Качественная реакция на спирт в моче

33.2.1. Определение рН, доказательство наличия белка, глюкозы, кетоновых тел, уробилина и крови с помощью комбинированных тест-полосок.

Комбинированными тест-полосками можно провести оценку в моче шести важных показателей: рН, белок, глюкозу, кетоновые тела, уробилин и кровь.

В пробирки налейте нецентрифугированную, хорошо перемешанную мочу. Тест-полоску (всю) опустите в сосуд с мочой. Избыток мочи снимите с полоски, прикасаясь к стенке сосуда. Через 30-60 сек, развившуюся окраску сравните со стандартной шкалой. Изменение окраски, которое наступило лишь на краях индикаторной зоны или только через 2 мин, не имеет диагностического значения. Моча не должна перед исследованием стоять больше 4 ч при комнатной температуре.

Белок. При наличии белка наблюдаются сдвиги в цвете тест-полоски от желтого к зеленому (0,3; 1,0; 5,0 г/л); патологическая протеинурия констатируется при цифрах более 0,25 г/л.

Глюкоза.Положительная реакция от оранжевого до коричневого цвета развивается через 60 с (5,55; 16,65, 55,55 ммоль/л). Окраска появляется даже при небольшой концентрации глюкозы (2,2 ммоль/л).

Кетоновые тела.Об их присутствии свидетельствует появление окраски в границах от розовой до фиолетовой (+, ++, +++). Чувствительность тест-полоски на ацетоуксусную кислоту выше, чем на ацетон; на β-гидроксимасляную кислоту тест-полоска не реагирует. Величины обнаружения: 100 мг/л для ацетоуксусной кислоты и от 400 мг/л для ацетона.

Уробилин.Положительная реакция от розового до красного цвета (граница появления 4 мг/л).

Кровь.Для эритроцитов и гемоглобина имеется отдельная шкала. Интактные эритроциты видны в виде отдельных или густо сидящих зеленых точек на желтом фоне (5-10, 50, 250 эрит/мкл). Равномерная зеленая окраска обозначает свободный гемоглобин или миоглобин, или гемолизированные эритроциты (50-250 эрит./мкл). При малых примесях крови в моче или при более длительном смачивании полосок реакция может наступить через 1-2 мин.

Качественная реакция на кровяные пигменты

К числу патологических составных частей мочи относятся также кровь (точнее, форменные элементы) и кровяные пигменты (гемоглобин или метгемоглобин). В тех случаях, когда появляется кровь в моче, говорят о гематурии, а при наличии кровяных пигментов — о гемоглобинурии. Наличие гемоглобина в моче в случае, как гематурии, так и гемоглобинурии, можно легко обнаружить спектроскопическим методом или с помощью специальных химических проб (гваякой, бензидиновой, пробы Геллера). Моча при гематурии непрозрачна, имеет красноватый оттенок, интенсивность которого зависит от количества форменных элементов крови. В осадке под микроскопом выявляются эритроциты и лейкоциты; в отличие от гемоглобинурии гематурия развивается при повреждении сосудов мочеполовых путей (мочевыми камнями, при раке мочевого пузыря, воспалении мочевого пузыря и цистите). Гемоглобинурия наблюдается при ряде заболеваний, связанных с усиленным гемолизом (распадом) эритроцитов. Моча при этом бывает окрашена в красный или, чаще, в кофейно-бурый цвет. В случае гематурии и гемоглобинурии моча дает положительную реакцию на белок.

Бензидиновая проба

Принцип метода: бензидиновая проба основана на окислении бензидина атомарным кислородом, который образуется при разложении пероксида водорода кровяным пигментом — гемоглобином, оказывающим пероксидазное действие.

В пробирку накапайте 20 капель свежесобранной нефильтрованной мочи, охладите. Добавьте равный объем раствора бензидина в уксусной кислоте и несколько капель 0,5% пероксида водорода. При наличии гемопротеида моча окрашивается в синий или зеленый цвет.

Качественные реакции на желчные пигменты

Желчные пигменты (билирубин, биливердин и др.) появляются в моче в виде щелочных солей при желтухах. Эти соединения образуются в основном из гемоглобина при распаде эритроцитов. Патологическая моча имеет желтовато-коричневое или зеленое окрашивание. Большинство химических проб (Гмелина, Розенбаха), доказывающих их присутствие, основано на способности билирубина и биливердина легко окисляться с образованием различно окрашенных продуктов: биливердина (зеленого), билицианина (синего), холетелина (желтого) и др.

Принцип метода: В основе данной пробы лежит окисление билирубина хлорным железом после осаждения его хлоридом бария.

К 10 мл мочи прибавьте 5 мл 15% хлорида бария, смешайте, отфильтруйте. Вынутый из воронки фильтр разложите на сухой фильтровальной бумаге. На пятно хлорида бария нанесите 1-2капли реактива Фуше (хлорное железо FeCl₃ + трихлоруксусная кислота Сl₃CCOOH). В присутствии билирубина, на фильтре появляются сине-зеленые или голубоватые пятна (реакция положительная). Нормальная моча содержит очень малое количество билирубина, которое не обнаруживается обычными лабораторными методами.

Проба Розина

Принцип метода основан на окислении билирубина мочи в биливердин под действием йода.

В пробирку налейте 5 мл мочи и осторожно наслоите 1 мл 0,1% спиртового раствора йода. При наличии билирубина на границе между обеими жидкостями образуется зеленое кольцо (проба положительная). Подобный эффект наблюдается после приема антипирина и при наличии в моче крови.

источник

Свердловское областное бюро судебно-медицинской экспертизы (нач. Л.И. Кузнецова)

УДК 340.67: [616.153.26 + 616.633.261-074:543.544

G. С. ANALYSIS OF ALCOHOLS IN BLOOD AND IN URINE BY ABSOLUTE CALIBRATION METHOD WITH SAMPLE TESTER

V. F. Lisenkov, I. K. Bushlanova

A modification of the G. C. set permitting the measuring of the amount of the sample to be tested that was introduced into the chromatograph. Simultaneous precise detrmination and estimation of all the spirits from C1 to C₅ is possible. The error range does not exceed 2%.

библиографическое описание:
Газохроматографический анализ спиртов в крови и моче методом абсолютной калибровки с пробомером / Лисенков В.Ф., Бушланова И.К. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1976. — №4. — С. 36-38.

В газовой хроматографии существует три метода расчета хроматограмм: абсолютной калибровки, внутреннего стандарта и внутренней нормализации. Для количественного анализа спиртов в биологических объектах предлагается использовать метод внутреннего стандарта. В качестве внутреннего стандарта применяется 4% раствор пропилового спирта. Для анализа в газовый хроматограф вводят пары, находящиеся в равновесии с жидкой фазой. Содержание паров вещества над жидкостью пропорционально коэффициенту распределения этого вещества между жидкостью и паром, причем при изменении темпера туры окружающей среды изменяется и коэффициент распределения. В результате изменяется и относительное содержание стандарта в паровой фазе, что, несомненно, должно приводить к ошибкам хроматографического анализа. Кроме того, если в исследуемом объекте содержится пропиловый спирт, возникает необходимость в замене внутреннего стандарта. К числу недостатков метода относится и двукратное введение анализируемой пробы, поскольку вначале проводится качественная, а затем количественная оценка результата.

