Камера для счета клеток мочи пмма

Слайд-планшеты используют для микроскопического исследования осадка мочи методом Нечипоренко, перитонеальной и синовиальной жидкости, эксудатов, транссудатов и других биологических жидкостей.

Пластиковый слайд-планшет содержит 10 камер для микроскопического исследования нативных или суправитально окрашенных препаратов, приготовленных из биологических жидкостей.

Каждая камера слайд-планшета покрыта тонкой, идеально прозрачной пластиковой пластинкой, играющей роль покровного стекла. Расстояние между поверхностью слайд-планшета и покровным стеклом позволяет клеточным элементам располагаться однослойно.

Длина слайд-планшета 8 см, ширина – 3 см, толщина – 1,7 мм, что примерно соответствует размерам предметных стекол для микроскопии. Например: в 9-ти окружностях камеры слайд-планшета подсчитано 8 эритроцитов, следовательно в 1 мкл жидкости содержится 80 эритроцитов.

Подсчет общего количества клеточных элементов в биологических жидкостях с использованием одной или двух серий окружностей можно производить на малом увеличении микроскопа (окуляр х10, объектив х8 или х10). Дифференциацию клеточных элементов (подсчет лейкоцитарной формулы и количества эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров и других клеточных элементов) ориентировочно можно произвести, используя объектив х20 и окуляры х10. Более точная дифференциация клеток проводится на большом увеличении микроскопа (объектив х40 и окуляры х10).

В каждой камере слайд-планшета слева расположены две серии окружностей, по 9 в каждой. Они видны в проходящем свете и на малом увеличении микроскопа. На большом увеличении микроскопа (окуляр х10 и объектив х40) одна окружность занимает все поле зрения.

Каждая окружность имеет диаметр 0,376 мм, объем одной окружности — 0,011 мкл. Объем каждой серии окружностей составляет 0,011х 9 = 0,099 мкл или ≈ 0,1 мкл. Следовательно, если количество клеточных элементов, подсчитанных в 9 окружностях камеры умножить на 10, то получается содержание клеточных элементов в 1 мкл исследуемой жидкости.

В одной упаковке 100 штук слайд-планшет.

Комфортность и удобство при работе;

При работе со слайд-планшетами не используются предметные и покровные стекла;

Исследование осадка мочи в слайд-планшете позволяет одновременно определить количество клеточных элементов в 1 мл мочи (число Нечипоренко) и получить представление о количестве форменных элементов в поле зрения или в препарате;

Быстрое и достаточно точное определение увеличенного количества клеток в ликворе (плеоцитоз);

Подсчет и дифференциальная диагностика клеток в ликворе и в осадке мочи требуют для каждого анализа пришлифовывать покровное стекло к камере, что вызывает затруднение в работе и отнимает время. Подсчет и дифференциальная диагностика клеток в камере слайд-планшета производится под фиксированным покровным стеклом.

Доставленная в лабораторию моча, собранная после туалета наружных половых органов (желательно средняя порция), аккуратно, без пены размешивается и переносится в 10 мл центрифужную пробирку. Если мочи мало, менее 10 мл, вся доставленная моча выливается в центрифужную пробирку.

Отцентрифугировать со скоростью 1500-2000 об/мин в течение 15 мин.

Надосадочную мочу с помощью пипетки отсосать и оставить в пробирке 1 мл мочи с осадком.

Содержимое пробирки тщательно без пены размешать той же пипеткой.

Каплей мочи с осадком заполнить камеру слайд-планшета. Остатки мочи удалить кусочком фильтровальной бумаги или ватным тампоном.

Слайд-планшет поместить на предметный столик микроскопа и при увеличении х200 или х400 произвести последовательно подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров.

Рассчитать количество форменных элементов в 1 мл мочи по формуле:
N=(x*10*1000)/v,

где:
N — количество форменных элементов в 1 мл мочи;
X — количество форменных элементов в одной серии (9 окружностей) в 0,1мкл;
V — количество мочи в мл, взятой для центрифугирования;
10 — коэффициент пересчета количества форменных элементов в 1 мкл мочи;
1000 — количество мочи в мкл, взятое для исследования.

Если для центрифугирования всегда берется 10 мл мочи, то можно пользоваться следующим вариантом формулы:

Нормальное количество форменных элементов мочи по Нечипоренко:
Лейкоциты — 2000 в 1 мл мочи;
Эритроциты — 1000 в 1 мл мочи;
Цилиндры — 20 в 1 мл мочи.

10-20 капель хорошо перемешанной спинномозговой жидкости поместить в центрифужную или видалевскую пробирку, внести, соответственно, 1-2 капли реактива Самсона и аккуратно, без пены перемешать.

Через 10-15 минут вновь перемешать содержимое пробирки и каплей перемешанного окрашенного ликвора заполнить камеру слайд-планшета.

Лишний ликвор удалить с поверхности слайд-планшета фильтровальной бумагой или ватным тампоном.

Подсчитать общее количество ликворных клеток (в зависимости от выраженности плеоцитоза*).

При слабом плеоцитозе, при условии, что клетки в камере распределены равномерно и попали в ячейки, можно подсчитать их количество в 18 ячейках камеры слайд-планшета. Полученное в 0,2 мкл ликвора количество клеток (в 18 ячейках) пересчитать на их содержание в 1 мкл ликвора по формуле:

где:
Х — количество клеток в 1 мкл ликвора;
А — количество клеток в 18 ячейках камеры слайд-планшета (в 0,2 мкл ликвора);
10 — цифра для получения количества клеток в 2 мкл;
2 — цифра для пересчета количества клеток на 1 мкл ликвора.

