При данном виде анализа мочи рабочее место должно быть оснащено следующими элементами:
- Пробирки.
- Пипетки.
- Капельницы.
- Гваяковая смола.
- Бензидин.
- Пирамидон.
- Ледяная уксусная кислота.
- Эфир.
- 96° спирт.
- Пергидроль.
Данная методика основана на следующем принципе: гемоглобин обладает свойством отнимать кислород от пероксидных соединений и отдавать его другим веществам (гваяковой смоле, бензидину, пирамидону); в результате этого образуются красящие вещества. Так, при реакции с бензидином получают зеленое или синее окрашивание, с гваяковой смолой — синее, с пирамидоном — фиолетовое.
При определении кровяного пигмента в моче придерживаются следующих правил:
1. Исследование производят в свежеполученной и хорошо взболтанной моче, в абсолютно чистой посуде. В постоявшей моче гемоглобин превращается в метгемоглобин, не обладающий пероксидазными свойствами, что может послужить причиной отрицательных результатов исследования.
2. Для реакции используют химически чистые и не вышедшие из срока годности реактивы.
3. Концентрируют гемоглобин и освобождают мочу от некоторых сопутствующих веществ (миогемоглобин, хром, медь, йодистый калий, бромистый калий и др.), дающих аналогичный результат реакции. Для этого готовят уксусно-эфирную вытяжку. С этой целью в химическую пробирку наливают 8-10 мл хорошо взболтанной нефильтрованной мочи (если не соблюдать этих указаний, то можно получить отрицательные результаты), 2 мл ледяной уксусной кислоты и 4-5 мл эфира; содержимое пробирки встряхивают и оставляют в штативе на несколько минут для отделения уксусно-эфирной вытяжки, в которую переходит гемоглобин в виде гематина. Верхний слой (уксусно-эфирная вытяжка) используют для проведения реакции.
4. Готовят 3% раствор перекиси водорода из свежего пергидроля : к 3 частям пергидроля прибавляют 27 частей дистиллированной воды. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.
Кровяной пигмент выявляют следующими реакциями:
- реакцией с гваяковой смолой;
- реакцией с бензидином;
- реакцией с пирамидоном.
Рассмотрим данные виды реакций более подробно
Для постановки этой реакции применяют свежеприготовленный насыщенный раствор гваяковой смолы. В пробирку помещают щепотку (на кончике ножа) гваяковой смолы и приливают 2-4 мл 96° спирта, растворяют до цвета крепкого чая. В реакции используют раствор без осадка.
Постановка реакции. В отдельную пробирку помещают 2-3 мл уксусно-эфирной вытяжки и прибавляют 8-10 капель свежеприготовленного насыщенного спиртового раствора гваяковой смолы и 8-10 капель 3% перекиси водорода.
При наличии кровяного пигмента образуется синее окрашивание. При незначительном содержании кровяного пигмента соответствующее окрашивание может появиться не сразу, а через несколько минут после начала реакции.
Для постановки реакции применяют 5% раствор бензидина в ледяной уксусной кислоте. Реактив готовят следующим образом: 0,5 г химически чистого беизидииа помещают в цилиндр и доливают до 10 мл ледяной ускусной кислотой. Приготовленный реактив должен быть бесцветным.
Постановка реакции. В пробирку помещают 2-3 мл уксусно-эфирной вытяжки, после чего прибавляют 8-10 капель 5% раствора бензидина и 8-10 капель 3% перекиси водорода.
При наличии кровяного пигмента образуется зеленое окрашивание.
Для реакции в качестве реактива применяют 5% раствор пирамидона: 0,5 г пирамидона помещают в цилиндр и доливают до 10 мл 96° спиртом.
Постановка реакции. В пробирку помещают 2-3 мл уксусно-эфирной вытяжки, прибавляют 8-10 капель 5% спиртового раствора пирамидона и 8-10 капель 3% перекиси водорода.
При наличии кровяного пигмента образуется фиолетовое окрашивание.
В случае выявления кровяного пигмента в бланке анализа указывают: «кровяной пигмент обнаружен».
источник
Из желчных пигментов в моче определяют билирубин и уробилин.
Определение билирубина (проба Розина).
Проба Розина основана на превращении билирубина под воздействием окислителей (йода) в биливердин, имеющий зеленый цвет.
Диагностическое значение.В норме билирубин в моче не содержится.
Билирубин появляется в моче при механической (подпеченочной) желтухе (ЖКБ, обтурация общего желчного протока опухолью, увеличенными лимфатическими узлами) и паренхиматозной (печеночной) желтухе (вирусный гепатит, хронический гепатит, цирроз печени).
При гемолитической желтухе билирубин в моче не обнаруживается.
Определение уробилина (проба Флоренса, проба Богомолова).
Наиболее чувствительной качественной реакцией на уробилин в моче является проба Флоренса.
Диагностическое значение. В норме в моче может содержаться небольшое количество уробилина.
В больших количествах уробилин в моче обнаруживается при паренхиматозной (печеночной) и гемолитической желтухах.
Микроскопическое исследование осадка мочи.
Микроскопия должна проводиться не позднее 2 часов после сбора мочи, при низкой плотности (менее 1010) – непосредственно сразу после сбора.
Элементы осадка мочи, видимые под микроскопом, разделяют на неорганизованные (соли) и организованные (клеточные элементы, цилиндры).
Неорганизованный осадок мочи.
Неорганизованный осадок мочи состоит из солей, выпавших в осадок в виде кристаллов или аморфной массы. Характер солей в основном зависит от коллоидного состояния и реакции мочи.
Диагностическое значение. Особого диагностического значения неорганизованный осадок не имеет. Обнаружение в осадке большого количества солей при однократном исследовании не может расцениваться как патологическое явление.
Кристаллы мочевой кислоты и ураты встречаются при почечно-каменной болезни, массивном распаде клеток опухоли, лейкемической ткани, а также при лихорадочных состояниях.
Оксалаты обнаруживаются в норме при растительном рационе питания.
Организованный осадок мочи.
К организованному осадку мочи относятся эпителиальные клетки, лейкоциты, эритроциты и цилиндры.
Диагностическое значение.
Клетки плоского эпителия попадают в мочу из половых путей и частично из мочеиспускательного канала. В норме встречаются единичные (до 5) клетки.
Большое количество их является признаком неправильно собранной мочи — без предшествующего туалета промежности.
При цистите и уретрите выявление клеток плоского эпителия в моче, связано с интенсивным слущиванием слизистой оболочки и сочетается с дизурией.
Поражение тубулярного аппарата почек при нефрите сопровождается появлением клеток почечного эпителия и цилиндров.
В норме в препарате мочевого осадка могут выявляться единичные лейкоциты(до 5 в поле зрения).
Обнаружение лейкоцитов в осадке мочи выше нормы – лейкоцитурия (до 50 лейкоцитов в поле зрения) или пиурия(более 50 лейкоцитов в поле зрения). Наблюдается лейкоцитурия (пиурия) при воспалительных заболеваниях почек и мочевыводящих путей (пиелонефрит, цистит, уретрит, туберкулез почек).
В норме в препарате мочевого осадка могут выявляться единичные эритроциты(до 3 в поле зрения).
Гематурия — наличие эритроцитов в моче.
Макрогематурия — обнаружение крови при осмотре мочи.
Микрогематурия — эритроциты в моче выявляются только при микроскопии.
Гематурия с преобладанием измененных («выщелоченных») эритроцитов характерна для острого и хронического гломерулонефрита, инфаркта почки, гипернефромы.