Мы предлагаем для анализа спиртов C1—с5, в частности этилового спирта, метод абсолютной калибровки. При введении пробы с помощью медицинского шприца возникают неизбежные потери пробы, связанные с токсическими погрешностями, причем величина этих потерь в каждом случае различна и невоспроизводима. Поскольку точность анализа зависит от воспроизводимости ввода пробы, это обстоятельство не может не отразиться на точности результатов. Для устранения зависимости результатов измерения от ввода пробы мы использовали принцип пробомера.

Измененная схема газохроматографа.
1 — регулятор давления; 2 — вентиль тонкой регулировки: 3 — устройство для ввода проб; 4 — сравнительное плечо катарометра (пробомер); 5 — разделительная колонка; 6 — рабочее плечо катарометра; 7 — самопишущий прибор.

Обычно сравнительное плечо катарометра включается в газовую линию до устройства для ввода пробы; в случае включения его после испарителя, непосредственно перед разделительной колонкой, проба будет попадать на сравнительное плечо катарометра не разделяясь и пик от сравнительного плеча катарометра будет служить индикатором объема введенной пробы — пробомером. Затем проба попадает на разделительную колонку, и с помощью рабочего плеча катарометра регистрируется обычная хроматограмма (см. рисунок). Отношение высот получаемых пиков к высоте пика пробомера (или отношение каких-либо других параметров, например, площадей пиков) величина в известных пределах постоянная, не зависящая от величины вводимой пробы.

Сравнительные результаты определения этилового спирта в крови и моче методом внутреннего стандарта и абсолютной калибровки

Методика. 0,5 мл объекта помещали в пенициллиновый флакон с 0,5 мл 50% раствора трихлоруксусной кислоты. После перемешивания и фиксации пробки во флакон с помощью шприца вводили 0,25 мл 30% раствора нитрита натрия. После минутного взбалтывания отбирали 2 мл парообразной пробы (газ-носитель — гелий) и вводили в хроматограф. Масштаб записи пика общего количества пробы 128, полярность записи — «обратная». После записи пика общего количества пробы (пика пробомера) масштаб записи переводят в положение 2, а полярность записи — в положение «прямая». В этих условиях регистрируется остальная хроматограмма, Первым из колонки выходит пик воздуха, а затем последовательно — спирты от С1 до С5. Для количественного анализа спиртов необходима предварительная градуировка хроматографа; с этой целью приготовляют искусственные смеси с различным содержанием определенных веществ и строят градуировочный график в координатах:

где h_i — высота пика, соответствующего определенному веществу: h — высота пика пробомера; C_i — концентрация вещества в пробе.

В процессе проведения анализа по хроматограмме рассчитывают величину h₁/h, а по градуировочному графику определяют искомую концентрацию. При количественном анализе остальных спиртов необходимо построить градуировочный график для каждого спирта в отдельности.

Количественно-качественный анализ всех спиртов от С1 до С5 возможен на основе одной хроматограммы. Предлагаемый метод может быть осуществлен на любом из хроматографов с детектором по теплопроводности.

Метод проверен нами при качественно-количественном анализе алкилнитратов в крови и моче.

Условия хроматографического разделения. Хроматограф ХЛ—69 с детектором по теплопроводности, колонка V-образная, длина 1,2 м. Неподвижная фаза — полиэтиленглюкон 1200 на ИНЗ—600, температура колонки 75°, сила тока детектора 60 мА, газ-носитель — гелий, 3 л/ч.

Условия регистрации. При записи пика пробомера масштаб регистрации устанавливается в положение 128, полярность записи «обратная». При записи остальной хроматограммы масштаб регистрации устанавливается в положение 2, полярность «прямая». Ошибка анализа не превышает 2% (см. таблицу).

1. Предлагаемый метод качественно-количественного определения спиртов С1—С₅ в крови и моче позволяет при однократном введении пробы проводить количественную оценку всех спиртов, содержащихся в объекте.
2. Проверка метода на лабораторном хроматографе ХЛ-69 показала, что ошибка анализа не превышает 2%.

Установление прижизненности механической травмы по биохимическим показателям / Асташкина О.Г., Столярова Е.П., Полтарев С.В., Терешина Н.А. // Медицинская экспертиза и право. — 2010. — №3. — С. 43-45.

Состояние и перспективы исследования цитомединов печени / Авдохиев Г.И., Кузьмина О.В., Кот М.Л. // Матер. IV Всеросс. съезда судебных медиков: тезисы докладов. — Владимир, 1996. — №2. — С. 43-44.

источник

Этиловый спирт С₂Н₅ОН (этанол, этиловый алкоголь, винный спирт) — бесцветная, летучая жидкость с характерным запахом, жгучая на вкус (пл. 0,813—0,816, т. кип. 77—77,5 °С). Этиловый спирт горит синеватым пламенем, смешивается во всех соотношениях с водой, диэтиловым эфиром и многими другими органическими растворителями, перегоняется с водяным паром.

Этиловый спирт получают путем брожения крахмалсодержащих продуктов (зерно, картофель), фруктов, сахара и т. д. Полученный брожением этиловый спирт отгоняют и получают спирт-сырец, который очищают путем ректификации. Спирт-сырец и самогон, изготовленные в домашних условиях, содержат некоторое количество сивушных масел, состав и свойства которых описаны ниже (см. гл. IV, § 10). Сивушные масла относительно медленно метаболизируются в организме. Поэтому продолжительность действия их на организм большая, чем этилового спирта.

Применение этилового спирта. Этиловый спирт широко используется в промышленности как растворитель и исходный продукт для получения многих химических соединений. Этот спирт используется в медицине как дезинфицирующее средство.

В химических лабораториях он применяется как растворитель, входит в состав многих спиртных напитков.

Действие на организм и токсичность. Этиловый спирт может поступать в организм несколькими путями: при приеме внутрь, при внутривенном введении, а также через легкие в виде паров с вдыхаемым воздухом.

Поступивший в организм этиловый спирт действует на кору головного мозга. При этом наступает опьянение с характерным алкогольным «возбуждением». Это возбуждение не является результатом усиления возбудительного процесса, а возникает из-за ослабления процесса торможения. Таким образом, под влиянием алкоголя проявляется преобладание процессов возбуждения над процессами торможения. В больших дозах этиловый спирт вызывает угнетение функций как спинного, так и продолговатого мозга. При этом может наступить состояние длительного глубокого наркоза с потерей рефлексов и угнетением жизненно важных центров. Под влиянием этилового спирта может наступить смерть в результате паралича дыхательного центра.

О токсичности этилового спирта свидетельствует наличие случаев острых отравлений этим спиртом. В последнее десятилетие острые отравления этиловым спиртом занимают первое место (около 60%) среди отравлений другими токсическими веществами. Алкоголь не только вызывает острые отравления, но и способствует скоропостижной смерти от других заболеваний (прежде всего, от заболеваний сердечно-сосудистой системы).

Степень токсичности этилового спирта зависит от дозы, концентрации его в напитках, от наличия в них сивушных масел и других примесей, прибавляемых для придания напиткам определенного запаха и вкуса. Ориентировочно смертельной дозой для человека считается 6—8 мл чистого этилового спирта на 1 кг массы тела. В пересчете на всю массу тела это составляет 200—300 мл этилового спирта. Однако эта доза может изменяться в зависимости от чувствительности к этиловому спирту, условий его приема (крепость напитков, наполненность желудка пищей) и т. д. У одних лиц смерть может наступить после приема 100— 150 г чистого этилового спирта, в то время как у других лиц. смерть не наступает и после приема 600—800 г этого спирта.

