Меню Рубрики

Что такое естественная контаминация мочи

Анализ мочи на бакпосев (бактериологическое исследование) используется для обнаружения в моче бактерий, подбора антибактериальных препаратов и контроля лечения инфекционно-воспалительных заболеваний органов малого таза.

Для постановки диагноза обычно используются данные не только бакпосева мочи, но и других исследований, а также учитываются клинические признаки патологии.

Инфекционно-воспалительным процессам в мочевыводящих путях свойственно рецидивирующее течение с высокой вероятностью развития осложнений. Чаще всего поражаются мочеиспускательный канал и мочевой пузырь, нередко инфекция распространяется на мочеточники и почки. Исчезновение клинических признаков острой бактериальной инфекции в мочевыводящих путях нередко говорит не о выздоровлении, а о хронизации процесса, т. е. переходе его в вялотекущую хроническую форму. Воспаление и бактериурия (наличие бактерий в моче) при этом сохраняется, что помогает выявить бакпосев мочи.

В норме в мочевыводящих путях микроорганизмы отсутствуют, исключение составляет только дистальный отдел уретры, который заселен микрофлорой с кожных покровов промежности (у женщин также из вульвы).

95% всех воспалительных заболеваний органов малого таза вызвано микроорганизмами. Возбудителями инфекции мочевыводящих путей обычно являются кишечная палочка (Escherichia coli), клебсиелла пневмонии (Klebsiella pneumoniae), синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa), цитробактер (Citrobacter), протей мирабилис (Proteus mirabilis), серрация (Serratia). Кроме того, инфекционными агентами становятся стафилококки (S. epidermidis, S. aureus, S. saprophyticus), стрептококки (S. pyogenes), микоплазма (Mycoplasma) и пр. При некомпенсированном сахарном диабете в мочевых путях часто обнаруживаются микроскопические грибы рода Candida.

Инфекциям мочевыводящих путей способствуют патологии, при которых нарушается отток мочи, а также системные заболевания. У детей, лиц преклонного возраста и ослабленных пациентов инфекционный процесс нередко протекает в латентной форме или имеет неспецифические проявления (нарушение пищеварения, потеря веса и пр.).

Для сбора мочи на бакпосев не следует пользоваться стеклянными банками, бытовыми пластиковыми емкостями, нельзя использовать нестерильные одноразовые контейнеры.

Для определения возбудителя проводится бактериальный посев мочи. Направление на исследование обычно выдает терапевт, уролог, акушер-гинеколог. При необходимости врач подробно объяснит, что такое анализ мочи на бакпосев, что показывает данное исследование, как собирать материал, сколько делается тест. Расшифровывать полученный результат должен только специалист.

В отличие от клинического анализа мочи, бактериологический анализ не проводится в профилактических целях, а назначается при наличии признаков инфекции мочевыводящих путей. Поводом к назначению бактериального посева мочи может быть обнаружение бактерий или грибов при проведении общего анализа мочи. Кроме того, данное исследование обычно назначается пациентам с рецидивами цистита, паранефритом, пиелонефритом, хроническим уретритом, сахарным диабетом, а также при мониторинге состояния ВИЧ-инфицированных пациентов и пр. Анализ мочи на бакпосев относится к обязательным исследованиям, которые проводятся беременным, в 3–10% случаев определяется бессимптомная бактериурия.

Мочу для бактериологического анализа сдают до начала или через 7–14 дней после завершения антибактериальной терапии (контрольное исследование), если лечащим врачом не указаны другие условия.

Существует ряд правил подготовки к сдаче мочи для бактериологического исследования, соблюдение которых позволяет получить максимально достоверный результат.

За неделю до анализа из рациона рекомендуется исключить соленую, острую и жирную пищу, а также спиртные напитки.

При острых инфекционно-воспалительных процессах обычно выделяется монокультура на фоне бактериурии высокой степени, а при хронических – ассоциации микроорганизмов на фоне бактериурии низкой степени.

Женщинам не следует сдавать мочу на бакпосев во время менструации и еще двое суток после ее окончания, так как менструальные выделения, которые с высокой вероятностью могут попасть в собранный материал, повлияют на результат исследования. Также за два дня перед исследованием не рекомендуется использовать противозачаточные или лекарственные препараты в форме вагинальных суппозиториев. Перед взятием материала на анализ нельзя делать спринцевание.

Перед сбором мочи проводят тщательный туалет наружных половых органов без использования антибактериального мыла. Мужчинам для предотвращения контаминации мочи перед сбором материала рекомендуется тщательно промыть половой член и складку крайней плоти. Для исследования необходимо собрать среднюю порцию первой утренней мочи (то есть начальная и последняя порция спускаются в унитаз). Моча собирается в специальный стерильный одноразовый контейнер, который выдается в лаборатории перед проведением анализа или приобретается в аптеке. В некоторых лабораториях можно приобрести транспортную пробирку с консервантом (обычно с борной кислотой). Набирая мочу, не следует прикасаться к внутренней стенке контейнера.

Материал для бактериологического исследования у грудных детей собирают при помощи мочеприемника, который можно приобрести в аптеке, а потом переливают в стерильный контейнер.

Для сбора мочи на бакпосев не следует пользоваться стеклянными банками, бытовыми пластиковыми емкостями, так как обеспечить стерильность подобной тары в домашних условиях, как правило, не представляется возможным. Кроме того, нельзя использовать нестерильные одноразовые контейнеры.

Доставить в лабораторию материал необходимо не позднее двух часов после сбора.

В норме в мочевыводящих путях микроорганизмы отсутствуют, исключение составляет только дистальный отдел уретры, который заселен микрофлорой с кожных покровов промежности.

Основной задачей анализа является выявление в моче микроорганизмов и определение их этиологической роли. Во внимание принимается вид инфекционного агента, степень бактериурии, обнаружение микроорганизмов в повторных исследованиях и т. д.

Бактериальный посев мочи производится на питательные среды при помощи бактериологической петли, тампона или шпателя. В норме рост микроорганизмов отсутствует, признаки микробного роста говорят о наличии бактериальной инфекции в моче, т. е. бактериурии.

Степень бактериурии позволяет провести дифференциальную диагностику инфекционного процесса от контаминации урины нормальной микрофлорой. Так, бактериурия до 10 3 микробных клеток в 1 мл мочи обычно указывает на отсутствие инфекционно-воспалительного процесса и, как правило, определяется в случае контаминации урины, при бактериурии 10 4 результат является сомнительным и появляется необходимость в повторном исследовании, 10 5 и более – инфекционно-воспалительный процесс.

С целью контроля проводимой терапии оценивается изменение степени бактериурии, ее уменьшение свидетельствует об эффективности применяемых лекарственных средств. Однако при расшифровке анализа мочи на бакпосев следует учитывать, что в ряде случаев (при проведении антибактериальной терапии, низких значениях pH и/или удельного веса мочи, нарушенном пассаже мочи и пр.) низкая степень бактериурии может определяться и при наличии патологического процесса. По этой причине немаловажное значение имеет также идентификация обнаруженных в моче инфекционных агентов (повторное выделение бактерий одного вида, как правило, указывает на наличие инфекции).

В отличие от клинического анализа мочи, бактериологический анализ не проводится в профилактических целях, а назначается при наличии признаков инфекции мочевыводящих путей.

Диагностическое значение имеет выявление в моче монокультуры или ассоциации микроорганизмов. При острых инфекционно-воспалительных процессах обычно выделяется монокультура на фоне бактериурии высокой степени, а при хронических – ассоциации микроорганизмов на фоне бактериурии низкой степени.

Помимо выявления инфекционного агента при проведении анализа мочи на бакпосев может определяться чувствительность к антибиотикам выделенных штаммов микроорганизмов.

Для постановки диагноза обычно используются данные не только бакпосева мочи, но и других исследований, а также учитываются клинические признаки патологии.

Видео с YouTube по теме статьи:

источник

Исследование мочи — определение лабораторными методами физико-химических свойств мочи,ее составных частей (органических и неорганических),клеточных элементов и микроорганизмов мочеполовой системы,выделяющихся вместе с мочой.
зависимости от задач исследование мочи можно разделить на несколько видов (анализов).