Если клеток очень много (умеренный или выраженный плеоцитоз), можно считать клетки в 9 ячейках камеры слайд-планшета и расчет производить по формуле: Х = В х 10, где:
Х — количество клеток в 1 мкл ликвора;
B — количество клеток в 9 ячейках камеры слайд-планшета (в 0,1 мкл ликвора);
10 — цифра для получения количества клеток в 1 мкл ликвора.

Если клетки покрывают все ячейки камеры (резко выраженный или массивный плеоцитоз), можно считать клетки в одной ячейке и расчет производить по формуле: Х = С х 9 х 10, где:
Х — количество клеток в 1 мкл ликвора;
C — количество клеток в одной ячейке камеры слайд-планшета;
9 — цифра для пересчета количества клеток в 9 ячейках камеры слайд-планшета;
10 — цифра для получения количества клеток в 1 мкл ликвора.

В нормальном ликворе взрослого человека практически отсутствуют клеточные элементы: в вентрикулярном ликворе 0-1 клетка/мкл, в субокципитальном — 2-3 клетки/мкл и люмбальном ликворе — 3-5 клеток/мкл. Содержание клеток в нормальном ликворе уменьшается в направлении от люмбального к субокципитальному, а в вентрикулярном — почти равно нулю.

Если клетки в камере слайд-планшета распределились неравномерно, нужно сосчитать клетки во второй серии окружностей и произвести перерасчет на 1 мкл ликвора.

В камере слайд-планшета при патологии обычно содержится достаточное количество клеток, позволяющее сосчитать лейкоформулу ликвора. Дифференциацию клеточных элементов необходимо производить при увеличении х 400. Результат выражается в процентах или в абсолютном количестве подсчитанных клеток. Например: общее количество клеток 39, из них: 15 нейтрофилов, 10 лимфоцитов, 5 моноцитов, 4 макрофага, 2 эозинофила и 3 плазматических клетки.

Если в камере слайд-планшета клеток мало (единичные) и решается вопрос о нормальном или патологическом количестве клеточных элементов в ликворе, необходимо провести подсчет в камере Фукса-Розенталя.

Поиск патологических клеточных элементов, тканевых клочков, комплексов клеток злокачественных новообразований, клеток арахноэндотелия, кристаллов всегда производится на малом увеличении микроскопа.

источник

В каталоге представлены: индикаторные полоски для определения pH, контрольная моча URINORM, ОК-Тест, слайд-планшеты, Reastain Urine для исследования элементов осадка мочи.

Индикаторные полоски для определения pH жидкостей представляют собой бумажные полоски с нанесенными на них индикаторами, изменяющими свой цвет в зависимости от pH среды. Они удобны и практичны для правильного приготовления рабочих реагентов и контроля за определенным уровнем pH. Практическое применение индикаторных полосок очень простое и при большом количестве исследований значительно сокращает трудозатраты.

Универсальные индикаторные полоски содержат комбинацию индикаторов:

• синий бромтимоловый,
• картазол желтый,
• бромкрезоловый зеленый,
• бромксиленовый синий,
• бромтимоловый синий.

Предназначены для определения рН в диапазоне 0-12 с шагом 1 единица рН. Упаковка по 100 штук.

Определение скрытой крови в кале. Одна упаковка содержит:

• Набор для взятия кала (8 шт.)
• Полоски OK-ФАН (1 уп./ 50 полосок)
• Инструкцию для врача и пациента (1 шт.).

При помощи одной упаковки ОК-теста можно сделать исследование у восьми пациентов в течение трех последовательных дней. Оценка визуальная, путем сравнения окраски зоны индикации полосок с цветной шкалой на этикетке тубы.

Слайд-планшет для микроскопического исследования осадка мочи и других биологических жидкостей

Пластиковый слайд-планшет содержит 10 камер для микроскопического исследования нативных или суправитально окрашенных препаратов, приготовленных из биологических жидкостей.

Каждая камера слайд-планшета покрыта тонкой, идеально прозрачной пластиковой пластинкой, играющей роль покровного стекла. Расстояние между поверхностью слайд-планшета и покровным стеклом позволяет клеточным элементам располагаться однослойно.

В каждой камере слайд-планшета слева расположены две серии окружностей, по 9 в каждой. Они видны в проходящем свете и на малом увеличении микроскопа. На большом увеличении микроскопа (окуляр х10 и объектив х40) одна окружность занимает все поле зрения.

Каждая окружность имеет диаметр 0,376 мм, объем одной окружности — 0,011 мкл. Объем каждой серии окружностей составляет 0.011×9 = 0,099 мкл или ≈ 0,1 мкл. Следовательно, если количество клеточных элементов, подсчитанных в 9 окружностях камеры умножить на 10, то получается содержание клеточных элементов в 1 мкл исследуемой жидкости.
В одной упаковке 100 слайд-планшетов.

Компания «Erba Lachema» представляет набор суправитальных красителей Reastain Urine для исследования элементов осадка мочи. Красители предназначены для стандартизированного, быстрого и более точного обнаружения и идентификации нейтрофилов, эпителиальных клеток, цилиндров, клеток злокачественных новообразований и других элементов мочевого осадка. Данная методика рекомендована Европейской группой анализа мочи в рамках Европейской конфедерации лабораторной медицины (European Urinalisis Group under European Confederation of Laboratory Medicine).