Длительное злоупотребление этиловым спиртом приводит к хроническому отравлению (алкоголизму). Повторные приемы алкоголя приводят к развитию привыкания, в результате которого малые дозы этого спирта перестают вызывать прежнее эйфорическое состояние. Чтобы вызвать эйфорическое состояние, таким лицам со временем требуется повышенная доза этилового спирта. Одновременно с привыканием вырабатывается пристрастие, а затем развивается алкогольная зависимость (алкоголизм), которая характеризуется тягостными переживаниями без употребления алкоголя и сильным желанием повторных его приемов.

В результате длительных приемов этилового спирта происходит ряд тяжелых нарушений функций организма: может наступить цирроз печени, перерождение сердечной мышцы и почек, стойкое расширение сосудов лица (особенно сосудов носа), дрожание мышц, галлюцинации, буйный бред (белая горячка), перерождение мужских и женских половых желез, в результате чего от алкоголиков рождаются дети с умственной и физической недостаточностью. Кроме этого, алкогольное опьянение часто является причиной несчастных случаев в быту, на производстве, транспорте и т. д. Значительное число нарушений социалистической законности и преступлений совершается в состоянии алкогольного опьянения.

Таким образом, алкоголизм является большим социальным злом, с которым необходимо вести решительную борьбу.

Распределение в организме. Этиловый спирт неравномерно распределяется в тканях и биологических жидкостях организма. Это зависит от количества воды в органе или биологической жидкости. Количественное содержание этилового спирта прямо пропорционально количеству воды и обратно пропорционально количеству жировой ткани в органе. В организме содержится около 65 % воды от общей массы тела. Из этого количества 75— 85 % воды содержится в цельной крови. Учитывая большой объем крови в организме, в ней накапливается значительно большее количество этилового спирта, чем в других органах и тканях. Поэтому определение этилового спирта в крови имеет большое значение для оценки количества этого спирта, поступившего в организм. Имеется определенная зависимость между количеством этилового спирта в крови и моче. В первые 1—2 ч после приема этилового спирта (спиртных напитков) концентрация его в моче несколько ниже, чем в крови. В период элиминации содержание этилового спирта в моче, взятой катетером из мочеточника, превышает содержание его в крови. Эти данные имеют большое значение для установления времени, прошедшего с момента приема этилового спирта до момента исследования.

Большое значение в диагностике опьянений и отравлений этиловым спиртом имеют результаты количественного определения этого спирта, которые выражают в промилле (% ), что означает тысячную долю.

При оценке результатов количественного определения этилового спирта в крови необходимо учитывать, что этот спирт может образовываться при гнилостном разложении трупов. При гниении в крови трупов может образовываться от ничтожных количеств до 2,4 % этилового спирта. В первые 2—3 сут после смерти этиловый спирт в определенной степени разлагается под влиянием алкогольдегидразы, которая в это время еще сохраняет ферментативную активность.

В отличие от крови в моче трупов образование этилового спирта не происходит. Поэтому для оценки степени опьянения производят определение этилового спирта как в крови, так и в моче.

Выводы о степени опьянения и о смертельных отравлениях этиловым спиртом делают на основании результатов определения этого спирта в крови. При обнаружении в крови менее 0,3 % этилового спирта делают вывод об отсутствии влияния этого спирта на организм. Легкое опьянение характеризуется наличием в крови 0,5—1,5 % этилового спирта. При опьянении средней степени в крови обнаруживается 1,5—2,5 % , а при сильном опьянении— 2,5—3,0 % этилового спирта. При тяжелом отравлении в крови содержится 3—5 % , а при смертельном отравлении — 5—6 % этилового спирта.

Метаболизм. Часть этилового спирта (2—10 %) выделяется из организма в неизмененном виде с мочой, выдыхаемым воздухом, потом, слюной, калом и т. д Остальное количество этого спирта подвергается метаболизму. Причем метаболизм этилового спирта может происходить несколькими путями. Определенное количество этилового спирта окисляется с образованием воды и оксида углерода (IV). Несколько большее количество этого спирта окисляется до уксусного альдегида, а затем до уксусной кислоты.

Если ввести в организм антабус, циамид и некоторые другие вещества, то происходит задержка превращения уксусного альдегида в уксусную кислоту. Это приводит к накоплению уксусного альдегида в организме, который вызывает отвращение к алкоголю.

При исследовании органов трупов (желудок с содержимым, печень, почки и др.) на наличие этилового спирта его отгоняют с водяным паром. Обнаружение этилового спирта производят при помощи описанных ниже реакций. Для обнаружения этилового спирта в крови и моче применяют метод газожидкостной хроматографии.

Реакция образования йодоформа. При нагревании этилового спирта с раствором иода и щелочью образуется йодоформ (CHJ ₃ ), имеющий специфический запах:

Выполнение реакции. В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 2 мл 5 %-го раствора гидроксида натрия или карбоната натрия. К этой смеси по каплям прибавляют 1 %-й раствор иода в 2 %-м растворе иодида калия до слабо-желтой окраски. Затем смесь несколько минут нагревают на водяной бане (50 °С). При наличии этилового спирта ощущается запах йодоформа. При относительно больших количествах этилового спирта в пробе образуются кристаллы йодоформа, имеющие форму шестиугольников и звездочек.

Предел обнаружения: 0,04 мг этилового спирта в 1 мл раствора. Эта реакция не специфична на этиловый спирт. Ее дают ацетон, молочная кислота и др.

1. Реакция образования уксусно-этилового эфира. Этиловый спирт с ацетатом натрия в присутствии серной кислоты образует уксусно-этиловый эфир, имеющий характерный запах:

Выполнение реакции. В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 0,1 г высушенного ацетата натрия, затем осторожно по каплям прибавляют 2 мл концентрированной серной кислоты. Смесь нагревают на пламени горелки (лучше нагревать пробирку на парафиновой или глицериновой бане) до выделения пузырьков газа. Появление специфического запаха уксусно-этилового эфира указывает на наличие этилового спирта в исследуемом растворе.

Предел обнаружения: 15 мкг этилового спирта в 1 мл раствора.

Запах уксусно-этилового эфира более отчетливо ощущается, если содержимое пробирки вылить в 20—25-кратный объем воды.

2. Реакция образования этилбензоата. При взаимодействии этилового спирта с бензоилхлоридом (хлористым бензоилом) образуется этилбензоат, имеющий характерный запах:

Распознаванию запаха этилбензоата мешает избыток бензоилхлорида, имеющего неприятный запах. Поэтому для разложения избытка бензоилхлорида прибавляют раствор щелочи:

Выполнение реакции. К 1 мл исследуемого раствора прибавляют 1—2 капли бензоилхлорида. При частом взбалтывании смеси к ней прибавляют по каплям 10 %-й раствор гидроксида натрия до исчезновения удушливого запаха бензоилхлорида. Появление запаха этилбензоата указывает на наличие этилового спирта в пробе. Этот запах лучше, ощущается после нанесения нескольких капель реакционной смеси на кусочек фильтровальной бумаги. Реакции мешает метиловый спирт, так как запах этилбензоата напоминает запах бензойнометилового эфира.

Выполнение реакции. К 1 мл исследуемого раствора прибавляют 10 %-й раствор серной кислоты до получения кислой среды (по лакмусу), К этой смеси по каплям прибавляют 10%-й раствор дихромата калия до тех пор, пока жидкость не станет оранжево-красной. Смесь оставляют на несколько минут при комнатной температуре. При наличии этилового спирта в исследуемом растворе появляется запах ацетальдегида. При этой реакции мвжет образовываться и некоторое количество уксусной кислоты. Побочная реакция образования уксусной кислоты понижает чувствительность реакции обнаружения ацетальдегида.