Определение свойств мочи,составных
клеточных элементов,
органических и неорганических соединений,ферментов.

Определение лейкоцитарной реакции при воспалительных заболеваниях мочеполовой системы: уретрита,цистита,
простатита и болезней почек (пиелонефрит,нефриты)
Определение белка,сахара,желчных пигментов,кетоацетонов и пр. при заболеваниях внутренних органов,
эндокринологических и инфекционных заболеваниях.
Определение видов почечного эпителия и цилиндров при заболеваниях почек
Определение микрогематурии в моче при заболеваниях и травмах мочеполовой системы и при мочекаменной болезни

Исследование мочи на гормоны

Применяется в основном для диагностики ранней беременности и некоторых эндокринологических заболеваниях

Определение лейкоцитов в различных порциях мочи

Топическая диагностика заболеваний мочеполовой системы

Исследование мочи на патогенную микрофлору

Бактериологическое исследование мочи и ПЦР

Грамотрицательная и грамположительная патогенная и условно-патогенная микрофлора
Ch.trachomatis (у мужчин)
Neisseria gonorrhoeae (у мужчин)
T.vaginalis
Патогенные грибы

В большинстве случаев для проведения исследования используется срединная порция (полученная во время мочеиспускания) утренней мочи.

отсутствуют (не более 50 мг/сут)

отсутствуют (не более 6 мг/сут)

отсутствуют или незначительное количество

при кислой реакции-кристаллы мочевой кислоты, ураты;
при щелочной реакции- аморфные фосфаты, мочекислый аммоний, трипельфосфаты;
оксалаты- при любой реакции мочи.
все соли определяются в незначительном количестве.

Исследование мочевого осадка по методу Ничепоренко *

лейкоциты- до 4000, эритроциты- до 1000 в 1 мл; цилиндры- 0-1 на 4 камеры подсчета

* Используется моча,собранная за определенный интервал времени (чаще за сутки)

Стаканные пробы мочи помогают уточнить локализацию воспалительного процесса в мочеполовых органах.
Самая простая,но достаточно объективная проба — двухстаканная,которую можно провести самостоятельно.Необходимо помочиться в 2 стеклянные банки не прерывая струи мочи,далее оценить полученные пробы.При воспалительном процессе моча мутная,с хлопьями,иногда с тонкими «волосками».

норма или нет выраженного воспалительного процесса

задний уретрит или простатит

Существуют и более сложные пробы — 3,5 и даже 7 стаканные,которые выполняются при участии врача

Современные мировые и национальные руководства не рекомендуют применять стаканные пробы мочи для диагностики уретритов ввиду низкой информативности и отсутствия практической ценности для выработки тактики лечения

Наибольшей информативностью обладает трехстаканный тест Meares и Stamey (1968 ),
состоящий в получении первой (10 мл) и второй (средней) порций мочи для бактериологического исследования, массажа простаты с получением секрета для микроскопии и посева, а также третьей порции мочи (после взятия секрета) для посева.

Форма хронического
простатита

Бактериальный (острый и хронический)

Воспалительный синдром
хронической тазовой боли

Невоспалительный синдром
хронической тазовой боли

В англоязычной литературе приняты следующие обозначения

EPS = expressed prostatic secretions specimen — секрет простаты
VB3 = voided bladder 3 specimen — третья порция мочи после массажа простаты

Степень бактериурии позволяет дифференцировать инфекционный процесс в мочевых путях от контаминации мочи нормальной микрофлорой. С этой целью используют следующие критерии:

  1. Степень бактериурии, не превышающая 10 х 3микробных клеток в 1 мл мочи, свидетельствует об отсутствии воспалительного процесса и обычно является результатом контаминации мочи.
  2. Степень бактериурии, равная 10 х 4 микробных клеток в 1 мл мочи, расценивается как сомнительный результат. Исследование следует повторить.
  3. Степень бактериурии, равная и выше 10 х 5 микробных клеток в 1 мл мочи, указывает на наличие воспалительного процесса.
  • Метод секторных посевов
  • Нитритный тест.Нитриты, являющиеся продуктами метаболизма представителей семейства Enterobacteriaceae, могут быть обнаружены в моче с помощью реактива Грисса. Появление красного окрашивания свидетельствует о присутствии в 1 мл мочи не менее 10 Х 5 микробных клеток.
  • Тест ТТХ Трифенилтетразолий хлористый (ТТХ) под действием продуктов жизнедеятельности микроорганизмов переходит из бесцветного в красный нерастворимый в воде трифенилформазан. Интенсивность окраски находится в прямой зависимости от степени бактериурии.

Исследование мочи методом полимеразной цепной реакции может применятся для диагностики половых инфекций,но круг ее применения ограничен.В основном ПЦР мочи применяют для диагностики хламидийных,гонококковых уретритов и трихомониаза у мужчин.У женщин применение исследования мочи методом ПЦР не рекомендовано (в редких случаях применяют у малолетних девочек).

  • Общий анализ мочи web
  • Лабораторные методы исследования мочи web

посещений 110914 обновлено 11.05.11

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ.ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ С ВРАЧОМ.

источник

Что такое клинические исследования и зачем они нужны? Это исследования, в которых принимают участие люди (добровольцы) и в ходе которых учёные выясняют, является ли новый препарат, способ лечения или медицинский прибор более эффективным и безопасным для здоровья человека, чем уже существующие.

Главная цель клинического исследования — найти лучший способ профилактики, диагностики и лечения того или иного заболевания. Проводить клинические исследования необходимо, чтобы развивать медицину, повышать качество жизни людей и чтобы новое лечение стало доступным для каждого человека.

У каждого исследования бывает четыре этапа (фазы):

I фаза — исследователи впервые тестируют препарат или метод лечения с участием небольшой группы людей (20—80 человек). Цель этого этапа — узнать, насколько препарат или способ лечения безопасен, и выявить побочные эффекты. На этом этапе могут участвуют как здоровые люди, так и люди с подходящим заболеванием. Чтобы приступить к I фазе клинического исследования, учёные несколько лет проводили сотни других тестов, в том числе на безопасность, с участием лабораторных животных, чей обмен веществ максимально приближен к человеческому;

II фаза — исследователи назначают препарат или метод лечения большей группе людей (100—300 человек), чтобы определить его эффективность и продолжать изучать безопасность. На этом этапе участвуют люди с подходящим заболеванием;

III фаза — исследователи предоставляют препарат или метод лечения значительным группам людей (1000—3000 человек), чтобы подтвердить его эффективность, сравнить с золотым стандартом (или плацебо) и собрать дополнительную информацию, которая позволит его безопасно использовать. Иногда на этом этапе выявляют другие, редко возникающие побочные эффекты. Здесь также участвуют люди с подходящим заболеванием. Если III фаза проходит успешно, препарат регистрируют в Минздраве и врачи получают возможность назначать его;

IV фаза — исследователи продолжают отслеживать информацию о безопасности, эффективности, побочных эффектах и оптимальном использовании препарата после того, как его зарегистрировали и он стал доступен всем пациентам.

Считается, что наиболее точные результаты дает метод исследования, когда ни врач, ни участник не знают, какой препарат — новый или существующий — принимает пациент. Такое исследование называют «двойным слепым». Так делают, чтобы врачи интуитивно не влияли на распределение пациентов. Если о препарате не знает только участник, исследование называется «простым слепым».

Чтобы провести клиническое исследование (особенно это касается «слепого» исследования), врачи могут использовать такой приём, как рандомизация — случайное распределение участников исследования по группам (новый препарат и существующий или плацебо). Такой метод необходим, что минимизировать субъективность при распределении пациентов. Поэтому обычно эту процедуру проводят с помощью специальной компьютерной программы.

  • бесплатный доступ к новым методам лечения прежде, чем они начнут широко применяться;
  • качественный уход, который, как правило, значительно превосходит тот, что доступен в рутинной практике;
  • участие в развитии медицины и поиске новых эффективных методов лечения, что может оказаться полезным не только для вас, но и для других пациентов, среди которых могут оказаться члены семьи;
  • иногда врачи продолжают наблюдать и оказывать помощь и после окончания исследования.
  • новый препарат или метод лечения не всегда лучше, чем уже существующий;
  • даже если новый препарат или метод лечения эффективен для других участников, он может не подойти лично вам;
  • новый препарат или метод лечения может иметь неожиданные побочные эффекты.

