Пцр днк цмв в моче

• Стоимость:прайс-лист.
• Срок исполнения: 3-4 рабочих дня.
• Где можно сдать: Данный анализ Вы можете сдать в любом медицинском офисе «ДИАМЕД».
• Подготовка к анализу: За 3 недели до сдачи анализа прекратить прием лекарственных препаратов. Заранее взять контейнер для мочи в любом офисе «ДИАМЕД». Собирается утренняя моча. В контейнер собирается 50 мл. от общего объема выпущенной мочи.

Метод качественного определения ДНК цитомегаловируса (моча).

Выявление ДНК цитомегаловируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в сыворотке крови. Определяемый фрагмент — гомологичные участки белка оболочки цитомегаловируса; специфичность определения — 100%. Чувствительность определения — не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл прошедшей обработку (выделение ДНК) пробе.

Цитомегаловирус — широко распространенный вирус семейства герпесвирусов. После окончания острого периода инфекция цитомегаловирусом обычно переходит в латентную форму, из которой может реактивироваться. Цитомегаловирус относят к так называемым оппортунистическим инфекциям: выраженные клинические проявления CMV-инфекции отмечаются чаще всего у пациентов с врожденными или приобретенными иммунодефицитами (в том числе вследствие ВИЧ-инфекции, применения иммунодепрессантов при трансплантации органов, и др.), а также на фоне физиологических иммунодефицитных состояний (дети первых 3 — 5 лет жизни, беременные). Первичная инфекция или (в меньшей степени) реактивации инфекции в период беременности связаны с риском внутриутробной инфекции, опасной для развития плода. Проявления инфекции зависят от особенностей иммунитета матери, вирулентности и локализации вируса. В целях выявления возможной инфицированности организма цитомегаловирусом, оценки риска возникновения острой инфекции, распознавания первичной инфекции целесообразно использование тестов: аnti-CMV-IgG и аnti-CMV-IgM в сыворотке крови, выявление вирусной ДНК методом ПЦР.

1. Подготовка к беременности;
2. Признаки внутриутробной инфекции, фето-плацентарная недостаточность;
3. Состояние иммуносупрессии при ВИЧ-инфекции, неопластических заболеваниях, приеме цитостатических препаратов и т.д.;
4. Клиническая картина инфекционного мононуклеоза в отсутствие инфекции, вызванной вирусом Эпштейна -Барра;
5. Гепато-спленомегалия неясной природы;
6. Лихорадка неясной этиологии;
7. Повышение уровня печеночных трансаминаз, гамма-ГТ, ЩФ в отсутствие маркеров вирусных гепатитов;
8. Атипичное течение пневмонии у детей;
9. Невынашивание беременности (замершая беременность, привычные выкидыши).

Материал для исследования: моча.

Единицы измерения: качественный метод (обнаружено / не обнаружено).

Референсные значения: не обнаружено.

В анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для искомого возбудителя;

1. В анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для искомого возбудителя;
2. В анализируемом образце вследствие нарушения правил забора материала не содержится достаточного для проведения анализа количества эпителиальных клеток.

Хранение материала: до 24 ч при +4 Со +8 Со

ВАЖНО! CMV-инфекция входит в группу TORCH-инфекций (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях — Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes), считающихся потенциально опасными для развития ребенка. Лабораторное обследование на TORCH-инфекции наиболее целесообразно проводить за 2 — 3 месяца до планируемой беременности. Это дает возможность предпринять необходимые лечебные или профилактические меры, и служит точкой сравнения с результатами обследований во время беременности.

источник

Цитомегаловирус, ДНК CMV, количественный — количественное определение ДНК цитомегаловируса в исследуемом биоматериале, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Метод ПЦР позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Цитомегаловирус (ЦМВ) — это разновидность из группы герпесвирусов (Herpesvirus), относящаяся к роду Cytomegalovirus подсемейства 3-herpesviridae. Встречается везде. Статистика частоты встречаемости очень вариативна — вероятно, из-за того, что у значительной массы носителей вируса заболевание протекает бессимптомно. Способов полного излечения от герпеса пока нет, т.е. зараженный человек остается носителем возбудителя на всю жизнь.

ЦМВ — это инфекция, сходная с герпесом или ветрянкой, только с гораздо более серьезными и неожиданными последствиями — от повреждения внутренних органов до необратимых изменений ЦНС. Передача вируса возможна только от человека человеку — через предметы или животных заражение произойти не может. Определить данное заболевание на ранних стадиях проблематично, его точный инкубационный период пока неизвестен. Проявления инфекции могут быть приняты за воспаление органов мочеполовой системы, обычные недомогания типа ОРВИ (острая респираторная вирусная инфекция) и прочие обычные болезни. Весьма часто ЦМВ приводит к возникновению многочисленных воспалений сразу в нескольких внутренних органах.

CMV у лиц с ослабленным иммунитетом
При беременности вирус не всегда передается от больной матери ребенку. Но если инфицирование ЦМВ произошло в период беременности или болезнь усилилась, то вероятность передачи заболевания плоду значительно возрастает.

Возникший иммунодефицит может спровоцировать активизацию болезни. Возбудитель может содержать моча, слюнная или семенная жидкость, молоко или секрет шейки матки. Мать может заразить ребенка как внутриутробно, так и при родах или при кормлении. Подростки часто заражаются при поцелуях, половых контактах и т.д.

Передача возбудителя возможна посредством цельной крови или её препаратов, содержащих красные кровяные тельца, либо во время пересадки органов. При нормальном иммунитете заболевание может никак себя не проявлять даже в течение всей жизни.

Основное средство профилактики ЦМВ — это поддержание сильного иммунитета, систематический прием иммуностимуляторов и витаминов. В противном случае даже при небольших проблемах с иммунитетом вирус способен стать причиной многих инфекционных болезней. Он довольно устойчив к противовирусным средствам, особенно при острой форме. Инкубационный период цитомегаловирусной инфекции обычно длится от 20 до 60 дней. Во время острой фазы болезни, которая продолжается от 2 до 6 недель, появляются признаки общей интоксикации организма: озноб, головная боль, боли в мышцах, наблюдается общая слабость и повышение температуры тела. На фоне первичного внедрения инфекции перестраивается иммунная система организма. В течении нескольких недель после острой фазы сохраняется слабость, могут возникать вегетативно-сосудистые расстройства.

Клинические признаки инфекции, вызванной CMV
Наиболее часто цитомегаловирусная инфекция проявляется как острая респираторно-вирусная инфекция. От больных поступают жалобы на общее недомогание, насморк, быструю утомляемость. Происходит увеличение и воспаление слюнных желез, сопровождающееся беловатым налётом на языке и дёснах, а также обильным выделением слюны.

При генерализованной форме ЦМВ-инфекции наблюдается поражение паренхиматозных (внутренних) органов. Воспаляются почки, поджелудочная железа, печёночная ткань, селезёнка, надпочечники. Это сопровождается «беспричинными», на первый взгляд, бронхитами и пневмониями, которые плохо поддаются лечению антибиотиками. У больных снижается иммунный статус, в периферической крови становится меньше тромбоцитов. Довольно часто наблюдаются поражения стенок кишечника, периферических нервов, сосудов глаз и головного мозга. Увеличиваются подчелюстные и околоушные слюнные железы, воспаляются суставы. Могут появиться высыпания на коже.

