Суточная моча на белок методика определения

Патологическая протеинурия является одним из наиболее важных и постоянных признаков заболеваний почек и мочевых путей. Определение концентрации белка в моче является обязательным и важным элементом исследования мочи. Выявление и количественная оценка протеинурии важна не только в диагностике многих первичных и вторичных заболеваний почек, оценка изменения выраженности протеинурии в динамике несет информацию о течении патологического процесса, об эффективности проводимого лечения. Обнаружение белка в моче даже в следовых количествах должно настораживать в отношении возможного заболевания почек или мочевых путей и требует повторного анализа. Особо следует отметить бессмысленность исследования мочи и, в частности, определения белка мочи без соблюдения всех правил ее сбора.

Все методы определения белка в моче можно разделить на:

Качественные,
Полуколичественные,
Количественные.

Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.

Условия определения белка в моче на основе реакции коагуляции:

Моча должна иметь кислую реакцию. Мочу щелочной реакции подкисляют несколькими (2 — 3) каплями уксусной кислоты (5 – 10%).
Моча должна быть прозрачной. Помутнение устраняется через бумажный фильтр. Если помутнение не исчезает, добавляют тальк или жженую магнезию (около 1 чайной ложки на 100 мл мочи), взбалтывают и фильтруют.
Качественную пробу следует проводить в двух пробирках, одна из них – контрольная.
Искать помутнение следует на черном фоне в проходящем свете.

К качественным методам определения белка в моче относятся:

Как показывают многочисленные исследования, ни один из большого числа известных методов качественного определения белка в моче не позволяет получать надежные и воспроизводимые результаты. Несмотря на это, в большинстве КДЛ в России эти методы широко используются в качестве скрининга – в моче с положительной качественной реакцией в дальнейшем проводят количественное определение белка. Из качественных реакций чаще используют пробу Геллера и пробу с сульфосалициловой кислотой, однако пробу с сульфосалициловой кислотой большей частью считают наиболее подходящей для выявления патологической протеинурии. Проба с кипячением в настоящее время практически не используется в связи с ее трудоемкостью и длительностью.

В основе метода Брандберга-Робертса-Стольникова лежит кольцевая проба Геллера, поэтому при данном методе наблюдаются те же ошибки, что и при пробе Геллера.

В настоящее время для определения белка в моче все чаще используются диагностические полоски. Для полуколичественного определения белка в моче на полоске в качестве индикатора чаще всего используется краситель бромфеноловый синий в цитратном буфере. О содержании белка в моче судят по интенсивности сине-зеленой окраски, развивающейся после контакта реакционной зоны с мочой. Результат оценивается визуально или с помощью анализаторов мочи. Несмотря на большую популярность и очевидные преимущества методов сухой химии (простота, скорость выполнения анализа) данные методы анализа мочи в целом и определения белка в частности не лишены серьезных недостатков. Одним из них, приводящих к искажению диагностической информации, является большая чувствительность индикатора бромфенолового синего к альбумину по сравнению с другими белками. В связи с этим, тест-полоски в основном приспособлены к обнаружению селективной гломерулярной протеинурии, когда практически весь белок мочи представлен альбумином. При прогрессировании изменений и переходе селективной гломерулярной протеинурии в неселективную (появление в моче глобулинов) результаты определения белка оказываются заниженными по сравнению с истинными значениями. Данный факт не дает возможности использовать данный метод определения белка в моче для оценки состояния почек (гломерулярного фильтра) в динамике. При тубулярной протеинурии результаты определения белка также оказываются заниженными. Определение белка с помощью диагностических полосок не является надежным индикатором низких уровней протеинурии (большинство выпускаемых в настоящее время диагностических полосок не обладают способностью улавливать белок в моче в концентрации ниже, чем 0,15 г/л). Отрицательные результаты определения белка на полосках не исключают присутствия в моче глобулинов, гемоглобина, уромукоида, белка Бенс-Джонса и других парапротеинов.

Хлопья слизи с высоким содержанием гликопротеидов (например, при воспалительных процессах в мочевых путях, пиурии, бактериурии) могут оседать на индикаторной зоне полоски и приводить к ложноположительным результатам. Ложноположительные результаты могут также быть связаны с высокой концентрацией мочевины. Плохое освещение и нарушение цветоощущения может быть причиной неточного результата.

В связи с этим, использование диагностических полосок следует ограничить скринирующими процедурами, а результаты, полученные с их помощью, следует рассматривать лишь как ориентировочные.

Корректное количественное определение белка в моче в ряде случаев оказывается непростой задачей. Трудности ее решения определяются следующим рядом факторов:

низким содержанием белка в моче здорового человека, часто находящимся на пороге чувствительности большинства известных методов;
присутствием в моче множества соединений, способных вмешиваться в ход химических реакций;
значительными колебаниями содержания и состава белков мочи при различных заболеваниях, затрудняющими выбор адекватного калибровочного материала.

В клинических лабораториях преимущественно применяются так называемые «рутинные» методы определения белка в моче, однако они далеко не всегда позволяют получать удовлетворительные результаты.

С точки зрения специалиста-аналитика, работающего в лаборатории, метод, предназначенный для количественного определения белка в моче, должен отвечать следующим требованиям:

обладать линейной зависимостью между поглощением образовавшегося в ходе химической реакции комплекса и содержанием белка в пробе в широком диапазоне концентраций, что позволит избежать дополнительных операций при подготовке пробы к исследованию;
должен быть прост, не требовать высокой квалификации исполнителя, выполняться при малом количестве операций;
обладать высокой чувствительностью, аналитической надежностью при использовании небольших объемов исследуемого материала;
быть устойчивым к воздействию различных факторов (колебаниям состава образца, присутствию лекарственных препаратов и др.);
обладать приемлемой стоимостью;
быть легко адаптируемым к автоанализаторам;
результат определения не должен зависеть от белкового состава исследуемого образца мочи.

Ни один из известных к настоящему времени методов количественного определения белка в моче не может в полной мере претендовать на роль «золотого стандарта».

Количественные методы определения белка в моче можно разделить на турбидиметрические и колориметрические.

К турбидиметрическим методам относятся:

определение белка с сульфосалициловой кислотой (ССК),
определение белка с трихлоруксусной кислотой (ТХУ),
определение белка с бензетоний хлоридом.

Турбидиметрические методы основаны на снижении растворимости белков мочи вследствие образования суспензии взвешенных частиц под воздействием преципитирующих агентов. О содержании белка в исследуемой пробе судят либо по интенсивности светорассеяния, определяемого числом светорассеивающих частиц (нефелометрический метод анализа), либо по ослаблению светового потока образовавшейся суспензией (турбидиметрический метод анализа).

Величина светорассеяния в преципитационных методах обнаружения белка в моче зависит от множества факторов: скорости смешивания реактивов, температуры реакционной смеси, значения pH среды, присутствия посторонних соединений, способов фотометрии. Тщательное соблюдение условий реакции способствует образованию стабильной суспензии с постоянным размером взвешенных частиц и получению относительно воспроизводимых результатов.

Некоторые лекарственные препараты влияют на результаты турбидиметрических методов определения белка в моче, приводя к так называемым «ложноположительным», либо «ложноотрицательным» результатам. К ним относятся некоторые антибиотики (бензилпенициллин, клоксациллин и др.), рентгеноконтрастирующие йодсодержащие вещества, сульфаниламидные препараты.

Турбидиметрические методы плохо поддаются стандартизации, часто приводят к получению ошибочных результатов, но, несмотря на это, в настоящее время они широко используются в лабораториях из-за невысокой стоимости и доступности реактивов. Наиболее широко в России используется метод определения белка с сульфосалициловой кислотой.