Главные отличия клинических исследований от некоторых других научных методов: добровольность и безопасность. Люди самостоятельно (в отличие от кроликов) решают вопрос об участии. Каждый потенциальный участник узнаёт о процессе клинического исследования во всех подробностях из информационного листка — документа, который описывает задачи, методологию, процедуры и другие детали исследования. Более того, в любой момент можно отказаться от участия в исследовании, вне зависимости от причин.

Обычно участники клинических исследований защищены лучше, чем обычные пациенты. Побочные эффекты могут проявиться и во время исследования, и во время стандартного лечения. Но в первом случае человек получает дополнительную страховку и, как правило, более качественные процедуры, чем в обычной практике.

Клинические исследования — это далеко не первые тестирования нового препарата или метода лечения. Перед ними идёт этап серьёзных доклинических, лабораторных испытаний. Средства, которые успешно его прошли, то есть показали высокую эффективность и безопасность, идут дальше — на проверку к людям. Но и это не всё.

Сначала компания должна пройти этическую экспертизу и получить разрешение Минздрава РФ на проведение клинических исследований. Комитет по этике — куда входят независимые эксперты — проверяет, соответствует ли протокол исследования этическим нормам, выясняет, достаточно ли защищены участники исследования, оценивает квалификацию врачей, которые будут его проводить. Во время самого исследования состояние здоровья пациентов тщательно контролируют врачи, и если оно ухудшится, человек прекратит своё участие, и ему окажут медицинскую помощь. Несмотря на важность исследований для развития медицины и поиска эффективных средств для лечения заболеваний, для врачей и организаторов состояние и безопасность пациентов — самое важное.

Потому что проверить его эффективность и безопасность по-другому, увы, нельзя. Моделирование и исследования на животных не дают полную информацию: например, препарат может влиять на животное и человека по-разному. Все использующиеся научные методы, доклинические испытания и клинические исследования направлены на то, чтобы выявить самый эффективный и самый безопасный препарат или метод. И почти все лекарства, которыми люди пользуются, особенно в течение последних 20 лет, прошли точно такие же клинические исследования.

Если человек страдает серьёзным, например, онкологическим, заболеванием, он может попасть в группу плацебо только если на момент исследования нет других, уже доказавших свою эффективность препаратов или методов лечения. При этом нет уверенности в том, что новый препарат окажется лучше и безопаснее плацебо.

Согласно Хельсинской декларации, организаторы исследований должны предпринять максимум усилий, чтобы избежать использования плацебо. Несмотря на то что сравнение нового препарата с плацебо считается одним из самых действенных и самых быстрых способов доказать эффективность первого, учёные прибегают к плацебо только в двух случаях, когда: нет другого стандартного препарата или метода лечения с уже доказанной эффективностью; есть научно обоснованные причины применения плацебо. При этом здоровье человека в обеих ситуациях не должно подвергаться риску. И перед стартом клинического исследования каждого участника проинформируют об использовании плацебо.

Обычно оплачивают участие в I фазе исследований — и только здоровым людям. Очевидно, что они не заинтересованы в новом препарате с точки зрения улучшения своего здоровья, поэтому деньги становятся для них неплохой мотивацией. Участие во II и III фазах клинического исследования не оплачивают — так делают, чтобы в этом случае деньги как раз не были мотивацией, чтобы человек смог трезво оценить всю возможную пользу и риски, связанные с участием в клиническом исследовании. Но иногда организаторы клинических исследований покрывают расходы на дорогу.

Если вы решили принять участие в исследовании, обсудите это со своим лечащим врачом. Он может рассказать, как правильно выбрать исследование и на что обратить внимание, или даже подскажет конкретное исследование.

Клинические исследования, одобренные на проведение, можно найти в реестре Минздрава РФ и на международном информационном ресурсе www.clinicaltrials.gov.

Обращайте внимание на международные многоцентровые исследования — это исследования, в ходе которых препарат тестируют не только в России, но и в других странах. Они проводятся в соответствии с международными стандартами и единым для всех протоколом.

После того как вы нашли подходящее клиническое исследование и связались с его организатором, прочитайте информационный листок и не стесняйтесь задавать вопросы. Например, вы можете спросить, какая цель у исследования, кто является спонсором исследования, какие лекарства или приборы будут задействованы, являются ли какие-либо процедуры болезненными, какие есть возможные риски и побочные эффекты, как это испытание повлияет на вашу повседневную жизнь, как долго будет длиться исследование, кто будет следить за вашим состоянием. По ходу общения вы поймёте, сможете ли довериться этим людям.

Если остались вопросы — спрашивайте в комментариях.

источник

Анализ мочи на бакпосев (бактериологический анализ мочи) – лабораторное исследование, в ходе которого выявляются и определяются бактерии, находящиеся в моче. Наличие бактерий в моче называется бактериурией. В норме у здорового человека моча стерильная, в ней нет никаких микроорганизмов. Бактериурия свидетельствует об инфицировании органов мочевыделительной системы, что может вызвать такие заболевания, как пиелонефрит, уретрит, цистит.

Бактериурия может сопровождаться следующими симптомами: боль внизу живота, болезненное мочеиспускание, появление неприятного запаха мочи, повышение температуры, помутнение или кровь в моче. Бывают случаи бессимптомной бактериурии. Тогда инфекция обнаруживается случайно, например, при сдаче обязательных анализов во время беременности.

Анализ мочи на бактериологический посев сдаётся в следующих случаях:

  • для определения инфекции, вызвавшей воспаление мочевой системы;
  • чтобы проконтролировать эффективность проведенного лечения инфекции мочевой системы;
  • в случае рецидива воспалительного заболевания органов мочевой системы;
  • при нетипичной картине заболевания для постановки точного диагноза;
  • при сахарном диабете, беременности, иммунодефиците;
  • для выявления резистентной (устойчивой к антибактериальной терапии) флоры.

Перед сбором мочи на анализ необходимо провести тщательный туалет наружных половых органов, чтобы не получить ложноположительный результат.

Для анализа мочи на бак посев сдаётся средняя порция утренней мочи. Чтобы собрать среднюю порцию мочи, следует сначала помочиться в унитаз, а потом в стерильный контейнер. Стерильный контейнер для мочи можно приобрести в аптеке. Если вас направили сдать анализ в частную лабораторию, то стерильный контейнер вам выдадут в регистратуре. Для анализа достаточно исследуемого материала в объёме 10 мл. Собранную в контейнер мочу надо доставить в лабораторию в течение двух часов. Если нет такой возможности, то контейнер помещают в холодильную камеру. Собранный биоматериал может храниться в холодильной камере при температуре от +4 до +8 °С не более 6 часов.

Если вы принимали антибиотики или мочегонные препараты в течение последних двух недель, обязательно сообщите об этом врачу, так как в этом случае можно получить ложноотрицательный результат анализа.

Анализ мочи на бак посев занимает до 10 дней. В лаборатории мочу помещают в питательную среду и на сутки ставят в инкубатор. Затем полученные бактерии высеивают в чаши Петри и снова выращивают в инкубаторе в течение суток. Выросшие колонии бактерий разделяют и вновь помещают в инкубатор. Потом колонии бактерий идентифицируют по свойствам и внешнему виду. Далее проводится тест на чувствительность бактерий к антибиотикам. Все результаты, полученные в ходе анализа мочи на бак посев, сводят в единую таблицу.

Результатом анализа мочи на посев будет количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл мочи. Если количество микроорганизмов 3 КОЕ/мл, то, возможно, в посев попали микробы с половых органов (контаминация), и тогда анализ считается отрицательным. При обнаружении бактерий в количестве 10 3 –10 4 КОЕ/мл пациента отправляют на повторную сдачу анализа, так как такой результат считается сомнительным. Когда значение равно или больше 10 5 КОЕ/мл – результат анализа положительный, выявленные бактерии являются причиной воспалительного процесса.

