Определение суточного белка в моче формула

При заболеваниях почек, сопровождающихся протеинурией, уровень выделения белка с мочой в течение суток колеблется в широких пределах. Поэтому в клинической практике выраженность протеинурии принято оценивать по суточной потере белка с мочой (суточной протеинурии).

В 8 ч утра пациент мочится в унитаз, после чего всю выделенную в течение суток (до 8 ч следующего дня) мочу собирают в отдельную емкость объемом 3 литра. Затем измеряют общее количество мочи, тщательно размешивают ее и наливают в отдельную банку емкостью 150–200 мл. В этой порции мочи определяют концентрацию белка по одному из методов, описанных выше.

Суточную протеинурию (в граммах) рассчитывают по формуле:

где Р_с— суточная протеинурия (в граммах); Р — концентрация белка в суточной моче (г/л); V — суточный диурез.

У здорового человека в разовой порции мочи при использовании перечисленных выше методов белок не определяется. Выделение белка с мочой (протеинурия) имеет важное диагностическое значение. Даже следы белка (0,033 г/л), обнаруженные в разовой порции мочи, требуют уточнения причин протеинурии.

В отдельных порциях мочи здорового человека содержится ничтожно малое количество белков, которое не обнаруживается с помощью обычных качественных реакций, используемых для его открытия.

По данным многих авторов, суточная экскреция белков с мочой до 150 мг может расцениваться как физиологическая норма для взрослого человека.

Белки, выводимые с мочой, имеют различное происхождение.

1. Белки плазмы крови, профильтровавшиеся в клубочках и нереабсорбиро-
занные в канальцах.

2. Белки, секретированные в мочу эпителием канальцев нефронов и мочевы-
делительного тракта. Основной среди них в количественном отношении — белок
Тамма—Хорсфалля, который секретируется клетками толстой восходящей части
петли Генле.

3. Десквамированные клетки эпителия канальцев.

В норме интактный гломерулярный фильтр служит препятствием для проникновения белков плазмы крови в первичную мочу, так как он проявляет избирательность как в отношении размера и конфигурации белковых молекул, так и в отношении их заряда (клубочковый фильтр является электростатическим барьером для отрицательно заряженных белков плазмы) (рис. 1).

Попавшие из крови в ультрафильтрат белки крови подвергаются реабсорбции в проксимальных канальцах нефронов путем пиноцитоза. Способность проксимальных канальцев реабсорбировать индивидуальные белки различна. Реабсорбция белков является насыщаемым процессом. Существуют конкурентные отношения между транспортом отдельных белков в канальцах (вариант А).

Протеинурия — повышение выведения белка с мочой — может быть различной по механизму развития.

Почечная клубочковая протеинурия (варианты В и С) связана с изменениями барьерных свойств клубочкового фильтрата, (вариант В: в мочу поступают белки плазмы с небольшой молекулярной массой — альбумин, трансферрин, α₁-антитрипсин). Развивается селективная протеинурия или (и) потеря избирательности фильтра по отношению к размеру частиц (вариант С: в мочу, помимо белков, обнаруживаемых при селективной протеинурии, поступают крупномолекулярные белки — а₂-макроглобулин, иммуноглобулин G и другие. Развивается неселективная протеинурия).

Почечная канальцевая протеинурия (вариант D) связана с патологией проксимальных канальцев нефронов, при которой нарушается реабсорбция профильтровавшихся белков. Выделение белка с мочой обычно незначительное. В моче содержатся белки, в норме проникающие через неповрежденный гломерулярный фильтр.

Почечная протеинурия может быть функциональной и патологической (органической).

Функциональная почечная протеинурия не связана с поражением почек, а является следствием временного, преходящего увеличения фильтрации белков сыворотки крови в ответ на сильные внешние раздражители. Причиной функциональной протеинурии может быть тяжелая физическая нагрузка, лихорадка, эмоциональное напряжение, охлаждение. К функциональной относят также ортостатическую протеинурию.

Органическая протеинурия обусловлена поражением самой паренхимы почек возникает как на фоне почечных заболеваний, так и различных видов патологии, при которых почки страдают вторично: различные варианты гломерулонефрита, нефротический синдром, врожденные и наследственные нефропатии, туберкулез, амилоидоз почек, поражение почек при сахарном диабете, злокачественный нефросклероз на фоне тяжелой гипертензии, системнаякрасная волчанка, геморрагический васкулит, хронический пиелонефрит.