Наиболее чувствительными и точными являются колориметрические методы определения общего белка мочи, основанные на специфических цветных реакциях белков.

биуретовая реакция,
метод Лоури,
методы, основанные на способности различных красителей образовывать комплексы с белками:
- Понсо S (Ponceau S),
- Кумасси бриллиантовый синий (Coomassie Brilliant Blue)
- пирогаллоловый красный (Pyrogallol Red).

С точки зрения исполнителя, в повседневной работе лаборатории при большом потоке исследований биуретовый метод является неудобным из-за большого числа операций. В то же время, метод характеризуется высокой аналитической надежностью, позволяет определять белок в широком диапазоне концентраций и выявлять альбумин, глобулины и парапротеины со сравнимой чувствительностью, вследствие чего биуретовый метод рассматривают в качестве референтного и рекомендуют для сравнения других аналитических методов обнаружения белка в моче. Биуретовый метод определения белка в моче предпочтительно выполнять в лабораториях, обслуживающих нефрологические отделения, и использовать в тех случаях, когда результаты определения с помощью других методов представляются сомнительными, а также для определения величины суточной потери белка у нефрологических больных.

Метод Лоури, обладающий более высокой чувствительностью по сравнению с биуретовым методом, сочетает биуретовую реакцию и реакцию Фолина на аминокислоты тирозин и триптофан в составе белковой молекулы. Несмотря на высокую чувствительность, данный метод не всегда обеспечивает получение надежных результатов при определении содержания белка в моче. Причиной тому служит неспецифическое взаимодействие реактива Фолина с небелковыми компонентами мочи (чаще всего аминокислотами, мочевой кислотой, углеводами). Отделение этих и других компонентов мочи путем диализа или осаждения белков позволяет с успехом использовать данный метод для количественного определения белка в моче. Некоторые лекарственные препараты – салицилаты, хлорпромазин, тетрациклины способны оказывать влияние на данный метод и извращать результаты исследования.

Достаточная чувствительность, хорошая воспроизводимость и простота определения белка по связыванию красителей делают эти методы перспективными, однако высокая стоимость реактивов препятствует более широкому их использованию в лабораториях. В настоящее время в России все большее распространение получает метод с пирогаллоловым красным.

Проводя исследование уровня протеинурии, нужно иметь ввиду, что различные методы определения протеинурии имеют разную чувствительность и специфичность к многочисленным белкам мочи.

Исходя из эмпирических данных, рекомендуется определять белок двумя разными методами и рассчитывать истинное значение по одной из приведенных формул:

протеинурия = 0,4799 B + 0,5230 L;
протеинурия = 1,5484 B – 0,4825 S;
протеинурия = 0,2167 S + 0,7579 L;
протеинурия = 1,0748 P – 0,0986 B;
протеинурия = 1,0104 P – 0,0289 S;
протеинурия = 0,8959 P + 0,0845 L;

где:
B – результат измерения с Кумасси G-250;
L — результат измерения с реактивом Лоури;
P — результат измерения с молибдатом пирогаллола;
S — результат измерения с сульфосалициловой кислотой.

Учитывая выраженные колебания уровня протеинурии в различное время суток, а также зависимость концентрации белка в моче от диуреза, различное его содержание в отдельных порциях мочи, в настоящее время при патологии почек принято оценивать выраженность протеинурии по суточной потере белка с мочой, то есть определять так называемую суточную протеинурию. Она выражается в г/сут.

При невозможности сбора суточной мочи рекомендуется определять в разовой порции мочи концентрации белка и креатинина. Поскольку скорость выделения креатинина в течение дня достаточно постоянна и не зависит от изменения скорости мочеотделения, отношение концентрации белка к концентрации креатинина постоянно. Данное отношение хорошо коррелирует с суточной экскрецией белка и, следовательно, может использоваться для оценки выраженности протеинурии. В норме отношение белок/креатинин должно быть менее 0,2. Белок и креатинин измеряют в г/л. Важным достоинством метода оценки выраженности протеинурии по соотношению белок-креатинин является полное исключение ошибок, связанных с невозможностью или неполным сбором суточной мочи.

О. В. Новоселова, М. Б. Пятигорская, Ю. Е. Михайлов, «Клинические аспекты выявления и оценки протеинурии», Справочник заведующего КДЛ, № 1, январь 2007 г.
А. В. Козлов, «Протеинурия: методы ее выявления», лекция, Санкт-Петербург, СПбМАПО, 2000 г.
В. Л. Эмануэль, «Лабораторная диагностика заболеваний почек. Мочевой синдром», — Справочник заведующего КДЛ, № 12, декабрь 2006 г.
В.И. Пупкова, Л.М. Прасолова — Определение белка в моче и спинномозговой жидкости. Кольцово, 2007 г.
Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва, «Медицина», 1975 г.

Для количественного определения белка пригоден любой образец мочи. Большинство исследователей для выяснения величины суточной потери белка предпочитают определять содержание белка в моче, собранной за сутки.

Раздел: Анализ мочи

Все качественные пробы на белок в моче основаны на способности белков к денатурации под влиянием различных физических и химических факторов. При наличии белка в исследуемом образце мочи появляется либо помутнение, либо выпадение хлопьевидного осадка.

Раздел: Анализ мочи

Проба с 20% сульфосалициловой кислотой относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.

Раздел: Анализ мочи

Кольцевая проба Геллера относится к качественным реакциям определения белка в моче. Так как она основана на реакции коагуляции, то исследуемая моча должна соответствовать определенным требованиям: быть прозрачной и иметь кислую реакцию.

Раздел: Анализ мочи

источник

Суточный анализ мочи на белок назначается для диагностики и мониторинга заболеваний почек, при диабете и инфекционных болезнях, а также в ряде других случаев. Исследование позволяет отличить физиологическую протеинурию от патологической. Для получения достоверных результатов необходимо соблюдать правила сбора материала.

Моча – биологическая жидкость, которая образуется почками и содержит в себе продукты обмена, предназначенные для выведения из организма. Она образуется в результате прохождения крови через гломерулярный фильтр почек, который не пропускает крупные молекулы, в том числе белковые. Поэтому у здорового человека в моче белок отсутствует или определяются его незначительное количество (следы). Содержание в разовой пробе мочи белка более 0,1 г/л или в суточной свыше 0,15 г/л расценивается как протеинурия.

В случае обнаружения в моче белка производят качественное определение его состава методом электрофореза, что повышает диагностическую ценность анализа.

Кратковременное повышение белка в моче может быть обусловлено физиологическими причинами (прием большого количества белковой пищи, тяжелые физические нагрузки, переохлаждение или перегревание, стресс, резкое изменение положения тела перед сбором материала).

Патологическими причинами протеинурии являются заболевания почек, сердечно-сосудистой и эндокринной системы, в том числе:

При наличии данных заболеваний или подозрении на них пациентам назначают сдать суточный анализ мочи на белок.

Другими показаниями к исследованию служат:

тяжело протекающие инфекционные заболевания;
лихорадочные состояния;
отравления нефротоксичными ядами (сулема, соли тяжелых металлов);
передозировка нефротоксичных антибиотиков (аминогликозиды, стрептомицин).

Кроме того, показанием к исследованию суточной мочи на белок служит выявление повышенной концентрации белка в общем анализе мочи.

Поскольку кратковременное возрастание белка в моче может быть вызвано физиологическими причинами, провести дифференциальную диагностику между физиологической (кратковременной) и патологической (постоянной) протеинурией призван анализ суточной мочи на белок. Основной целью является оценка потери белка организмом пациента за 24 часа.

Выявление белка Бенс-Джонса характерно для миеломной болезни. При повышенной проницаемости капиллярных стенок почечных клубочков в моче появляются альбумины.