В случае положительного результата анализа назначается лечение антибактериальными препаратами. Предварительно проводится анализ на устойчивость выделенных бактерий к антибиотикам для назначения эффективного лечения.

источник

Анализ мочи на посев имеет большое значение в эффективной диагностике заболеваний почек и мочевыводительной системы. Мочевыделительная система представляет собой, на первый взгляд, довольно простой процесс: в почках образуется моча (это вид экскрементов, продукт жизнедеятельности животных и человека), которая затем поступает в мочевой пузырь и из него через мочеиспускательный канал выводится из организма. Этот процесс настолько обыденный для человека, что последний до определенного момента не придает ему значения. Значение возрастает только при сбое этого процесса (при заболевании почек), и тогда человек обращается ко всевозможным медицинским исследованиям.

ОАМ (или еще его называют клинический анализ мочи) — это лабораторное исследование, которое позволяет оценить физические и химические характеристики мочи и микроскопию осадка. К физическим характеристикам относятся количество мочи, ее цвет, прозрачность, реакция (pH), удельный вес (относительная плотность). К химическим характеристикам относятся белок, глюкоза, кетоновые тела, желчные пигменты. Ну и микроскопия осадка — это количество гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, клеток эпителия и цилиндры. Диагнозы после проведения данного исследования могут быть разнообразными, например, лейкоцитарная эстераза. Если тест положительный, то это означает наличие лейкоцитов в данном виде экскрементов. В противном случае лейкоцитарная эстераза ставит инфекцию в моче под сомнение и говорит о необходимости проведения других видов исследования.

Данный анализ является одним из самых применяемых (начинают выявлять то или иное заболевание чаще всего именно с него), который помогает обнаружить отклонения в работе как мочевыводительной системы, так и почек.

Анализ мочи по Нечипоренко (идея данного исследования принадлежит советскому врачу А.З. Нечипоренко) — это лабораторное исследование, которое заключается в определении содержания в 1 мл мочи лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров. Данный вид исследования получил широкое распространение благодаря относительной простоте и широкой информативности. Целью данного исследования является выявление скрытого воспалительного процесса в мочевыводительной системе или дисфункции почек, и, как правило, проводят его при выявлении отклонений от нормы показателей в ОАМ. Нормальными пределами считаются следующие пропорции:

  1. Лейкоциты — до 2000 (у мужчин), до 4000 (у женщин).
  2. Эритроциты — до 1000.
  3. Цилиндры — до 20.

Посев мочи — это лабораторное исследование, которое позволяет выявить наличие микроорганизмов в моче. Основной задачей анализа (посев мочи на стерильность) является доказательство этиологической (причинной) роли микроорганизмов в развитии заболевания (их вид, степень бактериурии (наличие бактерии в моче), а также периодичность выделения бактерий). У здорового человека этот вид является стерильным, т. е. в ней отсутствуют какие-либо бактерии, в противном случае это свидетельствует о наличии инфекции в мочевыделительной системе. Посев мочи на флору назначают после наличия отклонений в ОАМ и анализе мочи по Нечипоренко.

Показания для направления на сдачу анализа на бактериологический посев мочи следующие:

  1. Болезненность при мочеиспускании в области лобка, а также рези при мочеиспускании.
  2. Боли в поясничном отделе.
  3. Нарушение мочеиспускания.
  4. Изменения в ОАМ.
  5. Контроль эффективности лечения.
  6. Определение чувствительности к антибиотикам микроорганизмов, которые паразитируют в органах мочевыделения.

Данные симптомы возникают у людей, подверженных следующим заболеваниям: острый и хронический цистит, уретрит, пиелонефрит, а также сахарный диабет и иммунодефицит.

Результат исследования указывается в наличии или отсутствии роста бактерии, степени мочи на бактериурию, выраженной в КОЕ/мл, наименовании возбудителя, чувствительности к антимикробным препаратам (определяется при бактериурии в титре 10*4 кое/мл). Итак, при анализе мочи на бак посев концентрация (количество) микроорганизмов в одной единице объема биоматериала устанавливается на колониеобразующих единицах (КОЕ).

КОЕ — это одна живая микробная клетка (или группа клеток), которая вызывает рост видимой колонии микробов. Если выявленное количество бактерий в моче до 1000 КОЕ/мл, то это означает, что бактерии туда попали случайным образом, например, с наружных половых органов, что лечения не требует.

Но если количество микробов равно или превышает 100 000 КОЕ/мл, то в этом случае ни о каких случайно попавших бактериях и речи быть не может: это инфекция, и за лечением необходимо обратиться к специалисту.

При промежуточном же результате 10-1000 КОЕ/мл анализ считается сомнительным, и его необходимо пересдать. Но, несмотря ни на что, не пытайтесь самостоятельно расшифровать тот или иной анализ (расшифровка неспециалистом ведет к неэффективному лечению).Обратитесь за этим непосредственно к врачу.

Правило 1. Биоматериал (мочу), как правило, собирают утром после сна. Но бывают и отдельные экстренные случаи, при которых сбор материала для исследования собирается через 2-3 часа после последнего мочеиспускания.

Правило. Непосредственно перед сбором мочи необходимо вымыть руки и половые органы. Эта мера необходима для предотвращения попадания в биоматериал ложных микробов, что может повлечь за собой искажение конечного результата анализа.

Правило 3. Экскремент должен быть собран в специальную и, что очень важно, стерильную емкость (их можно приобрести в аптечных пунктах). Кроме того, необходимо собрать именно среднюю порцию мочи, т. е. первые и последние капли не должны попасть в емкость. Это необходимо, для того чтобы бактерии в анализе мочи сконцентрировались в максимальном количестве (если, конечно, они в ней имеются).

Правило 4. Не рекомендуется сдавать данный анализ, если в период менее чем за две недели до сдачи в организм поступали антибиотики. Такие препараты могут поставить результат под сомнение.

После непосредственного сбора мочи анализ доставляется в лабораторию, где находятся различные питательные среды, на которые и наносится некоторое количество материала. Соблюдая определенные благоприятные условия для каждого типа бактерии, выращиваются их колонии. На основании этих данных и выносится результат анализа о микробе, который вызвал заболевание. Для определения чувствительности бактерий к антибиотикам на их колонии наносят несколько таких препаратов, для того чтобы был некий выбор в подборе препарата для борьбы с заболеванием. Анализ мочи на бак посев готовится от 1 до 10 дней (в зависимости от типа бактерий).

источник

Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) являются одними из наиболее распространённых бактериальных инфекций в детском возрасте. Трудности забора мочи для исследования и интерпретации результатов при контаминации образцов могут приводить к ошибочной диагностике данных инфекций.

Целью рандомизированного исследования, выполненного S. Vaillancourt и соавт. (Канада), являлась оценка влияния гигиенической обработки области промежности и гениталий на степень бактериальной контаминации средней порции мочи у детей, приученных ходить в туалет.

В работу вошли данные 350 детей и подростков в возрасте от 2 до 18 лет, обратившихся за медицинской помощью за период с 1 ноября 2004 г. по 1 октября 2005 г., у которых проводился забор средней порции мочи для проведения бактериологического исследования. Детям, вошедшим в первую группу, проводилась гигиеническая обработка области промежности и гениталий мыльной водой (n=179), участники контрольной группы не подвергались обработке (n=171). Все забранные образцы проходили скрининговое тестирование с последующим микроскопическим исследованием при выявлении при скрининге лейкоцитарной эстеразы, нитритов, кетонов, белка, глюкозы или крови в моче. Культуральное исследование выполнялось при положительном результате общего анализа мочи (выявление нитритов и/или лейкоцитарной эстеразы или ≥5 лейкоцитов в поле зрения при микроскопии центрифугированной мочи с высокой степенью увеличения). В ходе работы проводилось определение степени риска положительного результата общего анализа мочи и риска контаминации образца мочи (рост 8 КОЕ/л или 5 КОЕ/мл одного микроорганизма или ассоциации двух и более микроорганизмов при культуральном исследовании).