Гематурия с преобладанием неизмененных (свежих) эритроцитов характерна для почечнокаменной болезни, злокачественных новообразований, поликистоза.
Мочевые (почечные) цилиндры разделяются на клеточные, зернистые, гиалиновые, восковидные. Место их образования – почечные канальцы. Источник – клеточные элементы, белок мочи.
В норме цилиндры в моче не выявляются, за исключением единичных гиалиновых цилиндров.
Цилиндрурия — пoявлeниe цилиндров в моче наблюдается при почечной патологии, сопровождающейся выделением с мочой белка, эпителия, эритроцитов и лейкоцитов (гломерулонефрит, пиелонефрит, нефротический синдром).
Гиалиновые цилиндры могут обнаруживаться кроме этого у лихорадящих больных, при застойной почке.
Зернистые цилиндры выявляются при тяжелых поражениях почечной паренхимы.
Восковидные цилиндры характерны для нефротического синдрома, амилоидоза почек, когда в моче имеется большое количество белка.
Цилиндры из лейкоцитов, эритроцитов появляются вместе с большим количеством соответствующих клеточных элементов в моче.
источник
Цель занятия. Освоить методы определения реакции мочи, научиться исследовать мочу на белок, альбумозы, сахар, кетоновые тела, кровь, кровяные пигменты, миоглобин, индикан, желчные пигменты и желчные кислоты.
Объекты исследования и оборудование. Пробы мочи, дающие положительные и отрицательные реакции на белок, альбумозы, сахар, кетоновые тела и т.п.
Индикаторная бумага, pH-метры, фотоэлектроколориметр, реактивы для определения белка, альбумоз, сахара, кетоновых тел, кровяных пигментов, индикана, желчных пигментов и кислот.
Химическое исследование мочи включает установление ее pH, пробы на белок, альбумозы, сахар, кетоновые тела, кровь и кровяные пигменты, миоглобин, индикан, желчные пигменты и желчные кислоты.
Определение pH. Реакцию мочи определяют с помощью рН-мет- ра или индикаторной бумаги («Рифан», «Фан» универсальная), а также полифункциональных полосок-индикаторов, которые позволяют устанавливать также и другие характеристики мочи (наличие белка, глюкозы, кетоновых тел, уробелина, билирубина, аскорбиновой кислоты, следов крови и т.п.).
В норме pH мочи зависит от состава кормов. У травоядных животных реакция щелочная или нейтральная, у плотоядных умеренно кислая. Резко кислую реакцию наблюдают при заболеваниях, сопровождающихся лихорадкой, а также при голодании, почечной недостаточности; резко щелочную — при циститах, рассасывании экссудатов и транссудатов, после рвоты.
Определение белка. Белок в моче выявляют качественными и количественными пробами.
Качественная проба с сульфосалициловой кислотой. Это одна из самых чувствительных проб. В пробирку вносят 2—3 мл мочи с кислой реакцией, затем 5—6 капель 20%-го раствора сульфосалициловой кислоты. При наличии белка в моче в содержимом пробирки появляется помутнение, не исчезающее при подогревании (при наличии альбумоз помутнение исчезает при подогревании).
Качественная проба с азотной кислотой. В пробирку с 1—2 мл 50%-го раствора азотной кислоты осторожно приливают по стенке мочу так, чтобы эти две жидкости не смешивались. В случае присутствия белка в моче на границе между жидкостями появляется белое кольцо (диск), представляющее собой слой белка, свернувшегося под действием азотной кислоты. Кольцо может появиться также при реакции кислоты с другими составными частями мочи: например, моча, богатая уратами, также дает кольцо, состоящее из мочевой кислоты и уратов, но оно появляется не на границе азотной кислоты и мочи, а выше. При легком подогревании уратное кольцо исчезает. Кроме того, кольцо образуется в результате осаждения муцина, но значительно выше границы между мочой и реактивом, и оно не так резко выражено.
Количественная проба Робертса — Стольникова. В пробирку вносят 2 мл 50%-го раствора азотной кислоты и осторожно наслаивают такое же количество исследуемой мочи. Появление серого кольца на границе между кислотой и мочой в течение первых 2 мин указывает, что белка в пробе содержится более 0,033 г/л. В этом случае мочу разводят дистиллированной водой. Количество белка вычисляют, умножая 0,033 на степень разведения мочи. Содержание белка в моче при ее различных разведениях проще вычислять с помощью специальной таблицы (табл. 5.1).
Определение содержания белка в моче, разведенной в различных соотношениях
Моча, разведенная 1: 10 (3 мл мочи + 27 мл дистиллированной воды), мл
Количество добавляемой дистиллированной воды, мл
Количество белка в моче, г/л
Количественная проба с сульфосалициловой кислотой. В пробирку вносят 1,25 мл прозрачной мочи и добавляют 5 мл 3%-го раствора сульфосалициловой кислоты. Через 5 мин определяют оптическую плотность пробы в кюветах с рабочей гранью шириной 5 мм при светофильтре с длиной волны 650—590 нм (оранжевый или красный светофильтр) против контроля, который готовят следующим образом.
В центрифужную пробирку вносят 1,25 мл исследуемой прозрачной мочи и добавляют 5 мл 0,9%-го раствора хлорида натрия. Оптическую плотность контрольной пробы измеряют при тех же условиях, что и плотность опытной. Из оптической плотности опытной пробы вычитают оптическую плотность контроля. Показатель рассчитывают по калибровочному графику, который строят на основании разведения стандартного альбумина 0,9%-м раствором хлорида натрия с концентрацией 5, 10, 50 и 100 мг в 100 мл раствора. Из каждого стандартного разведения берут 1,25 мл и обрабатывают, как опытные пробы.
Появление белка в моче называется протеинурией. Последняя по своему происхождению может быть внепочечной (неренальной) и почечной (ренальной).
При внепочечных протеинуриях белок к моче примешивается в мочевых путях, что чаще бывает при циститах, уретритах, пиелонефритах, воспалении половых органов.
При почечных протеинуриях белок в мочу попадает непосредственно из почек. Почечные протеинурии бывают функционального и органического происхождения. Функциональные развиваются вследствие нарушения проницаемости капилляров почек. Их отмечают у коров в день родов, у новорожденных жеребят в течение первых 3 сут жизни. Органические протеинурии — это результат поражения паренхимы почек и увеличения проницаемости капилляров клубочков. Почечную протеинурию наблюдают при гломерулонефритах, нефрозах, застойных явлениях, интоксикациях, часто при инфекционных заболеваниях. Почечная и внепочечная протеинурии нередко комбинируются.
Определение альбумоз. Альбумозы в моче выявляют с помощью биуретовой реакции и пробой с сульфосалициловой кислотой.
Биуретовая реакция. К 3 мл подкисленной мочи добавляют около 1 мл насыщенного раствора хлорида натрия, кипятят, а затем горячую пробу фильтруют. К фильтрату добавляют 1 /2 объема концентрированного раствора гидроксида натрия и несколько капель сульфата меди. При положительной реакции появляется красно-фиолетовое окрашивание.
Проба с сульфосалициловой кислотой. К 2—3 мл исследуемой мочи прибавляют 5—6 капель 20%-го раствора сульфосалициловой кислоты. Наличие в моче альбумоз подтверждается появившимся помутнением, которое исчезает при подогревании пробирки.
Альбумозы в моче обнаруживают при гнойных, некротических процессах, в послеродовом периоде, при заболеваниях, сопровождающихся усиленным клеточным распадом.
Определение сахара. На сахар нужно исследовать свежую мочу. При ее хранении в теплом месте (не в холодильнике) глюкоза разлагается под действием ферментов, бактерий, грибов.