Чтобы результаты исследования были точными и достоверными, следует тщательно соблюдать правила подготовки и сбора суточной мочи:

пациент придерживается обычного водного и пищевого режима;
сбор мочи осуществляется в заранее подготовленную чистую емкость с крышкой объемом не менее трех литров (специальный контейнер для сбора суточной мочи можно приобрести в аптеке);
утром пациент должен провести туалет наружных половых органов и помочиться в унитаз, отметив время, которое и будет начальной точкой отсчета временного интервала;
в течение суток вся моча должна собираться в емкость, которую хранят в закрытом виде в прохладном и темном месте;
первая утренняя моча не собирается для анализа, вместо нее собирают первую утреннюю мочу следующего дня;
на направлении в лабораторию пациент отмечает количество собранной за сутки мочи (суточный диурез);
собранную мочу тщательно перемешивают, отливают в небольшую емкость 100-150 мл и доставляют в лабораторию.

Существует ряд факторов, которые могут оказать существенное влияние на результаты исследования суточной мочи на белок. К ложно повышенным результатам приводит загрязнение мочи каловыми массами, а также прием следующих лекарственных препаратов:

бикарбонат натрия;
сульфаниламиды;
пенициллин;
цефалоспорины;
рентгеноконтрастные средства, содержащие в составе йод.

Поэтому так важен тщательный туалет наружных половых органов перед началом сбора мочи. Кроме того, его следует повторить и после дефекации.

К ложно заниженным результатам приводит форсированный диурез, обусловленный приемом мочегонных препаратов, в том числе и растительного происхождения, а также питье большого количества жидкости.

При повышенной проницаемости капиллярных стенок почечных клубочков в моче появляются альбумины.

Учитывая это, необходимо, чтобы пациенты в ходе сбора суточной мочи придерживались обычного водного режима, а также не принимали лекарственные препараты, способные повлиять на результат исследования.

В среднем у здорового человека с мочой выводится 50–80 мг белка (верхняя граница нормы составляет 150 мг). При значительных физических нагрузках экскреция белка возрастает и может достигать 250 мг/сутки. Это явление рассматривается как физиологическая протеинурия, то есть не является признаком какой-либо болезни.

В зависимости от количества потери белка за сутки протеинурия подразделяется на три степени:

умеренная – менее 1 г;
средняя – от 1 до 3 г;
выраженная – от 3 г и выше.

Потеря белка менее 500 мг в сутки обычно указывает на наличие хронического пиелонефрита и ряда других заболеваний почек, при которых клубочковый аппарат страдает незначительно.

Средняя степень протеинурии может выступать симптомом следующих заболеваний:

амилоидоз почек;
острый и хронический гломерулонефрит;
токсический нефрит;
диабетическая нефропатия;
тяжелая сердечная недостаточность.

Тяжелая степень протеинурии характерна для нефротического синдрома.

Сочетание протеинурии с гематурией говорит о диффузном или очаговом поражении мочевыводящих путей, а с лейкоцитурией – об их инфекционном поражении.

Потери белка с мочой могут быть связаны и с другими причинами, например, с инфекционными заболеваниями, поражением центральной нервной системы. При беременности, начиная со второй половины, протеинурия нередко обусловлена развитием ОПГ-гестоза, или позднего токсикоза беременных.

В среднем у здорового человека с мочой выводится 50–80 мг белка. При значительных физических нагрузках экскреция белка возрастает и может достигать 250 мг/сутки.

В случае обнаружения в моче белка производят качественное определение его состава методом электрофореза, что повышает диагностическую ценность анализа. Так, выявление белка Бенс-Джонса характерно для миеломной болезни. При повышенной проницаемости капиллярных стенок почечных клубочков в моче появляются альбумины. Появление миоглобина свидетельствует о повреждении мышц, а гемоглобина – о внутрисосудистом гемолизе крови, который может быть вызван разными причинами (гемолитический криз, переливание несовместимой крови, отравления гемолитическими ядами).

Видео с YouTube по теме статьи:

источник

Моча – это важная биологическая жидкость в организме человека. Большая часть продуктов обмена удаляется именно с ней. У здорового человека ее состав имеет относительно фиксированные значения. При возникновении заболевания некоторые показатели изменяются, что дает возможность лечащим врачам уточнить поставленный диагноз. Выявить проблемы в работе почек поможет анализ суточной мочи на белок.

Это лабораторное исследование, с помощью которого определяют количество выделившейся жидкости за сутки. Такой метод применяется для оценки состояния функционирования почек. Состав урины:

вода, которая составляет 97%;
калий;
натрий;
креатинин;
мочевина;
соли в виде сульфатов, фосфатов и хлоридов.

Каждого компонента в норме должно содержаться определенное количество, отклонение от которого считается патологией. При исследовании суточного анализа мочи на белок норма для взрослых мужчин и женщин одинаковая. При нормальной работе почек это вещество не должно попадать в урину или его может содержаться незначительное количество 40-80 мг. Выделение 150 мг и более считается патологией. Однако с возрастом, особенно после 60 лет, допускается небольшое превышение допустимого показателя, и связано это с возрастными изменениями в организме. В некоторых случаях выявление белка объясняется неправильной подготовкой перед сбором биоматериала или погрешностями в питании. У детей норма зависит от возраста, веса и площади поверхности тела.

По результатам лабораторных исследований суточной урины получают следующие сведения:

Объем жидкости, который выделяется в течение суток из организма. В среднем, он составляет 1750 мл и может колебаться как в меньшую, так и в большую сторону в зависимости от объема выпитой жидкости.
Сахар. Особенно важен этот показатель для пациентов, страдающих сахарным диабетом.
Оксалаты. Превышение сверх допустимых границ чревато образованием в почках песка и камней.
Метанефрин. Это вещество образуется после распада гормонов. Отклонения от нормы в сторону увеличения – это признак патологии почек, сердечно-сосудистой системы и др.
Белок. У здоровых людей этого показателя не должна наблюдаться в урине. Это один из важных параметров, который выявляется при суточном анализе мочи. Завышенный уровень свидетельствует о признаках патологии почек, болезнях центральной нервной системы. Помимо общего количества белка, лабораторное исследование биологической жидкости позволяет обнаружить и белковые соединения, которые также важны для правильной постановки диагноза.

Ввиду того что изменения в качественном и количественном составе урины начинаются раньше, чем симптомы болезни, анализ позволяет своевременно выявить патологию. Показаниями к назначению этого вида исследований у взрослых и детей является наличие следующих заболеваний:

амилоидоза (нарушение обмена белков);
сахарного диабета;
нефропатии, которая проявляется отеками ног;
ишемии сердца;
почечной недостаточности.

Для большей информативности и получения наиболее объективной информации по итогам анализа суточной мочи на белок следует соблюдать определенные правила, которые обязательны для выполнения и заключаются в следующем:

За сутки или более исключить употребление витаминных комплексов, антикоагулянтов и диуретических средств.
За сутки изменить рацион. Отказаться от острой, жирной и сладкой пищи, а также алкогольных и кофейных напитков.
Не сдавать биоматериал во время месячных.
Для сбора урины приобрести в аптечном учреждении специальную тару или можно воспользоваться стеклянной банкой, объемом не менее трех литров.

Правила сбора биоматериала общие как для взрослых мужчин, так и для женщин и детишек, которые достигли определенного возраста и могут самостоятельно пользоваться горшком.