Внепочечная преренальная протеинурия, или протеинурия перегрузки (вариант Е), связана с повышением концентрации общего белка в плазме крови или появлением в крови парапротеинов в высокой концентрации. В этом случае белок в ультрафильтрате оказывается в таком количестве, которое превышает способность канальцев к реабсорбции. Перегрузочная протеинурия может быть
вызвана тремя распространенными белками: легкие цепи иммуноглобулинов (белки Бенс-Джонса в моче при миеломной болезни, макроглобулинемии Вальденстрема), гемоглобин (гемолиз, сопровождающийся полным насыщением системы гаптоглобина), миоглобин (например, при рабдомиолизе).

К преренальной протеинурии относят также протеинурию, связанную с гемодинамическими расстройствами в почках, возникающими при сердечной недостаточности, гиповолемии, гиперлордозе и др.

Внепочечная постренальная протеинурия, которую часто называют «ложной», свойственна заболеваниям мочеполового тракта (воспаление, опухоли мочеточников, мочевого пузыря, предстательной железы и др).

1. Заполните схему

2. Какое происхождение имеют белки, выводимые с мочой?

3. Заполните бланк анализа мочи, если исследуемая моча желтого цвета, мутная, относительная плотность 1028, реакция кислая, белок обнаружен 0,33г/л.

источник

Нормальные показатели: белок в норме в моче содержится в минимальных количествах, которые не обнаруживаются обычными качественными реакциями. Верхняя граница нормы белка в моче – 0,033 г/л. Если содержание белка выше этого значения, то качественные пробы на белок становятся положительными.

Клиническое значение определения:

Появление белка в моче называется протеинурия. Протеинурии могут быть ложными и почечными. Экстраренальные протеинурии могут быть при наличии примесей белкового происхождения из половых органов (вагинитах, уретритах и др.), количество белка при этом незначительно – до 0,01 г/л. Почечные протеинурии могут быть функциональными (при переохлаждении, физических нагрузках, лихорадке) и органическими — при гломерулонефрите, пиелонефрите, нефрите, нефрозах, почечной недостаточности. При почечных протеинуриях содержание белка может быть от 0,033 до 10 – 15 г/л, иногда выше.

Принцип метода: основан на том, что белок под действием неорганических кислот коагулирует (становится видимым). Степень помутнения зависит от количества белка.

Обнаружение белка в моче с 20% сульфосалициловой кислотой.

Реактивы: 20% р-р сульфосалициловой кислоты. Оборудование: темный фон.

1. Требования к моче: моча должна быть кислой (или слабокислой) рН, должна быть прозрачной, для этого мочу центрифугируют. Щелочную мочу подкисляют до слабокислой реакции среды, используя для контроля индикаторную бумагу.

2. В 2 пробирки одинакового диаметра наливают по 2 мл подготовленной мочи. 1 пробирка – контроль, 2 – опыт. В опытную пробирку добавляют 4 капли 20% сульфосалициловой кислоты.

3. Результат отмечают на темном фоне.

4. При наличии белка, моча в опытной пробирке мутнеет.

Качественное определение белка в моче тест – полосками.

Для выявления протеинурий используют различные монотест – полоски: Альбуфан, Альбустикс, Биофан Е и политесты: Трискан, Нонафан и др.

Обнаружение белка в моче по методу Робертса – Стольникова.

Принцип метода: основан на том, что белок под действием неорганических кислот коагулирует (становится видимым). Степень помутнения зависит от количества белка (т.е. кольцевая проба Геллера). При концентрации белка в моче 0,033 г/л к концу 3 минуты после наслаивания мочи появляется тонкое нитевидное белое кольцо.

Реактивы: 50% р-р азотной кислоты или реактив Робертса (98 частей насыщенного раствора поваренной соли и 2 части концентрированной соляной кислоты) или реактив Ларионовой (98 частей насыщенного р-ра поваренной соли и 2 части концентрированной азотной кислоты).

2. В пробирку наливают 2 мл 50% р-ра азотной кислоты или один из реактивов, затем осторожно по стенке пробирки с помощью пипетки наслаивают такой же объем подготовленной мочи

3. Пробу оставляют на 3 минуты

4. Через 3 минуты отчитывают результат. Результат отмечают на темном фоне в проходящем свете. Если кольцо широкое, компактное, то мочу разводят дистиллированной водой и вновь наслаивают на реактив.

5. Мочу разводят до тех пор, пока через 3 минуты не образуется тонкое нитевидное кольцо.

