать плоскость поляризованного света вправо. Чем больше угол вращения плоскости, тем больше концентрация глюкозы в растворе.

К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная и 3-оксимасляная кислоты.

В норме выделяется 20–50 мг кетоновых тел в течение суток.

Для определения кетоновых тел применяют:

1) унифицированную пробу Ланге;

2) модифицированную пробу Ротеры;

3) готовые наборы для экспресс-анализа ацетона в моче.

Моча здоровых людей содержит минимальные количества желчных пигментов, которые не обнаруживаются качественными пробами.

Билирубинурия встречается в основном при поражении структуры печени (паренхиматозные желтухи) и при механических затруднениях оттока желчи (механические желтухи). При гемолитической желтухе билирубин в моче отсутствует, что имеет диагностическое значение.

Унифицированная проба Розина

В пробирку вносят 5 мл мочи и аккуратно по стенкам наслаивают 1 %-ный спиртовой раствор йода. При наличии билирубина появляется зеленое кольцо на границе между средами.

Принцип пробы Готфрида взят за основу в экспресс-тестах, производимых рядом зарубежных фирм.

Уробилиноиды являются производными билирубина. Уробилиноиды образуются из желчного билирубина под действием клеток слизистой оболочки кишечника и ферментов бактерий. В норме в моче содержится незначительное количество уробилиногена, который при длительном стоянии мочи окисляется в уробилин. Причиной уробилинурии может быть снижение детоксикационной функции печени, которая теряет способность разрушать мезобилиноген, поступающий из кишечника. При паренхиматозной желтухе это является причиной уробилинурии.

Повышенное образование в кишечнике стеркобилиногена встречается при гемолизе эритроцитов.

Отсутствие уробилиноидов – признак отсутствия поступления желчи в кишечник. Повышение содержания уробилиноидов в моче наблюдается при гемолитических анемиях, маляриях, злокачественных анемиях; холангитах, гемолитических желтухах, при инфекционных и токсических гепатитах, циррозах, других заболеваниях печени, инфекционном мононуклеозе, сердечной недостаточности. Уменьшение отмечается при желчнокаменной болезни, приеме некоторых лекарственных препаратов (сульфаниламиды, антибиотики).

За сутки уробилиноидов выделяется не более 6 мг, а у детей – не более 2 мг.

Реакция на уробилиноиды в моче оценивается как слабоположительная (+), положительная (++) и резко положительная (+++). Исследования следует проводить на свежих образцах или на образцах, хранившихся в темной емкости в холодильнике.

Унифицированная проба Флоранса

Данная проба очень чувствительна. С помощью пробы можно выявить полное отсутствие уробилиноидов в моче.

Необходимо помнить, что некоторые лекарственные вещества могут давать положительную пробу Шлезингера.

Кровь может содержаться в моче в виде эритроцитов или свободного гемоглобина. Гемоглобин встречается во всех своих разновидностях – редуцированный гемоглобин, оксигемоглобин, карбоксигемоглобин, метгемоглобин, циангемоглобин и сульфгемоглобин. Практически важнее наличие крови, т. е. эритроцитов в моче, что легче всего определить путем микроскопического исследования осадка. Выявление гемоглобина имеет меньшее диагностическое значение.

Гемоглобин выявляется при помощи реакций:

4) для экспресс-анализа используются реактивные таблетки или тест-полоски.

Кристаллические и органические составные части мочи при более продолжительном стоянии или центрифугировании оседают на дно пробирки. Этот осадок можно подвергнуть микроскопическому или химическому исследованию.

В практике чаще всего применяют микроскопическое исследование осадка мочи.

Результаты отсчитывают по числу организованных элементов в поле зрения микроскопа, причем обязательно отмечается увеличение.

1) неорганизованные осадки;

Под микроскопом исследуют чаще всего неокрашенные препараты при среднем увеличении с опущенным конденсором. В особенности удобна фазово-контрастная микроскопия. Диагностическое значение исследования осадка состоит главным образом в выявлении эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров. Отсчитывается их число в поле зрения.