Непосредственно перед сбором урины необходимо выполнить туалет наружных половых органов.
Первая порция биоматериала не учитывается. Однако фиксируется время утреннего мочеиспускания.
Собирают всю выделяемую жидкость в течение 24 часов. В ночное время также продолжается сбор урины.
Тару с биоматериалом рекомендуется хранить при температуре не выше 8 градусов и не ниже 5.
Сразу после забора последней порции, собранную мочу следует тщательно перемешать.
Предварительно у доктора следует уточнить, как сдавать суточный анализ мочи на белок в лабораторию. Существует два способа. Около 100 мл биоматериала отливают в емкость маленького размера и относят в лабораторию или можно доставить весь суточный объем в большой таре.
В случае, когда имеет значение изменение диуреза за сутки, то доктор рекомендует фиксировать объем любой потребляемой жидкости в течение 24 часов.

Таким термином обозначают высокие показатели белковых веществ в урине. С ее помощью отслеживают работу почек. Различают протеинурию следующих видов. Легкая – не является предвестником заболеваний и возникает по естественным причинам. Умеренная и выраженная – эти виды свидетельствуют о проблемах в работе почек. В этих случаях, кроме белка в суточном анализе мочи, присутствуют такие симптомы, как:

боли в костях;
головокружение;
потеря аппетита;
сонливость;
тошнота;
рвота;
сильная утомляемость.

Причины появления белка в урине:

сердечная недостаточность;
болезни центральной нервной системы;
гипертиреоз;
инфекционный эндокардит.

Основным фактором, оказывающим влияние на появление в урине белковых соединений, являются неполадки в усвоении этого вещества. Различают протеинурию:

Канальцевую. При некоторых заболеваниях невозможно или затруднительно всасывание белков.
Клубочковую. В этом случае белковые молекулы не задерживаются и вместе с жидкостью выводятся. Такое явление характерно при следующих патологиях: пиелонефрит, повреждение почек токсинами, гломерулонефрит.
Экстраренальная. Присутствуют повреждения мочевыводящих путей, характерные для уретритов, кольпитов и циститов.

Белок – это строительный материал, принимающий участие в различных процессах в организме индивида. Выявление его в урине считается признаком развития патологических процессов. Почечные тельца теряют целостность и вместе с вредными веществами в мочу попадает белок, а причиной такого сбоя является воспалительный процесс в почках. Анализ урины позволяет своевременно распознать болезнь, удостовериться в правильной работе почек в самый ответственный и важный период в жизни женщины. Любое, даже самое незначительное выявление белка у беременных в суточном анализе мочи – это признак начала развития патологии. Причинами его появления являются следующие заболевания:

гломерулонефрит;
красная волчанка;
нефрит;
гипертония;
диабет сахарный.

С целью диагностики заболеваний почек используют простой метод – это суточной анализ мочи на белок. Соблюдение условий для правильного сбора мочи является обязательным для любой женщины в положении.

Наружные половые органы должны быть чистыми. Подмываться можно с использованием обычного мыла. Использовать антисептики или травяные сборы запрещено, так как они исказят достоверность результатов.
Собирают урину в чистую сухую тару с широким горлом.

В случае обнаружения в моче белка доктор назначает лечение, которое защитит плод от отрицательного влияния заболевания, ставшего причиной появления веществ белковой природы в урине. Далее следует выяснить причину этого явления. В большинстве случаев она кроется в нарушении работы почек. Появление белка в биоматериале во второй половине беременности – это один из симптомов гестоза. Затем присоединяются отеки, перепады артериального давления.

Всем женщинам рекомендуется при беременности:

суточный анализ мочи на белок;
регулярное посещение доктора;
контроль за давлением;
питание, усиленное витаминными комплексами;
умеренное потребление жидкости;
отказ от специй и по возможности от соли или уменьшение ее количества до минимума.

Расшифровку анализов следует доверить своему доктору. В случае выявления патологических причин появления белковых веществ в урине необходимую терапию назначает только медицинский работник. Не рекомендуется самостоятельно лечиться и увлекаться нетрадиционными методами. При выявлении причин, не связанных с патологическими процессами, уделяют особое внимание рациону. Важно помнить, что эффективность терапии зависит от своевременной диагностики.

источник

Определение суточной потери белка представляет собой исследование мочи, при котором определяется функциональное состояние почек, в частности клубочкового аппарата. Этот анализ получил достаточно широкое распространение в практической медицине благодаря простоте проведения, а также высокой информативности.

Белки (протеины) представляют собой органические азотсодержащие соединения, которые состоят из аминокислот и являются синтетическим материалом для всех структур организма. В крови они находится в виде альбуминов и глобулинов. Молекулы этих соединений имеют достаточно большие размеры, поэтому не проходят через полупроницаемую мембрану клубочков почек, выполняющую роль биологического фильтра во время фильтрации. При нормальном функциональном состоянии почек в моче может быть небольшое количество протеина (следы), концентрация которого не должна превышать 140 мг/мл мочи (0,140 г/л мочи). В небольшом количестве он попадает за счет слущивания эпителиальных клеток, продукции мукопротеидов слизистыми оболочками структур мочевыделительной системы, а также фильтрации единичных молекул альбуминов крови.

В пробе мочи проводится определение концентрации белка при помощи различных методик. Самой распространенной из них является добавление специальных химических реагентов, вызывающих денатурацию белковых соединений. При этом на границе мочи и реактива (реактив наслаивается на мочу в пробирке) образуется белое кольцо. По кратности разведения мочи, при котором образуется тоненькое кольцо из денатурированного протеина рассчитывается его концентрация. Количество белка, выводимого в течение суток (суточная протеинурия) определяется в пробе мочи, собранной за 24 часа.

В современных лабораториях данное исследование проводится при помощи специальных анализаторов, которые дают более точный количественный результат.

Определение суточной протеинурии позволяет оценить функциональное состояние клубочкового аппарата почек, выполняющего фильтрацию крови (образование первичной мочи). При различной патологии биологическая (полупроницаемая) мембрана воспаляется и повреждается, что приводит к прохождению белковых молекул через нее. По количеству протеинов при исследовании можно судить о выраженности повреждения клубочкового аппарата почек. Существует несколько основных показаний к проведению данного исследования:

Профилактическое исследование для определения функционального состояния почек (оно также может включать пробу по Зимницкому).
Диагностика различных заболеваний почек, сопровождающихся выведением протеинов, в частности аутоиммунного воспаления (гломерулонефрит) с поражением клубочкового аппарата.
Онкологический процессс формированием злокачественной опухоли почек или другой локализации.
Выявление инфекционного процесса в почках (пиелонефрит) или структурах мочевыделительной системы, при этом в моче белок появляется за счет повышения продукции слизи, появления лейкоцитов в моче.

Также данное исследование проводится в сомнительных случаях, когда другие методы диагностики не дают достоверного результата.

Для сбора мочи необходима чистая стеклянная посуда емкостью не менее 3-х литров. Утром в день исследования (обычно в 6.00) первое мочеиспускание производится без сбора. Затем при каждом последующем мочеиспускании она собирается в одну посуду до 6.00 утра следующего дня. Затем определяется общий объем мочи (необходим для проведения расчетов), часть порции отливается в чистую посуду объемом 100-150 мл и отправляется в лабораторию, где определяется суточная протеинурия.

Очень важным условием правильного сбора анализа является чистая посуда, так как загрязнение (особенно органическими веществами) может привести к ложноположительному результату. Также к этому может привести прием некоторых медикаментов (антибиотики, рентгенконтрастные вещества).

В норме в течение суток с мочой может выводится не более 150 мг протеинов. При превышении этого показателя, в зависимости от его выраженности различают несколько видов протеинурии:

Умеренная протеинурия (в сутки выводится до1 г белка) – бывает при инфекционном воспалительном процессе, интоксикации организма, начальной стадии опухолевой патологии, при диете с повышенным употреблением белковой пищи.
Средняя протеинурия (от 1-го до 3-х г белка) – может быть при тяжелых инфекциях или гнойных процессах, гломерулонефрите легкой степени.
Выраженная протеинурия (выводится более 3-х г белка в сутки) – указывает на тяжелое поражение клубочкового аппарата почек при гломерулонефрите, поражении организма различными токсинами.