6. Расчет содержания белка в моче производят по формуле:

С = 0,033г/л х степень разведения.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

источник

Суточная протеинурия – лабораторное исследование урины, которое проводится с целью определения объема отделяемого за сутки белка. Анализ позволяет выявить заболевания мочевыделительной системы, наличие очагов воспаления в организме. Иногда рост количества протеинов вызван воздействием внешних факторов. Поэтому важно разобраться в возможных причинах такой проблемы и особенностях проведения анализа.

Присутствие небольшого объема белка в моче считается естественным. Он проникает в урину во время работы почек и в процессе метаболизма. Избыточное его количество носит название протеинурия. Такое состояние может стать симптомом болезни, а потому оставлять его без внимания нельзя.

Выделяют два основных вида белковых соединений, которые обнаруживаются в биологической жидкости: альбумины и глобулины.

Первые легко растворяются в воде и имеют небольшую молекулярную массу. Патология, при которой отмечается резкий их рост, называется альбуминурия.
Глобулины трудно растворимы. Их молекулярная масса достаточно высокая. Оба белка могут легко проникать сквозь почечные клубочки. Если мочевыделительная система функционируют правильно, то в урине обнаруживаются только следы протеиновых соединений.

Максимальное количество суточного белка в моче взрослого человека составляет 140 мг\сутки. Такой показатель считается нормальным только при проведении специальных исследований. В ходе общего анализа могут обнаруживаться только следы белка. Естественным признается его концентрация менее 0,033 грамм\литр.

В период беременности содержание белка в урине повышается. Это связано с увеличением интенсивности кровотока в почках. Для будущих мам нормальным признается выделение от 150 до 300 мг белка в течение суток. Значительное отклонение от нормы становится признаком развития осложнений и требует обязательного лечения. Поэтому беременным женщинам придется подготовиться к сдаче таких анализов.

Суточный анализ мочи на белок может показать превышение нормативных показателей в результате воздействия на организм следующих неблагоприятных факторов:

Употребление чрезмерного количества белковой пищи.
Избыточные физические нагрузки. С такой проблемой чаще сталкиваются спортсмены и люди, чья работа связана с длительным пребыванием в вертикальном положении, например, военные.
Сильный стресс, провоцирующий нарушения в работе внутренних органов и систем.
Лихорадочное состояние. Повышение температуры тела до отметки в 38 градусов и выше провоцирует ускорение реакций распада химических веществ в организме, что и приводит к чрезмерному выделению белка.
Интенсивная пальпация живота, которая проводилась достаточно долго.
Серьезное переохлаждение организма или тепловой удар.

Функциональная протеинурия не сопровождается развитием серьезных патологий. При устранении негативного воздействия состояние здоровья быстро нормализуется.

Повышенное количество белка в урине обнаруживается у подростков, имеющих астеническое телосложение. Нередко это становится одним из симптомов поясничного лордоза.

Значительное превышение нормы белка в суточной моче часто наблюдается при развитии серьезных заболеваний. Среди них выделяют:

Сердечная недостаточность. При такой болезни отмечается нарушение кровоснабжения почек, что приводит к нарушению процесса фильтрации.
Амилоидоз почек. Такое заболевание сопровождается изменением углеводно-белкового баланса в организме, в результате чего происходит внеклеточное отложение амилоида в почечной ткани. Это приводит к потере функциональности органа.
Гемолитическая анемия. Проблема сопровождается массовым разрушением эритроцитов, из-за чего в кровь попадает большая концентрация гемоглобина.
Злокачественные новообразования.
Гломерулонефрит – поражение клубочков почек, которое может приводить к отмиранию тканей почечных канальцев.
Нефросклероз. Болезнь сопровождается склерозированием нефронов почек. Их место занимает стремительно разрастающаяся соединительная ткань. В результате почки уменьшаются в размерах, становятся сморщенными. Итогом этому становится почечная недостаточность, сокращение диуреза, и как следствие значительная интоксикация организма.
Эпилепсия и травмы головы, сопровождающиеся кровоизлиянием в мозг.
Диабетическая нефропатия. Такое нарушение функционирования почек происходит на фоне изменения метаболизма углеводов и жиров при серьезной гипертонии.
Мочекаменная болезнь. Конкременты, формирующиеся в почках, провоцируют потерю их функциональности. В результате этого выделение протеинов в мочу усиливается многократно.
Туберкулез почек. Инфекционное заболевание, которое поражает паренхиму почек. Возбудителями становятся микобактерии туберкулеза.