Согласно полученным результатам, частота выявления ИМП (рост этиологически значимого микроорганизма в количестве >10 5 КОЕ/мл) в обеих группах составляла 7%. Основным возбудителем инфекции являлась Escherichia coli (19), реже выделялись Proteus spp. (3) и Enterococcus spp. (1). При этом 96% случаев положительного культурального исследования мочи отмечались у девочек (средний возраст 8 лет). Частота контаминации образцов мочи в группе детей, которым проводилась гигиеническая обработка области промежности и гениталий, была значительно ниже по сравнению с таковой в контрольной группе (7,8% vs 23,9%, соответственно). Контаминация в большинстве случаев была представлена ассоциацией двух и более микроорганизмов, реже одним микроорганизмом (рост 7 КОЕ/л или 4 КОЕ/мл) или непатогенными микроорганизмами (Corynebacterium spp. и Staphylococcus epidermis). Кроме того, у детей, подвергавшихся гигиенической обработке области промежности и гениталий, была ниже вероятность положительного результата общего анализа мочи по сравнению с таковой в контрольной группе (20,6% vs 36,8%, соответственно).

В целом, у детей, подвергавшихся гигиенической обработке, была отмечена более высокая прогностическая значимость положительного результата исследования мочи в отношении выявления ИМП по сравнению с контрольной группой (40,5% vs 12,7%, соответственно; р=0,001).

Таким образом, гигиеническая обработка области промежности и гениталий позволяет сократить частоту контаминации образцов средней порции мочи у детей, приученных ходить в туалет. Выполнение указанной процедуры перед забором образцов позволит снизить необходимость в повторных исследованиях мочи и выполнении дополнительных исследований, а также сократить частоту неоправданного назначения антибактериальных препаратов.

Vaillancourt S., McGillivray D., Zhang X., Kramer M.S.

To clean or not to clean: effect on contamination rates in midstream urine collections in toilet-trained children.

Pediatrics 2007; 119(6):e1288-93.

анализ мочи, контаминация, гигиенические мероприятия

источник

Бактериологический посев (бакпосев) – это микробиологическое лабораторное исследование биологического материала человека путем его посева на определенные питательные среды при определенном температурном режиме с целью выявления наличия в нем любого количества патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и дальнейшего решения задач специфического лечения.

При выделении определенных микроорганизмов проводится второй немаловажный анализ – антибиотикограмма – определение чувствительности обнаруженных патогенов к антибактериальным препаратам и бактериофагам.

• Высокая специфичность метода (то есть перекрестных ложных реакций не наблюдается).
• Возможность исследовать абсолютно любую биологическую жидкость человека.
• Лечебная цель – определение чувствительности выявленного микроба к тому или иному лечебному средству (антибиотикограмма), что позволяет с достаточно высокой точностью проводить лечебные назначения.

• Длительность получения результата.
• Высокие требования к забору материала.
• Определенные требования к квалификации персонала бактериологических лабораторий.

Применение микробиологического метода исследования достаточно широко распространено в медицинской практике, в частности, в инфекционных болезнях, гинекологии, урологии, хирургии, отоларингологии, онкологии и других. Безусловным показанием для необходимости проведения бакпосева являются любое воспалительное заболевание органов и систем организма человека, подозрение на септический процесс.

Для исследования забираются следующие биологические среды организма человека: носоглоточная слизь, слизь из зева, секрет бронхиального дерева (мокрота), испражнения (кал), слизь уретры, цервикального канала, секрет простаты, моча, кровь, спинномозговая жидкость, грудное молоко, желчь, содержимое кист, воспалительных очагов, раневое отделяемое.

В слизи носа и зева можно обнаружить гемолитические стрептококки (Streptococcuc pyogenes, Streptococcuc agalactiae), пневмококки (Streptococcuc pneumoniae), золотистый стафилококк (Staphylococcus auereus), коринобактерии дифтерии (Corynebacterium diphtheriae), гемофильную палочку (Haemophilus influenzae типа b), менингококк (Neisseria meningitidis), листерии (Listeria).

В испражнениях пытаются выявить кишечную группу бактерий – салмонеллы и шигеллы (Salmonella spp., Shigella spp.) иерсинии (Iersiniae spp.), тифо-паратифозную группу бактерий (Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B), условно — патогенные возбудители кишечных инфекций, анаэробные микробы, возбудителей пищевых токсикоинфекций, а также обследовать кал на дисбактериоз кишечника.

В содержимом ран, биопунктате, гнойном отделяемом можно выявить псевдомонады или синегнойную палочку (Pseudomonas aeruginosa).

Слизь урогенитального тракта обследуют на предмет наличия в ней возбудителей инфекций, передающихся половым путем – гонококка, трихомонады, грибов (Neisseria gonorrhoeae ,Trichomonas vaginalis, грибы рода Candida), уреаплазму (Ureaplasma urealyticum), микоплазму (Mycoplasma hominis), листерии (Listeria), также можно исследовать мазок на бактериальную флору.

Кровь можно посеять (обследовать) на стерильность.

Такие материалы, как грудное молоко, моча, секрет простаты, соскоб, мазок, раневое содержимое, суставная жидкость, желчь исследуют на общую обсемененность (бактериальную флору).

Материал для исследования в бактериологической лаборатории помещают (делают посев) на специальные питательные среды. В зависимости от желаемого поиска того или иного возбудителя или группы возбудителей посев производится на разные среды. Например, это может быть избирательная или элективная питательная среда (для роста какого-то одного возбудителя, рост других микробов при этом угнетается), примером которых может быть свернутая лошадиная сыворотка для выявления возбудителей дифтерии или среда с селенитом или с солями желчных кислот для обнаружения кишечных возбудителей.

Другим примером могут быть дифференциально-диагностические среды (среда Гисса), которые используются для расшифровки бактериальных культур. При необходимости с жидких питательных сред делают пересев на твердые среды с целью большей идентификации колоний.

Бакпосев. Колонии на твердой среде

Затем питательные среды помещают в термостат (специальный прибор), в котором создаются благоприятные условия (температура, влажность и др.) для роста и размножения возбудителей, в термостате среды находятся определенное время.

Далее проводят контрольный осмотр выросших колоний микроорганизмов, которые называют «культурой микроорганизмов». При необходимости проводят микроскопию материала колоний с предварительной окраской специальными красителями.

Что оценивается при контрольном осмотре? Это форма, цвет, плотность колоний, после дополнительного исследования – способность разлагать некоторые неорганические и органические соединения.

Далее проводят подсчет возбудителей. При микробиологической исследовании учитывается такое понятие, как колониеобразующая единица (КОЕ) — одна микробная клетка, способная образовать колонию, или видимая колония микробов. По КОЕ возможно определить концентрацию или количество микроорганизмов в исследуемом образце. Подсчет КОЕ проводится разными методами: подсчетом колоний под микроскопом, методом серийных разведений, секторным методом.

Качество проводимого бактериологического посева во многом зависит от правильности забора материала для исследования. Нужно помнить простое правило: стерильная посуда и стерильные инструменты! Несоблюдение этих требований приведет к контаминации (внешней обсемененности материала представителями кожи и слизистых, окружающей среды, не имеющих клинического значения), что автоматически сделает исследование бессмысленным. Для забора материала используют стерильную посуду, которая выдается в самой бактериологической лаборатории на руки пациенту при амбулаторном обследовании, для забора испражнений, мочи. Из различных очагов воспаления забор проводится только стерильными инструментами (шпатели, петли, ложки) специально обученным медицинским работником (в поликлинике обычно это медсестра инфекционного или смотрового кабинетов).

Кровь и мочу собирают в сухие пробирки, остальные материалы в посуду с транспортной питательной средой.

Стерильная посуда для забора мочи и испражнений

Другое правило: забор материала до начала антибиотикотерапии! На фоне приема антибиотиков результат будет существенно искажен. Если принимали такие препараты, то прекратить их прием за 10 дней до исследования и сообщить врачу о факте приема любых антибактериальных препаратов.

Должна быть обеспечена быстрая доставка в лабораторию! Микроорганизмы могут погибнуть при высыхании, изменении кислотности. Например, кал должен быть доставлен в теплом виде.

При заборе мочи: после утренних гигиенических процедур забирается средняя порция утренней мочи в количестве 10-15 мл в стерильную посуду. Доставить в лабораторию в течение 2х часов.