Окончательное выяснение причины появления белка проводит врач на основании данных клинического обследования, а также других методов лабораторного, инструментального и функционального исследования.

источник

Моча – биологическая жидкость. Она вырабатывается в почках, в ней содержатся продукты обменных процессов, которые требуется вывести из организма. Моча формируется при прохождении крови сквозь фильтр в почках. Он не способен пропускать слишком большие молекулы, таковыми являются и молекулы протеинов.

У здорового человека в моче не содержится белок, редко выявляются незначительные его следы. Содержание белка в разовой общей пробе больше 0,1 г на 1 л говорит о протеинурии. Показатели суточного анализа мочи на белок должны быть в пределах 0,15 г на 1 л. Превышение нормы является симптомом заболевания.

Лабораторная диагностика утренней мочи помогает установить протеинурию, но не позволяет определить степень ее выраженности. Помимо этого, метод недостаточно чувствителен по отношению к низкомолекулярным белкам.

При обнаружении протеинурии в общих анализах с целью установления степени тяжести патологии необходимо проведение исследования суточной урины. Важно понимать, что это исследование также не поможет установить вид протеинурии, этиологию отклонения от нормы, поэтому всегда дополняется другими методами диагностики – лабораторными, инструментальными.В нормальном состоянии суточная потеря белка равняется 40 – 80 мг, количество может незначительно меняться. Если выводится больше 150 мг – это протеинурия. В соответствии с объемом белка в урине, собранной в течение 24 часов, устанавливается степень патологического состояния:

легкая, или микроальбуминурия, – от 0,3 до 1 г;
умеренная – от 1 до 3 г;
тяжелая – больше 3 г.

Сбор суточной мочи и ее анализ позволяет диагностировать разные заболевания, которые могут не проявиться при общем исследовании.

Если патологий нет, то концентрация белка всегда в пределах нормы. Так происходит, потому что при правильном функционировании всех органов белок проходит фильтрацию почками, не попадает в урину. Объем сахара и белка в суточном анализе мочи позволяет доктору поставить диагноз и подобрать дополнительные методы для его подтверждения. Обычно этот вид исследования проводится при выявлении протеинурии в результатах общего анализа.Также анализ суточной порции биоматериала требуется при подозрениях на некоторые заболевания:

нарушения почечной фильтрации;
сахарный диабет;
ишемия сердечной мышцы;
патологии соединительной ткани разного происхождения, особенно на стадиях обострения;
нефропатия.

Некоторые пациенты начинают волноваться уже при обнаружении в урине минимального объема белка. Но это не повод для переживаний. Такие отклонения могут быть следствием нерационального питания, когда в организм попадает избыточное или недостаточное количество белков. Также исказить результаты анализа могут слишком интенсивные физические нагрузки.

При сильной протеинурии врач предполагает развитие нефропатии или аутоиммунных болезней, причины также могут заключаться в отравлении, особенно часто это происходит после передозировки лекарственными средствами. В любом случае врачи назначают проведение дополнительной диагностики.

Доктора обязательно контролируют содержание белка в моче у беременных женщин, чтобы вовремя выявить возможные нарушения здоровья будущей матери и ребенка. Но высокая его концентрация – не всегда отклонение. Так часто происходит при употреблении перед сдачей урины молочных продуктов, мяса в большом количестве.

Протеинурия у беременных зачастую выявляется после стрессовых ситуаций, нервного переутомления. Но есть и патологические причины – это цистит, пиелонефрит, уретрит. Самое опасное из патологических состояний для женщины в положении и для ее будущего ребенка, которое сопровождается высокой концентрацией белка в суточном анализе урины, – это гестоз.

При отсутствии лечения развиваются сильные отеки по всему телу, цефалгия, эпигастральные боли, судороги. Это состояние опасно для здоровья беременной и ее будущего ребенка.Сдавать анализ мочи при беременности требуется каждые 2 месяца, на позднем сроке – чаще. Правила сбора материала простые:

накануне не включать в рацион соленые, кислые продукты, мясо в больших количествах;
собирать урину следует утром, после пробуждения;
перед забором урины принять душ;
отвезти анализ в лабораторию в течение часа после сбора;
не трясти тару во время перевозки.

При исследовании обязательно учитывается оттенок, реакция, удельный вес урины. При обнаружении отклонений врач дополнительно назначает диагностику в стационарных условиях, включающую анализ суточной мочи.

Для получения максимально достоверных результатов обследования требуется соблюдать некоторые правила перед тем, как сдавать мочу:

в день проведения анализа необходимо отказаться от использования диуретиков, употребления мочегонных продуктов, также любых препаратов, которые оказывают прямое или косвенное влияние на работу почек;
придерживаться привычного режима потребления жидкости;
не изменять привычный рацион.

Для исключения искажения данных анализа нужно предотвратить влияние случайных факторов, четко следовать правилам сбора урины.

Обязательно выполнять все правила этапа подготовки к анализу:

За сутки нужно исключить алкоголь и кофе, отказаться не только от лекарств, но и от витаминных комплексов.
Женщинам не следует делать анализ в период менструации. Сбор урины при месячных проводится в крайних случаях, но полученные данные в любом случае окажутся неточными.
Собирают мочу в специальный контейнер – он стерильный, продается в любой аптеке. Рекомендуется использовать небольшие емкости, затем выливая урину в общую.
Не обязательно стерилизовать емкости, достаточно тщательно их промыть.

Как уже было сказано, при суточном анализе мочи на белок ее требуется собирать в специально подготовленную емкость.Важно четко следовать инструкции, как сдавать суточный анализ:

перед мочеиспусканием необходимо провести туалет наружных половых органов с мылом, затем смывая его водой;
потом органы вытираются чистой сухой салфеткой;
первую утреннюю порцию мочи не следует собирать, но важно отметить время мочеиспускания;
полученная в течение следующих 24 часов урина собирается в один большой сосуд.

После каждого добавления новой порции сосуд тщательно закрывается и ставится в холодильник. Температура хранения — от +4 до +8 градусов по Цельсию. После завершения сбора фиксируется объем жидкости.

Также на емкость приклеивается бумага с информацией о пациенте, временем начала забора и его окончания. Весь объем мочи, собранной за сутки, не передается в лабораторию. Ее нужно тщательно перемешать и отлить 100-200 мл в отдельную тару для анализа.

Есть некоторые факторы, сильно изменяющие результаты исследования суточной мочи. Причины появления ложно завышенного показателя могут быть такими:

загрязнение мочи калом;
прием бикарбоната натрия, пенициллинов, сульфаниламидов, цефалоспоринов;
использование рентгеноконтрастных средств, содержащих йод.

Ложное занижение показателей провоцирует повышенный диурез, форсированный приемом диуретиков, употреблением большого количества жидкости, мочегонных продуктов.

Во избежание получения ложных данных следует правильно готовиться к анализу и затем правильно собирать урину.

Если содержание белка в норме, это свидетельствует о правильной работе почек, об отсутствии патологий, увеличивающих этот показатель. Его концентрация сильно изменяется на протяжении всего дня, в какой-то мере на этот процесс влияет количество употребляемой белковой пищи – при избыточном поступлении белок полностью не усваивается, поэтому выводится вместе с мочой.

Нормальная концентрация белка в урине для общего анализа – 0,014 г/л, норма белка при беременности несколько выше – до 0,033 г/л, у ребенка доходит до уровня 0,036 г/л. Большие отклонения говорят о наличии протеинурии. Содержание суточного белка в моче в норме в среднем равняется 108 мг/л.