Эритроциты встречаются в моче в виде круглых образований желтоватого цвета с хорошо очерченными краями, а при вращении микровинта – с ясно выраженными двойными контурами. В концентрированной и кислой моче эритроциты сморщиваются, и края их становятся неровными, зазубренными; в щелочной и гипотонической моче они разбухают, а в некоторых случаях вследствие потери красящего вещества представляются почти бесцветными дисками – так называемые тени эритроцитов. В зависимости от количества выделенных эритроцитов различают макрогематурию и микрогематурию. Макроскопически гематурия выявляется при содержании по крайней мере 1 мл крови в одном литре мочи.

Лейкоциты. Видны под микроскопом в виде круглых образований, в 2–4 раза крупнее эритроцитов, с явно выраженной зернистостью. В кислой моче наблюдается явно выраженная структура лейкоцитов, а в щелочной – лишь их грануляции.

Эпителиальные клетки. В моче встречаются клетки плоского, цилиндрического эпителия и круглые эпителиальные клетки, характеризующиеся своей ясно выраженной структурой ядра и зернистостью. Они различаются между собой по форме и величине. Плоские эпителиальные клетки бывают различной формы, в отличие от цилиндрических, имеющих продолговатую цилиндрическую форму («хвостовые» клетки). Круглые эпителиальные клетки в некоторых случаях очень трудно отличить от лейкоцитов.

Цилиндры. Гиалиновые цилиндры представляют собой прозрачные образования (длина – от 0,2 до 0,3 мм). Они встречаются и у здоровых людей, причем их количество повышается при физической нагрузке и протеинурии. При диабетической коме или прекоматозном состоянии наблюдаются коматозные цилиндры Кюльца, указывающие на нарушение почечной функции.

Зернистые цилиндры образуются при далеко зашедшем распаде слипшихся клеток, при котором создается зернистая структура цилиндров. При сильнее выраженной дегенерации клеток и более продолжительном нахождении в просвете канальцев образуются восковидные цилиндры, встречающиеся особенно часто при увеличении диуреза после острой анурии, при развивающейся сморщенной почке и пр.

Унифицированное определение числа форменных элементов по методу Каковского – Аддиса

Мочу собирают в течение 24 ч: утром больной опорожняет мочевой пузырь, а затем в течение суток собирает мочу в сосуд с 4–5 каплями формалина или 2–3 кристаллами тимола; рекомендуется хранить мочу в холодильнике.

Для избежания получения недостоверных результатов, обусловленных ее низкой плотностью или распадом форменных частиц в нейтральной (щелочной) моче, желательно назначить больному в течение суток, предшествовавших исследованию, мясную пищу с ограничением жидкости, чтобы получить мочу более высокой концентрации и кислой реакции. Если нет возможности собирать мочу с учетом описанных условий, то можно собирать мочу 10–12 ч, при этом точность результата страдает, но собрать мочу проще. Собирают мочу за ночное время следующим образом: в 10 ч вечера пациент полностью освобождает мочевой пузырь, мочу выливают, следующее мочеиспускание происходит лишь в 8 ч утра, через 10 ч. Всю утреннюю мочу посылают в лабораторию для исследования. При никтурии такой вариант неприемлем. Собранную мочу необходимо тщательно перемешать и измерить ее объем. Для проведения исследования необходим осадок из количества мочи, выделенной за 12 мин., которое рассчитывают по формуле:

где Q – объем мочи, собранной за 12 мин (мл); V – объем мочи, выделенной за время исследования (мл); t – время проведения исследования (часы); 5 – коэффициент пересчета за 1/5 ч.

В норме количество суточного выделения форменных элементов с мочой: до 2 × 10 6 лейкоцитов, до 1 × 10 6 эритроцитов и 2 × 10 4 цилиндров.

Унифицированное определение числа форменных элементов в 1 мл мочи методом Нечипоренко

Производят определение количества форменных элементов в 1 мл мочи с помощью счетной камеры.