При заборе мазка из зева и носа: нельзя утром чистить зубы, полоскать рот и нос дезинфицирующими растворами, пить и есть.

Забор испражнений должен производиться утром стерильной лопаточкой в стерильную посуду в объеме 15-30 гр. Недопустимо попадание в пробу мочи. Доставка в течение 5 часов. Не допускается замораживание или ночное хранение. Собирать кал без применения клизм и слабительных.

Кровь для бакпосева берется до начала антибиотикотерапии на фоне подъема температуры в стерильную пробирку в количестве не менее 5 мл (детям), не менее 15 мл (взрослым).

Мокрота собирается утром натощак в стерильный контейнер во время приступа кашля со слизью. Перед забором почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой. Доставить в лабораторию в течение 1 часа.

Грудное молоко собирается после гигиенической процедуры. Околососковая область обрабатывается тампоном, смоченным 70% этиловым спиртом. Первые 15 мл сцеженного молока не используются. Затем 5 мл сцеживается в стерильный контейнер. Доставить в течение 2х часов.

Отделяемое половых органов: у женщин забор проводится не ранее, чем через 14 дней после менструации, не ранее чем через 1 месяц после отмены антибиотиков, желательно в течение 2х часов не мочиться; у мужчин – не рекомендуется мочиться в течение 5-6 часов до взятия пробы.

При исследовании слизи из носоглотки результат будет готов через 5-7 дней, исследование испражнений займет около 4-7 дней. При обследовании соскоба урогенитального тракта длительность исследования займет 7 дней. Посев на общую флору длится 4-7 дней. Больше всего по длительности готовится кровь на стерильность – 10 дней. Однако самый ранний предварительный результат могут дать через 3 дня.

Результатом бакпосева является как качественная оценка (сам факт наличия возбудителя в исследуемом образце), так и количественная оценка (концентрация возбудителя в материале).

Расшифровка количественного результата проводится самым простым способом. Выделяют 4 степени роста (обсемененности) микроорганизмов в исследуемом материале. Для 1 степени роста характерен скудный рост только на жидкой среде, на твердой – роста нет; для 2 степени – рост на плотной среде до 10 колоний одного вида; для 3 степени – от 10 до 100 колоний; для 4 степени – более 100 колоний.

Это важно для условно-патогенной флоры, при выявлении которой 1 и 2 степень не считают причиной болезни, это просто свидетельствует о загрязненности материала для исследования, 3-4 степени указывают на этиологию (причину) заболевания. Если выделена патогенная флора, то учитываются все без исключения выделенные колонии, то есть все 4 степени.

Результат подсчета колоний в КОЕ/мл расшифровывается следующим образом: 103/мл означает обнаружение 1 колонии; 104/мл – от 1 до 5 колоний; 105/мл – рост 5-15 колоний; 106/мл – более 15.
Количественный результат важен не только для определения степени обсемененности, но и контроля правильности проводимого лечения.

Определение чувствительности выделенного микроорганизма к тому или иному антибактериальному препарату является важной составляющей бактериологического исследования. Набор препаратов, к которому чувствителен или резистентен возбудитель, и является антибиотикограммой.

Чувствительность возбудителя – это восприимчивость к лекарственному препарату, то есть антибиотик подействует на рост и размножение микроба. Резистентность – устойчивость возбудителя к тому или иному препарату, то есть антибактериальный препарат не подействует.

Антибиотикограмма выдается в определенных единицах измерения – минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

источник

Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) широко распространены среди насе­ления. Так, в Западной Европе их ежегодно диагностируют в среднем у 4% на­селения. У женщин заболевание регистрируют в 30 раз чаще, чем у мужчин, причем с возрастом частота ИМП увеличивается: у девочек школьного возраста она составляет в среднем 1%, к 30 годам возрастает до 20% и достигает макси­мального уровня после 60 лет.

Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) широко распространены среди насе­ления. Так, в Западной Европе их ежегодно диагностируют в среднем у 4% на­селения. У женщин заболевание регистрируют в 30 раз чаще, чем у мужчин, причем с возрастом частота ИМП увеличивается: у девочек школьного возраста она составляет в среднем 1%, к 30 годам возрастает до 20% и достигает макси­мального уровня после 60 лет. Среди мужчин к ИМП наиболее предрасположе­ны мальчики до 5 лет и пожилые люди, но даже у последних инцидентность поражения мочевыводящих путей не превышает 5%. Практически всегда на­званная патология возникает у пациентов с мочевыми катетерами. В целом на долю ИМП приходится около 40% госпитальных инфекций, причем чаще всего причиной становится применение уретральных катетеров.

Этиология инфекций мочевыводящих путей

С удивительной закономерностью по всему миру у различных половозраст­ных групп населения при наиболее тяжело протекающих ИМП наиболее часто изолируют из мочи кишечную палочку (E. coli) и сапрофитный стафилококк (S. saprophyticus), относимые в соответствии с этим Европейской конфедераци­ей лабораторной медицины (European Confederation of Laboratory Medicine -ECLM) к первичным возбудителям ИМП человека.

Многие бактерии, ассоциированные с ИМП, проявляют патогенные свой­ства значительно реже или преимущественно на фоне других инфекций, ослаб­ления иммунитета, инвазивных диагностических и лечебных процедур. К числу таких условно патогенных видов относятся клебсиеллы, ацинетобактеры, энте-робактеры, протеи, морганеллы, серратии, псевдомонады, стрептококки груп­пы В, энтерококки, коринебактерии и ряд других микроорганизмов.

Обе упомянутые выше группы микроорганизмов относят к типичным воз­будителям ИМП. Помимо них при бактериологическом исследовании мочи в ряде случаев выявляют нетипичных возбудителей, которые обычно ассоции­рованы с инфекциями других органов и тканей, а мочевой тракт поражают спо­радически. Поэтому такая находка должна каждый раз внимательно изучаться, перепроверяться и анализироваться, чтобы не стать причиной диагностиче­ской ошибки.

Клиническое значение бактериурии

В одних случаях ИМП протекают бессимптомно, в других принимают раз­ные клинические формы, исход которых во многом определяется своевремен­ностью выявления, точностью идентификации и чувствительностью этиологи­ческого агента к антимикробным препаратам. Их симптоматика варьирует в зависимости от локализации возбудителя в нижних (уретрит и цистит) или верхних (пиелонефрит) отделах мочевого тракта. При уретрите обычно отмеча­ют дизурию и поллакиурию, при цистите — боли в нижней части живота, уча­щенное мочеиспускание, транзиторную гематурию, изменение запаха мочи; при остром пиелонефрите — боли в поясничной области, положительный син­дром Пастернацкого, повышение температуры тела, озноб, гематурию, лейко-цитурию, в ряде случаев протеинурию, а также комплекс неспецифических на­рушений (тошноту, рвоту, диарею).

Обнаружение в моче микроорганизмов не всегда позволяет установить эти­ологию болезни. Чтобы иметь для этого основания, необходимо в первую оче­редь подтвердить постоянное присутствие агента в мочевом тракте пациента в течение периода наблюдения. Это достигается посредством его обнаружения в повторно взятых пробах мочи или в образцах, полученных катетеризацией или пункцией мочевого пузыря, что значительно снижает вероятность случайной контаминации.

Важнейшим критерием «истинной» ИМП служит высокая концентрация (титр) агента в моче. Е.Х. Касс в 1960 г. установил, что в бессимптомный период развития пиелонефрита в моче 95% женщин титр возбудителя превышает 10 5 КОЕ/мл. Пользуясь этим индикатором, получившим название «критерия Касса», урологи на протяжении полувека классифицируют бактериурию на «ис­тинную» и «случайную», порой забывая, что данный параметр был определен только для одной группы пациентов (женщин) с определенной патологией (острый пиелонефрит). Более глубокое изучение данного вопроса показало, что такой диагностический уровень бактериурии часто является завышенным, т. е. служит причиной невыявления большого числа ИМП. По мнению специали­стов Европейской конфедерации лабораторной медицины, диагностический титр первичных возбудителей ИМП, обнаруженных в собранной при есте­ственном мочеиспускании пробе мочи, должен быть не менее 10 3 КОЕ/мл, а дру­гих бактерий — больше или равным 10 4 КОЕ/мл (для женщин) и 10 3 КОЕ/мл (для мужчин). Рекомендуется интерпретировать клиническую значимость титра бактерий мочи не формально, а с учетом клинического состояния пациента, способа получения пробы мочи, патогенных свойств изолятов (их принадлеж­ности к первичным и вторичным уропатогенным агентам), метода определения титра бактерий.