Суточный анализ мочи на белок позволяет оценить фильтрационные способности почек. При нарушениях работы клубочкового аппарата в урину попадают даже большие молекулы белка. Причиной могут стать:

наследственные патологии развития;
воспалительные процессы в почках;
аутоиммунные заболевания;
интоксикация;
инфекции.

При суточной потере белка меньше 500 мг/л можно говорить о развитии хронической формы пиелонефрита или других нарушениях функций почек, когда происходит незначительное поражение клубочкового аппарата.

При существенном превышении нормы у взрослого (более 500 мг/л) врач может предположить следующие патологии:

гломерулонефрит в хронической форме или во время обострения;
почечный амилоидоз;
нефрит токсической природы;
нефропатию, вызванную сахарным диабетом;
сердечную недостаточность в тяжелой форме.

Тяжелая степень протеинурии чаще всего выявляется при нефротическом синдроме.

При поражении мочевыводящих путей (очаговом или диффузном) протеинурии сопутствует гематурия. Если дополнительно выявляется лейкоцитурия, это свидетельствует о воспалительном процессе, вызванном инфекцией.

Выявление в урине белка может быть признаком инфекций, поражения центральной нервной системы. Протеинурия во второй половине беременности появляется чаще всего при гестозе или позднем токсикозе.

Не нужно полагать, что повышение белка – неопровержимое свидетельство опасного заболевания. Это только синдром, который указывает на наличие проблемы в организме, вызывающей нарушение фильтрационной функции почек. Для постановки диагноза используются дополнительные методы исследования.

Сдать анализ на суточную концентрацию белка в моче недостаточно для выявления заболевания и выбора эффективного лечения.

Данные, полученные после исследования урины на белок, помогают только определить вероятные причины. Опираясь на них, врач подбирает дополнительные методы инструментальной диагностики, чтобы выявить заболевание.

Определение концентрации белка в суточной моче помогает вовремя распознать прогрессирование опасных патологий. Но результаты будут достоверными только при правильной подготовке к сбору материала.

источник

Почечная (истинная) протеинурия бывает функциональной и органической. Среди функциональной почечной протеинурии наиболее часто наблюдаются следующие ее виды:

— физиологическая протеинурия новорожденных, которая исчезает на 4— 10-й день после рождения, а у недоношенных несколько позже;
— ортостатическая альбуминурия, которая характерна для детей в возрасте 7—18 лет и появляется только в вертикальном положении тела;
— транзиторная (инсультная) альбуминурия, причиной которой могут быть различные заболевания органов пищеварения, тяжелая анемия, ожоги, травмы или физиологические факторы: тяжелая физическая нагрузка, переохлаждение, сильные эмоции, обильная, богатая белком пища и др.

Органическая (почечная) протеинурия наблюдается вследствие прохождения белка из крови через поврежденные участки эндотелия почечных клубочков при заболеваниях почек (гломерулонефрит, нефроз, нефросклероз, амилоидоз, нефропатия беременных), расстройствах почечной гемодинамики (почечная венная гипертензия, гипоксия), трофических и токсических (в том числе лекарственных) воздействиях на стенки капилляров клубочков.

Большинство качественных и количественных методов определения белка в моче основаны на его коагуляции в объеме мочи или на границе сред (мочи и кислоты).

Среди качественных методов определения бедка в моче наибольшее распространение получили унифицированная проба с сульфосалициловой кислотой и кольцевая проба Геллера.

Унифицированная проба с сульфасалициловой кислотой проводится следующим образом. В 2 пробирки наливают по 3 мл профильтрованной мочи. В одну из них прибавляют 6—8 капель 20 % раствора сульфасалициловой кислоты. На темном фоне сравнивают обе пробирки. Помутнение мочи в пробирке с сульфасалициловой кислотой указывает на наличие белка. Перед исследованием необходимо определить реакцию мочи, и если она щелочная, то подкислить 2—3 каплями 10 % раствора уксусной кислоты.

Проба Геллера основана на том, что при наличии белка в моче на границе азотной кислоты и мочи происходит его коагуляция и появляется белое кольцо. В пробирку наливают 1—2 мл 30 % раствора азотной кислоты и осторожно по стенке пробирки наслаивают точно такое же количество профильтрованной мочи. Появление белого кольца на границе двух жидкостей указывает на наличие белка в моче. Следует помнить, что иногда белое кольцо образуется при наличии большого количества уратов, но в отличие от белкового кольца оно появляется несколько выше границы между двумя жидкостями и растворяется при нагревании [Плетнева Н.Г., 1987].

Из количественных методов наиболее часто применяются:

1) унифицированный метод Брандберга—Робертса—Стольникова, в основу которого положена кольцевая проба Геллера;
2) фотоэлектроколориметрический метод количественного определения белка в моче по помутнению, образующемуся при добавлении сульфасалициловой кислоты;
3) биуретовый метод.

Выявление белка в моче упрощенным ускоренным методом проводят колориметрическим методом с помощью индикаторной бумаги, которую выпускают фирмы «Lachema» (Словакия), «Albuphan», «Ames» (Англия), «Albustix», «Boehringer» (Германия), «Comburtest» и др. Метод заключается в погружении в мочу специальной бумажной полоски, пропитанной тетрабромфеноловым синим и цитратным буфером, которая меняет свой цвет от желтого до синего в зависимости от содержания белка в моче. Ориентировочно концентрацию белка в исследуемой моче определяют с помощью стандартной шкалы. Для получения правильных результатов необходимо соблюдать следующие условия. рН мочи должна быть в пределах 3,0—3,5; при слишком щелочной моче (рН 6,5) будет получен ложноположительный результат, а при слишком кислой моче (рН 3,0) — ложноотрицательный.

Бумага должна находиться в контакте с исследуемой мочой не дольше, чем указано в инструкции, в противном случае тест даст ложноположительную реакцию. Последнюю также наблюдают и при содержании в моче большого количества слизи. Чувствительность различных видов и серий бумаги может быть различной, поэтому к количественной оценке белка в моче этим методом следует относиться осторожно. Определение его количества в суточной моче при помощи индикаторной бумаги невозможно [Плетнева Н.Г., 1987]

Существует несколько способов определения количества белка, выделившегося с мочой за сутки. Наиболее простым является метод Брандберга —Робертса—Стольникова.

Методика. 5-10 мл тщательно перемешанной суточной мочи наливают в пробирку и осторожно по стенкам ее добавляют 30 % раствор азотной кислоты. При наличии белка в моче в количестве 0,033 % (т.е. 33 мг на 1 л мочи) через 2-3 мин появляется тонкое, но четко видимое белое кольцо. При меньшей его концентрации проба отрицательная. При большем содержании белка в моче его количество определяют путем многократных разведений мочи дистиллированной водой до тех пор, пока не перестанет образовываться кольцо. В последней пробирке, в которой еще видно кольцо, концентрация белка будет составлять 0,033 %. Умножив 0,033 на степень разведения мочи, определяют содержание белка в 1 л неразведенной мочи в граммах. Затем рассчитывают содержание белка в суточной моче по формуле:

где К — количество белка в суточной моче (г); х — количество белка в 1 л мочи (г); V — количество мочи, выделенное за сутки (мл).

В норме в течение суток с мочой выделяется от 27 до 150 мг (в среднем 40—80 мг) белка.

Указанная проба позволяет определить в моче только мелкодисперсные белки (альбумины). Более точные количественные методы (колориметрический метод Кьельдаля и др.) довольно сложны и требуют специальной аппаратуры.