Окисление этилового спирта и обнаружение его по ацетальдегиду. Ацетальдегид, образующийся при окислении этилового спирта, можно обнаружить при помощи реакции с нитропруссидом натрия и морфолином. С этой целью 2—3 капли раствора 4 , содержащего ацетальдегид, наносят на капельную пластинку или на фильтровальную бумагу и прибавляют каплю реактива (свежеприготовленная смесь равных объемов 20 %-го водного раствора морфолина и 5 %-го водного раствора нитропруссида натрия). При наличии ацетальдегида в растворе появляется синяя окраска.

Предел обнаружения: 1 мкг ацетальдегида в пробе.

Предварительная проба на наличие этилового спирта в моче и крови. Эта проба подробно описана выше (см. гл. IV, § 8).

Обнаружение этилового спирта в напитках и растворах методом газожидкостной хроматографии

Принцип обнаружения химических соединений с помощью метода газожидкостной хроматографии описан в ряде источников литературы. Для обнаружения этилового спирта в растворах, напитках и в других жидкостях методом газожидкостной хроматографии в качестве эталонного вещества применяют 95 %-й этиловый спирт. Перед введением в дозатор газового хроматографа этот спирт переводят в более летучее, чем этиловый спирт (т. кип. 78 °С), соединение — этилнитрит (т. кип. 17 °С). Для этого к этиловому спирту прибавляют нитрит натрия или калия и трихлоруксусную кислоту:

Образовавшийся этилнитрит, который находится в газообразном состоянии над жидкостью, вводят в газовый хроматограф и производят хроматографирование.

металлическая колонка длиной 100 см, диаметром 0,6 см;

твердый носитель: сферохром, хезасорб или другие носители;

неподвижная жидкая фаза: полиэтиленгликоль (мол. масса 1000—1500), нанесенный на твердый носитель в количестве 12 %;

газ-носитель: технический азот, пропускаемый через хроматограф со скоростью 50—60 мл/мин;

скорость движения диаграммной ленты 720 мм/ч.

Методика обнаружения этилового спирта в напитках и растворах. Во флакон из-под пенициллина вносят 0,5 мл 50%-го раствора трихлоруксусной кислоты и 0,5 мл водного раствора эталонного вещества (95 %-го этилового спирта, разбавленного водой с таким расчетом, чтобы концентрация его составляла 3— 4% ). Флакон закрывают резиновой пробкой, которую закрепляют специальным приспособлением (фиксатором). Затем с помощью шприца через резиновую пробку во флакон вводят 0,25 мл 30 %-го раствора нитрита натрия. Содержимое флакона в течение 1 мин хорошо взбалтывают и с помощью другого сухого шприца набирают 3 мл газообразной фазы, находящейся над жидкостью. Эту газообразную фазу, содержащую этилнитрит, вводят в дозатор хроматографа и производят хроматографирование. При этом записывают время удерживания этилнитрита.

После окончания хроматографирования эталонного вещества производят точно такой же опыт с исследуемым раствором, в котором предполагается наличие этилового спирта.

Совпадение времени удерживания вещества в обеих пробах (в пробе с эталонным и исследуемым веществом) указывает на идентичность этих веществ.

Методика обнаружения этилового спирта в крови и моче. Методика обнаружения этилового спирта в крови и моче аналогична методике обнаружения этого спирта в напитках и растворах. Сначала производят хроматографирование и определение времени удерживания этилового спирта, являющегося эталонным веществом. Это определение производят так, как указано при описании методики определения этого спирта в напитках и растворах. Затем приступают к определению этилового спирта в крови или в моче.

Во флакон из-под пенициллина вносят 0,5 мл исследуемой крови или мочи и 0,5 мл 50 %-го раствора трихлоруксусной кислоты. Флакон закрывают резиновой пробкой, которую закрепляют специальным фиксатором. После этого во флакон через резиновую пробку с помощью шприца вводят 0,25 мл 30%-го раствора нитрита натрия. Содержимое флакона хорошо взбалтывают в течение одной минуты. Затем из флакона другим шприцом набирают 3 мл газообразной фазы, которую вводят в дозатор хроматографа и хроматографируют. Если совпадает время удерживания эталонного вещества и вещества, содержащегося в крови или в моче, делают вывод о наличии этилового спирта в исследуемых биологических жидкостях.

При обнаружении этилового спирта в моче или в крови методом газожидкостной хроматографии производят количественное определение этого спирта в указанных объектах.

Количественное определение этилового спирта в крови и моче методом газожидкостной хроматографии

Для количественного определения этилового спирта в крови и моче применяют метод внутреннего стандарта, как один из методов газожидкостной хроматографии. Согласно этому методу, к крови или к моче, в которых определяют количественное содержание этилового спирта, прибавляют внутренний стандарт. В качестве внутреннего стандарта применяют пропиловый спирт. Содержащийся в крови или моче этиловый спирт (т. кип. 78 °С), а также пропиловый спирт (т. кип. 97,5 °С), прибавленный в качестве внутреннего стандарта, переводят в более летучие соединения (в этилнитрит с т. кип. 17 °С и пропилнитрит с т. кип. 46 — 48°С). Смесь этилнитрита и пропилнитрита вводят в дозатор хроматографа и проводят хроматографирование. При этом на хроматограмме выписывается два пика, один из которых соответствует этиловому спирту (этилнитриту), а второй — пропиловому спирту (пропилнитриту). Затем рассчитывают отношение площади или высоты пика этилового спирта (этилнитрита) к площади или высоте пика внутреннего стандарта — пропилового спирта (пропилнитрита).

Расчет количественного содержания этилового спирта в крови или в моче производится по калибровочному графику.

Построение калибровочного графика. Сначала приготовляют серию стандартных растворов, содержащих 2, 3, 4 и 5 % этилового спирта, и раствор внутреннего стандарта, содержащий 4 % пропилового спирта. В несколько флаконов из-под пенициллина вносят по 2 мл раствора, содержащего по 4 % пропилового спирта. В каждый флакон прибавляют по 2 мл раствора этилового спирта различной концентрации (2, 3, 4 и 5% ). Содержимое флаконов хорошо перемешивают, а затем берут по 1 мл смеси спиртов из каждого флакона и переносят в другие флаконы из-под пенициллина. В каждый флакон прибавляют по 0,5 мл 50 %-го раствора трихлоруксусной кислоты. Флаконы закрывают резиновыми пробками, которые закрепляют фиксаторами. Затем с помощью шприца через резиновую пробку во флаконы вносят по 0,25 мл 30 %-го раствора нитрита натрия. Содержимое флаконов взбалтывают в течение одной минуты. После этого с помощью другого сухого шприца из флаконов отбирают по 3 мл газообразной фазы, которую вводят в дозатор хроматографа, и хроматографируют.

Условия хроматографирования указаны выше при описании способа обнаружения этилового спирта в напитках и растворах.

На хроматограммах измеряют площадь или высоту каждого пика. Затем находят отношение площади или высоты пика этилового спирта (этилнитрита) к площади или высоте пика внутреннего стандарта (пропилнитрита). Учитывая, что при этом для разных концентраций этилового спирта получаются величины, незначительно отличающиеся друг от друга, их умножают на 100 и результаты умножения наносят на ось ординат калибровочного графика. На ось абсцисс калибровочного графика наносят значение концентраций этилового спирта (в % ).