В некоторых случаях экскреция белка может быть спровоцирована аллергической реакцией организма на различные вещества. При всех вышеперечисленных заболеваниях наблюдается повреждение почечных фильтров. В результате происходит активное выведение протеинов вместе с уриной.

Суточный анализ мочи на белок проводят при наличии симптоматики, характерной для протеинурии. Выраженность клинической картины будет во многом зависеть от степени тяжести проблемы. Среди основных признаков выделяют:

Диспепсические расстройства.
Скачки артериального давления.
Болевые ощущения в области поясницы.
При сердечной недостаточности появляются боли в области грудины.
Головные боли.
Ломота в костях. Она связана с усиленным вымыванием белка из организма.
Снижение аппетита.
В детском возрасте отмечается выраженная отечность.

При такой проблеме изменения можно заметить и в процессе мочеотделения. Он может причинять дискомфорт, желания сходить в туалет появляются чаще. В урине обнаруживается белый осадок в виде хлопьев.

Чтобы получить достоверные результаты исследований важно помнить, как правильно собрать суточную мочу. Необходимо соблюдать несколько ключевых рекомендаций:

За день до сбора биологической жидкости необходима подготовка к процедуре. Откажитесь от употребления мочегонных препаратов, а также медикаментов, содержащих большие дозы аскорбиновой кислоты. Постарайтесь избегать физических нагрузок и стрессовых ситуаций. Не употребляйте алкогольных напитков и вредных продуктов питания.
Перед мочеиспусканием проводят тщательный туалет половых органов без применения моющих средств. Особенно важным это оказывается для женщин, так как попадание в образец вагинального секрета искажает результаты.
Важным аспектом того, как собирать мочу перед исследованием, становится подготовка емкости. Она должна быть сухой и чистой, иметь плотно закрывающуюся крышку. Выбирайте банку объемом не менее 2,5 литров.
Для анализа мочи на протеинурию отделяемая сразу после пробуждения порция урины не нужна. В течения всего остального дня нужно мочиться в банку. Заключительное мочеиспускание в емкость совершается ровно через сутки после первого.
Правила сбора образцов гласят, что хранить собираемую мочу необходимо при низкой температуре. Лучше всего поместить плотно укупоренную банку с уриной в холодильник.

У многих возникает вопрос, как собрать урину у грудных детей. В современных аптеках продаются специальные мочеприемники. Они подходят как для мальчиков, так и для девочек. У лежащих больных жидкость собирают при помощи судна или катетера.

После сбора заключительной порции постарайтесь как можно быстрее доставить емкость в лабораторию. Длительное хранение образцов исказит результаты.

В лаборатории определение содержания белка проводится несколькими способами:

К порции мочи добавляется сульфосалициловая кислота. Если количество протеинов повышено, жидкость становится мутной, взвешенные частицы начинают мерцать.
В пробирку вливают азотную кислоту, а сверху распределяют небольшой слой мочи. Если суточная потеря белка превышает норму, то на границе двух жидкостей появляется белесое кольцо.

Концентрацию протеинов рассчитывают с применением специальной формулы. По результатам полученных исследований можно будет сделать вывод о наличии патологий.

Анализ мочи на суточную протеинурию позволяет выявить не только наличие белка, но и его концентрацию. Исходя из полученных показателей, определяют степень тяжести заболевания. Выделяют три основных фазы проблемы:

Если количество выявленных протеинов находится в промежутке от 1 до 1,1 грамма, то ставится диагноз умеренная протеинурия. Ее причинной чаще становится наличие воспалительного процесса в организме. Такие показатели также обнаруживаются на начальной стадии онкологических заболеваний.
Когда суточный белок в моче находится на уровне от 1,2 до 3,1 грамма, говорят о средневыраженной протеинурии. Таким признаком сопровождаются заболевания, вызванные бактериальным поражением, а также нарушением функциональности почек.
Если анализ суточной мочи показал результат выше 3 грамм, то речь идет о ярко выраженной протеинурии. Это наблюдается при гломерулонефрите, сильной интоксикации организма и тяжелой почечной недостаточности. Такое состояние требует незамедлительного лечения. В противном случае развиваются осложнения, угрожающие не только здоровью, но и жизни человека.

Если в ходе исследований суточной мочи на белок выявляются серьезные отклонения от нормы, специалист подбирает адекватную программу лечения. Пациент должен строго придерживаться всех предписаний врача.