Проба Бенедикта. Реактив Бенедикта готовят следующим образом. В мерную колбу на 1000 мл наливают 700 мл дистиллированной воды, добавляют 173 г цитрата натрия и 100 г безводного (или 200 г кристаллического) карбоната натрия. Смесь нагревают до растворения всех ее компонентов. Отдельно растворяют 17,3 г сульфата меди в 100 мл дистиллированной воды. Оба раствора смешивают в мерной колбе и после остывания их общий объем доводят дистиллированной водой до 1000 мл.
В пробирку вносят 5 мл реактива и прибавляют 8—10 капель мочи. Пробу нагревают 2 мин над пламенем спиртовки или 5 мин на кипящей водяной бане. Дают остыть в течение 5—7 мин. При окрашивании содержимого пробирки в синий цвет пробу считают отрицательной. При наличии сахара в моче (более 0,5 г в 100 мл) отмечают зеленое, желтое или красное окрашивание жидкости и осадок на дне пробирки. Причем при содержании в 100 мл мочи от 0,05 до 0,5 г глюкозы цвет пробы зеленый, от 0,5 до 1 г — желто-зеленый, от 1 до 2 г — желтый и больше 2 г — красный.
Проба Ниляндера. Реактив Ниляндера (нитрат висмута —2 г, сегнетовая соль — 4 г, 10%-й раствор гидроксида натрия — 100 мл) — бесцветный раствор, хорошо сохраняющийся в склянке из темного стекла. При продолжительном хранении реактива его качество следует проверять перед постановкой опыта. Для этой цели в пробирку наливают реактив Ниляндера, разбавленный в 10 раз водой, и нагревают. Если реактив не испорчен, то при кипении жидкость не должна темнеть.
Проба заключается в следующем: к 3—4 мл реактива Ниляндера добавляют около 2 мл мочи и нагревают смесь в течение 3—4 мин над пламенем спиртовки. При положительной реакции смесь мутнеет и приобретает окраску от коричневой до черной. Чувствительность пробы довольно высокая, она выявляет содержание 0,1 г сахара в 100 мл мочи. Однако при наличии в моче значительного количества мочевой и салициловой кислот, а также гемоглобина проба дает ложноположительную реакцию.
Экспресс-метод. Для экспресс-определения сахара в моче используют специальную индикаторную бумагу «Глюкотест» или по- лифункциональные диагностические полоски. Определить содержание сахара в моче можно с помощью орто-толуидинового метода (см. исследование крови).
В норме моча содержит незначительное количество глюкозы, которое не удается обнаружить обычными качественными реакциями. Если способность почечных канальцев реабсорбировать глюкозу нарушается, то в моче появляется глюкоза — развивается глюкозурия. Последняя может быть физиологической и патологической. Физиологическая глюкозурия возникает при даче животным кормов, богатых углеводами, иногда в результате испуга, а также при беременности. Патологическую глюкозурию наблюдают при сахарном диабете, отравлениях соединениями тяжелых металлов, хлоралгидратом, скипидаром и другими токсичными веществами, при дистрофии печени, воспалительных процессах в головном и спинном мозге.
Определение кетоновых тел. Их обнаруживают с помощью пробы Лестраде. Готовят реактив следующего состава: нитропруссид натрия — 1 г, сульфат аммония — 20 г, карбонат натрия (безводный) — 20 г. Навески тщательно растирают в фарфоровой ступке, смешивают и хранят в хорошо закупоренной стеклянной банке.
На белую кафельную плитку насыпают небольшое количество сухого порошка, который увлажняют двумя-тремя каплями исследуемой мочи. При наличии кетоновых тел в моче реактив приобретает цвет от розового до темно-фиолетового. Окраска может появиться через 2—3 мин.
В норме моча содержит очень мало кетоновых тел, и они не улавливаются пробой Лестраде. Положительная реакция на кетоновые тела в моче — кетонурия — встречается чаще всего при кетозе молочных коров, кетонурии суягных овец, листериозе, продолжительных желудочно-кишечных расстройствах.
Определение крови и кровяных пигментов. Кровь в свежей моче можно легко обнаружить под микроскопом. Кровяные пигменты (гемоглобин и его дериваты — метгемоглобин, сульфгемоглобин, гемосидерин), а также миоглобин выявляют с помощью специальных проб.
Бензидиновая проба. К 2 мл 3%-го раствора пероксида водорода добавляют 10—15 капель свежеприготовленного насыщенного раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте, размешивают и затем по каплям вносят исследуемую мочу. Окрашивание смеси вначале в зеленый, а затем в синий цвет указывает на наличие в моче кровяных пигментов. Моча здоровых животных дает отрицательную реакцию на кровяные пигменты.
Гематурию — появление крови в моче — наблюдают при нефритах, нефрозонефритах, инфарктах почек, мочекаменной болезни, цистите, С-гиповитаминозе, распаде опухолей в мочевой системе. Гемоглобинурию — появление гемоглобина в моче — отмечают при гемоглобинемиях, которые чаще всего развиваются как следствие кровепаразитарных болезней, острых отравлений, ожогов, тяжелых инфекционных заболеваний.
Проба с сульфатом аммония. В 5 мл исследуемой мочи вносят 2,8 г кристаллического сульфата аммония, после чего смесь фильтруют. Красно-коричневый цвет фильтрата свидетельствует о наличии мио- глобина, отсутствие окраски — гемоглобина.
Моча здоровых животных не содержит миоглобина. Его появление в моче — миоглобинурию — наблюдают при механических повреждениях мышц, паралитической миоглобинурии лошадей.
Определение индикана. В моче здоровых животных индикан содержится в незначительном количестве. Повышенное выделение индикана с мочой — индиканурию — наблюдают при интенсивном гниении белковых веществ в кишечнике (непроходимость кишечника, копростазы, перитонит), а также при усиленном распаде белков в организме (абсцессы, опухоли и др.). Индикан в моче выявляют с помощью специальных проб.
Проба Обермайера. В пробирку вносят 6 мл мочи и 6 мл раствора хлорида железа III [0,2-0,4 г хлорида железа 111 растворяют в 100 мл концентрированной хлороводородной (соляная) кислоты]. Через 5 мин добавляют 1—2 мл хлороформа, после чего содержимое пробирки встряхивают. При наличии индикана хлороформ в нижней части пробирки окрашивается в синий цвет. Интенсивность окраски зависит от количества индикана.
Проба Яффе. В пробирку вносят сначала 2—3 мл профильтрованной мочи, затем равный объем концентрированной соляной кислоты, 2—3 мл хлороформа и 1—2 капли 2%-го раствора перманганата калия. Содержимое пробирки перемешивают. Реакцию оценивают после оседания хлороформа. При наличии индикана хлороформ окрашивается в голубой или розовый цвет.
Определение желчных пигментов и желчных кислот. Из желчных пигментов в моче могут присутствовать билирубин и уробилиноге- новые (уробилиновые) тела, которые обнаруживают соответствующими пробами или с помощью диагностических полосок.
Проба на билирубин (по Розину). В пробирку вносят 3—4 мл исследуемой мочи и наслаивают водный раствор йода (1 г кристаллического йода, 2 г йодида калия и 30 мл дистиллированной воды) или 1%-й спиртовой раствор йода. При положительной реакции на границе между слоями жидкостей появляется зеленое кольцо.
В норме моча содержит билирубин в малых количествах, не выявляемых существующими реакциями. Билирубин в моче — би- лирубинурию — обнаруживают при механической и паренхиматозной желтухе.