Берут разовую порцию мочи (рекомендуется утреннюю) в середине мочеиспускания. Отдельно подсчитывают эритроциты, лейкоциты и цилиндры во всей сетке камеры.

В норме в 1 мл мочи определяется до 2000 лейкоцитов и до 1000 эритроцитов; цилиндры не определяются или находятся в количестве не более одного на 4 камеры Горяева и на одну камеру Фукса – Розенталя.

Определение числа форменных элементов, экскретируемых с мочой за 1 мин., по методу Амбурже

Производят определение количества форменных элементов, выделенных с мочой в течение 1 мин., с помощью счетной камеры.

Мочу собирают в течение 3 ч.

За 1 мин. с мочой в норме выделяется до 2000 лейкоцитов и до 1000 эритроцитов.

Описанные методы количественного исследования элементов мочевого осадка могут использоваться для распознавания скрытой лейкоцитурии, для выяснения вопроса о преобладании гематурии или лейкоцитурии, для динамического наблюдения за этими симптомами в течение терапии.

Для цитологического исследования чаще рекомендуется использовать осадок суточной мочи. Окраску производят по Романовскому. При микроскопии препаратов можно обнаружить клеточные элементы почечной структуры из мочевого пузыря или предстательной железы с признаками атипии.

При новообразованиях мочевого пузыря более точные данные можно получить при исследовании материала из полости мочевого пузыря, полученного путем аспирации. Аспирация проводится сухим шприцем путем плавного отсасывания мочи по катетеру из пустого мочевого пузыря.

Альфа-амилаза секретируется слюнными и поджелудочной железами, небольшая ее активность имеется в тканях печени и скелетной мускулатуры. В отличие от большинства других ферментов она фильтруется в клубочках почек и содержится в моче. В качестве субстрата в методах определения α-амилазы чаще всего используют крахмал.

Активность α-амилазы выражается в граммах или миллиграммах крахмала, гидролизованного 1 л мочи при инкубации 37 °C за 1 с.

В нормальной моче содержится до 44 мг/(с × л), или до 120 мг/(ч × мл).

Повышение диастазы может происходить при хроническом панкреатите, холецистите, язвенной болезни.

Оксалатовые камни обыкновенно образуются из щавелевокислого натрия. Мелкие камни – гладкие, светло-коричневого цвета, более крупные – неровные, окрашенные красителем крови в темно-коричневый цвет, отличаются довольно твердой консистенцией.

Уратовые (мочекислые) камни обычно состоят из мочевой кислоты и урата аммония. Для них характерны гладкая поверхность, желтая до коричневой окраска и довольно значительная твердость. Камни из урата аммония мягки, светло-желтого цвета (встречаются у детей).

Фосфатовые камни состоят из фосфорнокислого кальция или фосфорнокислой аммиак-магнезии. Они желтовато-белого цвета с неровной шероховатой поверхностью, легко крошатся. Часто выделяются в виде песка.

Карбонаты – небольшие камни беловатого цвета, круглой формы, с гладкой поверхностью.

Цистиновые камни желтоватого цвета и мягкой, как воск, консистенции. Встречаются редко, так же как ксантиновые и холестериновые.

Смешанные камни обыкновенно наслаиваются концентрически: их ядро образовано чаще всего из оксалатов или уратов, а окружающий слой – из фосфатов.

Изредка наблюдаются мочевые камни из индиго, ксантина или жиров.

Химическое исследование мочевых камней. Мочевой камень растирают в порошок, и небольшую часть последнего нагревают в пробирке в сухом виде. Если порошок органического характера – он чернеет и сгорает без остатка (ураты, цистин). Если порошок чернеет, но остается значительный остаток, то это указывает преимущественно на неорганическую природу камня. Часть порошка растворяют в нескольких каплях 10 %-ной азотной кислоты в фарфоровом сосуде и осторожно выпаривают. После охлаждения к остатку добавляют аммиак. Пурпурно-красная окраска указывает на присутствие уратов (мурексидная реакция). Часть порошка исследуют по схеме Hawk (см. табл. 9).