1. флакон с 50 мл реактива синего цвета
2. флакон с 50 мл реактива красного цвета

Реактивы стабильные, хранятся при температуре (+10 — +25) 0 C. Срок годности указан на упаковке.
Приготовление рабочей смеси: реактивы смешиваются в соотношении 1: 1. Рабочая смесь хранится при комнатной температуре в течение 3 месяцев в защищенном от света месте, в посуде из темного стекла. В готовой смеси при хранении может образовываться осадок. При появлении осадка смесь реактивов необходимо профильтровать через миллипоровый фильтр с диаметром отверстий 0,45 мкм.

Методика окраски осадка мочи
В 0,5 мл осадка мочи ввести с помощью пипетки 50 мкл смеси реактивов (1- 2 капли) и размешать. Через 5 мин нанести с помощью пипетки 20 мкл окрашенного осадка мочи на предметное стекло и покрыть покровным стеклом размером 18 × 18 мм или 22 ×22 мм или заполнить камеру слайд-планшета. Микроскопическое исследование окрашенного осадка проводить сначала на малом увеличении микроскопа (80х , 100х или 200х), а затем на большом (400х).
Примечание: при рН >7,0 и относительной плотности мочи > 1,030 краска может выпадать в осадок.

URINORM контрольная моча — безопасная коррекция правильности результатов, полученных при работе на анализаторах мочи и визуально, благодаря простоте проведения исследования и доступности цены.

URINORM контрольная моча — жидкий, готовый к использованию синтетический материал со значениями концентраций в пределах нормальных и патологических диапазонов(удельный вес, лейкоциты, нитриты, уробилиноген, белок, рН, глюкоза, кетоны, билирубин, кровь). URINORM контрольная моча разработана для проверки и подтверждения точности и воспроизводимости исследований, проводимых диагностическими полосками PHAN визуально и на анализаторах Laura и Laura Smart.

источник

Количественные методы определения клеток в единице объема до сих пор широко используются в работе лабораторий разных направлений. Проведено исследование для оценки воспроизводимости результатов подсчета с помощью камеры Горяева и пластиковых слайд планшетов для микроскопического исследования осадка мочи.

Количественные методы определения клеток в единице объема до сих пор широко используются в работе лабораторий разных направлений. Проведено исследование для оценки воспроизводимости результатов подсчета с помощью камеры Горяева и пластиковых слайд планшетов для микроскопического исследования осадка мочи.

Используя при подсчете клеточных элементов формулы из методического пособия производителя, были достигнуты хорошие результаты. Проведенные параллельные измерения показали, что работа с данными формулами позволяет точно определять количество клеточных элементов.

Количественные методы определения клеток в единице объема образцов биологических жидкостей и сегодня широко используются в работе лабораторий разных направлений — общеклинических, микробиологических и др.

В рамках клинико-лабораторных исследований выполняют подсчет

• числа сперматозоидов в 1 мл эякулята,
• числа лейкоцитов в ликворе
• концентрацию спор возбудителя сибирской язвы В. anthracis в вакцинной культуре [3, 4].

Успеете скачать всё, что нужно, по демодоступу за 3 дня?

В начале прошлого века для подсчета клеток крови применялся аппарат Тома — Цейсса, на смену ему пришла камера Предтеченского и, наконец, с середины прошлого века для подсчета клеток стали использовать сетку камеры Горяева, состоящую из 225 больших квадратов, 25 из которых разграфлены на 16 маленьких [2]. До настоящего времени она является основным инструментом подсчета клеток при проведении анализа мочи по методу Нечипоренко [1].

Принцип формирования сеток во всех камерах один и тот же.

Камеры разделены на некоторое число квадратов, различным образом сгруппированных. Зная объем квадрата, можно произвести расчет и определить количество клеток в единице объема образца.

Контрольных материалов для оценки результатов исследования мочи по методу Нечипоренко не существует. Камеры не подвергаются калибровке, ни одна система внешней оценки качества не имеет в своем арсенале контрольных образцов, в работе с которыми нужно применять камеру Горяева.

Таким образом, оценить правильность полученных результатов — дело непростое.

Перед началом использования в работе пластиковых слайд-планшетов (Aptaca, Италия) для микроскопического исследования осадка мочи и других биологических жидкостей мы решили провести исследование, целью которого было оценить точность и воспроизводимость результатов подсчета.

В качестве материала для исследования были взяты образцы крови 16 больных.

Подсчет проводился тремя врачами клинической лабораторной диагностики, которые определяли количество лейкоцитов при помощи слайд-планшета и для сравнения — с использованием камеры Горяева.

В качестве контрольных использовались данные, полученные на автоматическом гематологическом анализаторе Сисмекс KX-21N.

Для проверочного исследования мы выбрали подсчет форменных элементов крови, а не мочи, в связи с тем что контроль их количества можно осуществить автоматизированным способом.

• Камера Горяева предназначена для подсчета форменных элементов крови и клеточных элементов спинномозговой жидкости. Площадь камеры — 9 мм², глубина — 0,1 мм, объем — 0,9 мм³.
• Слайд-планшет содержит ячейки, которые снабжены сеткой для подсчета (3×3 мм) и покрыты тонкой прозрачной пластиковой пластинкой. Каждая сетка поделена на 5 квадратов (1×1 мм), которые, в свою очередь, разделены на 9 маленьких квадратов (0,333×0,333 мм).

Подсчет велся согласно инструкции, опубликованной на сайте компании-производителя.