У женщин и мужчин поражение мочеполовой системы даёт симптомы хронического неспецифического воспаления. В этом случае, если не обнаружена вирусная природа патологии, лечение заболевания при помощи антибиотиков будет малоэффективно.

Осложнения CMV
Самые серьёзные и опасные осложнения цитомегаловируса — это патология беременности, плода и новорожденного. Если произошло инфицирование плода во время беременности, то риск развития этой патологии будет максимальным. Однако, не стоит забывать, что проблемы могут возникнуть также у беременных при активации латентной ЦМВ-инфекции, когда вирус попадает в кровь, впоследствии заражая плод. Согласно статистике, ЦМВ является наиболее частой причиной невынашивания беременности. Внутриутробная цитомегаловирусная инфекция является причиной поражений центральной нервной системы (тугоухость и отставание в умственном развитии). 20–30% случаев заканчиваются смертью ребёнка.

Лечение CMV-инфекции
Лечение ЦМВ-инфекции является комплексным. Оно включает в себя противовирусную и иммунную терапию. Стоит помнить, что ЦМВ довольно быстро покидает периферию и не выделяется из биологических жидкостей (грудное молоко, слюна и кровь). Таким образом, наступает латентная фаза инфекции. Очень важно вовремя и качественно провести иммунотерапию, чтобы активировать защитные механизмы организма для контроля активации латентной ЦМВ-инфекции.

Показания:

• подготовка к беременности;
• признаки внутриутробной инфекции, фетоплацентарная недостаточность;
• состояние иммуносупрессии при ВИЧ-инфекции, неопластических заболеваниях, приёме цитостатических препаратов и т.д;
• клиническая картина инфекционного мононуклеоза в отсутствии инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барра;
• гепато-спленомегалия неясной природы;
• лихорадка неясной этиологии;
• повышение уровня печёночных трансаминаз, гамма-ГТ, ЩФ в отсутствии маркёров вирусных гепатитов;
• атипичное течение пневмонии у детей;
• невынашивание беременности (замершая беременность, привычные выкидыши).

Подготовка
За месяц до сдачи исследования необходимо исключить прием антибиотиков.

• соскоб уретры. Рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания;
• первая порция свободно выпущенной мочи.

• соскоб уретры, цервикального канала, влагалища. Целесообразно проводить в первую половину менструального цикла, не ранее 5-ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. При наличии выраженных симптомов воспаления, взятие материала проводится в день обращения. Накануне и в день обследования пациентке не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии (общей/местной) и во время menses, ранее 24–48 часов после полового контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии. Если для исследования берут соскоб из уретры, сбор материала проводят до или не ранее 2–3 часов после мочеиспускания.

Слюна

Сбор слюны должен проводиться строго до начала применения антибактериальных и химиотерапевтических препаратов или не ранее, чем через 10–14 дней после их отмены (для местных антибиотиков), и не ранее, чем через один месяц после применения антибиотиков рer os (перорально). Перед сбором слюны рекомендуется провести трехкратное полоскание полости рта физиологическим раствором или кипяченой водой. Сбор слюны у детей можно проводить стерильным шприцем объемом 2–5 мл (без иглы!) из защечного пространства в эппендорф. Следует собрать не менее 1 мл слюны. Плотно закрыть контейнер крышкой для предотвращения вытекания биоматериала.

Моча

Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии.
Накануне сдачи анализа не рекомендуется употреблять в пищу овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свекла, морковь, клюква и т.п.), принимать диуретики.

Перед сбором мочи необходимо провести тщательный гигиенический туалет внешних половых органов. Собирают строго утреннюю порцию мочи, выделенную сразу же после сна. Женщинам не рекомендуется сдавать анализ мочи во время менструации; во избежание попадания в мочу выделений из влагалища. Рекомендуется ввести во влагалище тампон.

За сутки до сдачи исключить прием алкоголя и половой акт.

Следует собирать первую утреннюю порцию мочи в количестве 20–30 мл в стерильный флакон.

При первом утреннем мочеиспускании небольшое количество мочи ( первые 1–2 сек) выпустить в унитаз, а затем, не прерывая мочеиспускания, собрать первую порцию мочи в чистую емкость. Продолжить мочеиспускание в унитаз. Емкость закрыть, промаркировать.

Интерпретация результатов
Ответ выдается в количественном формате.

источник

Цитомегаловирус (ЦМВ) или вирус герпеса 5 типа, – ДНК-содержащий вирус Cytomegalovirus hominis семейства Herpesviridae подсемейства Betaherpesvirinae. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) человека – хроническая антропонозная болезнь вирусной этиологии, характеризующаяся многообразием форм патологического процесса и клинических проявлений – от латентной инфекции до клинически выраженного генерализованного заболевания. Заболевание ЦМВИ классифицируют в зависимости от сроков и механизмов заражения (врожденная и приобретенная инфекция, пренатальная, интранатальная и постнатальная), степени активности вируса (латентная, персистирующая и реактивированная инфекция), первичного или повторного заражения (острая инфекция, реактивация вируса и реинфекция).

Отличительными особенностями инфекции являются возможность ЦМВ персистировать во многих органах и способность его к инфицированию практически всех клеток организма человека, что предопределяет многообразие клинических проявлений, как при врожденной, так и приобретенной формах инфекции. ЦМВ рассматривается в качестве основного возбудителя внутриутробной инфекции, имеющей самые различные исходы: от инфицирования без реализации инфекции, формирования пороков развития и заболевания новорожденных до гибели плода и мертворождения.

ЦМВИ – типичный антропоноз. Источником инфекции является больной человек либо вирусоноситель. Пути передачи: вертикальный, половой, воздушнокапельный, фекально-оральный, артифициальный (парентеральный). Факторами передачи являются кровь, цервикальный и вагинальный секреты, сперма, женское молоко. Вирус выделяется с мочой, фекалиями, слюной, мокротой, в меньшей степени – со слезной жидкостью. Заражение может происходить также при переливании крови, трансплантации органов и тканей. Цитомегалия — широко распространенная инфекция, среди взрослого населения РФ у 73–98% обнаружены АТ-ЦМВ.

ЦМВИ относится к оппортунистическим инфекциям, особую опасность представляет для больных с иммунодефицитами различной природы. Иммуносупрессия приводит к реактивации латентной инфекции и развитию манифестных вариантов болезни с поражением различных органов и систем, способных привести к летальному исходу. Манифестная ЦМВИ занимает одно из первых мест в структуре оппортунистических заболеваний у ВИЧ-инфицированных пациентов. Данная патология встречается у 20–40% больных СПИДом, не получающих антиретровирусной терапии. Клинически выраженная ЦМВИ — одно из серьезных инфекционных осложнений при трансплантации органов, инфекция обостряет процессы, приводящие к реакции отторжения трансплантата.

При персистенции ЦМВ в организме человека выделяют две стадии, которые сменяют друг друга – продуктивную (с репликацией вируса) и латентную. Выход вируса из латентной стадии означает реактивацию, что может быть предопределено снижением иммунорезистентности либо появлением иных факторов, способствующих его репродукции. Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции.