При почечной протеинурии с мочой выделяются не только альбумины, но и другие виды белка. Нормальная протеинограмма (по Зейцу и соавт., 1953) имеет следующее процентное содержание: альбуминов — 20 %, α₁-глобулинов — 12 %, α₂-глобулинов — 17 %, γ-глобулинов — 43 % и β-глобулинов — 8 %. Отношение альбуминов к глобулинам изменяется при различных заболеваниях почек, т.е. нарушается количественное соотношение между белковыми фракциями.

Наиболее распространенными методами фракционирования уропротеинов являются следующие: высаливание нейтральными солями, электрофоретическое фракционирование, иммунологические методы (реакция радиальной иммунодиффузии по Манчини, иммуноэлектрофоретический анализ, преципитационный иммуноэлектрофорез), хроматография, гель-фильтрация, а также ультрацентрифугирование.

В связи с внедрением методов фракционирования уропротеинов, основанных на изучении электрофоретической подвижности, вариабильности молекулярной массы, размеров и формы молекул уропротеинов, появилась возможность выделять характерные для того или иного заболевания типы протеинурии, изучать клиренсы индивидуальных плазменных белков. К настоящему времени в моче идентифицировано свыше 40 плазменных белков, В том числе в нормальной моче 31 плазменный белок [Berggard, 1970].

В последние годы появилось понятие селективности протеинурии. В 1955 г. Hardwicke и Squire сформулировали понятие «селективная» и «неселективная» протеинурия, определив, что фильтрация плазменных белков в мочу подчиняется определенной закономерности: чем больше молекулярная масса белка, экскретируемого в мочу, тем меньше его клиренс и тем ниже концентрация его в окончательной моче. Протеинурия, соответствующая этой закономерности, является селективной в отличие от неселективной, для которой характерным является извращение выведенной закономерности.

Обнаружение в моче белков с относительно большой молекулярной массой свидетельствует об отсутствии избирательности почечного фильтра и выраженном его поражении. В этих случаях говорят о низкой селективности протеинурии. Поэтому в настоящее время широкое распространение получило определение белковых фракций мочи с использованием методов электрофореза в крахмальном и полиакриламидном геле. По результатам этих методов исследования можно судить о селективности протеинурии.

По данным В.С.Махлиной (1975), наиболее оправданным является определение селективности протеинурии путем сравнения клиренсов 6—7 индивидуальных белков плазмы крови (альбумина, транеферрина, α₂ — макроглобулина, IgA, IgG, IgM) с использованием точных и специфичных количественных иммунологических методов реакции радиальной иммунодиффузии по Манчини, иммуноэлектрофоретического анализа и преципитального иммуноэлектрофореза. Степень селективности протеинурии определяют по индексу селективности, представляющего собой отношение сравниваемого и эталонного белков (альбумина).

Изучение клиренсов индивидуальных плазменных белков позволяет получить достоверные сведения о состоянии фильтрационных базальных мембран клубочков почки. Связь между характером экскретируемых в мочу белков и изменениями базальных мембран клубочков настолько выражена и постоянна, что по уропротеинограмме можно косвенно судить о патофизиологических изменениях в клубочках почек. В норме средний размер пор гломерулярной базальной мембраны составляет 2,9—4 А° НМ, которые могут пропускать белки, имеющие молекулярную массу до 10 4 (миоглобулин, кислый α₁ — гликопротеин, легкие цепи иммуноглобулинов, Fc и Fab — фрагменты IgG, альбумин и трансферрин).

При гломерулонефрите, нефротическом синдроме размеры пор в базальных мембранах клубочков увеличиваются, в связи с чем базальная мембрана становится проницаемой для белковых молекул большого размера и массы (церулоплазмин, гаптоглобин, IgG, IgA и др.). При крайней степени повреждения клубочков почек в моче появляются гигантские молекулы белков плазмы крови (α₂-макроглобулин, IgM и β₂-липопротеин).

Определяя белковый спектр мочи, можно сделать заключение о преимущественном поражении тех или иных участков нефрона. Для гломерулонефрита с преимущественным поражением гломерулярных базальных мембран характерно наличие в моче крупно- и среднемолекулярных белков. Для пиелонефрита с преимущественным поражением базальных мембран канальцев характерны отсутствие крупномолекулярных и наличие повышенных количеств средне- и низкомолекулярных белков.

Концентрацию этого белка в плазме крови и моче определяют радиоиммунологическим методом с помощью стандартного набора «Phade-bas β₂-mikroiest» (фирма «Pharmaсia», Швеция). В сыворотке крови здоровых людей содержится в среднем 1,7 мг/л (колебания от 0,6 до 3 мг/л), в моче — в среднем 81 мкг/л (максимально 250 мкг/л) β₂-микроглобулина. Превышение его в моче свыше 1000 мкг/л — явление патологическое. Содержание β₂-микроглобулина в крови увеличивается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением клубочковой фильтрации, в частности при остром и хроническом гломерулонефрите, поликистозе почек, нефросклерозе, диабетической нефропатии, острой почечной недостаточности.

Концентрация β₂-микроглобулина в моче повышается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением реабсорбционной функции канальцев, что приводит к увеличению экскреции его с мочой в 10—50 раз, в частности, при пиелонефрите, ХПН, гнойной интоксикации и др. Характерно, что при цистите в отличие от пиелонефрита не наблюдается увеличения концентрации β₂-микроглобулина в моче, что может быть использовано для дифференциальной диагностики этих заболеваний. Однако при интерпретации результатов исследования надо учитывать, что любое повышение температуры всегда сопровождается увеличением экскреции β₂-микроглобулина с мочой.

Средние молекулы (СМ), иначе называемые белковыми токсинами, представляют собой вещества с молекулярной массой 500—5000 дальтон. Физическая структура их неизвестна. В состав СМ входят по меньшей мере 30 пептидов: окситоцин, вазопрессин, ангиотензин, глюкагон, адренокортикотропный гормон (АКТГ) и др. Избыточное накопление СМ наблюдается при снижении функции почек и содержании в крови большого количества деформированных белков и их метаболитов. Они обладают разнообразным биологическим действием и нейротоксичны, вызывают вторичную иммунодепрессию, вторичную анемию, угнетают биосинтез белка и эритропоэз, тормозят активность многих ферментов, нарушают течение фаз воспалительного процесса.

Уровень СМ в крови и моче определяют скрининговым тестом, а также путем спектрофотометрии в ультрафиолетовой зоне по длине волны 254 и 280 мм на спектрофотометре ДИ-8Б, а также динамической спектрофотометрии с компьютерной обработкой в диапазоне волн 220—335 нм на том же спектрометре фирмы Beckman. За норму принимают содержание СМ в крови, равное 0,24 ± 0,02 усл. ед., а в моче — 0,312 ± 0,09 усл. ед.
Будучи нормальными продуктами жизнедеятельности организма, они удаляются из него в норме ночками путем гломерулярной фильтрации на 0,5 %; 5 % их утилизируется другим путем. Все фракции СМ подвергаются канальцевой реабсорбции.

Кроме белков плазмы крови, в моче могут быть неплазменные (тканевые) протеины. По данным Buxbaum и Franklin (1970), неплазменные белки составляют приблизительно 2/3 всех биоколлоидов мочи и значительную часть уропротеинов при патологической протеинурии. Тканевые белки попадают в мочу непосредственно из почек или органов, анатомически связанных с мочевыми путями, или попадают из других органов и тканей в кровь, а из нее через базальные мембраны клубочков почки — в мочу. В последнем случае экскреция в мочу тканевых протеинов происходит аналогично выведению плазменных белков различной молекулярной массы. Состав неплазменных уропротеинов чрезвычайно разнообразен. Среди них гликопротеины, гормоны, антигены, ферменты (энзимы).