Проба на уробилиногеновые (уробилиновые) тела (по Богомолову). В химический стакан вносят 10-15 мл мочи и 2—3 мл насыщенного раствора сульфата меди. В случае помутнения мочи в нее добавляют несколько капель концентрированной соляной кислоты до просветления раствора. Через 5 мин в стакан вносят 2—3 мл хлороформа и содержимое взбалтывают. При наличии уробилиногеновых тел слой хлороформа приобретает цвет от розово-красного до медно- красного.
С мочой здоровых животных выводится незначительное количество уробилиногеновых тел, которые при хранении мочи переходят в уробилиновые тела. Повышенное содержание уробилиногеновых тел — уробилиногенурию (уробилинурию) — наблюдают при гемолизе эритроцитов в кровяном русле, например при кровепаразитарных болезнях, отравлениях гемолитическими ядами, болезнях печени и кишечника. Полное отсутствие уробилиногеновых тел указывает на механическую желтуху.
Проба на желчные кислоты с серным цветом. В колбу вносят 40— 60 мл мочи и выдерживают при комнатной температуре в течение 20—30 мин, после чего на поверхность содержимого колбы насыпают порошок серного цвета. Если порошок не тонет, то проба отрицательная; если тонет — положительная. Проба бывает положительной при содержании желчных кислот и солей в моче выше 0,01%. Более четкие результаты получают, если мочу разводят до относительной плотности 1,015.
Проба на желчные кислоты с метиленовым синим. Пробу выполняют в двух пробирках: в одну — контрольную — вносят 2 мл дистиллированной воды, в другую — 2 мл исследуемой мочи. В обе пробирки добавляют по одной капле 0,2%-го раствора метиленового синего. При положительной реакции в пробирке с исследуемой мочой появляется зеленое окрашивание.
Количество желчных кислот в моче значительно увеличивается при механической и паренхиматозной желтухе.
источник
Принцип. Билирубин под действием окислителя (йода) превращается в биливердин зеленого цвета.
Реактивы: 1% спиртовой раствор йода или раствор Люголя (1г йода + 2г калия йодистого на 300мл воды).
Ход исследования. На 4-5мл мочи наслаивают раствор йода или раствор Люголя. При наличии билирубина в моче на границе жидкостей появляется кольцо зеленого цвета.
Обнаружение билирубина пробой Фуше
Принцип. Билирубин, предварительно осажденный хлоридом бария, превращается под действием хлорного железа в биливердин. Проба очень чувствительна, применяется при сомнительных результатах пробы Розина.
Реактивы:15% раствор хлорида бария, реактив Фуше: 25г трихлоруксусной кислоты растворяют в 100мл дистиллированной воды + 1г хлорного железа.
Ход исследования. Если реакция мочи щелочная, то необходимо подкислить её несколькими каплями уксусной кислоты. К 10мл мочи добавляют 5мл 15% хлорида бария, перемешивают и фильтруют. Фильтр вынимают из воронки, помещают его в чашку Петри на сухой фильтр. На осадок хлорида бария наносят 1-2 капли реактива Фуше. При наличии в моче билирубина на фильтре появляются пятна сине-зеленого цвета.
1.2.2.5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КРОВЯНОГО ПИГМЕНТА В МОЧЕ
Наличие в моче свободного кровяного пигмента (гемоглобина) без эритроцитов называется гемоглобинурия. Гемоглобинурия наблюдается при быстром внутрисосудистом распаде большого количества эритроцитов, когда освободившийся гемоглобин не успевает полностью перейти в билирубин. Гемоглобинурия может временно появиться у здоровых людей после длительной ходьбы (маршевая гемоглобинурия). Патологическая гемоглобинурия наблюдается у больных при острой гемолитической анемии, после переливания несовместимой крови, при отравлении гемолитическими ядами (мышьяк, яды грибов и змей), у людей с холодовыми антителами после охлаждения, при пароксизмальной ночной гемоглобинурии (гемолитической почке). В зависимости от концентрации гемоглобина моча при этом приобретает красный, бурый, иногда почти черный цвет.
Появление в моче пигмента мышечной ткани — миоглобина называется миоглобинурия. Миоглобинурия бывает при обширных травмах мышечной ткани (синдром сдавления, или Краш-синдром), а также при ударах электрическим током, инфаркте миокарда, мышечной дистрофии, отравлениях спиртами и др. В присутствии миоглобина моча приобретает красный цвет.
Методы обнаружения гемоглобина в моче. Определение кровяного пигмента не входит в общий анализ мочи. Проводится в тех случаях, когда моча имеет красный или бурый цвет, а при микроскопическом исследовании эритроциты в ней не обнаружены.
Для выявления гемоглобина и миоглобина в моче используются следующие методы:
— экспресс-метод с помощью реактивных полос.
Обнаружение кровяного пигмента в моче амидопириновой пробой
Принцип.Кровяной пигмент (гемоглобин) обладает пероксидазными свойствами, то есть способностью расщеплять перекись водорода с образованием атомарного кислорода, который окисляет амидопирин с образованием вещества сине-фиолетового цвета.
Реактивы: 5% спиртовой раствор амидопирина, уксусная кислота концентрированная, диэтиловый эфир, 3% раствор перекиси водорода свежеприготовленный.
Ход исследования. Готовят из мочи уксусно-эфирную вытяжку: к 10мл хорошо перемешанной, не фильтрованной мочи добавляют 2мл концентрированной уксусной кислоты, перемешивают и приливают 3-4мл эфира. Закрывают пробирку пробкой и несколько раз осторожно пропускают эфир через слой мочи для экстрагирования гемоглобина, который при взаимодействии с уксусной кислотой превращается в уксуснокислый гематин. В течение нескольких минут дают отстояться слоям. Отсасывают верхний слой (уксусно-эфирную вытяжку) в другую пробирку. Прибавляют 8-10 капель раствора амидопирина и 8-10 капель 3% перекиси водорода. При наличии кровяного пигмента в моче образуется сине-фиолетовое окрашивание.
1.2.2.6. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ «ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ»
1. Какие методы химического исследования входят в общий анализ мочи?
2. Какой принцип заложен в основе турбидиметрического определения количества белка в моче?
3. Встречается ли гипергликемия без глюкозурии? Когда?
4. Может ли быть глюкозурия без гипергликемии? В каком случае?
5. Какой метод определения глюкозы в моче наиболее специфичен?
6. Какие единицы измерения в системе СИ используются для выражения количества глюкозы в моче?
7. В каких случаях проводится определение уробилина и билирубина в моче?
8. Какие желчные пигменты появляются в моче при вирусном гепатите?
9. При какой желтухе наблюдается уробилинурия без билирубинурии?
10. Для какого заболевания характерно сочетание уробилинурии с билирубинурией?
11. Каков принцип определения билирубина в моче?
12. При какой патологии выделяется моча темно-бурого, почти черного цвета?
13. Какую патологическую примесь мочи обнаруживают с помощью нитропруссида натрия?
1.2.3. Микроскопическое исследование осадка мочи
Микроскопическое исследование осадка мочи может проводиться:
— количественными методами Нечипоренко, Каковского-Аддиса, Амбурже и др.
1.2.3.1. ОРИЕНТИРОВОЧНЫЙ МЕТОД
Заключается в изучении под микроскопом нативного (естественного, неокрашенного) препарата, приготовленного из осадка мочи. Этот метод входит в общий анализ мочи и является очень распространенным, но не точным. Результаты исследования при этом зависят от многих факторов: количества взятой для центрифугирования мочи, оборотов центрифуги, толщины препарата и др.