При первичном заражении на 5–7 день вырабатываются АТ IgM, через 10–14 дней – низкоавидные АТ IgG, затем постепенно авидность этих АТ увеличивается, они становятся высокоавидными. АТ IgM исчезают через один месяц, низкоавидные АТ IgG – через 1–3 месяца, высокоавидные АТ IgG циркулируют в крови носителя пожизненно. При первичном инфицировании в стадии “серологического окна”, до начала синтеза АТ, происходит активная репликация вируса, в этот период единственным маркером инфекции является ДНК вируса в крови. При реактивации возможно появление АТ IgM и/или IgA, а также низкоавидных АТ IgG; в пик реактивации выявляются ДНК либо АГ ЦМВ в плазме крови.

Решающим условием антенатальной ЦМВИ является виремия у матери вследствие первичного или повторного заражением вирусом или его реактивации. ЦМВ способен преодолевать плацентарный барьер и поражать плод в различные сроки беременности, вызывая врожденную инфекцию. По данным различных авторов, активная форма ЦМВИ выявляется у женщин с отягощенным акушерским анамнезом в 35–60% случаев. Входными воротами для вируса в антенатальном и интранатальном периодах течения беременности могут быть плацента и плодные оболочки, в неонатальном периоде и позже – дыхательные пути и пищеварительный тракт, возможно заражение и через кровь.

ЦМВ обладает преимущественно нейротропным, эпителиотропным, гепатотропным и кардиотропным действием на плод. Его воздействие может быть и опосредованным, приводящим к различным нарушениям в плаценте: расстройству маточно- плацентарного кровообращения, отклонению в эволюционном формировании плаценты. Клиническим эквивалентом этих расстройств могут быть сокращение продолжительности беременности и преждевременное родоразрешение, рождение детей с симптомами перенесенной гипоксии или признаками внутриутробной гипотрофии, общая задержка внутриутробного развития.

Наибольшее значение для развития ранних перинатальных поражений плода имеет гематогенный путь инфицирования. Кроме того, для интранатальных и более поздних поражений характерными являются вертикальный и контактный пути передачи ЦМВ, нередки также случаи смешанного инфицирования. Острая ЦМВИ может протекать в виде генерализованной формы с присоединением вторичных инфекций и иметь летальный исход уже в первые недели жизни ребенка. При инфицировании плода во время реактивации латентной ЦМВИ чаще имеют место поздние проявления инфекции в виде нарушений зрения, слуха, задержки психического развития, двигательных нарушений. При отсутствии выраженных иммунологических нарушений острая ЦМВИ переходит в латентную с пожизненным присутствием вируса в организме человека. Развитие иммуносупрессии, в частности связанной с ВИЧ-инфекцией, ведет к возобновлению репликации ЦМВ, появлению вируса в крови и манифестации заболевания. Летальность больных ВИЧ-инфекцией, страдающих ЦМВИ, составляет 25–27%.

Клинический диагноз ЦМВ-инфекции требует обязательного лабораторного подтверждения. Выявление в крови пациента АТ-ЦМВ IgМ и/или IgG недостаточно ни для установления факта активной репликации ЦМВ, ни для подтверждения манифестной формы заболевания.

• Женщины, планирующие беременность;
• женщины с отягощенным акушерским анамнезом (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
• беременные женщины (в первую очередь имеющие УЗИ-признаки внутриутробной инфекции, лимфоаденопатии, лихорадку, гепатит и гепатоспленомегалию неясного генеза);
• беременные женщины с иммунодефицитом, в т. ч. с ВИЧ-инфекцией;
• матери, родившие ребенка с признаками внутриутробной инфекцией или врожденными пороками развития;
• дети, имеющие симптоматику врожденной инфекции, пороки развития или рожденные женщинами из группы риска по внутриутробной передаче ЦМВ;
• пациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением ЖКТ;
• пациенты с наличием иммунодефицита с клинической картиной органных или генерализованных поражений.

• Врожденная ЦМВИ – краснуха, токсоплазмоз, неонатальный герпес, сифилис, бактериальная инфекция, гемолитическая болезнь новорожденных, родовая травма, наследственные синдромы;
• мононуклеозоподобное заболевание – инфекции, вызываемые вирусом Эпштейна-Барр, герпес-вирусами 6 и 7 типов, острая ВИЧ-инфекция, стрептококковый тонзиллит, дебют острого лейкоза;
• заболевание органов дыхания у детей раннего возраста – коклюш, бактериальный трахеит или трахеобронхит, РС-вирусной инфекция, герпетический трахеобронхит;
• у больных с иммунодефицитом – пневмоцистная пневмония, туберкулез, токсоплазмоз, микоплазменная пневмония, грибковые и герпетические инфекции, бактериальный сепсис, лимфопролиферативные заболевания, ВИЧ-энцефалит, нейросифилис, прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;
• полинейропатия и полирадикулопатия – полирадикулопатия, вызванная герпесвирусами 2 и 6 типов, синдром Гийена-Барре, токсическая полинейропатия, связанная с приемом лекарственных средств, алкоголя, наркотических психотропных веществ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопические исследования, выявление возбудителя в культуре клеток, обнаружение АГ или ДНК, определение АТ IgM, IgА, IgG, авидности АТ IgG.

Материал для исследования

• Кровь (сыворотка, плазма), лейкоциты крови, моча, слюна, СМЖ – культуральные исследования, выявление ДНК;
• пуповинная кровь, амниотическая жидкость – выявление ДНК;
• слюна, моча – выявление АГ;
• сыворотка/плазма крови – определение АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Использование метода ПЦР позволяет определить наличие ДНК вируса в тканях и биологических жидкостях. Исследование обладает высокой специфичностью (100%) и чувствительностью (85–100%). ДНК ЦМВ может быть выявлено и при латентной ЦМВИ, указывая на продолжающуюся репликацию вируса даже при полном отсутствии клинических симптомов болезни. Использование ПЦР в реальном времени позволяет определить уровень виремии («вирусную нагрузку») в крови и СМЖ.

Выделение вируса из лейкоцитов крови, мочи, слюны, ликвора, спермы и др. в культуре клеток долгое время называли «золотым стандартом» в диагностике ЦМВИ. В настоящее время, с появлением высокочувствительных и специфичных молекулярно-биологических методов, вирусологические исследования уже не занимают главного места в лабораторной диагностике ЦМВИ. Это обусловлено как особенностями вируса – на результат культивирования влияет неустойчивость ЦМВ к изменению температуры и замораживанию, так и необходимостью выполнения исследований в специально оборудованной вирусологической лаборатории, которыми обычно не располагают лечебно-профилактические учреждения. Кроме того, вирусологическое исследование не позволяет отличить первичное инфицирование от рецидивирующей формы ЦМВИ, особенно при бессимптомном течении. Некоторые лаборатории используют “быстрый культуральный метод” с предварительным внесением биоматериала в культуру фибробластов и выявлением цитопатического действия ЦМВ при применении РИФ.

Для обнаружения АГ вируса в слюне и моче используют метод РИФ, по количеству светящихся клеток можно приблизительно оценить интенсивность выделения вируса. В связи с персистенцией ЦМВ обнаружение АГ не указывает на активность инфекционного процесса, для ее оценки требуются дополнительные исследования – выявление отдельных АГ вируса (р55, рр65 и др.).