Количественными критериями постановки диагноза ИМП служат:

  • при изоляции монокультуры E. coli и S. saprophyticus — титр больше или рав­ный 10 3 КОЕ/мл;
  • при изоляции монокультур других бактерий — титр больше или равный 10 4 КОЕ/мл;
  • при изоляции смешанной культуры двух бактерий — титр больше или рав­ный 10 5 КОЕ/мл.

У большинства пациентов заболевание мочевого тракта вызывает один возбудитель, реже два, но когда в моче обнаруживают три и более микроорга­низмов, то чаще всего это бывает обусловлено контаминацией тестированных проб или их посевов на питательные среды.

Не следует также забывать о том, что на ранних стадиях ИМП, при высоком уровне диуреза, недержании мочи, проведении бактериологического анализа после начала применения антимикробных препаратов, а также низком рН мочи, результаты оценки интенсивности бактериурии могут оказаться заниженными. В то же время следует иметь в виду, что моча представляет собой субстрат, в котором многие бактерии быстро размножаются при соответствующей их фи­зиологическим потребностям температуре. Поэтому большое влияние на титр бактерий в моче оказывают способы ее сбора, хранения и транспортировки.

Наиболее достоверные результаты получают при сборе первой утренней мочи. Первая ее порция в наибольшей степени контаминирована обычной микрофлорой уретры пациента. Поэтому при подозрении на инфекцию дис-тального отдела мочевого тракта предпочтительнее собирать среднюю порцию мочи, а при симптомах поражений почек и мочевого пузыря — среднюю или по­следнюю. С целью избежания контамина­ции мочи пользуются также катетером или проводят пункцию мочевого пузыря, если оправдан риск травмирования тканей при таких процедурах.

Мочу для бактериологического анализа собирают в стерильные контейнеры. Наибо­лее удобны специальные контейнеры, в крышке которых имеется 2 закры­вающихся отверстия: одно для вакуумной пробирки (в нее можно легко и быстро со­брать часть пробы без риска контаминации), второе — для дипслайда/дипстрика. Рис. 1. Контейнер для сбора мочи

Транспортировка мочи в лабораторию

Важность информации о титре потенциально опасных бактерий в моче диктует необходимость быстрой (в течение не более 2 ч) ее доставки в лабора­торию. При отсутствии такой возможности пробы хранят в холодильнике до 12 ч. Замораживания мочи следует избегать, поскольку оно ведет к гибели боль­шого количества бактериальных клеток. Это может стать причиной не только неправильного определения их титра, но и невозможности изоляции патоген­ных бактерий на питательных средах.

Однако упомянутые выше правила удается соблюдать не всегда (например, при самостоятельном сборе мочи пациентами в домашних условиях). Консер­вирование борной кислотой (10-20 г/л) позволяет дольше хранить предназна­ченные для исследований пробы мочи при комнатной температуре за счет по­давления роста бактерий и грибов. В настоящее время доступны контейнеры для мочи со стандартным количеством данного консерванта.

Важнейшие этапы диагностики ИМП — изоляция из мочи бактерий и опре­деление их титра. В этих целях обычно пользуются тремя типами питательных сред: универсальными, селективными и хромогенными.

Универсальные среды обеспечивают рост тех видов бактерий, которые не нуждаются в специфических питательных веществах. Одна из лучших сред дан­ной группы — кровяной агар; его состав соответствует потребностям большин­ства уропатогенных бактерий. Он позволяет выявлять гемолитическую актив­ность бактерий. Склонные к роению протеи дают на этой среде обильный рост, мешая развитию других микроорганизмов и маскируя их колонии. Такого недо­статка лишена среда CLED. Однако ее дифференциально-диагностический по­тенциал ограничен ферментирующими лактозу бактериями, и она не пригодна для культивирования прихотливых бактерий (в частности тех, чей рост in vitro зависит от наличия в субстрате крови или сыворотки).

Селективные среды обеспечивают благоприятные условия роста для опре­деленных видов микроорганизмов и подавляют остальные. При бактериологи­ческом исследовании мочи применяют среды Левина, МакКонки и Колумбий­ский CNA кровяной агар. В среде МакКонки соли желчных кислот содержатся в небольшой концентрации, поэтому ее можно считать умеренно-селективной по отношению к грамотрицательным бактериям. Входящий в состав среды кри-сталлвиолет, как и в среде Левина, ингибирует рост грамположительных бакте­рий, особенно энтерококков и стафилококков. Выросшие на ней энтеробакте-рии дифференцируют по способности ферментировать лактозу (розовая или красная окраска колоний на среде МакКонки и черная — на среде Левина). Ко­лумбийский CNA кровяной агар содержит колистин и налидиксовую кислоту, которые подавляют рост грамотрицательных бактерий. На этой среде стрепто­кокки группы В формируют бесцветные колонии, золотистый стафилококк -белые или золотистые, S. epidermis — белые, E. fecalis — серые, K. pneumoniae — чер­ные колонии.

Хромогенные среды предназначены для изоляции и идентификации ми­кроорганизмов с помощью специфических компонентов, которые определен­ным образом меняют цвет при контакте с гомологичными им факторами (в пер­вую очередь ферментами бактерий), что позволяет идентифицировать продуцентов последних. Одной из хромогенных сред, предназначенных для бактериологического анализа мочи, является Uriselect3. Поскольку она очень питательна и не содержит селективных факторов, то на ней растут почти все уропатогенные бактерии. Колонии тех из них, которые образуют бета-глюкуронидазу, окрашиваются в розово-фиолетовый цвет (кишечная палочка), колонии бактерий, синтезирующих бета-глюкозидазу, становятся зелено-синими (цитробактеры, энтеробактеры, энтерококки, клебсиеллы, псевдомона­ды). Кроме того, в состав этой среды входит триптофан, что позволяет диффе­ренцировать изоляты на обладающие триптофан дезаминазой (колонии спонтанно окрашиваются в оранжево-коричневый цвет) и не синтезирующие этот фермент. Дополнительно образование индола выявляют нанесением на ко­лонии раствора перхлорита железа (реагент становится коричнево-зеленым) или реактива Ковача (реагент розовеет). Некоторые микроорганизмы, в т. ч. стафилококки и ацинетобактерии, формируют на среде Uriselect3 белые коло­нии, видовую принадлежность которых определяют дополнительными биохи­мическими тестами.

Способы определения титра бактерий в моче

Золотым стандартом определения титра бактерий в моче остается ее посев на универсальные среды в чашках Петри. Способ основан на штриховом рас­пределении дозированного объема образца (1-100 мкл) по поверхности среды. Посев серийных разведений мочи дает наиболее точные результаты. Примене­ние калиброванных пластиковых бактериологических петель упрощает и уско­ряет данную процедуру, но не обеспечивает высокой точности исследований при титре бактерий ниже 10 4 КОЕ/мл.

Полуколичественные методы определения титра бактерий в моче прово­дят с применением пластинок, покрытых питательными средами (дипслай-дов и др.). Хотя титр бактерий в моче, определенный количественными мето­дами, является более точным, упомянутые приспособления позволяют объединить несколько преаналитических и аналитических этапов, ускоряя тем самым получение результатов, что нередко имеет большее значение для клиницистов, чем очень точная информация о титре бактерий в исследован­ных пробах.

Концентрацию бактерий определяют по числу выросших колоний через сутки после посева пробы. Одновременно отбирают колонии для установления морфологии изолятов (при низкой концентрации бактерий посевы инкубиру­ют еще сутки, а затем оценивают их морфологию).