Среднее значение количества лейкоцитов:

• полученное при исследовании на автоматическом анализаторе, составило 5950 ± 2407×109/л (M ± SD),
• при подсчете с помощью камеры Горяева (среднее значение результатов анализа, выполненного тремя врачами) — 4916 ± 1794,4×109/л,
• при использовании слайд-планшета (среднее значение, полученное тремя врачами) — 9477 ± 3624×109/л.

Результаты подсчета количества лейкоцитов с использованием камеры Горяева и с использованием слайд-планшета достоверно отличались от данных, полученных на автоматическом анализаторе Sysmex KX-21 N.

Результаты подсчета с помощью камеры Горяева и на автоматическом анализаторе, полученные двумя врачами из трех, достоверно не отличались, но существенно отличались от значений, полученных при работе со слайд-планшетом.

Особенно важно, что при использовании слайд-планшета были выше не только собственно средние значения числа лейкоцитов, но и дисперсия полученных результатов, оказавшаяся достоверно большей, чем дисперсия результатов, полученных с применением автоматического анализатора.

В литературе найти описание нашей проблемы или ее решение нам не удалось. Обратившись к производителю за разъяснениями, мы получили великолепную инструкцию, в которой имелись ответы на все наши вопросы.

Оказалось, что необходимо выбирать способ подсчета элементов в зависимости от клеточности образца.

1. При высокой клеточности необходимо подсчитать количество элементов в 5 разных малых квадратах, строго следя за тем, чтобы подсчет не проводился в одних и тех же квадратах.
2. При низкой клеточности необходимо подсчитать количество элементов в 10 разных малых квадратах, строго следя за тем, чтобы подсчет не проводился в одних и тех же квадратах.

Дальнейшие подсчеты ведутся согласно формулам, приведенным ниже.

Tμ = n / (k x N x 10) или Tml = (n x 1000) / (k x N x 10),

• n — количество клеток, подсчитанных в малых квадратах;
• N — количество малых квадратов, в которых велся подсчет;
• k — 0,01111 — объем малого квадрата;
• 10 — количество миллилитров мочи, подвергнутых центрифугированию;
• Tμ — количество клеток в микролитре;
• Tml — количество клеток в миллилитре.

Также методическое пособие содержит формулы для работы с образцами, которые не подвергаются центрифугированию:

Tμ = n / (k x N) или Tml = (n x 1000) /(k x N) .

Используя данный подход к подсчету клеточных элементов, мы смогли добиться хороших результатов. Проведенные параллельные измерения показали, что работа с данными формулами позволяет точно определять количество клеточных элементов.

Применяя данные рекомендации, мы смогли использовать слайд-планшет для микроскопического анализа мочи, количественного определения по методу Нечипоренко, а также для подсчета клеток в любом биологическом материале.

На наш взгляд, эта тема представляет практический интерес, т. к. камеры для подсчета клеток широко применяются и по сей день. Своей скромной публикацией мы открываем площадку для обсуждения.

Список использованной литературы

1. Нечипоренко А. З. Определение количества лейкоцитов и эритроцитов в 1 мл мочи // Лабораторное дело. 1969. № 2. С. 121. 2. Предтеченский В. Е. Руководство к клинической микроскопии. М.: Типо-литографияТ-ваИ. Н. Кушнерев и Ко, 1901. 256 с. 3. Методические указания. МУ 3.3.1.1112–02. Основные требования к вакцинным штаммам сибиреязвенного микроба для иммунизации людей. (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 26.02.2002). 4. СП 3.3.2.561-96. 3.3.2. Медицинские иммунобиологические препараты. Государственные испытания и регистрация новых медицинских иммунобиологических препаратов. Санитарные правила (утв. постановлением Госкомсанэпиднадзора РФ от 31.10.1996 № 33).

источник

Кулешова С.В. заведующая КДЛ, врач высшей категории
Москалева С.П.врач высшей категории
Зорина Л.В. врач высшей категории
Григорьева Е.В. врач высшей категории
Минушкина Л.О. д.м.н., профессор кафедры терапии, кардиологии и функциональной диагностики Учебно-научного медицинского центра УДП РФ

При переходе на новые методики сотрудникам лаборатории следует внимательно изучать инструкции и тестировать новинки перед составлением стандартных операционных процедур. В статье рассматриваются проблемы, с которыми может столкнуться любая лаборатория при модернизации. Успешный опыт внедрение пластиковых слайд-планшетов для исследования мочи и сложности, возникшие в процессе внедрения предложены для обсуждения.
Summary the introduction of new techniques requires careful study guide and test innovations prior to the preparation of standard operating procedures. The article discusses the problems that can face any laboratory at modernization. The successful introduction of the plastic slide plates urine and difficulties encountered in the implementation process proposed for discussion.
«С микроскопическим исследованием мочи каждый врач должен быть знаком самым обстоятельным образом, так как в некоторых случаях только путём такого исследования и возможна точная и решительная диагностика данного страдания.» В.Е. Предтеченский