Определение этилового спирта в крови и моче. Во флакон из-под пенициллина вносят 2 мл раствора внутреннего стандарта (пропилового спирта, концентрация которого составляет 4% ), прибавляют 2 мл крови или мочи, подлежащей исследованию на наличие этилового спирта. Содержимое флакона хорошо взбалтывают, а затем 1 мл жидкости (смеси крови или мочи с внутренним стандартом) переносят в другой флакон из-под пенициллина и прибавляют 0,5 мл 50 %-го раствора трихлоруксусной кислоты. Флакон закрывают резиновой пробкой, которую закрепляют фиксатором. При помощи шприца через пробку во флакон вносят 0,25 мл 30%-го раствора нитрита натрия. Содержимое флакона взбалтывают в течение одной минуты. Затем при помощи другого сухого шприца отбирают из флакона 3 мл газообразной фазы, которую переносят в дозатор хроматографа, и проводят хроматографирование.

На хроматограмме определяют площади или высоты пиков и рассчитывают отношение площади или высоты пика этилового спирта к площади или высоте пика внутреннего стандарта. На основании этого отношения, умноженного на 100, по калибровочному графику рассчитывают содержание этилового спирта в крови или в моче (в % ).

При определении этилового спирта в крови найденную по калибровочному графику концентрацию этого спирта умножают на 0,95, а найденную концентрацию этилового спирта в моче умножают на 1,05.

источник

Токсикант – бесцветная, прозрачная жидкость, не отличающаяся по запаху, цвету и вкусу от этилового спирта, эйфорическая фаза отравления выражена слабо, быстро нарастает общетоксическое действие. У всех больных наблюдалась общая слабость, острота зрения снижается, перед глазами ощущались «туман» или «сетка», тошнота, боли в животе и рвота. В организме метаболизирует до формальдегида. Представьте схему исследования биологических объектов (внутренних органов, крови, мочи) на присутствие данного ядовитого вещества.

Исходя из обстоятельств, изложенных в задаче, следует предположить, что отравление произошло метиловым спиртом.

Объекты анализа:

• рвотные массы, промывные воды желудка;

Метаболизм метилового спирта происходит по пути его окисления до формальдегида, муравьиной кислоты. Конечные продукты окисления — оксид углерода(IV) и вода. Процесс окисления идет по схеме:

Изолирование биологических объектов проводят перегонкой с водяным паром. Биологический материал смешивают с дистиллированной водой до густоты кашицы и помещают в круглодонную колбу (2) с таким расчетом, чтобы колба была заполнена не более чем на 1/3 ее объема.

Колбу с объектом закрепляют в штативе и закрывают пробкой так, чтобы конец стеклянной трубки, вводящей пар, доходил почти до дна колбы. Дистилляция производится по возможности медленно, так, чтобы можно было считать капли в приемнике.

При специальном исследовании на метанол приемник охлаждают льдом для уменьшения потерь искомого токсического вещества.

Обнаружение

Для обнаружения метилового спирта в крови, моче и биологическом материале используют метод газожидкостной хроматографии (основной) и характерные химические реакции (подтверждающее исследование).

Метод газожидкостной хроматографии. Обнаружение метилового спирта проводят по соответствующим параметрам удерживания алкилнитритным методом. Качественные параметры: время удерживания, объем удерживания, расстояние удерживания. Если при анализе на хроматограмме не обнаружено пика, который по времени удерживания соответствует метилнитриту, исследование на метиловый спирт прекращают.

Качественный анализ спиртов алкилнитритным методом ГЖХ

Если на хроматограмме получен пик метилнитрита, проводят подтверждающие химические реакции: окисление до формальдегида с последующим его обнаружением и образование сложного эфира с салициловой кислотой (метилсалицилата).

Реакция окисления метилового спирта до формальдегида. К 5 мл дистиллята добавляют 2 мл 10% раствора серной кислоты. Жидкость охлаждают, помещая пробирку в холодную воду, содержащую кусочки льда. Затем по каплям в исследуемую смесь добавляют 1% раствор перманганата калия до сохраняющейся розовой окраски.

Через 20 мин добавляют по каплям 15% раствор сульфита натрия до обесцвечивания раствора.

Окисление метанола необходимо проводить в присутствии разбавленной серной кислоты и при охлаждении, так как при наличии в дистилляте этилового спирта, при бурном течении реакции и разогревании смеси он подвергается дегидратации с последующим окислением образующегося этилена до формальдегида. Это может привести к переоткрытию метанола за счет этилового спирта.

Бесцветный раствор делят на 2 части и проводят реакции, характерные для формальдегида.

Реакция с раствором фуксинсернистой кислоты. К одной части раствора добавляют 3 капли концентрированной серной и 1 мл раствора фуксинсернистой кислоты. Наблюдают появление сине-фиолетового окрашивания. Окраску, которая появляется через 30 мин и более, во внимание не принимают. Чувствительность реакции — 0,1 мг метилового спирта в 1 мл дистиллята.

Реакция с кодеином и концентрированной серной кислотой. К 5 каплям концентрированной серной кислоты в фарфоровой чашке добавляют несколько крупинок кодеина и стеклянной палочкой — 1-2 капли исследуемого раствора; наблюдают появление сине-фиолетового окрашивания. Чувствительность реакции — 0,1 мг метилового спирта в 1 мл раствора.

Реакция образования сложного эфира с салициловой кислотой (метилсалицилата). К 1 мл дистиллята добавляют 0,03 г салициловой кислоты и 2 мл концентрированной серной кислоты. Смесь тщательно перемешивают и осторожно нагревают на пламени горелки, а затем выливают в 20-кратный объем воды очищенной — ощущают характерный запах метилового эфира салициловой кислоты.

Оценка. Реакция неспецифична. Этиловый спирт с салициловой кислотой образует продукт с подобным запахом. По реакции можно определить 0,3 мг метилового спирта в исследуемой пробе дистиллята.

Количественное определение

Газожидкостная хроматография определения метанола проводится по методике, описанной в вопросе 4. Расчет содержания метилового спирта в исследуемом объекте проводят по калибровочному графику, по калибровочному коэффициенту или методом внутреннего стандарта. В качестве внутреннего стандарта используется – этанол или н-пропанол.

источник

Этиловый спирт — подвижная, бесцветная, летучая жидкость с характер­ным запахом и жгучим вкусом. Смешивается во всех отношениях с водой, эфиром. Удельный вес 0,813-0,816, температура кипения 77-78,5°. Горит синеватым пламенем.

Из биологического материала (внутренние органы трупов) этиловый спирт отгоняется в первые порции дистиллята. Обна­ружение и определение этилового алкоголя в крови и моче как живых лиц, так и трупов в настоящее время возможно непо­средственно с применением газо-жидкостной хроматографии.

Качественное обнаружение этилового алкоголя в дистиллятах. 1. Реакцией образования йодоформа:

При исследовании осадка йодоформа под микроскопом наблюдаются характерные шестиугольные таблички и звез­дочки.

Реакция образования йодоформа является чувствительной, по­зволяет обнаружить 0,04 мг спирта в 1 мл, но неспецифичной. Свойством давать при этих же условиях йодоформ обладает ряд органических веществ, имеющих или способных образовать

группировку атомов CH3C . Это, например, ацетон, молоч-

ная кислота, почти всегда присутствующая в содержимом же­лудка или внутренних органах трупа, и др. Этим определяется отрицательное значение йодоформной реакции: она может ука­зывать только на ненахождение этилового спирта. При положи­тельном результате йодоформной пробы наличие этилового спирта необходимо подтвердить другими реакциями.