Микроскопия нативного препарата мочи
Принцип. Микроскопическое исследование нативных препаратов мочевого осадка, полученного при центрифугировании мочи.
Исследуемый материал. Микроскопическое исследование осадка проводится в утренней порции мочи. Исследование осадка желательно выполнить в течение 20 минут после получения мочи. При более длительном хранении необходимо пробу охладить и добавить консерванты: 0,5мл ледяной уксусной кислоты, чтобы значение рН было 5,0-7,0, так как лучше всего сохраняется моча кислой реакции; тимол (кристалл на 10-15мл) или 40% формалин (1 капля на 10мл мочи). Через 2-3 часа хранения мочи при комнатной температуре разрушается около 50% клеток. Низкая относительная плотность мочи (менее 1,010) также приводит к разрушению эритроцитов.
Оборудование: центрифуга, микроскоп, центрифужные пробирки, предметные и покровные стекла.
Ход исследования. Приготовление препаратов: в центрифужнуюпробирку наливают 10мл утренней порции мочи после тщательного её перемешивания. Центрифугируют 5 минут при 2000 об/мин. Затем быстрым наклоном пробирки сливают надосадочную жидкость. Оставшийся осадок переносят пипеткой с тонко оттянутым концом на середину предметного стекла и накрывают покровным стеклом. Надо стараться перенести осадок с минимальным количеством жидкости, чтобы покровное стекло закрывало его полностью. Большая капля расплывается, колеблется, препарат становится многослойным, что затрудняет микроскопию. Изучение препаратов начинают с малого увеличения (объектив 8Х, окуляр 7Х или 10Х) для общего обзора. Более детальное изучение препарата с количественной оценкой структур производят при большом увеличении (объектив 40Х, окуляр 7Х или 10Х), с опущенным конденсором.
При микроскопии осадка мочи различают:
— организованные (органические) осадки;
— неорганизованные (неорганические) осадки.
Организованные осадки мочи. К организованным осадкам мочи относятся эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки и цилиндры. Элементы организованного осадка имеют большое диагностическое значение и оцениваются количественно. Если элементов много и они при большом увеличении микроскопа встречаются в каждом поле зрения, то их содержание выражают количеством в поле зрения. Если же элементов мало, и они встречаются далеко не в каждом поле зрения, их содержание выражают количеством в препарате, то есть в 10-15 полях зрения.
Эритроциты в моче могут быть измененными и неизмененными, что зависит в основном от реакции и относительной плотности мочи. Неизмененные (сохранившие свой пигмент) эритроциты имеют вид дисков желтовато-зеленоватого цвета без ядра и зернистости. Отличительной особенностью эритроцитов является наличие в них двойного контура, заметного при работе микровинтом микроскопа. В концентрированной моче резко кислой реакции эритроциты могут приобретать звездчатую форму. При длительном пребывании эритроцитов в моче с низкой относительной плотностью 1,002-1,009 они теряют пигмент и приобретают вид бесцветных одноконтурных или двухконтурных колец. Деление эритроцитов на неизмененные и измененные не имеет решающего значения при определении источника гематурии.
Нормальное содержание эритроцитов в моче. В норме эритроциты в моче либо совсем не встречаются, либо обнаруживаются единичные (0-3) в препарате.
Клиническое значение увеличения количества эритроцитов в моче. Увеличение количества эритроцитов в моче называется гематурия [от греч. haima кровь + urina]. Если наличие крови в моче видно на глаз, то есть моча имеет розовый, красный, бурый цвет или цвет «мясных помоев», то говорят о макрогематурии.Если же увеличенное количество эритроцитов обнаруживается только при микроскопическом исследовании, а цвет мочи не изменен, то это расценивается как микрогематурия.
По месту возникновения гематурии делятся на почечные (ренальные), при которых эритроциты попадают в мочу из почек, и внепочечные (экстраренальные), при которых источником эритроцитов являются мочевыводящие пути. Почечные гематурии развиваются вследствие поражения паренхимы почек и наблюдаются при гломерулонефрите, пиелонефрите, туберкулезе, инфаркте и раке почек. Внепочечные гематурии связаны с кровотечением и воспалением мочевыводящих путей. Встречаются при опухолях и камнях мочевого пузыря и мочеточников, травмах мочевыводящих путей, цистите и уретрите. При так называемых «ложных» гематуриях эритроциты попадают в мочу из половых органов.
Лейкоциты в моче имеют вид небольших зернистых клеток округлой формы, в 1,5-2 раза крупнее эритроцитов. При низкой относительной плотности мочи размер их увеличивается и в некоторых из них (так называемых «активных») становится заметным броуновское движение гранул. При бактерурии (наличии большого количества бактерий) и в моче щелочной реакции лейкоциты довольно быстро разрушаются. Лейкоциты в моче представлены в основном нейтрофилами, но иногда обнаруживаются и эозинофилы, которые отличаются более крупной, преломляющей свет зернистостью.
Нормальное содержание лейкоцитов в моче: у мужчин – 0-3 в поле зрения, у женщин – 0-5 в поле зрения.
Клиническое значение лейкоцитов мочи. Увеличение количества лейкоцитов в моче называется лейкоцитурия. Если лейкоцитов очень много (более 60-100 в п/зр.), то говорят о пиурии – гное в моче [от лат. рyon гной + urina]. Увеличение количества лейкоцитов в моче свидетельствует о воспалительном процессе в почках и мочевыводящих путях и встречается при пиелите – воспалении почечной лоханки, пиелонефрите, цистите, уретрите. Наличие в осадке «активных» лейкоцитов характеризует интенсивность воспалительного процесса независимо от его локализации.
Трехстаканная проба проводится для ориентировочной оценки источника форменных элементов в моче. Проба заключается в исследовании трех порций мочи, полученных при однократном мочеиспускании. Перед пробой обследуемый должен удерживать мочу в течение 3-5 часов. В первый сосуд собирается начальная порция (50-60мл), во второй – средняя (самая большая), в третий – последняя порция мочи. У мужчин третья порция берется после массажа предстательной железы.
Помутнение мочи, изменение ее цвета, обнаружение при микроскопии увеличенного количества лейкоцитов и эритроцитов только в первой порции указывает на воспаление мочеиспускательного канала. Если патологические примеси обнаруживаются в одинаковом количестве во всех порциях мочи, то вероятнее всего заболевание почек. При обнаружении патологических примесей только в последней порции мочи предполагают локализацию очага в мочевом пузыре или в предстательной железе (у мужчин).
Эпителиальные клетки. В моче могут содержаться клетки плоского, переходного и почечного эпителия.
Клетки плоского эпителия — полигональной (неправильно многоугольной) или округлой формы, в 3-5 раз крупнее лейкоцитов, бесцветные, с маленькими темными ядрами. Располагаются в препаратах единично или пластами, попадают в мочу из уретры, наружных половых органов, влагалища.
Клетки переходного эпителия могут иметь различную форму: хвостатую, цилиндрическую, округлую, и разные размеры – в 3-6 раз крупнее лейкоцитов. Их цитоплазма окрашена пигментами мочи в желтоватый цвет. Содержат довольно крупное ядро. Иногда в клетках переходного эпителия наблюдаются дегенеративные изменения в виде грубой зернистости и вакуолизации цитоплазмы. В мочу они поступают из мочевого пузыря, мочеточников и почечных лоханок.
Клетки почечного эпителия выстилают почечные канальцы, имеют неправильно округлую форму, слегка желтоватый цвет и небольшие размеры — в 1,5-2 раза крупнее лейкоцитов. В цитоплазме клеток почечного эпителия обычно выражены дегенеративные изменения: зернистость, вакуолизация, жировая инфильтрация, в результате чего ядра в них часто не видны. При усиленном отторжении клетки почечного эпителия образуют эпителиальные цилиндры.