При проведении микроскопического исследования (световая микроскопия) основными морфологическими признаками ЦМВИ являются гигантские клетки с внутриядерными включениями (цитомегалы). Их можно обнаружить в эпителии почечных канальцев, желчных протоках, выводных протоках слюнных желез, поджелудочной железы, ткани легких, клетках глии, нейронах, эндотелиоцитах. Наличие таких клеток указывает на репродукцию вируса, однако они обнаруживаются не во всех случаях активной инфекции. Диагностическая чувствительность метода не превышает 50%.

Для определения АТ-ЦМВ обычно используют метод ИФА. Наличие АТ IgM свидетельствует в пользу острой инфекции или реактивации. Реактивация гораздо чаще сопровождается гиперпродукцией АТ IgА, чем IgM. Выявление АТ IgG имеет низкое диагностическое значение. Диагностическую ценность теста повышает определение авидности АТ IgG: выявление низкоавидных АТ IgG свидетельствует о текущей или недавно перенесенной ЦМВИ, снижение индекса авидности возможно и при реактивации. Обнаружение высокоавидных АТ позволяет исключить первичную инфекцию, однако реактивация может протекать при наличии высокоавидных АТ, что подтверждается обнаружением ЦМВ, его АГ («ранних белков») или ДНК, а также выявлением АТ IgА.

Определение специфических АТ к вирусу помогает в распознавании заражения человека ЦМВ, но ввиду длительного периода нарастания титра АТ от момента инфицирования, последующего долгого сохранения их в крови, трансплацентарного перехода АТ IgG от матери к плоду (выявляются у ребенка до 1,5 лет) диагностическая ценность исследования ограничена. При наблюдении в динамике (2–4 недели) повышение титра АТ IgG в 4 раза указывает на активную ЦМВИ. Однако необходимость длительного периода наблюдения (до 4 недель) и возможность сохранения повышенного титра АТ на протяжении ряда лет лимитирует использование такого подхода к диагностике.

Дополнительным исследованием при поражении мозга, вызванного ЦМВ, может быть параллельное обнаружение АТ IgG в периферической крови и СМЖ методом ИФА с последующим расчетом их соотношения. Значение соотношения позволяет выявить интратекальную продукцию АТ и соответственно вовлечение в инфекционный процесс ЦНС.

Иммуноблот позволяет детектировать АТ IgM и IgG к отдельным белкам ЦМВ, подтвердить специфичность исследования, следить в динамике за появлением и исчезновением отдельных белков, что имеет высокое диагностическое и прогностическое значение. Наличие АТ к отдельным АГ вируса подтверждает формирование иммунного ответа к ЦМВ.

Показания к применению различных лабораторных исследований и интерпретация их результатов у разных категорий обследуемых

Диагностика первичного заражения, в т. ч. в период беременности, возможна только у пациентов, в крови которых отсутствуют АТ-ЦМВ. Независимо от клинических вариантов заболевания, при первичной ЦМВИ выявляются прямые (присутствие вируса, его ДНК или АГ) и косвенные (АТ-ЦМВ) лабораторные маркеры активной репликации ЦМВ. При обследовании больных при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) необходимо количественное определение содержания ДНК ЦМВ в крови. Определение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛЖ, биоптатах бронхов, биоптатов органов выполняют при наличии соответствующей органной патологии.

Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови беременной женщины – основной маркер высокого риска заражения плода и развития врожденной ЦМВИ.

Отсутствие АТ-ЦМВ IgM, IgА и IgG означает отсутствие ЦМВ в организме. Однако у лиц с выраженным иммунодефицитом при активной репликации ЦМВ продукция специфических АТ может быть снижена до неопределяемого уровня.

Выявление АТ-ЦМВ разных классов позволяет определить фазы инфекционного процесса (репликативная или латентная). АТ IgM чаще оценивают как маркер первичной герпес-вирусной инфекции. При выявлении АТ IgM для подтверждения инфицирования ЦМВ рекомендуются дополнительные исследования: определение АТ IgА или авидности АТ IgG, выявление АТ к отдельным белкам с использованием иммуноблота; повторное обследование женщины или ребенка через 2 недели. Выявление АТ IgА и(или) низкоавидных АТ IgG подтверждает наличие инфекции. При повторном выявлении АТ IgM и отсутствии IgА и(или) низкоавидных IgG результат выявления АТ IgM считают ложноположительным.

Выявление АТ IgM и IgG к предранним белкам-антигенам и низкоавидных АТ IgG свидетельствует о первичном инфекционном процессе.

Обнаружение только АТ IgG не позволяет охарактеризовать период заболевания. При наличии иммуносупрессии классического (4-х кратного) увеличения АТ IgG во время рецидива не наблюдают.

Установление факта инфицирования плода осуществляется на основании обнаружения ДНК ЦМВ. Выбор биологического материала определяется с учетом срока гестации, обусловливающего возможность проведения того или иного метода инвазивной пренатальной диагностики: амниотическая жидкость – 16–23 недели, пуповинная кровь – 20–24 недели. Косвенным подтверждением факта инфицирования плода является обнаружение АТ IgM и/или АТ IgА в пуповинной крови (проведение исследования возможно с 22 недели беременности).

Лабораторная диагностика врожденной ЦМВИ основана на обнаружении ЦМВ, его ДНК или АГ в различном биологическом материале (периферическая кровь, моча, слюна, смывы и мазки от ротоглотки, СМЖ) и выявлении в сыворотке или плазме крови АТ IgМ и IgА в течение первых 7 дней после рождения. Проведение исследования в более поздние сроки не позволяет дифференцировать врожденную и приобретенную инфекцию. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови, моче, соскобах со слизистой ротовой полости через 4–6 недель жизни ребенка при отсутствии вируса в первые 2 недели говорит об интранатальном или раннем постанатальном заражении. Подтверждением манифестной ЦМВИ у детей первых месяцев жизни является наличие ДНК ЦМВ в крови.

При сомнительных результатах дополнительную диагностическую информацию может дать выявление АТ IgМ к отдельным белкам-антигенам вируса методом иммуноблота. Отсутствие АТ-ЦМВ у детей с врожденной ЦМВИ может быть связано с развитием иммунологической толерантности к АГ вируса цитомегалии (инфицирование ЦМВ не сопровождается эффективным синтезом АТ-ЦМВ).

При обследовании детей в постнеонатальном возрасте показано выявление возбудителя (классический или модифицированный вирусологический метод), его ДНК или АГ («ранних белков») и АТ IgМ и IgА. Выявление анти-ЦМВ IgМ у детей первых недель жизни считают критерием внутриутробного заражения вирусом. Недостатком определения АТ IgМ служит их частое отсутствие в крови при наличии активного инфекционного процесса и не менее частые ложноположительные результаты. При обследовании детей в возрасте до 4–6 месяцев жизни целесообразно одновременное определение АТ у ребенка и матери с последующим сопоставлением величины их уровня (титра) и характера авидности. При обследовании ребенка в возрасте старше 6 месяцев может быть исследована только кровь ребенка. Для исключения ЦМВИ у детей первого года жизни рекомендуется определение ДНК или АГ в моче.