Бактериологическое исследование бывает двух видов.

1. Бактериальный посев (бакпосев) – диагностический тест, при котором образец исследуемой жидкости, ткани или выделений помещается в емкость с питательной средой, способствующей активному росту находящихся в образце бактерий.

2. Бактериоскопия представляет собой микроскопический метод изучения бактерий, т. е. исследование под микроскопом.

После бактериоскопии ставится окончательный диагноз.

Мочу для бактериологического исследования выводят катетером в стерильный сосуд.

Количественное исследование бактерий в моче по Броду.

Техника исследования: мочу для исследования у женщин выводят стеклянным катетером, а у мужчин используют мочу при спонтанном мочеиспускании, после предварительного основательного вычищения ладьевидной ямки (расширение уретры в области головки полового члена) 50 %-ным спиртом. В нескольких чашках Петри с кровяным агаром производят посев из неразведенной и разведенной в различной степени мочи. По числу колоний определяют количество бактерий в 1 мл мочи (1 колония = 1 бактерия).

Проба с трифенилтетразоловым хлоридом для выявления значительной бактериурии

Принцип: активно дышащие бактерии восстанавливают бесцветный раствор 2,3,5-трифенилтетразолового хлорида до красного нерастворимого трифенил формазана.

Техника исследования: к 2 мл хорошо взболтанной мочи прибавляют 0,5 мл рабочего раствора (№ 2). Пробирка инкубируется в течение 5 ч при температуре 37 °C. При положительном результате пробы образуется красный осадок трифенил формазана (при наличии более 100 000 бактерий в 1 мл). При отсутствии красного осадка – проба отрицательна.

Проба является ориентировочной, но достаточной для клинических целей.

Бактериологическое исследование на микобактерии туберкулеза (МБТ)

Бактериологический метод применяется в тех случаях, когда бактериоскопическое исследование не дало положительных результатов.

К моче добавляют двойной объем 6 %-ного раствора серной кислоты, затем в течение 10 мин. энергично встряхивают и центрифугируют в пробирке, жидкость убирают, а осадок нейтрализуют путем добавления нескольких капель 3 %-ного раствора едкого натрия и проводят посев. Данный метод основан на способности микобактерий быть устойчивыми к воздействию кислот и щелочей.

В настоящее время найдены ускоренные бактериологические методы роста микобактерий на препаратах-мазках (по Прайсу) или выращивания на кровяной среде. При исследовании мочи на туберкулезные микобактерии следует помнить о том, что их с мочой выделяется относительно мало, и несколько больше МБТ обычно содержится в утренней моче. Поэтому для исследования собирают утреннюю порцию мочи. Еще одним методом обнаружения микобактерий является микроскопия осадка мочи, окрашенного по методу Циля – Нельсена (бактериоскопический метод). Мочу центрифугируют и готовят мазок из ее осадка. После подсыхания мазок исследуют при помощи иммерсионной микроскопии и просматривают 100 полей зрения. Микобактерии обнаруживаются как ярко-красные, тонкие, расположенные в одиночку или группами, в основном находящиеся вне клеток палочки.

Наиболее результативным бактериоскопическим методом выявления МБТ является люминесцентная микроскопия, которая позволяет повысить результативность исследования. При люминесцентной микроскопии микобактерии светятся золотисто-оранжевым светом на черном фоне (картина «звездного неба»). В особо трудных случаях диагностики нефротуберкулеза может быть применена биологическая проба (прививка мочи морской свинке). Свинка при заражении погибает от милиарного туберкулеза, или ее выводят из опыта через 1,5–2 месяца и производят гистологическое исследование внутренних органов.

К преимуществам посева мочи на питательные среды перед биологической пробой относится возможность определения чувствительности и устойчивости микобактерий туберкулеза к лекарственным препаратам. Поэтому исследование мочи на МБТ должно проводиться многократно от 5– до 10-кратного посева мочи.

источник