Пациент К. 34 лет обратился к терапевту для получения санаторно-курортной карты. На приеме активно жалоб не предъявляет. При осмотре общее состояние удовлетворительное. Температура тела 36.6°С. Сознание ясное. Кожные покровы обычной окраски. Видимые слизистые розовые. Лимфоузлы не увеличены. Отеков нет. Системы органов дыхания, система органов пищеварения без патологии. Тоны сердца звучные, ритм правильный. ЧСС 68 в мин. Артериальное давление 120/80 мм. рт. ст. Симптом поколачивания — отрицательный. Мочеиспускание безболезненное. Даны направления на анализы в необходимом объеме. По результатам выполненных анализов патология не выявлена. Пациенту выдается медицинская справка формы №072/у. После санаторно-курортного лечения в выписном эпикризе пациенту были даны рекомендации обратиться к нефрологу в связи с изменениями в анализе мочи по методу Нечипоренко. В анализе отмечалось увеличение количества эритроцитов до 2400 клеток в мл. и лейкоцитов до 4800 клеток в мл.
Пациент К. был вызван для обследования, в ходе которого проводилось исследование мочи, крови, консультация уролога, нефролога и терапевта. Результаты анализов были в пределах референтных значений. Консультации специалистов патологии не выявили. Было решено связаться с лечащим врачом пациента К. для уточнения результатов анализов. В ходе детального и подробного опроса выяснилось, что объяснить отклонения в результате анализа мочи выполненного по методу Нечипоренко специалистам санатория тоже не удалось. Клинически данных за почечную патологию у пациента К. в течение всего срока пребывания в санатории не было. Однако, после расспросов о методах и способах исследования выяснилось, что подсчет форменных элементов в моче велся врачами не с использованием камеры Горяева, а в пластиковом планшете. Данный случай привлек наше внимание, и мы стали интересоваться случаями несоответствий клинической картины у пациентов с данными анализа мочи по методу Нечипоренко. Анализируя в течение полугода результаты пациентов, полученные в нашей лаборатории с данными этих же пациентов, полученными в других лечебных учреждениях, мы выяснили, что в ряде случаев имеются завышенные результаты анализа при использовании слайд-планшетов при отсутствии клинических проявлений болезни, функциональных изменений и при нормальных значениях анализов в нашей лаборатории.

История приборов для подсчёта клеточных элементов насчитывает уже более 150 лет. Сетки в счетных камерах, предложенных различными авторами неодинаковы как по рисунку, так и по площади.

В начале прошлого века для подсчёта клеток крови применялся аппарат Тома-Цейсса (рис.1), который в дальнейшем был заменён на камеру Предтеченского (рис.2) и , наконец в середине прошлого века прибор обрёл современный вид – сетку камеры Горяева, состоящую из 225 больших квадратов, 25 из которых разграфлены на 16 маленьких. Она и используется сегодня как основной инструмент подсчёта клеток в 1 мл.мочи по методу Нечипоренко

Рисунок 2. Сетка Предтеченского

Принцип сеток в камерах один и тот же. Они разделены на то или иное число квадратов, различным образом сгруппированных. Зная объём квадрата можно произвести расчёт и определить количество клеток в единице объёма.

Перед вводом в работу пластиковых слайд — планшетов мы решили провести исследование, целью которого было оценить воспроизводимость результатов подсчёта с помощью камеры Горяева и нового пластикового слайд-планшета.

Материал и методы исследования

В качестве материала для исследования были взяты образцы крови 16 больных. Проводился подсчёт количества лейкоцитов. В качестве контрольного измерения использовались данные автоматического гематологического анализатора Сисмекс KX-21N. Подсчёт также велся 3 независимыми врачами, которые определяли количество лейкоцитов с помощью камеры Горяева и слайд-планшета.
Камера Горяева предназначена для подсчёта форменных элементов крови и клеточных элементов спинномозговой жидкости. ТУ9443-007-29508133-2007 ,РУ МЗ № ФСР 2008/02731 от 11.06.2008 г. Технические данные камеры : площадь — 9 мм2, глубина — 0,1 мм, объём — 0,9 мм3.
Камера (слайд-планшет) для микроскопического исследования осадка мочи и других биологических жидкостей, Aptaca. Каждая ячейка снабжена сеткой для подсчёта (3х3 мм) и покрыта тонкой прозрачной пластиковой пластинкой, играющей роль покровного стекла. Каждая сетка поделена на 5 квадратов (1х1 мм), которые в свою очередь разделены на 9 маленьких квадратов (0,333х0,333 мм). Изготовлена камера из полиметилметакрилата (ПММА). Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2011/09223 от 19 марта 2012 г. Подсчёт вёлся согласно инструкции, опубликованной на сайте производителя [5].

Для исследования мы брали образцы венозной крови, определяя количество лейкоцитов с помощью автоматического гематологического анализатора Сисмекс KX-21N ( Sysmex KX-21N ) Производитель: Roche Diagnostics (Швейцария).

Результаты исследования

Проанализировано 16 проб. Подсчет вёлся независимо 3 врачами с высшей категорией. Средние значения количества лейкоцитов по данным анализатора составили 5950±2407*109/л(M±SD), при подсчёте с помощью камеры Горяева (средние данные у 3 независимых врачей) 4916±1794,4*109/л , с помощью слайд планшета (средние данные у 3 независимых врачей) — 9477±3624*109/л. Данные подсчёта и с использованием камеры Горяева и с использованием слайд — планшета достоверно отличались от данных автоматического анализатора Sysmex KX-21 N. Для двух врачей из трёх результаты подсчёта с помощью камеры Горяева и автоматического анализатора достоверно не отличались, но существенно отличались от значений, полученных при работе со слайд-планшетом

Рисунок3. Дисперсия результатов подсчёта форменных элементов крови с помощью камеры Горяева и слайд-планшета.

Обращает на себя внимание, что при подсчёте с помощью слайд -планшета были выше не только собственно средние значения количества форменных элементов крови, но и дисперсия полученных результатов, оказавшаяся достоверно большей, чем дисперсия результатов автоматического анализатора. Наименьшая дисперсия значений количества форменных элементов наблюдалась при использовании камеры Горяева (Рис 3).