Нормальное содержание эпителиальных клеток в моче. Клетки плоского и переходного эпителия практически всегда встречаются в осадке нормальной мочи от единичных в препарате до единичных в поле зрения. Клеток почечного эпителия в моче быть не должно.
Клиническое значение эпителиальных клеток мочи.Клетки плоского эпителия обычно диагностического значения не имеют, а лишь указывают на нарушение правил сбора мочи. Большое количество клеток переходного эпителия может появиться в моче при цистите, пиелите, мочекаменной болезни, опухолях мочевыводящих путей. Наличие клеток почечного эпителия свидетельствует о поражении паренхимы почек.
Цилиндры представляют собой белковые или клеточные образования канальцевого происхождения, имеющие цилиндрическую форму и различную величину. Различают следующие виды цилиндров: гиалиновые, зернистые, восковидные, эпителиальные, эритроцитарные, лейкоцитарные, пигментные.
Гиалиновые цилиндры состоят из рыхло расположенного белка. Имеют вид цилиндрических полупрозрачных образований с нежными контурами, один конец которых закруглен, другой обрублен. Образуются в почечных канальцах из свернувшегося белка при изменении рН мочи в кислую сторону. К поверхности гиалиновых цилиндров могут прилипать клеточные элементы (лейкоциты, эритроциты, почечный эпителий), а также соли.
Зернистые цилиндры имеют более резкие контуры и состоят из плотной зернистой массы желтоватого цвета, образующейся при распаде клеточных элементов или зернистой коагуляции белка.
Восковидные цилиндры образуются из уплотненных гиалиновых и зернистых цилиндров при их длительном пребывании в канальцах. Имеют резко очерченные контуры, гомогенную структуру, окрашены в серовато-желтый цвет, похожий на цвет воска. Они значительно шире гиалиновых и часто имеют бухтообразные вдавления по бокам.
Эпителиальные цилиндры состоят из клеток почечного эпителия, обычно окрашены пигментами мочи в желтоватый цвет и обнаруживаются на фоне этих же клеток.
Эритроцитарные цилиндры имеют желтоватый цвет, образуются в канальцах при почечной гематурии, состоят из массы эритроцитов и располагаются на их фоне.
Лейкоцитарные цилиндры — образования серого цвета, состоят из массы лейкоцитов и находятся на их фоне. Образуются в просвете канальцев при почечной пиурии.
Пигментные цилиндры образуются в результате коагуляции пигментов при гемоглобинурии и миоглобинурии. Имеют коричневый цвет и зернистую структуру, располагаются на фоне зернистых масс пигмента.
От цилиндров следует отличать цилиндроиды, которые похожи на гиалиновые цилиндры, но имеют продольную исчерченность и большую длину. Один конец у них закруглен, другой расщеплен. Они состоят из слизи и могут быть в нормальной моче.
Нормальное содержание цилиндров. В моче могут быть единичные гиалиновые цилиндры (до 1-2 в препарате). Остальные цилиндры в норме не обнаруживаются.
Клиническое значение цилиндров.Наличие цилиндров в моче –цилиндрурия является симптомом поражения паренхимы почек. Хотя и считается, что вид цилиндров особого диагностического значения не имеет, гиалиновые цилиндры подтверждают ренальную протеинурию, а лейкоцитарные и эритроцитарные указывают на почечное происхождение лейкоцитурии и гематурии.
Неорганизованные осадки мочи. Представлены солями и кристаллическими образованиями. Состав неорганизованного осадка зависит от реакции мочи.
В моче кислой реакции встречаются кристаллы мочевой кислоты, ураты (соли мочевой кислоты) и оксалаты (соли щавелевой кислоты).
В моче щелочной реакции могут быть аморфные фосфаты, трипельфосфаты, кислый мочекислый аммоний.
Кристаллы мочевой кислоты образуют кирпично-красный осадок. Под микроскопом имеют вид кристаллов разного цвета (желтого, кирпично-красного, бесцветные) и разнообразной формы (ромбов, призм, брусков, бочонков, игл и др.). Отдельные кристаллы могут образовывать пучки и розетки. Растворяются в щелочах.
Ураты – натриевые и калиевые соли мочевой кислоты. Макроскопически имеют вид аморфного осадка розоватого цвета. При микроскопии выглядят как мелкий сероватый или коричневатый песок, расположенный в виде полос, кучек, может накладываться на цилиндры. Ураты растворяются в щелочах, при нагревании и в реактиве Селена (5г борной кислоты и 5г буры на 100мл воды).
Оксалаты – кальциевые соли щавелевой кислоты. Чаще всего имеют вид почтовых конвертов разной величины. Могут встречаться в моче и кислой, и щелочной реакции. Растворяются в соляной кислоте.
Аморфные фосфаты – кальциевые и магниевые соли фосфорной кислоты. Выглядят как мелкие бесцветные крупинки, похожие на ураты, но не окрашены. Растворяются в соляной и уксусной кислотах. При нагревании не растворяются.
Трипельфосфаты – аммиак-магниевые соли фосфорной кислоты. Имеют характерную ромбическую форму в виде «гробовых крышек», санок, листьев папоротника, снежинок. Растворяются в уксусной кислоте.
Кислый мочекислый аммоний имеет форму гирь, шаров, плодов дурмана. Может встречаться в моче и кислой, и щелочной реакции. Растворяется в щелочах и при нагревании.
Кристаллы лейцина, тирозина, цистина, холестерина, билирубина, гематоидина и др. обнаруживаются в моче только при патологии.
Клиническое значение неорганизованного осадка мочиневелико, так как его характер зависит в основном от реакции мочи, то есть от питания. Количество неорганизованного осадка точно не оценивают. В анализе лишь указывают «много солей» или «немного солей» и их вид. Например: «Ураты, большое количество».
1.2.3.2. КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ОСАДКА МОЧИ
По сравнению с ориентировочным методом эти методы более точные, так как они строго стандартизованы. К наиболее распространенным методам количественного исследования осадка мочи относятся:
— метод Нечипоренко (определение количества форменных элементов в 1мл мочи);
— метод Каковского-Аддиса (определение количества форменных элементов в суточном объеме мочи).
Определение количества форменных элементов в 1мл мочи методом Нечипоренко
Принцип. Определение количества форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в 1мл мочи с помощью счетной камеры.
Специальное оборудование: микроскоп, счетная камера.
Ход определения. Исследуют одноразовую порцию мочи (желательно утреннюю) в середине мочеиспускания. Определяют рН мочи, так как в щелочной моче могут частично разрушаться клеточные элементы. 5 или 10мл мочи центрифугируют при 3500 об/минуту в течение 3 минут. Отсасывают верхний слой, оставляя с осадком 0,5мл (500мкл) мочи при небольшом осадке и 1мл (1000мкл) – при большом объеме осадка. Хорошо перемешивают осадок и заполняют им счетную камеру. Подсчитывают отдельно лейкоциты, эритроциты и цилиндры во всей сетке камеры.
Расчет количества клеток в 1мл мочи ведется по формуле:
, где
А – количество подсчитанных элементов в счетной камере; 500(1000) – объем мочи в микролитрах, оставленный вместе с осадком; 0,9(3,2) – объём счетной камеры Горяева (Фукса-Розенталя); 5(10) – количество мочи, взятое для центрифугирования, в мл.