2. Реакцией образования сложного эфира с уксусной кисло­той, который обнаруживается по характерному освежающему запаху:

Чувствительность реакции, по данным С. Б. Новикова, состав­ляет 15-20 мг спирта в 1 мл дистиллята.

3. Реакцией окисления этилового алкоголя (5% раствором би-хромата калия в сернокислой среде) до уксусного альдегида — специфический запах:

СН₃СОН окисляется далее до СН₃СООН.

Чувствительность реакции, по определениям С. Б. Новикова, не превышает 3 мг в 1 мл дистиллята 1 .

4. Реакцией получения этилбензоата, обладающего специфиче­ским запахом. Реакция проводится с дистиллятом и бензоилхло-ридом в присутствии 40% раствора едкого натра:

Запах, напоминающий запах бензойноэтилового эфира, может дать метиловый спирт, а потому эта реакция доказательна только в отсутствии метилового спирта.

Чувствительность реакции, по данным С. Б. Новикова, состав­ляет 2-3 мг в 1 мл раствора.

Заключение о качественном обнаружении этилового спирта в дистилляте может быть дано только при положительных ре­зультатах реакций образования сложных эфиров.

Количественное определение этилового спирта в нашей стране производится несколькими методами: а) этилнитритным; б) ме­тодом Видмарка в модификации Шоймоша; в) фотометриче­ским; г) газохроматографическим.

а) Этилнитритный метод. Метод основан на переведе­нии этилового спирта в сложный эфир этилнитрит, омылении его и последующем определении азотистой кислоты — одного из про­дуктов омыления этилнитрита.

Количественному определению этилового алкоголя этилнит­ритным методом предшествует подготовка «укрепленных» дистиллятов, заключающаяся в нескольких повторных пере­гонках.

Так, из 100-200 мл крови, растертой с хлоридом натрия, отго­няют сначала 300 мл дистиллята, затем дистиллят смешивают с раствором едкого натра и хлоридом натрия и отгоняют 200 мл дистиллята, в 20 мл которого после добавления 40 мл воды и производится определение этилового спирта.

Операции, связанные с определением, ведутся в трех дели­тельных воронках объемом 50 мл. В первую воронку помещают 5 мл очищенного четыреххлористого углерода , 10 мл дистилля­та, 1 мл 5 н. раствора НС1 и 2 мл 25% раствора нитрита нат­рия:

Этилнитрит экстрагируется четыреххлористым углеродом. Рас­твор этилнитрита в четыреххлористом углероде переносят во вторую воронку, содержащую 20 мл 0,1 н. раствора едкого нат­ра, и встряхивают — происходит очистка от избытка окислов азота.

В третьей воронке раствор этилнитрита в хлороформе встряхивают с 10 мл раствора виннокаменной и сульфаниловой

кислот. Этилнитрит при этом омыляется и образуется соль диа­зония.

Слой органического растворителя удаляют, а к водному рас­твору диазотированной сульфаниловой кислоты добавляют 10 мл солянокислого раствора а-нафтиламина 3 . Содержимое во­ронки встряхивают — получается осадок или окрашивание вследствие образования азокрасителя:

Осадок растворяют в 5% растворе NaOH (25 мл), переносят в мерную колбу емкостью 250 мл, объем раствора доводят ди­стиллированной водой до метки и фотометрируют или колори­метрируют визуально, сравнивая окраску полученных растворов со стандартной шкалой.

Все операции экстрагирования, связанные с количественным определением этилового спирта этилнитритным методом, должны проводиться быстро и в герметически закупоренных делитель­ных воронках.

Определение повторяют с меньшими количествами дистиллята (например, 5 мл).

Для приготовления стандартной шкалы азокрасителя поль­зуются абсолютным этанолом или этанолом строго определен­ной концентрации по X Государственной фармакопеи. Берут 2,5 мл раствора, содержащего 2%о (весовых) спирта, разбавля­ют его дистиллированной водой и проводят все стадии реакции образования азокрасителя.

Азокраситель растворяют в 25 мл 5% раствора NaOH, коли­чественно переносят в мерную колбу емкостью 500 мл и объем доводят до метки водой. Стандартный раствор азокрасителя со­ответствует содержанию 0,01 мг этанола в нем. Из исходного раствора путем ступенчатого разбавления готовится стандарт­ная шкала. Например 4 объема исходного раствора смешивают с одним объемом воды, что соответствует 0,008 мг/мл; 3 объема исходного раствора и 2 объема воды составят 0,006 мг/мл и т. д.

Расчет этанола а нвеске объекта исследования производится по формуле:

где С -концентрация спирта в 1 мл стандартного раствора, выраженная в миллиграммах; V — общий объем раствора азокрасителя в миллилитрах ана­лизируемой пробы; 60 — общий объем разбавленного дистиллята, взятого для количественного определения в миллилитрах; 10—объем разбавленного ди­стиллята, взятого на определение в миллилитрах; 200 — общий объем вто­рого дистиллята в миллилитрах; 20 — объем второго дистиллята, использо­ванного для определения в миллилитрах; п — навеска объекта исследования в граммах.

Этилнитритный метод обладает высокой чувствительностью и позволяет определять десятые доли промилле этилового спирта. Ю. Г. Твалчрелидзе показал, что этилнитритный метод неприме­ним к исследованию дистиллятов, содержащих формальдегид. Метод трудоемок, связан с затратой большого количества ис­следуемого материала (до 200 мл крови). В судебно-меди­цинской практике метод применяется для исследования крови трупов.

б) Определение этилового спирта микро ме­тодом Видмарка в модификации Шоймоша. Метод был разработан для определения этанола в крови живых лиц. В судебно-химических отделениях судебно-медицинских ла­бораторий Бюро судебно-медицинской экспертизы органов здра­воохранения в исключительных случаях, когда на экспертизу доставлены не подвергшиеся гнилостному разложению очень малые количества крови или тканей трупа, допускается опреде­ление этанола микрометодом Видмарка в модификации Шой­моша. Полученные при этом результаты количественного опре­деления могут иметь только относительное значение.

Принцип микрометода состоит в том, что в колбе определен­ной конструкции спирт из взятой навески крови отгоняют путем суховоздушной дистилляции и поглощают строго определенным количеством смеси бихромата калия с концентрированной сер­ной кислотой. Спирт вступает в реакцию с бихроматом калия, и окисляется до уксусной кислоты, а бихромат калия восстанав­ливается.

Исходя из количества бихромата калия, взятого до анализа и оставшегося неизмененным после реакции со спиртом, вычис­ляют количество его, пошедшее на окисление поглощенного из крови спирта. Умножив это количество на соответствующий коэффициент, получают количество спирта, находящегося в ис­следуемом образце.

Способ позволяет определять наличие спирта при содержании его в исследуемом объекте в количествах 5%о с достаточной точностью.

Как и этилнитритный метод, метод Видмарка — Шоймоша неспецифичен.

в) Фотометрический метод определения эти­
лового спирта был предложен в 1954 г. Feldstem и Klend­
shoj. В СССР разрабатывался В. М. Колосовой и И. С. Каран­
даевым. Метод основан на ускоренной изотермической диффу­
зии этилового спирта из объекта исследования (кровь, моча)
под действием карбоната калия. Спирт восстанавливает бихро­
мат калия в кислой среде; окраска последнего изменяется от
светло-желтой до темно-синей.