Обсуждение результатов

Проведенное нами исследование показало существенные расхождения в подсчёте количества форменных элементов крови с помощью различного лабораторного оборудования. Ранее мы, проводя подсчёт в камере клеточных элементов для анализа мочи по Нечипоренко с помощью слайд-планшета, получали результаты, которые не укладывались в референсные значения. В литературе найти описание нашей проблемы или ее решение нам не удалось.
Следует также отметить, что имелись существенные разночтения, между официальной инструкцией на русском языке, и инструкцией, полученной нами непосредственно от производителя.
Мы в работе ориентировались на инструкцию, предоставленную производителем оборудования. Для собственного исследования мы выбрали подсчёт форменных элементов крови, а не мочи, в связи с тем, что имели автоматизированный способ контроля их количества.
Следует отметить, что подсчёт клеточных элементов в камере Горяева оказался более точным. У двух врачей из трёх результаты измерений достоверно не отличались от данных автоматического анализатора. Полученные данные при использовании слайд-планшета у всех трёх врачей существенно отличались, как от данных анализатора, так и от данных, традиционного подсчёта с помощью камеры Горяева. Работа с камерой Горяева позволяет получить меньший разброс результатов, чем работа со слайд — планшетом.
Таким образом, при переходе к иному методу подсчёта (например, при замене камеры Горяева на слайд-планшет для выполнения анализа по методу Нечипоренко) использование существующих референтных значений вряд ли допустимо.
При работе с другим материалом, заменяя камеру Горяева на слайд -планшет, необходимо предварительно проверить возможность использования существующих норм. Результаты, полученные при работе со слайд-планшетами часто оказываются выше, чем при использовании других методов.
На бланке с результатом следует указывать прибор, использованный в работе – камера Горяева или пластиковый слайд-планшет. Это важно для корректного сравнения результатов.
Также необходимо учесть, что инструкция, прилагаемая к слайд-планшетам не приводит полный объём информации для безопасного использования. В случае подсчёта клеток по методу Нечипоренко нельзя пользоваться предложенной формулой в инструкции без применения коэффициента концентрации. Данные по коэффициенту приводятся в полной версии инструкции производителя, либо высчитываются самостоятельно.

На наш взгляд эта тема представляет практический интерес, т.к .камеры для подсчёта клеток широко применяются и по сей день. Своей скромной публикацией мы открываем площадку для обсуждения. Просим откликнуться, и присоединиться к обсуждению специалистов разных направлений, в работе которых есть опыт внедрения слайд-планшетов.

Использованная литература:
1. «Руководство к клинической микроскопии.» В.Е.Предтеченский. Москва 1901 г. Типо-литография Т-ва И.Н.Кушнерев и Ко. 256 с 101ил

источник

КАМЕРЫ СЧЁТНЫЕ — приборы для подсчета форменных элементов крови, мочи и цереброспинальной жидкости, а также микроорганизмов. Предложена К. с. франц. физиологом Малассе (L. Ch. Malassez) в 1874 г.

К. с. представляют собой толстое предметное стекло с углублением, на дне к-рого выгравирована счетная сетка; над углублением накладывают шлифованное покровное стекло. Постоянная высота К. с. обеспечивается плотным притиранием покровного и предметного стекол до образования радужных ньютоновых колец (полосы интерференции).

Структурными элементами всех типов сеток являются большие и малые квадраты. Сетки различных типов — Тома, Бюркера, Предтеченского, Тюрка, Нейбауэра, Горяева, Фукса — Розенталя и др.— отличаются различным группированием больших и малых квадратов.

Известные величины — высота камеры, площадь сетки и ее делений и разведение взятой для исследования крови — позволяют высчитать количество форменных элементов в определенном объеме (1 мкл) крови (или другой среды).

Различают открытые и закрытые К. с. В закрытой камере покровное стекло притирают после ее заполнения, и при этом в нее могут попасть пузырьки воздуха. Такие К. с. (Тома — Цейсса с сеткой Тома, Дунгера с особой сеткой) неудобны в работе и не используются.

Открытые камеры (рис. 1) заполняются после притирания покровного стекла. Они имеют две сетки на одном предметном стекле. Пластинки с выгравированными сетками отграничены желобками одна от другой, а также от остальной части предметного стекла. Наличие желобков дает возможность регулировать заполнение камер. Некоторые камеры снабжены металлическими зажимами, фиксирующими покровное стекло.

Открытые К. с. впервые описал С. П. Алферов в 1883 г., затем в 1905 г. Бюркер (К. Burker). Известны открытые счетные камеры Ключарева, Гауссера и Леви, Гельбера, Глауберманна. В СССР широко применяются счетные камеры Горяева и Фукса — Розенталя. Камера Горяева с сеткой Горяева (рис. 2) имеет объем 0,9 мкл, площадь сетки 9 мм 2 . Сетка состоит из 225 больших квадратов; из них 100 — пустые, 25 — разделены каждый на 16 малых квадратов, 100 — разделены полосами.

Счетная камера Фукса — Розенталя с сеткой Фукса — Розенталя (рис. 3) имеет объем 3,2 мкл, площадь сетки 16 мм 2 , она состоит из 256 больших квадратов (квадраты, разделенные полосами, не считают).

Перед работой предметное стекло К. с. и шлифованное покровное стекло моют под струей водопроводной воды и насухо вытирают. Затем плотно притирают покровное стекло к камере (до появления радужных ньютоновых колец, ибо только при этом условии объем К. с. постоянен).