Тканевые протеины в моче выявляют с помощью обычных методов белковой химии (ультрацентрифугирование, гель-хроматография, различные варианты электрофореза), специфических реакций на ферменты и гормоны и иммунологических методов. Последние позволяют также определить концентрацию неплазменного уропротеина в моче и в ряде случаев определить тканевые структуры, ставшие источником его появления. Основным методом выявления в моче неплазменного белка является иммунодиффузионный анализ с антисывороткой, полученной иммунизацией экспериментальных животных мочой человека и истощенной (адсорбированной) в последующем белками плазмы крови.

При патологическом процессе наблюдаются глубокие нарушения жизнедеятельности клеток, сопровождающиеся выходом внутриклеточных ферментов в жидкостные среды организма. Энзимодиагностика базируется на определении ряда ферментов, выделившихся из клеток пораженных органов и не свойственных сыворотке крови.
Исследования нефрона человека и животных показали, что в отдельных его частях имеется высокая ферментативная дифференциация, тесно связанная с функциями, которые выполняет каждый отдел. В клубочках почки содержится относительно небольшое количество различных энзимов.

Клетки почечных канальцев, особенно проксимальных отделов, содержат максимальное количество энзимов. Высокая их активность наблюдается в петле Генле, прямых канальцах и собирательных трубочках. Изменения активности отдельных энзимов при различных заболеваниях почек зависят от характера, остроты и локализации процесса. Они наблюдаются до появления морфологических изменений в почках. Поскольку содержание различных ферментов четко локализовано в нефроне, определение того или иного фермента в моче может способствовать топической диагностике патологического процесса в почках (клубочки, канальцы, корковый или мозговой слой), дифференциальной диагностике почечных заболеваний и определению динамики (затухание и обострение) процесса в почечной паренхиме.

Дли дифференциальной диагностики заболеваний органов мочеполовой системы применяют определение активности в крови и моче следующих ферментов: лактатдегидрогеназы (ЛДГ), лейцинаминопептидазы (ЛАП), кислой фосфатазы (КФ), щелочной фосфатазы (ЩФ), β-глюкуронидазы, глютамино-щавелевоуксусной трансаминазы (ГЩТ), альдолазы, трансамидиназы и др. Активность ферментов в сыворотке крови и в моче определяют с помощью биохимических, спектрофотометрических, хроматографических, флуориметрических и хемилюминесцентных методов.

Энзимурия при заболеваниях почек более выражена и закономерна, чем энзимемия. Она особенно сильно выражена в острой стадии заболевания (острый пиелонефрит, травма, распад опухоли, инфаркт почки и т.д.). При этих заболеваниях обнаруживается высокая активность трансамидиназы, ЛДГ, ЩФ и КФ, гиалуронидазы, ЛАП, а также таких неспецифических энзимов, как ГЩТ, каталаза [Полянцева Л.Р., 1972].

Селективная локализация ферментов в нефроне при обнаружении ЛАП и ЩФ в моче позволяет с уверенностью говорить об острых и хронических заболеваниях почек (острая почечная недостаточность, некроз почечных канальцев, хронический гломерулонефрит) [Шеметов В.Д., 1968]. По данным А.А.Карелина и Л.Р.Полянцевой (1965), трансамидиназа содержится лишь в двух органах — почке и поджелудочной железе. Она является митохондриальным ферментом почек и в норме в крови и моче отсутствует. При различных заболеваниях почек трансамидиназа появляется в крови и в моче, а при поражении поджелудочной железы — только в крови.

Дифференциальным тестом в диагностике гломерулонефрита и пиелонефрита Krotkiewski (1963) считает активность ЩФ в моче, повышение которой более характерно для пиелонефрита и диабетического гломерулосклероза, чем для острого и хронического нефрита. Нарастающая в динамике амилаземия при одновременном снижении амилазурии может указывать на нефросклероз и сморщивание почки, ЛАП имеет наибольшее значение при патологических изменениях в клубочках и извитых канальцах почки, поскольку содержание ее в этих отделах нефрона более высокое [Шепотиновский В.П. и др., 1980]. Для диагностики волчаночного нефрита рекомендуется определение β-глюкуронидазы и КФ [Приваленко М.Н. и др., 1974].

При оценке роли энзимурии в диагностике заболеваний почек следует учитывать следующие положения. Энзимы, будучи по своей природе белками, при малой молекулярной массе могут проходить через неповрежденные клубочки, определяя так называемую физиологическую энзимурию. Среди этих энзимов постоянно определяются в моче α-амилаза (относительная молекулярная масса 45 ООО) и уропепсин (относительная молекулярная масса 38000).

Наряду с низкомолекулярными энзимами в моче здоровых лиц могут быть обнаружены в небольшой концентрации и другие энзимы: ЛДГ, аспартат- и аланинаминотрансферазы, ЩФ и КФ, мальтаза, альдолаза, липаза, различные протеазы и пептидазы, сульфатаза, каталаза, рибонуклеаза, пероксидаза [King, Воусе, 1963].

Высокомолекулярные энзимы с относительной молекулярной массой больше 70000-100000, по мнению Richterich (1958) и Hess (1962), могут проникать в мочу лишь при нарушении проницаемости клубочкового фильтра. Нормальное содержание ферментов в моче не позволяет исключить патологический процесс в почке при окклюзии мочеточника. При эпзимурии возможен выход энзимов не только из самих почек, но и из других паренхиматозных органов, клеток слизистых оболочек мочевых путей, предстательной железы, а также форменных элементов мочи при гематурии или лейкоцитурии.

Большинство энзимов неспецифично по отношению к почке, поэтому откуда происходят энзимы, обнаруженные в моче здоровых и больных, установить трудно. Однако степень энзимурии даже дли неспецифичных энзимов при поражении почек бывает выше нормы или той, которая наблюдается при заболеваниях других органов. Более ценную информацию может дать комплексное исследование в динамике ряда ферментов, особенно органоспецифичных, таких как трансаминаза.

В решении вопроса о почечном происхождении энзима в моче помогает исследование изоэнзимов с выявлением фракций, типичных для изучаемого органа. Изоэнзимы — это энзимы, изогенные по действию (катализируют одну и ту же реакцию), но гетерогенные по химической структуре и другим свойствам. Каждая ткань имеет характерный для нее изоэнзимный спектр. Ценными методами разделения изоэнзимов являются электрофорез в крахмальном и полиакриламидном геле, а также ионообменная хроматография.

При миеломной болезни и макроглобулинемии Вальденстрема в моче обнаруживают белок Бенс-Джонса. Метод обнаружения названного белка в моче основан на реакции термопреципитации. Применявшиеся ранее методы, с помощью которых оценивают растворение этого белка при температуре 100 °С и повторное осаждение при последующем охлаждении, ненадежны, так как не все белковые тела Бенс-Джонса обладают соответствующими свойствами.

Более достоверно выявление этого парапротеина путем осаждения его при температуре 40 -60 °С. Однако и в этих условиях осаждения может не произойти в слишком кислой (рН 6,5) моче, при низкой ОПМ и низкой концентрации белка Бенс-Джонса. Наиболее благоприятные условия для его осаждения обеспечивает методика, предложенная Patnem: 4 мл профильтрованной мочи смешивают с 1 мл 2 М ацетатного буфера рН 4,9 и согревают 15 мин на водяной бане при температуре 56 °С. При наличии белка Бенс-Джонса в течение первых 2 мин появляется выраженный осадок.

При концентрации белка Бенс-Джонса меньше 3 г/л проба может быть отрицательной, но на практике это встречается крайне редко, поскольку его концентрация в моче, как правило, более значительна. На пробы с кипячением нельзя вполне полагаться. С полной достоверностью он может быть обнаружен в моче иммуно-электрофоретическим методом с использованием специфических сывороток против тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов.

источник