По градации переходных оттенков фотометрированием по от­ношению к эталонным растворам этилового спирта и к конт­рольной пробе (дистиллированная вода) определяется содержа­нием спирта в объектах исследования.

Для фотометрирования используется универсальный фотометр ФМ и фотоэлектроколориметры, работающие в видимой области спектра. Определение проводится при длинах волн 436-465 нм.

Количественному определению этилового алкоголя фотомет­рическим методом предшествуют качественные реакции с рас­творами бихромата калия в серной кислоте, перманганата ка­лия в воде и раствора мета-нитробензальдегида в серной кис­лоте. Применение трех реактивов-индикаторов повышает специ­фичность метода (по сравнению, например, с методом Видмарка- Шоймоша) и позволяет в какой-то степени отдифференци­ровать этиловый алкоголь от метилового, пропилового, бутило­вого и изоамилового.

Метод достаточно точен (±0,2%о), позволяет проводить серий­ные анализы, требует затраты малых количеств объекта (по 2 мл крови и мочи), пригоден к исследованию крови и мочи как трупов, так и живых лиц. Метод нашел широкое применение в судебно-медицинской практике.

г) Ферментативный (энзимный) метод, или ме­
тод А Д Г нашел применение в ряде зарубежных лабораторий,
Сущность метода заключается в том, что алкогольдегидрогепаза
(АДГ) катализирует окисление этилового алкоголя в уксусный
ангидрид. Акцептором водорода в данной реакции является ди­
фосфопиридиннуклеотид (ДРМ), который в виде восстановлен­
ной формы адсорбирует в области длин волн 366 нм. С помощью
стандартных растворов строят калибровочный график, а затем
по измеренной на фотометре экстинкции исследуемого раствора
производят расчет концентраций алкоголя

Метод точен (±0,1%), специфичен, удобен при серийных определениях, однако требует специального оборудования, осна­щения и специальных реактивов.

д) Определение методом газ о-ж идкостной хро­
матографии. Неоспоримыми преимуществами перед химиче­
скими методами определения этилового спирта обладает метод
газо-жидкостнои хроматографии — одного из современных видов
распределительной хроматографии.

Определение этилового спирта этим методом является специ­фичным, сравнительно точным — чувствительность метода со­ставляет 0,01%, объективным и доказательным. Газо-жидкост­ная хроматография позволяет разделить спирты — метиловый, этиловый, пропиловый, бутиловый и изоамиловый друг от друга в присутствии других летучих веществ, дать выде­ленным спиртам качественную и количественную характе­ристику.

Газовая хроматография, начав свое бурное развитие в 1952 г., к настоящему времени добилась огромных успехов при анализе

органических веществ. В последнее десятилетие газо-жидкостная хрома­тография начинает широко приме­няться и в химико-токсикологиче­ском анализе при исследовании на наличие летучих веществ: спиртов — метилового, этилового, пропилового и изоамилового, галогенопроизвод­ных — хлороформа, дихлорэтана и др., ароматических углеводородов — бензола, толуола, ксилола, ацет-альдегида и некоторых других токсикологически важных ве­ществ.

Сущность газохроматографическо­го метода обнаружения и определе­ния этилового (и других алифатиче­ских спиртов C₁-С₅) заключается в переведении спиртов в алкилди-триты, которые затем подвергаются разделению на хроматографической колонке. Разделенные на компонен­ты смеси спиртов поочередно посту­пают в детектор по теплопроводно­сти- катарометр, сигналы которого регистрируются самописцем на бу­мажной ленте в виде ряда хромато­графических пиков (рис. 8). В основе детектирования лежит из­мерение различий в теплопроводности чистого газа-.носителя, поступающего в сравнительную камеру детектора, и смеси ана­лизируемого вещества с газом-носителем, выходящей в детектор

Катарометр реагирует на присутствие в анализируемой смеси

практически любого вещества.

Установление подлинности веществ проводится по времени удерживания алкилнитритов па хроматографической колонке. Время удерживания исчисляется от момента введения анали­зируемого вещестпа в колонку до появления максимума пика (на хроматограмме — расстояние от линии введения анализи­руемого вещества до максимума пика).

Расчет концентрации этилового алкоголя производят с по­мощью метода внутреннего стандарта. Внутренним стандартом служит пропиловый спирт, а при его обнаружении в исследуе­мом объекте — изопропиловый спирт.

В методическом письме главного судебно-медицинского экс­перта Министерства здравоохранения СССР подробно описаны условия обнаружения и определения этилового алкоголя, отбор проб и ход анализа, аппаратура и реактивы.

Токсикологическое значение и метаболизм. По серьезности последствий интоксикации этиловый алкоголь занимает одно из первых мест. Нередко он является косвенной причиной большо­го количества смертельных исходов, нетрудоспособности и серь­езных повреждений.

В. А. Балякин приводит данные из своей экспертной практи­ки. На 2075 вскрытий трупов лиц, погибших при несчастных случаях, основной причиной смерти в 22,9% случаев являлся алкоголь. Смертельные исходы в результате уличной транспорт­ной травмы составили 386 случаев, из них 177 (45,8%) относи­лось к лицам в нетрезвом состоянии; среди умерших от охлаж­дения 90% были в состоянии алкогольной интоксикации, а сре­ди пешеходов, попавших под автомобиль,- 76,6%.

Пристрастие к этиловому спирту общеизвестно. Этиловый алкоголь относится к наркотикам. При приемах внутрь он вы­зывает сначала возбуждение, а затем угнетение и паралич центральной нервной системы. Длительное воздействие спирта на организм может привести к тяжелым функциональным рас­стройствам нервной системы, пищеварительного аппарата, сер­дечно-сосудистой системы, печени и т. д.

Картина острого отравления этиловым спиртом является ха­рактерной. Имеют место случаи патологического опьянения, ког­да после сравнительно небольших доз принятого спирта человек впадает в состояние опьянения и теряет способность распозна­вать окружающее, правильно реагировать на него, контролиро­вать свои действия. Такие лица под влиянием алкоголя способ­ны совершать тяжелые антисоциальные поступки, о которых они часто потом не помнят.

При вскрытии трупа в большинстве случаев не обнаружи­ваются характерные изменения. Важными в диагностическом отношении признаками при судебно-медицинском исследовании трупа являются запах спирта от всех органов и тканей, особен­но от мозга и легких, и данные химико-токсикологического ис­следования крови, мочи, а иногда и внутренних органов.

Введенный в организм спирт током крови распределяется от­носительно равномерно по тканям и органам. Наибольшие количества спирта обычно содержатся в крови, головном мозге и тканях, богатых кровью. Однако после всасывания в кровь

около 90% этилового спирта окисляется до воды и угольного ангидрида по схеме:

Реакция эта протекает в печени

Этот процесс протекает главным образом в печени, а так­же в мышцах, почках, легких.

Только около 10% этилового спирта выделяется из организма в. неизмененном виде, причем около 7% легкими,

При гниении крови и других тканей животного организма про­исходит как «новообразование» этилового спирта за счет пре­вращения углеводов крови, высших спиртов, бактериального распада белковых веществ и т. п., так и понижение его концент­рации за счет окисления и улетучивания.

источник

Для того чтобы выявить этанол в организме человека, часто используют лабораторную диагностику и метод забора крови у пациента. Однако не менее достоверным является и анализ мочи на алкоголь. Причем если в случае с кровью удается выявить недавнее употребление спиртных напитков, то при заборе мочи можно сделать выводы о том, что человек употреблял алкоголь несколько дней назад. То есть, в моче этанол сохраняется дольше. О том, как происходит проведение анализа, сколько времени алкоголь держится в урине, что нужно сделать перед анализом мочи и что нужно для получения достоверных результатов, разбираемся в материале ниже.