Содержимое пробирки перед заполнением камеры несколько раз перемешивают, затем оплавленным концом стеклянной палочки отбирают из пробирки, наклоняя ее, каплю крови и наносят на предметное стекло у самого края покровного стекла. Если одной капли крови недостаточно для полного заполнения К. с., добавляют еще каплю. Если кровь взята в смеситель, то первые капли из капилляра смесителя выпускают, а К. с. заполняют каплей из ампулы смесителя. Остатки жидкости с предметного стекла удаляют марлевым тампоном. Подсчет начинают через 3 мин. после заполнения камеры (за это время происходит оседание форменных элементов крови) под микроскопом при малом увеличении (объектив X 8, окуляр X 10 или X 15) и затемненном поле зрения (с прикрытой диафрагмой или при несколько опущенном конденсоре). Счету подлежат клетки, лежащие внутри квадрата (рис. 4). Клетки, пересеченные сторонами квадратов, считают следующим образом: если более половины клетки находится внутри квадрата, то ее считают, если вне — ее не считают. Клетки, пересекаемые линиями точно посередине, считают на двух смежных, правой и верхней, линиях квадратов и не считают на двух других. При использовании соответствующих разводящих р-ров эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, эозинофилы, базофилы и ретикулоциты могут быть подсчитаны в камере Горяева.

Эритроциты считают в 80 малых квадратах, т. е. в 5 больших квадратах, расположенных по диагонали. Расчет проводится по формуле:

где а — количество эритроцитов, подсчитанное в 80 малых квадратах, 80 — количество сосчитанных малых квадратов, 200 — степень разведения крови, 4000 — множитель для получения содержания эритроцитов в 1 мкл крови (объем малого квадрата 1/4000 мкл). Практически количество эритроцитов, подсчитанное в 5 больших квадратах, умножают на 10 000.

Лейкоциты подсчитывают в 1600 малых квадратах (в 100 больших квадратах). Расчет проводится по формуле:

где а — количество лейкоцитов, подсчитанное в 1600 малых квадратах, 1600 — количество сосчитанных малых квадратов, 20 — степень разведения крови, 4000 — множитель для получения содержания лейкоцитов в 1 мкл крови. Практически количество лейкоцитов, подсчитанное в 1600 малых квадратах, умножают на 50.

Тромбоциты подсчитывают в 400 малых квадратах (25 больших квадратах по диагонали сетки). Реактивами для разведения могут быть изотонический р-р хлорида натрия, различные р-ры, консервирующие тромбоциты и гемолизирующие эритроциты.

Считают тромбоциты под обычным микроскопом и с помощью фазово-контрастного устройства (см. Фазово-контрастная микроскопия) для более четкого выявления их. После разведения пробирку с кровью оставляют на 25—30 мин. для гемолиза эритроцитов. Затем содержимое пробирки повторно перемешивают и заполняют К. с., к-рую помещают на 5 мин. во влажную камеру (напр., чашки Петри с влажной ватой) для оседания тромбоцитов. Расчет проводят по формуле:

где а — количество тромбоцитов,, подсчитанное в 400 малых квадратах, 200 — степень разведения крови, 400 — число сосчитанных малых квадратов, 4000 — множитель для получения содержания тромбоцитов в 1 мкл крови. Практически количество тромбоцитов, подсчитанное в 400 малых квадратах, умножают на 2000.

Количество базофилов и эозинофилов подсчитывают в камере Горяева в 1600 малых квадратах, как и лейкоциты. Практически подсчитанное количество базофилов и эозинофилов умножают на 50.

Ретикулоциты подсчитывают в камере Горяева в 80 малых квадратах, как эритроциты. Практически подсчитанное количество ретикулоцитов умножают на 10 000.

Определение общего количества клеток в цереброспинальной жидкости (см.) лучше производить в камере Фукса — Розенталя (из-за небольшого числа лейкоцитов в цереброспинальной жидкости). Подсчитывают по всей сетке (256 больших квадратов) под малым увеличением микроскопа (окуляр X 15, объектив х 8).

При очень большом количестве клеток допускается подсчет половины сетки (с последующим умножением результата на 2). Расчет проводят по формуле:

где а — количество клеток, подсчитанное в 256 квадратах, 11/10— степень разведения, 3,2— объем камеры в мкл. Практически при подсчете в камере Фукса — Розенталя число лейкоцитов делят на 3.

В камере Горяева клетки цереброспинальной жидкости считают не менее 3 раз (также всю площадь), каждый раз заполняя камеру заново, затем берут среднее арифметическое. Расчет проводят по формуле:

где а — среднее арифметическое количество клеток, подсчитанное по всей сетке, 11/10 — степень разведения, 0,9 — объем камеры в мкл. Практически число подсчитанных лейкоцитов умножают на 1,2.

Количественное определение форменных элементов в моче проводит в камерах Фукса — Розенталя, Горяева: подсчет эритроцитов и лейкоцитов при среднем увеличении микроскопа, подсчет цилиндров — при малом. Степень разведения мочи зависит от метода исследования (см. Моча).

Подсчет в К. с. не вполне точен. Ошибка метода составляет от 10 до 20% в зависимости от количества подсчитываемых элементов.

Следует предохранять камеры от загрязнения и попадания пыли на сетку. После работы камеру и покровное стекло моют под струей водопроводной воды и осторожно, но тщательно вытирают чистой салфеткой (можно марлевой). Затем завертывают в бумагу и убирают в коробку.