Нормальные величины. В 1мл мочи в норме содержится до 1000 эритроцитов и до 2000 лейкоцитов, цилиндры отсутствуют или обнаруживаются не более одного на 4 камеры Горяева или на 1 камеру Фукса-Розенталя.
Определение числа форменных элементов в суточном объеме мочи по методу Каковского-Аддиса
Принцип. Определение количества форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в суточном объеме мочи с помощью счетной камеры.
Специальное оборудование: микроскоп, счетная камера.
Собирание мочи. Классический вариант собирания мочи требует строгого соблюдения правил хранения мочи в течение суток. Утром обследуемый освобождает мочевой пузырь, а затем в течение 24 часов собирает мочу в сосуд с 2-3 кристаллами тимола. Желательно хранить мочу в холодильнике. Во избежание получения заниженных данных, обусловленных распадом форменных элементов в нейтральной (щелочной) моче или при низкой ее плотности, обследуемому в течение суток, предшествующих анализу, назначают мясную пищу с ограничением жидкости, чтобы получить мочу кислой реакции и более высокой концентрации.
Если нет возможности выполнить все эти условия, собирают мочу за 10 часов. В 10 часов вечера больной опорожняет мочевой пузырь (эта моча выливается), и до 8 часов утра мочеиспускания не должно быть. Всю мочу, полученную в 8 часов утра, доставляют в лабораторию.
Ход исследования. Собранную мочу тщательно перемешивают и измеряют её объем. Рассчитывают количество мочи, выделенное за 12 минут (1/5 часа), по формуле:
Q = ;
где Q – объем мочи, выделенный за 12 минут (мл); V — объем мочи, собранной за время исследования (мл); t – время сбора мочи (часы); 5 – коэффициент пересчета за 1/5 часа.
Рассчитанное количество мочи центрифугируют в градуированной центрифужной пробирке при 3500 об/минуту в течение 3 минут или при 2000об/минуту в течение 5 минут. Отсасывают верхний слой, оставляя с осадком 0,5мл мочи. Если осадок превышает 0,5мл, то оставляют 1мл мочи. Осадок тщательно перемешивают и заполняют им счетную камеру. Подсчитывают отдельно количество лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров.
Расчет количества клеток, выделенных с мочой за сутки,ведут по формуле:
Х = , где
А – количество подсчитанных элементов в счетной камере; 500(1000) – объем мочи в микролитрах, оставленный вместе с осадком; 0,9(3,2) – объём счетной камеры Горяева (Фукса-Розенталя). Умножение на 5 и 24 дает расчет количества клеток за 24 часа.
Нормальные величины. В сутки с мочой выделяется: эритроцитов – до 1·10 6 ; лейкоцитов – до 2·10 6 ; цилиндров – до 2·10 4 .
1.2.3.3. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ «МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОСАДКА МОЧИ»
1. Каков характерный признак эритроцитов в моче?
2. Как выглядят выщелоченные эритроциты?
3. Каким термином можно оценить содержание в моче:
— 70-90 лейкоцитов в поле зрения;
— 0-5 эритроцитов в поле зрения;
— 8-10 лейкоцитов в поле зрения?
4. Какое происхождение имеет гематурия при наличии эритроцитарных цилиндров в моче?
5. Каков характерный признак мочи при почечной колике?
6. Каким термином следует оценить содержание лейкоцитов 20000 в 1мл мочи?
7. Для какого исследования осадка мочи требуется суточная моча?
8. При каких условиях образуются мочевые цилиндры?
9. Что такое «активные» лейкоциты?
10. Какое заболевание может сопровождаться пиурией?
11. Каковы результаты трехстаканной пробы при цистите?
12. Какие неорганизованные осадки мочи относятся к амфотерным?
13. При каких условиях эритроциты в моче приобретают звездчатую форму?
14. Какая проба помогает ориентировочно установить причину мутности мочи?
1.2.4. Исследование мочи с помощью тест-полосок
Диагностические тест-полоски, выпускаемые разными фирмами (ФАН, УРИСКАН и др.) изготавливаются из бумаги или пластика и используются для повседневных исследований в лабораториях и скрининга при профилактических осмотрах. Полоски имеют зоны для исследования таких показателей в моче, как относительная плотность, рН, белок, глюкоза, кетоновые тела, уробилиноиды, билирубин, лейкоциты, кровь, нитриты.
Существуют как монофункциональные полоски: альбуфан (на белок), глюкофан (на глюкозу) и др., так и полифункциональные полоски, имеющие от 3 до 10 зон индикации. Имеются комбинации тестов для специальных целей, например, для мониторига терапии сахарного диабета (глюкоза и кетоновые тела), заболеваний почек и мочевого тракта (лейкоциты, нитриты, рН, белок, кровь), для заболеваний печени (уробилиноген и билирубин).
Некоторые определения с помощью тест-полосок основаны на том же принципе, что и обычные методы химического исследования мочи (определение глюкозы глюкозооксидазным методом, кетоновых тел – пробой с нитропруссидом натрия). Однако для большинства тест-полосок используются другие подходы. Так, относительная плотность мочи определяется путем измерения в ней концентрации ионов. Количество лейкоцитов оценивается с помощью цитохимической реакции на специфичный для гранулоцитов фермент эстеразу. Исследование на наличие крови в моче тест-полосками выявляет как целые, не разрушенные эритроциты, так и свободный гемоглобин (миоглобин). Неповрежденные эритроциты дают точечное окрашивание, а кровяной пигмент – гомогенную зеленую окраску на отдельной зоне индикации.
Кроме обычного набора исследований, мультитестовые полоски позволяют также определить наличие в моче нитритов – показателя бактеруриии. Большинство грамположительных бактерий, в том числе и кишечная палочка (самый частый возбудитель инфекции урогенитального тракта) содержат фермент, превращающий пищевые нитраты овощей в нитриты, которые и обнаруживаются тест-полоской.
Результаты исследования оцениваются по окраске зон индикации чаще полуколичественно с четким разграничением нормы (отрицательный результат) от патологии. Оценка результатов исследования может проводиться как на глаз, визуально, так и с помощью специальных анализаторов мочи (типа Клинитек, Урискан, Урифан и др.), работающих в автоматическом режиме.
Таким образом, диагностические тест-полоски обладают рядом преимуществ по сравнению с традиционными методами исследования мочи: они просты в использовании, снижают трудоемкость анализов, позволяют быстро проводить целый комплекс исследований, результаты которых по точности не уступают химическим и микроскопическим методам.
Синдром [от греч. syndromē скопление] — это сочетание нескольких симптомов, обусловленных единым патогенезом. Мочевые синдромы описывают сочетание свойств мочи, характерные для определенной патологии.
Амилоидоз почек развивается вследствие нарушения обмена веществ, при котором образуется новое для организма вещество белкового происхождения – амилоид. Откладываясь в органах, в том числе и в почках, амилоид нарушает их функции. Это приводит к запустеванию и атрофии нефронов, а затем – к сморщиванию почек. В развернутой стадии заболевания при исследовании мочи выявляются: выраженная протеинурия (до 10г/л белка и больше) очень низкой селективности; значительная лейкоцитурия; цилиндрурия; клетки почечного эпителия. Проба Зимницкого выявляет нарушение концентрационной функции почек.
Гломерулонефрит [от греч. glomerulum шарик + nephros почка] – острое или хроническое диффузное двухстороннее заболевание почек с преимущественным поражением почечных клубочков. Развивается вследствие иммуноаллергических процессов, вызываемых гемолитическими стрептококками. Основными клиническими проявлениями острого гломерулонефрита являются отеки, повышение артериального давления, боли в пояснице. Изменения мочи при этом проявляются в виде олигурии, протеинурии (обычно не более 1-2 г/л); гематурии и лейкоцитурии разной степени. Гематурия более выражена, чем лейкоцитурия, может наблюдаться макрогематурия. В осадке мочи выявляются также клетки почечного эпителия, гиалиновые цилиндры.