Перед тем как уяснить принцип проведения анализа урины на наличие в ней этанола (если человек употребил алкоголь накануне) стоит понять, что алкоголь при попадании в организм человека изначально распределяется по кровотоку. То есть всасывается из желудка и кишечника в кровь и уже транспортируется ко всем системам и органам. В результате такого процесса этанол в крови можно выявить уже через 15-20 минут после того, как человек выпьет спиртное. Что касается мочи, то здесь необходимо, чтобы этанол вместе с током крови дошел до почек. И только после того как обогащенная спиртом кровь пройдет очистку и образуется моча, в ней и можно будет увидеть спирт при анализе. В целом скорость выявления этанола в урине пациента (или сколько держится алкоголь в моче) зависит от нескольких факторов:

• Пол пациента;
• Вес человека – не менее влияющий на метаболические процессы фактор;
• Скорость метаболических процессов в его организме;
• Количество выпитого напитка;
• Крепость спиртного;
• Влияющим фактором является и наличие хронических заболеваний;
• Определяющим фактором является и состояние почек и мочевыделительной системы.

Однако в среднем выявить спирт в моче можно уже через 1-2 часа после выпивки. При этом наличие спирта в организме (урине) человека сохраняется еще в течение 1-2 дней с постепенным уменьшением его концентрации.

Важно: ускорить процесс выведения этанола из мочи (более быстро вывести спирт из организма) можно методом приема мочегонных препаратов или обильного питья. Однако при лабораторном анализе специалисты все равно выявят следы спирта в организме (моче) человека.

Ситуации, в которых может потребоваться доказать влияние алкоголя на анализ мочи бывают самыми разными. Однако чаще всего это необходимость освидетельствования правонарушителя. В большинстве случаев — участника ДТП. Стоит отметить, что в основном для освидетельствования нарушителя сотрудники ГИБДД используют алкотестер. Однако если на момент проведения освидетельствования аппарат вышел из строя или, к примеру, человек отказывается от проведения теста, его могут направить сдать мочу на наличие в ней этанола. Если привести все ситуации, при которых требуется проведение подобного анализа, то выглядят они следующим образом:

• Неадекватное поведение нарушителя на дороге при явных отклонениях в показании алкотестера;
• Отказ нарушителя от проведения анализа с помощью алкометра;
• Явный запах алкоголя от человека;
• Отсутствие или поломка прибора, с помощью которого проводят освидетельствование;
• Необходимость заверить документально состояние опьянения нарушителя.

Важно: после нарушения или ДТП желательно сдать анализ урины на алкоголь в течение 6-12 часов. В виде исключения период может быть продлен до 24 часов.

Стоит знать, что выполнение анализа и выведение его результатов не требуют от человека какой-либо специальной подготовки. То есть для исследования на алкоголь перед сдачей можно не предпринимать никаких действий, кроме ограничения приема лекарственных препаратов и спиртных напитков. Также желательно исключить кисломолочные и пивные напитки/квас. Здесь достаточно явиться в специализированное учреждение и собрать мочу (помочиться) в стерильный контейнер. В норме сдавать анализ мочи лучше утром. Но если требуется срочное исследование, то допустимо любое время суток для выполнения анализа. После этого сданный биоматериал забирают для проведения исследования. О том, как сдавать мочу после алкоголя, должен рассказать лаборант в медицинском учреждении. Но в любом случае желательно для сдачи мочи алкоголь в которой присутствует, предварительно соблюсти правила интимной гигиены.

Важно: в норме у здорового человека этанол в моче должен полностью отсутствовать или быть в пределах 0,1%. Однако исключения составляют пациенты, которые имеют хроническое заболевание сахарным диабетом. У таких людей ацетон и сахар в моче могут быть расценены, как алкоголь. Для опровержения результатов человек должен иметь с собой медицинскую карту, в которой указан диагноз пациента.

При выведении результатов анализа полученные данные трактуют таким образом:

• Показатель содержания спирта 0-0,1% — человек трезв и признаки приема алкоголя в ближайшие дни лаборант не нашел или же алкоголь уже весь вывелся.
• Показатель 0,3-1,0% считается сомнительным и может трактоваться как абсолютная трезвость пациента. К такому результату может привести недавний прием кефира, кваса и пр. Именно их спирты найдутпри проведении анализа.
• Показатель в пределах 1,0% и выше свидетельствует о том, что человек в ближайшие 2-3 дня пил спиртные напитки. Причем здесь перед анализом мочибесполезно предпринимать какие-либо действия.

Важно: алкоголь на анализ мочи влияет с точностью 100%. Поэтому если вам необходимо выполнить исследования урины и вы не знаете, можно ли сдавать анализ мочи после пьянки, то потерпите 1-2 дня.

• Крепкие напитки с 40% содержанием спирта в количестве 300 мл выводятся в течение 30 часов. При этом чем меньшей была доза спиртного, тем меньшим будет время присутствия этанола в моче как сторонней примеси. Анализ показываетточную концентрацию спиртного.
• Если принимать менее крепкие напитки (ликер или настойка 24-30%), то срок их выведения с мочой будет около 17-21 час. То есть в течение этого определенного периода определяютналичие спирта в урине. Насколько долго будет оставаться в организме и затем выводиться этанол, зависит и от массы человека.
• Если было выпито вино крепостью 11-18%, то сдаваемыйматериал будет содержать остатки этанола еще 8-13 часов. Продолжительность выведения спирта также варьируется от выпитой дозы и веса испытуемого.
• Если был выпит определенный слабоалкогольный напиток крепостью 9%, то в моче он останется на 3-6 часов и в течение этого времени воздействует на организм.
• О том, как влияет распитие пива на результат анализа мочи, известно, что пенный напиток выводится с мочой в течение 2-4 часов. Определить наличие пива в моче также не сложно, как и наличие крепкого алкоголя.Анализ все покажет без искажения.

Помните, любые химические вещества искажают результаты анализов не только мочи, но и крови.

Такой способ освидетельствования пациента является не только максимально достоверным, но еще и доступным. Кроме того, данный метод проведения анализа на этанол может выявить картину опьянения гораздо в большем периоде, чем анализ крови на алкоголь. Но здесь же каждый потенциальный клиент лаборатории должен понимать, что алкоголь на анализ берется исключительно по добровольному соглашению пациента.

Важно: анализ мочи на наличие в ней алкоголя не дает возможности выявить текущее состояние опьянения. Исследование лишь определяет факт распития алкоголя накануне.

Совет: если вам предстоит исследовать урину для определения физиологических показателей вашего организма, и вы сомневаетесь, влияет ли алкоголь на анализ, то знайте, что алкоголь и анализ мочи несовместимы. Спиртное может повлиять на результат исследования сданного материала.

После выпитого спиртного напитка концентрация всех веществ в моче повышается (мочевая кислота в мочевом пузыре и пр.). Причем это касается даже пива. Многие ошибочно полагают, что этот пенный напиток не влияет на показатели анализа и полученные результаты теста. Однако если вы сомневаетесь, можно ли пить пиво перед сдачей урины, то стоит знать, что пиво, также как и другой алкоголь, отображаются в урине при ее исследовании. Все напитки, влияющие на результат анализа мочи, являются алкогольными. О том, сколько времени после всего выпитого алкоголь пребывает в моче человека, можно узнать из таблицы ниже.

источник