Библиография: Справочник по клиническим лабораторным методам исследования, под ред. Е. А. Кост, с. 22, М., 1975.

источник

Камера для счёта клеток мочи ПММА,уп.100 шт,(слайд-планшет), Предназначена для микроскопического исследования осадка мочи и других биологических жидкостей. Представляет собой пластиковый планшет на 10 ячеек. Каждая ячейка снабжена сеткой для подсчета (3х3 мм) и покрыта тонкой прозрачной пластиковой пластинкой, играющей роль покровного стекла. Каждая сетка поделена на 5 квадратов (1х1 мм), которые в свою очередь разделены на 9 маленьких квадратов (0,333 х 0,333 мм). Материал – полиметилметакрилат (ПММА). Италия

Опубликованный тендер

Закон, регулирующий правовые отношения в области государственных закупок.

• Переторжка по 44-ФЗ и 223-ФЗ: особенности, процедура проведения
• Как оплатить неустойку по 44-ФЗ
• Сравниваем 44-ФЗ и 223-ФЗ: таблица для чайников
• Существенные условия контракта по 44-ФЗ: что к ним относится и можно ли их изменять?
• В каких случаях указывать и подтверждать страну происхождения товара по 44-ФЗ?
• Способы закупок по 44-ФЗ и 223-ФЗ
• Национальный режим при осуществлении закупок по 44-ФЗ и 223-ФЗ: запреты, ограничения, условия допуска
• Что такое госзакупки: полное определение понятия, виды закупок по 44-ФЗ
• Банковское сопровождение контракта по 44-ФЗ: виды, случаи и порядок осуществления
• Что не так с 44-ФЗ, или Почему злится Артемий Лебедев
• Чем обычный договор отличается от контракта по 44-ФЗ
• Идентификационный код закупки (ИКЗ) по 44-ФЗ: определение, формирование, расшифровка и поиск закупок по ИКЗ
• Независимый регистратор по 44-ФЗ: обзор, функции, цели, плюсы и минусы использования
• Что изменилось в закупках в конце мая: обзор Постановлений Правительства
• Предметы роскоши по 44-ФЗ: как их опознать
• Расширили список запрещенных иностранных товаров по 44 ФЗ
• Вопрос: Я продаю компьютеры. Могу ли я участвовать в закупках по 44фз, если у меня нет документов о том, что эта техника — российского происхождения?
• Оплата по контракту по 44-ФЗ: как получить вовремя
• Как проходят закупки у СМП по 223-ФЗ и 44-ФЗ
• Исключения из правил: что нельзя закупить по 44-ФЗ или 223-ФЗ
• Неустойка по 44-ФЗ: разбираемся с особенностями начисления

ИНН: 3662044189 / КПП: 366501001

• Как отличить убытки от неустойки
• «Зачем потеть и страдать, затачивая техзадание под своего подрядчика?» — подумал как-то заказчик и обратился к компьютерщикам.
• Об исчезновении строительства детского сада.
• Может ли поставщик увидеть заявки конкурентов?
• Как заказчики злоупотребляли своими правами
• Заказчик не платит
• Топ-5 ловушек заказчика в документации
• Общение с заказчиками
• Заказчик разместил аукцион на ремонтные работы. Сроки выполнения работ — нереальные. Стоит ли участвовать?
• Ошибки заказчика и обжалование действий заказчика
• Кто такие государственные заказчики
• ФАС в шоке: новое нарушение госзаказчиков
• Топ-5 ловушек заказчика в техзадании
• Может ли заказчик поменять техзадание после публикации закупки?
• Права поставщика, о которых молчат заказчики
• Контракт исполнен, а оплаты нет — знакомая ситуация?
• Положение о закупках по 223-ФЗ: содержание, структура, примеры
• Любовь заказчика к ПДФ (pdf)

При прокрутке вниз Вы можете получить очень полезную информацию, подобранную специально для Вас нашей программой. А также самые интересные и актуальные статьи о тендерах и закупках, которые мы подобрали для Вас на просторах интернета.

• 1
• 2
• 3
• 4
• 5
• 6
• 7
• 8
• 9
• 10
• 11
• 12
• 13
• 14
• 15
• 16
• 17
• 18
• 19
• 20
• 21
• 22
• 23
• 24
• 25
• 26
• 27
• 28
• 29
• 30
• 31
• 32
• 33
• 34
• 35
• 36
• 37
• 38
• 39
• 40
• 41
• 42
• 43
• 44
• 45
• 46
• 47
• 48
• 49
• 50
• 51
• 52
• 53
• 54
• 55
• 56
• 57
• 58
• 59
• 60
• 61
• 62
• 63
• 64
• 65
• 66
• 67
• 68
• 69
• 70
• 71
• 72
• 73
• 74
• 75
• 76
• 77
• 78
• 79
• 80
• 81
• 82
• 83
• 84
• 85
• 86
• 87
• 88
• 89
• 90
• 91
• 92
• 93
• 94
• 95
• 96
• 97
• 98
• 99
• 100
• 101
• 102
• 103
• 104
• 105
• 106
• 107
• 108
• 109
• 110
• 111
• 112
• 113
• 114
• 115
• 116
• 117
• 118
• 119
• 120
• 121
• 122
• 123
• 124
• 125
• 126
• 127
• 128
• 129
• 130
• 131
• 132
• 133
• 134
• 135
• 136
• 137
• 138
• 139
• 140
• 141
• 142
• 143