Мочекаменная болезнь связана с образованием в мочевых органах, преимущественно в почках, камней, которые чаще состоят из солей мочевой, щавелевой и фосфорной кислот. Образование камней обычно является следствием нарушения обмена веществ и инфекционных заболеваний мочевой системы. Камни могут смещаться, нарушая целостность слизистой оболочки, что вызывает приступы болей (почечная колика) и появление крови в моче. У большинства больных вследствие присоединения инфекции наблюдается лейкоцитурия вплоть до пиурии, макро- или микрогематурия после почечной колики. Часто в моче в большом количестве содержатся соли и кристаллы.
Нефротический синдром — сочетание двух симптомов: массивной (выраженной) протеинурии, при которой потеря белка с мочой превышает 3,5г в сутки, и упорных отеков. Нефротический синдром может наблюдаться при различных заболеваниях (гломерулонефрите, амилоидозе почек, ХПН), отягощая их течение.
Пиелонефрит [от греч. pyelos лоханка + nephros почка] – инфекционно-воспалительное заболевание, при котором одновременно или последовательно поражаются лоханки и паренхима почек (преимущественно канальцы). Вызывается стафилококками, кишечной палочкой, стрептококками и другими возбудителями. Исследование мочи при острых формах пиелонефрита и обострении хронических форм выявляет значительную лейкоцитурию (до 30-40 и более лейкоцитов в поле зрения) вплоть до пиурии; бактерурию; микрогематурию; протеинурию (обычно до 1 г/л). При хронических формах болезни нарушается концентрационная функция почек.
Хроническая почечная недостаточность (ХПН) – медленно, постепенно возникающее и неуклонно прогрессирующее нарушение функции почек, приводящее к развитию уремии – мочекровия [от греч. uron моча + haimа кровь]. При этом в крови накапливается большое количество токсичных продуктов азотистого обмена (мочевины, мочевой кислоты, креатинина), которые вызывают отравление организма. ХПН является конечной фазой многих хронических заболеваний: гломерулонефрита, пиелонефрита, амилоидоза почек, почечнокаменной болезни и др. Развитие ХПН вызвано гибелью бóльшей части нефронов. Общий анализ мочи при ХПН изменен незначительно, что не соответствует тяжести заболевания. Выявляются протеинурия (до 2 г/л), незначительная лейкоцитурия (до 8-10 в п/зр.), микрогематурия (до 3-4 эритроцитов в п/зр.), единичные цилиндры и клетки почечного эпителия. Проба Зимницкого свидетельствует о резком нарушении концентрационной функции почек – наблюдаются гипо- изостенурия, никтурия.
Цистит [от греч. kystis мочевой пузырь] — воспаление мочевого пузыря. Проявляется дизурическими расстройствами: частым и болезненным мочеиспусканием. Характерными признаками анализа мочи при цистите являются выраженная лейкоцитурия, бактерурия, микро- или макрогематурия, большое количество клеток слущенного переходного эпителия. При трехстаканной пробе патологические примеси (лейкоциты, кровь, гной, слизь) обнаруживаются только в последнем сосуде.
1.4. ЗАКЛЮЧИТЕЛЬНЫЕ КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ К ГЛАВЕ «ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ»
Установите соответствие между элементами в столбцах. Одному элементу в левом столбце соответствует только один элемент в правом столбце.
1. Процессы, происходящие на разных этапах образования мочи:
1) I этап а) секреция глюкозы
2) II этап б) секреция ионов водорода и аммиака
3) III этап в) фильтрация воды и низкомолекулярных веществ
г) обратное всасывание нужных организму веществ
д) реабсорбция конечных продуктов обмена белков.
2. Показатели общего анализа мочи, определяемые при исследовании:
1) физических свойств а) эритроциты, лейкоциты
2) химического состава б) белок, глюкоза
3) микроскопии осадка в) уробилин, билирубин
д) цвет, относительная плотность.
3. Количество мочи при изменении суточного диуреза (л):
4. Изменение суточного диуреза при заболеваниях:
1) сахарный диабет а) никтурия
2) острый гломерулонефрит б) физиологическая олигурия
г) патологическая олигурия
д) патологическая полиурия.
5. Причины изменения цвета мочи:
1) крепкого чая а) гематурия
3) темно-желтый в) билирубинурия
г) низкая концентрация пигментов
д) высокая концентрация пигментов.
6. Цвет мочи при заболеваниях:
1) водянистый а) гемолитическая желтуха
3) мясных помоев в) острый гломерулонефрит
г) паренхиматозная желтуха.
7. Причины мутности мочи и способы её удаления:
1) эритроциты а) добавление уксусной кислоты
2) фосфаты б) добавление эфира
8. Методы определения белка в моче:
1) качественно а) тест-полоски
2) полуколичественно б) Андреева
3) количественно в) с 10% NaOH
9. Виды глюкозурии их причины:
1) экстраинсулярная физиологическая а) стресс
2) экстраинсулярная патологическая б) недостаточность тироксина
3) инсулярная в) гиперфункция щитовидной железы
д) недостаточность инсулина.
10. Причины изменения цвета мочи при различных видах желтух:
1) паренхиматозные а) гематурия
2) гемолитические б) билирубинурия
3) механические в) уробилинурия
д) билирубинурия + уробилинурия.
11. Локализация кровотечения при обнаружении крови в разных порциях мочи
2) в 3-ей порции б) наружные половые органы
3) во всех порциях в) мочеиспускательный канал
12. Причины гематурии, гемоглобинурии и миоглобинурии:
1) ренальная гематурия а) усиленный гемолиз эритроцитов
2) экстраренальная гематурия б) обширные травмы мышечной ткани
3) гемоглобинурия в) опухоли мочевыводящих путей
4) миоглобинурия г) печеночная недостаточность
д) поражение паренхимы почек.
13. Содержание элементов организованного осадка мочи в норме:
2) эритроцитов б) 5-10 в п/зр.
3) восковидных цилиндров в) до 10 в п/зр.
14. Морфология элементов неорганизованного осадка мочи:
1) мочевая кислота а) листья папоротника
15. Растворители для разных видов неорганизованного осадка мочи:
1) щелочь а) трипельфосфаты
2) соляная кислота б) мочевая кислота
16. Исследуемый материал при количественных методах микроскопического
1) Нечипоренко а) утренняя порция в середине мочеиспускания
2) Каковского-Аддиса б) моча за 3 часа
г) 3 порции при однократном мочеиспускании.
17. Содержание форменных элементов в 1мл мочи в норме:
18. Преобладающий вид клеточных элементов в моче при заболеваниях:
1) гломерулонефрит а) лейкоциты
2) пиелонефрит б) плоский эпителий
19. Заболевания и их лабораторные признаки:
1) механическая желтуха а) уробилинурия
2) острый гломерулонефрит б) дизурия
3) сахарный диабет в) олигурия
20. Характерные лабораторные признаки заболеваний:
1) макрогематурия а) пиелонефрит
2) бактерурия б) вирусный гепатит
21. Особенности гематурии при заболеваниях:
1) после почечной колики а) цистит
2) в конце мочеиспускания б) мочекаменная болезнь
Дата добавления: 2014-11-29 ; Просмотров: 1452 ; Нарушение авторских прав? ;
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
источник