Выявление АТ IgG в сыворотке крови новорожденного без сопоставления с уровнем АТ в крови матери не является диагностически значимым вследствие возможности их трансплацентарного переноса из материнского организма. Только при динамическом (с интервалом в 14–21 день) сравнении уровня АТ IgG новорожденного ребенка с уровнем АТ IgG в крови матери можно судить об их природе. Если титры АТ IgG у ребенка при рождении равны материнским, а при повторном исследовании через 3–4 недели снижаются приблизительно в 1,5–2 раза, то АТ, выявленные у ребенка, являются материнскими.

Скрининг беременных женщин – выявление АТ IgМ и низкоавидных АТ IgG. Для исключения реактивации целесообразно определение АТ IgА и низкоавидных АТ IgG.

Обследование больных с наличием иммунодефицита при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) включает гистологическое исследование биопсийных материалов для выявление цитомегалов (окраска гематоксилином и эозином), обнаружение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛ, биоптатах бронхов, биоптатов внутренних органов при наличии соответствующей органной патологии; выявление АГ ЦМВ в крови, определение концентрации ДНК ЦМВ в крови методом ПЦР. В диагностике ЦМВИ у ВИЧинфицированных наиболее информативно наличие в крови ДНК ЦМВ в высокой концентрации (в плазме крови >10000 копий/мл, в лейкоцитах > 1000 копий/ 105 лейкоцитов).

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2019

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

источник

Цитомегаловирус (ЦМВ) – одна из разновидностей герпеса. Он может приводить к появлению у человека симптомов, которые будут характерны для большого количества других заболеваний. Отличить цитомегаловирусную инфекцию (ЦМВИ) может быть достаточно сложно. Поэтому важно выявить или исключить присутствие в организме этого вируса. ПЦР на ЦМВ – простой и эффективный способ определить наличие герпесвируса.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – метод лабораторной диагностики, при котором выявляется присутствие различных ДНК в забранном на анализ биоматериале. Этот метод используется для определения степени родства между людьми, для производства клонированных генов, для изучения генов в целом. Также метод ПЦР активно применяется при диагностике различных заболеваний, которые имеют инфекционную или наследственную природу. Выявление инфекционного заболевания возможно благодаря способности определить ДНК вируса в биоматериале человека.

ПЦР при цитомегаловирусе это эффективный метод, так как:

• для анализа подходит практически любой материал – моча, кровь, слюна, соскоб с уретры и другие;
• позволяет выявить ЦМВ на самых ранних стадиях заражения и при скрытом течении болезни;
• ЦМВ определяется даже при малом его количестве в организме человека;
• высокая скорость получения результатов;
• гарантированная точность данных (при правильном взятии материала и предварительное подготовке к его сдаче).

Правила подготовки к сдаче анализа на ЦМВ ничем не отличаются от рекомендаций относительно подготовки к какому-либо другому анализу. Соблюдение этих рекомендаций поможет получить достоверный результат.

Подготовка к тесту на определение ДНК cytomegalovirus DNA в крови:

1. Не принимать антибиотики в течение двух дней.
2. Не курить перед анализом.
3. В течение двух суток не употреблять жирную пищу и спиртные напитки.
4. Перед анализом нельзя проходить ректальный осмотр, физиотерапию, рентген.
5. Сдавать кровь натощак утром. В случае, если кровь будут сдавать вечером, нужно не есть в течение минимум 7 часов.

Если материал на ЦМВ сдаётся путём соскоба из влагалища и уретры:

1. Не вводить медикаменты и делать спринцевание в течение минимум 1 суток.
2. Не иметь половых контактов за 3 суток.
3. При соскобе из уретры необходимо не мочиться за два — три часа до сдачи биоматериала.

Если для ПЦР на ЦМВ будет сдаваться моча, то её нужно собирать утром после пробуждения, до приёма пищи и любых жидкостей. Биоматериал необходимо отдать на анализ в лабораторию в течение ближайших 3 часов после мочеиспускания.

Если анализироваться будет слюна на цитомегаловирус, то её следует сдавать также в утреннее время. Перед мазком на ЦМВ нельзя принимать пищу, пить различные жидкости, чистить зубы, курить.

Важно соблюдать все вышеперечисленные рекомендации. Это позволит поставить верный диагноз и возможность прогнозирования лечения. Отклонение от них может привести к получению ложноположительных или ложноотрицательных результатов. Это может быть чревато усугублением состояния здоровья.

Цитомегаловирус Igg и Igm. ИФА и ПЦР при цитомегаловирусе, авидность к цитомегаловирусу

Сроки готовности результатов ПЦР на ЦМВ зависят только от клиники или лаборатории, в которой сдавался анализ.

Многие клиники и лаборатории способны предоставить результаты ПЦР на ЦМВ на следующий рабочий день после сбора биоматериала. Часто данные можно получить уже в течение дня, когда был сдан анализ.

Однако иногда результат может быть известен только через 2-3 дня. С этим можно столкнуться при большой загруженности лаборатории, или если клиника вынуждена направлять материалы для анализа в другую лабораторию.

Сроки готовности результатов ПЦР на ЦМВ всегда озвучиваются и оговариваются заранее.

Цитомегаловирус в крови, моче, слюне, ложноположительный результат на цитомегаловирус

Отрицательный результат ПЦР на ЦМВ говорит об отсутствии заражения. Такой ответ бывает в двух случаях:

1. В материале не обнаружено ДНК фрагментов цитомегаловируса.
2. В материале недостаточно клеток, необходимых для проведения анализа и получения достоверного результата (нарушены правила сдачи материала или проведения анализа).

Положительный результат ПЦР на ЦМВ говорит об обнаружении патогена в организме. Такой ответ ПЦР возможен в двух случаях:

1. При исследовании было найдено ДНК цитомегаловируса. Пациент имеет первичное или повторное заболевание.
2. В биоматериале были обнаружены клетки, не специфичные для биоматериала (нарушены правила сдачи материала).

При анализе данных ПЦР на цитомегаловирус учитывается наличие антител IgM и IgG.

Наличие IgG говорит о том, что инфицирование вирусом произошло относительно давно, не менее 2 недель до проведения теста. Присутствие этих антител также может свидетельствовать о том, что заражение произошло несколько лет назад и возбудитель в организме находится в «пассивном» состоянии.

Положительная реакция на IgG может говорить, что у пациента есть иммунитет, он является носителем вируса и заражение является невозможным; что у пациента произошло повторное обострение болезни из-за снижения общей защитной функции организма.

Наличие в биоматериале антител IgM свидетельствует о том, что заражение произошло относительно недавно и является только появившимся, первичным, т. е. до этого в организме пациента не было антител к этому вирусу. Также IgM могут указывать, что вирус «активизировался» и хроническое состояние латентной инфекции перешло в острое.

Присутствие IgM в расшифровке ПЦР не всегда говорит о наличии ЦМВ. Результат может быть ложноположительным. В данном случае требуется более детальное обследование и наблюдение «в динамике».

Наиболее внимательно к процессу сдачи ПЦР на ЦМВ и точности его результатов следует относиться людям с ВИЧ, родителям маленьких детей и женщинам в период беременности. Иногда потребуется неоднократная сдача анализа.