Специальные приспособления для бактериологического анализа мочи

При бактериологическом анализе мочи фактор времени имеет особое зна­чение: во-первых, как отмечалось выше, плотность популяции находящихся в моче бактерий при благоприятных условиях постепенно увеличивается, что не­редко ведет к получению ложноположительных результатов лабораторных ана­лизов; во-вторых, от точности и своевременности постановки диагноза зависит успешность лечения пациента. Снижение затрат времени на преаналитическом этапе повышает эффективность медицинской помощи пациентам с болезнями мочевыводящих путей. Стремясь к такой цели, Дж. П. Маккей и Г.Х. Сендис в 1965 г. испытали приспособление, представлявшее собой контейнер с пластико­вой ложкой, в которую залита питательная среда. Ее погружали в пробу мочи, переносили в контейнер и транспортировали в лабораторию. С помощью такого незамысловатого приспособления удалось свести преаналитический этап к процедуре сбора мочи и погружения в нее ложки со средой. Это можно было делать не только в поликлинике, но и непосредственно в домашних усло­виях, причем для проведения столь простой манипуляции не требовалась спе­циальная подготовка пациента или медицинского персонала. Исходная сте­рильность приспособления значительно снижала риск случайной контаминации посторонними микроорганизмами взятой пробы. Отпала необходимость в экс­тренной доставке взятой пробы мочи в лабораторию, т. к. рост бактерий в по­севе начинается с момента погружения дипслайда в мочу. Более того, выдержав в течение ночи в термостате приспособление с посевом, медсестра может в на­чале нового рабочего дня провести первичную оценку результатов: если при­знаки роста микроорганизмов отсутствуют, то отпадает необходимость в транс­портировке пробы мочи или ее посева в лабораторию для дальнейшего исследования (а следовательно значительно сокращаются затраты труда и вре­мени специалистов, а также расход реактивов, питательных сред и других средств).

В последующем «ложку» Маккея — Сендис усовершенствовали, разделив на 2 сектора площадью около 310 мм 2 , которые заливали триптиказно-соевым ага­ром и средой Левина соответственно. Поскольку засев осуществляли погру­жением приспособления в мочу, то его назвали «дипслайдом». Со временем дип-слайд стал плоским и более компактным, т. к. среды стали заливать на его противоположные стороны. Пластинчатая форма дипслайда обеспечила равно­мерность посева, облегчила визуальный контроль роста бактерий. Наличие на пластинке нескольких сред расширило возможности и повысило результатив­ность анализа, снизив его трудоемкость и общую стоимость.

Комбинации питательных сред, используемые при изготовлении дип-слайдов, постепенно оптимизировали. В начале 1960-х гг. фирма Oxoid (Вели­кобритания) предложила одну сторону пластинки заливать универсальной средой CLED для определения титра бактерий в моче по числу выросших ко­лоний, а другую — средой МакКонки, селективно поддерживающей рост боль­шинства энтеробактерий. Данная комбинация питательных сред стала основной.

В 1990-х гг. компания ORION (Финляндия) приступила к выпуску дипслай-дов Uricult-Trio, одна сторона которых залита средой CLED, а другая — частично средой МакКонки, а частично агаровой основой с солями желчных кислот (для подавления роста грамположительных кокков), а также с 8-гидроксиквинолином-b-D-глюкуронидом и солью железа (для выявления (3-глюкуронидазы как марке­ра колиформных бактерий). На последней из упомянутых сред значительно ограничено роение протеев; образуемые ими и кишечной палочкой колонии можно спутать по форме и цвету.

Применение дипслайдов значительно облегчает полуколичественную оцен­ку интенсивности бактериурии. Их устройство (компактность, комбинирова­ние на одной пластинке нескольких сред в небольшом количестве) обеспечива­ет экономию средств, облегчает транспортировку проб в лабораторию, требует очень небольшого места в термостате, а также меньших затрат времени и труда (поскольку посев на несколько сред происходит одновременно посредством простого погружения в пробу). Основное преимущество, предоставляемое дипслайдами, состоит в возможности посева на них мочи непосредственно у крова­ти больного или в поликлинике, куда тот принес пробу на анализ. Как след­ствие, снижается риск получения ложноположительных результатов оценки интенсивности бактериурии, обусловленных ростом популяции микроорганиз­мов в пробе мочи с момента ее взятия до анализа.

Однако идеальными эти устройства считать нельзя из-за наличия у них ряда недостатков. Самым существенным является сплошной рост бактерий в посевах проб мочи с высокой концентрацией (более 10 5 КОЕ/мл). Чем меньше площадь пластинки, залитой питательной средой, тем чаще сплошной рост бак­терий мешает оценке их титра и изоляции отдельных колоний для изучения их морфологии и выращивания чистой культуры. В дипслайдах с тремя питатель­ными средами эта проблема в еще большей степени усугубилась из-за сокраще­ния площади засеваемых сред. Рекомендацию погружать дипслайды в мочу не более чем на 75% площади нельзя считать целесообразной: это никак не влияет на интенсивность роста микроорганизмов и не облегчает оценку их концентра­ции, хотя повышает шансы обнаружить подвижные виды бактерий, способные мигрировать в неконтактировавшие с пробой участки сред.

Можно одновременно использовать несколько дипслайдов, засевая их цельной мочой и ее разведениями, но тогда надо смириться с большим расхо­дом средств на проведение анализа. Бывает сложно сделать посев на дипслайд небольшой порции мочи (например, взятой от новорожденных детей). Боль­шой объем мочи, абсорбируемый средами в процессе их засева, часто ведет в процессе инкубации к образованию конденсата, мешающего визуальному кон­тролю роста бактерий и делающего необходимым преждевременное открыва­ние контейнера с приспособлением.

Для устранения перечисленных недостатков компания «Новамед» (Изра­иль) предложила новое техническое решение. Она выпустила приспособление (дипстрик), принципиально отличающееся от обычных дипслайдов тем, что по­сев на питательные среды осуществляется погружением в мочу не всей пла­стинки, а только специальной насадки. Последняя представляет собой пластиковое кольцо с зубцами. При опускании дипстрика в пробирку-контейнер кольцо остается у ее горлышка, а зубцы делают посев штрихом на средах обеих сторон дипстрика. Неодинаковая толщина зубцов обеспечивает захват разных по объему проб мочи. В сделанных ими штриховых посевах постепенно умень­шается концентрация бактерий, что обеспечивает формирование изолирован­ных колоний, если титр микроорганизмов в моче не превышает 10 7 КОЕ/мл. Минимальный титр бактерий, выявляемый приспособлением в моче, находит­ся в интервале от 5 х 10 2 до 5 х 10 3 КОЕ/мл.

Приспособление выпускают с несколькими комбинациями сред: Uriselect3 + МакКонки (основная), CLED + МакКонки, а также CLED + CNA Колумбийский кро­вяной агар (дополнительные). С их помощью одновременно оценива­ют интенсивность бактериурии и идентифицируют уропатогенные возбудители в хромогенной среде Uriselect3, а также в среде МакКон-ки (грамотрицательные бактерии) и CNA Колумбийском агаре (грам-положительные бактерии). Параллельные исследования клинических проб мочи в дипслайде Uricult и дипстрике подтвердили превосходство нового приспособления по чувстви­тельности, специфичности, а также воспроизводимости результатов. На сегодняшний день дипстрик — единственное приспособление, сочетающее точность бактериологического анализа в чашках Петри с преимуществами дипслайдов, что позволяет говорить о появлении новой «дипстрик»-технологии. Дипстрики легко интегрируются в привычную практику работы лечебных и диагностических медицинских учреждений. Проще и удобнее транспортировать в лабораторию сделанный на них посев, чем пробы мочи пациентов. При этом значительно сокращается время, затрачиваемое на про­ведение бактериологического анализа. Данные приспособления позволяют быстро и точно устанавливать этиологию большинства ИМП. В тех случаях, когда изолированные на дипстрике бактерии не удается идентифицировать, не требуется повторно исследовать мочу — достаточно продолжить изучение морфологических, тинкториальных, культуральных и биохимических свойств выросших колоний.

Б.Ф. Шуляк,
зав. научно-инновационным отделом ООО «ГЕМ» (г. Москва),

С.С. Белокрысенко,
зав. лабораторией проблем клинической микробиологии и контроля за госпитальными инфекциями Научно-исследовательского центра Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова

источник

Читайте также:  Почему берут мочу через катетер