Цитомегаловирус в крови, моче, слюне, ложноположительный результат на цитомегаловирус

Цитомегаловирус присутствует в организме около 90% взрослых людей. И только у половины из них он может активизироваться и привести к развитию болезни. Симптомы, которые он вызывает, сходны со многими другими заболеваниями. Чтобы врач смог поставить верный диагноз и выбрать самый эффективный способ лечения необходимо сдать ПЦР на определение ЦМВ.

источник

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): A26.28.009.001 «Определение ДНК цитомегаловируса (Cytomegalovirus) в моче методом ПЦР, качественное исследование»

Биоматериал: Моча разовая (первая порция)

Срок выполнения (в лаборатории): 2 р.д. *

Цитомегаловирус относится к семейству герпесвирусов. Заражение возможно различными путями, самый распространенный вариант — воздушно-капельный, например при поцелуе. Также вирус передается при незащищенном половом контакте, со спермой, слизью канала шейки матки, при переливании крови, трансплантации органов; от инфицированной матери к плоду через плаценту, во время родов, через грудное молоко.
Цитомегаловирус широко распространен среди населения, после инфицирования в организме сохраняется пожизненно. К 35 годам антитела (маркеры инфицирования) выявляются у 45% людей.
У людей с крепким иммунитетом заболевание протекает без осложнений. Отдельным группам важен постоянный контроль. К ним относятся:

• беременные, так как наличие цитомегаловируса — одна из причин невынашивания. Кроме того, а внутриутробное заражение приводит к поражению нервной системы плода (микроцефалия, снижение интеллекта, тугоухость, в 20 % плод погибает);
• лица с иммунодефицитом;
• лица, страдающие рецидивирующим герпесом и плохо поддающиеся терапии (причина — микст вируса простого герпеса и цитомегаловируса).

Симптомы цитомегаловирусной инфекции сходи с симптомами респираторных заболеваний. Это слабость, общее недомогание, быстрая утомляемость, головная боль, насморк, покраснение ротоглотки, увеличение слюнных желез и лимфатических узлов.
Нередко цитомегаловирус поражает органы мочеполовой системы; в этом случае плохо поддается лечению антибиотиками. Возможна генерализованная форма заболевания с воспалением тканей печени, селезенки поджелудочной железы, почек. Это может сопровождаться развитием бронхитов, пневмоний. Также отмечается снижение иммунного статуса, снижение тромбоцитов в периферической крови; возможно поражение сосудов глаз, периферических нервов, воспаление суставов.

• взрослым для уточнения этиологической природы возбудителя при симптомах респираторной вирусной инфекции;
• женщинам, планирующим беременность;
• лицам, у которых диагностировано состоянием иммунодефицита;
• детям исследование проводится, в случае если мать во время беременности перенесла первичную цитомегаловирусную инфекцию;
• детям для уточнения этиологической природы возбудителя на фоне течения респираторной инфекции;
• пациентам с часто рецидивирующей герпесвирусной инфекцией;
• пациентам перед проведением трансплантации органов;
• пациентам с часто рецидивирующими уретритами, не поддающимися лечению либо с нестойкой ремиссией.

Для исследования берется первая порция утренней мочи до проведения гигиенических процедур. Проведение исследования не рекомендуется на фоне антибактериальной и противовирусной терапии.

Выявляет в исследуемом образце генетический материал цитомегаловируса.

Адреса медицинских центров, в которых можно заказать исследование, уточняйте по телефону 8-800-100-363-0
Все медицинские центры СИТИЛАБ в г. Камышлов >>

* На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории.
Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.

источник

Определение ДНК цитомегаловируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – хроническое вирусное заболевание, характеризующееся многообразием форм патологического процесса и клинических проявлений – от латентной инфекции до клинически выраженного генерализованного заболевания. Заболевание ЦМВИ классифицируют в зависимости от сроков и механизмов заражения (врожденная и приобретенная инфекция), степени активности вируса (латентная, персистирующая и реактивированная инфекция), первичного или повторного заражения (острая инфекция, реактивация вируса и реинфекция). Возбудитель инфекции – цитомегаловирус (ЦМВ) или вирус герпеса 5-го типа, — ДНК-содержащий вирус, относится к семейству герпесвирусов.

Отличительными особенностями инфекции являются возможность ЦМВ персистировать во многих органах и способность его к инфицированию практически всех клеток организма человека, что предопределяет многообразие клинических проявлений как при врожденной, так и приобретенной формах инфекции. ЦМВИ относится к оппортунистическим инфекциям, клинические проявления которых становятся возможными только в условиях первичного или вторичного иммунодефицитного состояния (ВИЧ инфекция, трансплантация, применение иммунодепрессантов, онкогематологические заболевания, облучение, диабет), а также при физиологическом иммунодефиците (дети первых 3 — 5 лет жизни, беременные — чаще во 2 и 3 триместре).

Источник инфекции: человек с первичной инфекцией либо на стадии реактивации латентной ЦМВИ. ЦМВИ передается при бытовых и сексуальных контактах, воздушно-капельным и гемотрансфузионным путями, при кормлении грудью (через женское молоко), пересадке органов и тканей, через инфицированную сперму. Возможна вертикальная передача инфекции (от матери к плоду), которая происходит трансплацентарно или в процессе родов.

Входные ворота инфекции: слизистые ротоглотки, дыхательных путей, гениталий, прямой кишки, поврежденная кожа. Инкубационный период колеблется от 15 дней до 3 месяцев. Характер патологических нарушений и разнообразие клинических проявлений при ЦМВИ определяется способностью вируса вызывать поражения различных видов тканей и клеток:

— интерстициальной ткани внутренних органов: легких, печени, миокарда, селезенки, почек, надпочечников, кишечника, простаты;

— эпителиальных клеток слюнных слюнных желез, протоков слюнных желез, альвеол, бронхов, канальцев почек, слизистой кишечника, мочевыводящих путей;

— эндотелия кровеносных сосудов;

— иммунокомпетентных клеток (лимфоциты, моноциты);

При полноценном иммунитете ЦМВИ протекает клинически бессимптомно. В редких случаях развивается картина инфекционного мононуклеоза (около 10% всех случаев инфекционного мононуклеоза), клинически не отличимого от мононуклеоза, вызванного вирусом Эпштейн-Барра. Также выявляют тонзилофарингит, лимфоаденопатию, парез лицевого нерва, гранулематозный гепатит, миокардит, интерстициальную пневмонию, гемолитическую анемию, тромбоцитопению. Генитальная форма ЦМВИ: цервицит, эрозия шейки матки, уретрит, вульвагинит, эндометрит.

ЦМВ-инфекция входит в группу TORCH-инфекций (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях — Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes), считающихся потенциально опасными для развития ребенка. ЦМВ обладает преимущественно нейротропным, эпителиотропным, гепатотропным и кардиотропным действием на плод. Его воздействие может быть и опосредованным, приводящим к различным нарушениям в плаценте: расстройству маточно-плацентарного кровообращения, отклонению в формировании плаценты. Клиническим проявлением данных нарушений могут быть преждевременные роды, рождение ребенка с симптомами перенесенной гипоксии и признаками внутриутробной гипотрофии. При инфицировании плода во время реактивации латентной ЦМВИ чаще имеют место поздние проявления инфекции в виде нарушений зрения, слуха, задержки психического развития, двигательных нарушений.

Методом ПЦР возможно выявить небольшое количество вирусных частиц в биологическом материале. Он позволяет идентифицировать ЦМВ вне зависимости от срока заражения даже в тот период, когда антитела в крови еще не образовались. С помощью полимеразной цепной реакции также можно обнаружить ЦМВ при первичной инфекции и при обострении хронической.

Сбор мочи проводится после тща­тельного туалета наружных половых органов. Не следует производить сбор мочи во время менструации. Для анализа отбирают первую порцию утренней мочи в количестве 15−25 мл в стерильный контейнер. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения противовирусной терапии.

Материал для исследования: утренняя порция мочи.

• Подготовка к беременности.
• Признаки внутриутробной инфекции, фето-плацентарная недостаточность.
• Состояние иммуносупрессии при ВИЧ-инфекции, неопластических заболеваниях, приеме цитостатических препаратов.
• Клиническая картина инфекционного мононуклеоза в отсутствие инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барра.
• Гепато-спленомегалия неясной природы.
• Лихорадка неясной этиологии.
• Повышение активности ферментов печени: трансаминаз (АЛТ, АСТ), гамма-глютамилтранспептидазы, щелочной фосфатазы при отсутствии маркеров вирусных гепатитов.
• Атипичное течение пневмонии у детей.
• Невынашивание беременности (замершая беременность, привычные выкидыши).

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

Лечащий врач определяет тип биоматериала для исследования.

Тест является количественным. При отсутствии в анализируемом образце биологического материала фрагментов ДНК, специфичных для ЦМВ выдается результат «не обнаружено».

При выявлении ДНК ЦМВв анализируемом образцевыдается количественный результат, количество ДНК возбудителя указывается в копиях/мл.

источник

Клиническая диагностика цитомегаловирусной инфекции требует обязательного лабораторного подтверждения.

Исследование крови пациента на наличие специфических антител класса IgM и/или антител класса IgG недостаточно ни для установления факта активной репликации ЦМВ, ни для подтверждения манифестной формы заболевания. Наличие анти-ЦМВ IgG в крови означает лишь факт встречи с вирусом. Антитела IgG новорождённый получает от матери, и они не служат доказательством заражения цитомегаловирусом. Количественное содержание IgG антител в крови не коррелирует ни с наличием заболевания, ни с активной бессимптомной формой инфекции, ни с риском внутриутробного заражения ребёнка. Лишь увеличение в 4 и более раз количества анти-ЦМВ IgG в «парных сыворотках» при обследовании с интервалом в 14-21 сут имеет определённое диагностическое значение. Отсутствие анти-ЦМВ IgG в сочетании с наличием специфических IgM антител свидетельствует об острой цитомегаловирусной инфекции. Выявление анти-ЦМВ IgM у детей первых недель жизни — важный критерий внутриутробного заражения вирусом, однако серьёзным недостатком определения IgM антител служит их частое отсутствие при наличии активного инфекционного процесса и нередкие ложноположительные результаты. О наличии острой цитомегаловирусной инфекции свидетельствуют нейтрализирующие IgM антитела, присутствующие в крови не более 60 сут от момента заражения вирусом. Определение индекса авидности анти-ЦМВ IgG, характеризующего скорость и прочность связывания антигена с антителом, имеет определённую диагностическую и прогностическую ценность. Выявление низкого индекса авидности антител (менее 0,2 или менее 30%) подтверждает недавнее (в течение 3 мес) первичное заражение вирусом. Наличие низкоавидных антител у беременной служит маркёром высокого риска транспланцентарной передачи возбудителя плоду. В то же время отсутствие низкоавидных антител не исключает полностью недавнюю инфекцию.

Вирусологическая диагностика цитомегаловирусной инфекции основанна на выделении цитомегаловируса из биологических жидкостей на культуре клеток, является специфической, но трудоёмкой, длительной, дорогой и малочувствительной.

В практическом здравоохранении используют быстрый культуральный метод обнаружения вирусного антигена в биологических материалах путём анализа инфицированных клеток культуры. Выявление ранних и сверхранних антигенов цитомегаловируса показывает наличие у больного активного вируса.

Однако методы выявления антигенов уступают по чувствительности молекулярным методам, основанным на ПЦР, дающим возможность прямого качественного и количественного обнаружения ДНК цитомегаловируса в биологических жидкостях и тканях в кратчайшие сроки. Клиническое значение определения ДНК или антигена цитомегаловируса в различных биологических жидкостях не одинаково.

Присутствие возбудителя в слюне выступает лишь маркёром инфицированности и не свидетельствует о существенной вирусной активности. Наличие ДНК или антигена цитомегаловируса в моче доказывает факт заражения и определённую вирусную активность, что имеет значение, в частности, при обследовании ребёнка в первые недели его жизни. Наиболее важное диагностическое значение имеет обнаружение ДНК или антигена вируса в цельной крови, свидетельствующее о высокоактивной репликации вируса и его этиологической роли в имеющейся органной патологии. Выявление ДНК цитомегаловируса в крови беременной женщины — основной маркёр высокого риска заражения плода и развития врождённой цитомегаловирусной инфекции. Факт заражения плода доказывают наличием ДНК цитомегаловируса в амниотической жидкости или пуповинной крови, а после рождения ребёнка подтверждают обнаружением ДНК вируса в любой биологической жидкости в первые 2 нед жизни. Манифестную цитомегаловирусной инфекцию у детей первых месяцев жизни обосновывают наличием ДНК цитомегаловируса в крови, у иммуносупрессивных лиц (реципиентов органов, больных ВИЧ-инфекцией) необходимо устанавливать количество ДНК вируса в крови. Достоверно указывает на цитомегаловирусную природу заболевания содержание ДНК цитомегаловируса в цельной крови, равное 3.0 и более loglO в 10″ лейкоцитах. Количественное определение ДНК цитомегаловируса в крови имеет и большое прогностическое значение. Появление и постепенное повышение содержания ДНК цитомегаловируса в цельной крови существенно опережает развитие клинической симптоматики. Обнаружение цитомегалоклеток при гистологическом исследовании биопсийных и аутопсийных материалов подтверждает цитомегаловирусную природу органной патологии.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]

источник

ПЦР цитомегаловирус – один из самых эффективных современных методов диагностики. Данная техника позволяет с высокой степенью определять наличие или отсутствие инфекции в организме, а также уточнять степень ее развития.

ПЦР, или полимеразная цепная реакция, была разработана американским ученым Кэри Муллисом в 1983 г. Метод получил всеобщее признание, и в 1993 г. принес своему автору Нобелевскую премию в области достижений по химии.

В основе ПЦР – выявление ДНК возбудителя инфекционного заболевания. Данная техника считается особенно информативной в отношении цитомегаловируса (ЦМВ), принадлежащего к ДНК-содержащим разновидностям болезнетворных микроорганизмов.

К проведению исследования методом ПЦР прибегают в следующих ситуациях:

1. На этапе планирования беременности.
2. При наличии фетоплацентарной недостаточности.
3. У пациентов с неопластическими заболеваниями, ВИЧ-инфекцией.
4. В период приема цитостатиков.
5. При клиническом проявлении патологии на фоне отсутствия возбудителя.
6. В период приема противораковых лекарственных препаратов.
7. При повышении температуры тела без видимой причины.
8. Перед процедурой сдачи крови у доноров.
9. При длительном течении воспалительных процессов у детей и взрослых.

Анализ на ПЦР на цитомегаловирус показан при проведении обследования новорожденных младенцев. У грудничков биоматериал берут не позже 10-14 дня после появления на свет.

Метод также используют в педиатрии во время проведения диагностики у детей с нетипичным течением пневмонии. В гинекологии он актуален для женщин при невынашивании беременности, или подозрении на внутриутробное инфицирование плода.

Помимо медицины ПЦР нашел свое применение в других сферах. Криминалисты с его помощью выявляют «хозяина» обнаруженного на месте преступления биоматериала. Иногда ПЦР используют при определении отцовства или проведении экспериментов с мутациями ДНК.

Методика полимеразной цепной реакции предусматривает работу с различными жидкими средами:

кровью;

Выявление цитомегаловируса в имеющемся биоматериале осуществляется в лабораторных условиях с применением высокоточной современной техники. Для этих целей предназначен специальный реактор, работающий на молекулярно-генетическом уровне.

В случаях, когда другие диагностические методы не способны предоставить нужную информацию относительно развития вируса в организме пациента, ПЦР становится единственным безошибочным способом определения инфекции.

Чтобы получить достоверные результаты обследования, накануне проведения процедуры потребуется соблюдать нижеприведенные правила для пациентов:

1. За 6-8 часов до сдачи крови отказаться от употребления любых продуктов питания.
2. В течение 24-х часов, предшествующих забору биоматериала, исключить прием алкогольных напитков, физическую активность.
3. За сутки до обследования избегать любых форм сексуальной близости.
4. В течение 2-3 часов до взятия мазка из половых путей следует воздерживаться от мочеиспускания, курения.
5. За неделю до сдачи анализа прекратить прием каких-либо лекарственных препаратов (в первую очередь антибиотиков).

Если сдача крови предстоит грудничку или ребенку постарше, родителям потребуется обеспечить его достаточным количеством питья. За 30 минут до процедуры следует давать малышу достаточное количество кипяченой воды.

Чаще всего для проведения ПЦР берется кровь из вены. Такой способ диагностики наиболее удобен, так как не вызывает существенного дискомфорта, может применяться для обследования пациентов любого возраста и пола. Манипуляции выполняются стерильными одноразовыми инструментами, в ранние утренние часы, натощак.

Взятие мазка на цитомегаловирус у женщин также позволяет быстро выявить наличие вируса в организме. Пациентка в этот момент находится в гинекологическом кресле, а врач выполняет забор биоматериала из влагалища и шейки матки. Для этого специалист использует маточное зеркало и тампон-зонд. У девушек, не живущих половой жизнью, зеркало не используется.

Чтобы взять мазок у мужчины, уролог использует стерильный ватный тампон. Доктор вводит его в уретру, затем вращательными движениями извлекает. Процедура часто вызывает дискомфорт, однако болезненные ощущения отсутствуют.

Вид биоматериала определяется специалистом, исходя из индивидуальных особенностей обследуемого. При отсутствии следов вируса в крови или мазках часто проводятся дополнительные тесты.

Проведение диагностики цитомегаловируса методом полимеразной цепной реакции позволяет быстро получить однозначный результат – отрицательный/положительный. В первом случае бланк с информацией относительно проведенного обследования содержит словесную формулировку «не обнаружено», что означает отсутствие следов искомой инфекции в биоматериале. В случае наличия жалоб проводится дополнительная диагностика с целью выявления других видов возбудителей.

Положительный результат говорит о факте заражения цитомегаловирусом, его пребывании в организме пациента в пассивной форме, или выделении в небольших количествах. После получения такого ответа обязательным становится проведение адекватной терапии. Нередко назначаются дополнительные исследования (анализ на антитела), позволяющие определить изменения, вызванные жизнедеятельностью вируса в теле пациента.

Метод ПЦР также способен показывать количество присутствующих микроорганизмов. Количественный анализ ПЦР становится особенно важным при выборе эффективной терапевтической тактики.

Существует так называемое «здоровое носительство», при котором ПЦР демонстрирует положительный результат, однако активная форма инфекции не наблюдается. В таких случаях отсутствует типичная симптоматика, лечение не проводится, однако пациенту рекомендовано наблюдаться у врача.

Сдавать анализы на ПЦР на ЦМВ можно на усмотрение пациента – как в государственном медицинском учреждении, так и в частной клинике. Обязательными условиями успешного проведения обследования являются:

• наличие в учреждении необходимого диагностического оборудования;
• высокий профессионализм медицинского персонала;
• добросовестная подготовка пациента к процедуре.

При необходимости прохождения повторного исследования на ЦМВ следует обращаться в заведение, в котором проводились предыдущие процедуры. Это позволит получить максимально точные результаты, т. к. показатели, соответствующие норме, могут отличаться в каждой диагностической лаборатории. Осуществление ПЦР-диагностики строится на реализации высоких требований в процессе проведения исследования.

Сдавать подобный анализ рекомендуется только в профессиональных лабораториях, имеющих проверенную репутацию и компетентных сотрудников, внедряющих строгие системы контроля за качеством медицинской практики (Инвитро, Гемотест и др.)

Обследование женщин на наличие цитомегаловируса проводится как на этапе планирования беременности, так и во время вынашивания малыша. Своевременное выявление инфекции и прохождение соответствующего лечения невероятно важны, так как позволяют избежать выкидыша в первом триместре, или развития у плода необратимых патологий в более позднем сроке вынашивания (поражений ЦНС, ухудшения слуха или зрения).

ПЦР у пациенток, находящихся в «интересном» положении, позволяет обнаруживать даже незначительное присутствие вируса в исследуемом биоматериале. Таковым в период беременности становится кровь, урина, выделения из влагалища, содержимое цервикального канала, цереброспинальная жидкость, слюна, амниотическая (околоплодная) жидкость.

Обследование на наличие цитомегаловируса методом ПЦР у беременных пациенток проводится на бесплатной основе. Такая услуга предоставляется в государственных медицинских учреждениях после предъявления страхового полиса.

Для проведения анализа ПЦР требуется временной промежуток в пределах 24-х часов. Окончательный результат предоставляется по истечении 1,5-2 дней.

В случае необходимости процедура выявления цитомегаловируса может быть проведена за несколько часов. Достоверность результатов при этом остается на уровне 99-100 %.

Некоторые специалисты рассматривают в качестве минуса метода ПЦР неспособность определять характер инфекции – первичный или повторный. Кроме этого в случае с ЦМВИ и другими патологиями данная техника не позволяет обнаруживать отличия между активным и «спящим» вирусом.

Стоимость проведения диагностики методом ПЦР в различных лабораториях варьируется в незначительных пределах, определяется разновидностью и сроком исследования биоматериала. Средняя цена обычной диагностики составляет от 6, 95 $ до 15 $. Ускоренное проведение обследования предусматривает двукратное увеличение стоимости услуги.

Для пациентов, желающих сэкономить материальные средства, существует специальный фиксированный пакет анализов.

Такая услуга предоставляется большинством частных клиник, проводящих обследования с использованием методики ПЦР.

источник