Превышение суточного количества отделяемого белка опасно для здоровья человека. Поэтому такое состояние требует обязательного лечения. Применяемая лечебная тактика будет зависеть от особенностей выявленного заболевания. Возможно применение следующих методик:

Применение лекарственных препаратов. При наличии инфекции назначаются антибиотики. Для устранения скачков артериального давления показано использование гипотензивных медикаментов. Если обнаружены новообразования, нужно применять противоопухолевые средства.
Правильное питание. Предотвратить потерю белка помогает рациональное меню. Нужно ежедневно есть овощи, зелень, ягоды и фрукты. Старайтесь не употреблять большое количество белковой пищи. Минимизируйте количество соли в ваших блюдах.
Корректировка образа жизни. Требуется полный отказ от вредных привычек. Старайтесь оградить себя от стрессов, психологических и умственных перенапряжений. Контролируйте уровень физических нагрузок.

При ярко выраженной протеинурии требуется терапия в условиях стационара. Врач должен постоянно контролировать состояние пациента и при необходимости корректировать программу лечения. Незначительное отклонение белка от нормативных показателей корректируется в домашних условиях.

С проблемой протеинурии человек может столкнуться в любом возрасте. Поэтому важно знать, как распознать такое отклонение и как сдавать суточный анализ правильно. Это поможет выявить болезнь на ранней стадии и приступить к терапии.

источник

Являясь побочным продуктом человеческой жизнедеятельности, моча содержит в себе значительное количество различных биологических веществ. По их присутствию в ней можно судить о состоянии организма человека. В медицине лабораторные анализы мочи имеют большое значение при выявлении тех или иных патологий. Особая роль отводится определению количества белка.

Исследование суточной протеинурии (протеинурия дословно — белок в моче) направлено на определение концентрации в моче белка. В норме его в урине быть не должно, но в некоторых случаях он может присутствовать в крайне незначительном количестве.

Сам по себе белок являет собой необходимое органическое соединение, являющееся неким «строительным материалом» для клеток человеческого организма. По сути, сам человек во многом состоит из различных белковых соединений. Однако появление его в моче свидетельствует о патологии, в первую очередь почек.

При помощи данного анализа можно определить в моче два типа белковых соединений:

Ни альбумины, ни глобулины не должны систематически выявляться при проведении анализа мочи

Чаще всего обнаруживаются альбумины, которые и свидетельствует о заболеваниях мочевыделительной системы. Глобулины выявляют в моче очень редко, однако их наличие свидетельствует об аутоиммунных патологиях, что, впрочем, не всегда является точным маркером, так как при определённых условиях наличие данного органического соединения является физиологической нормой.

Основной ценностью этого метода исследования является то, что при помощи его на ранней стадии можно выявить серьёзные заболевания мочевыделительной системы, когда они ещё остаются бессимптомными.

Недостатком анализа является то, что для получения точного результата сдавать его приходится несколько раз. Это связано с тем, что в некоторых случаях допускается появление белка в моче по физиологическим причинам, не связанным с развитием патологии.

Показанием для определения суточной протеинурии является подозрение на следующие патологии:

инфекционно-воспалительные заболевания почек;
аутоиммунные заболевания;
злокачественные опухоли;
хронические неинфекционные поражения почек.

Кроме того, исследование проводится и в профилактических целях после перенесённых заболеваний для выявления возможных рецидивов.

Определение концентрации белковых соединений в моче обязательно проводится у беременных, так как нагрузка на почки в этот период особенно высока.

Противопоказаний к данному исследованию нет.

Рекомендуется за сутки до проведения исследования воздерживаться от активных физических нагрузок. Это связано с тем, что под их воздействием фильтрационная функция почек может снизиться, что приведёт к попаданию в мочу белковых соединений. Также следует отказаться от приёма продуктов с высоким содержанием белка, в том числе:

За сутки до исследования рекомендуется исключить продукты с высоким содержанием белка

Сбор урины проводится по следующим правилам:

Моча, выделившаяся сразу после пробуждения, для анализа не годится, так как содержит в себе слишком много продуктов распада.
Во время следующих актов мочеиспускания следует собирать мочу в один контейнер.
Перед самим забором мочи необходимо провести тщательный туалет половых органов.
В перерывах между походами в туалет ёмкость с уриной следует хранить в тёмном прохладном месте.
Моча собирается таким образом в течение суток.
На следующий день собранную мочу нужно перемешать путём взбалтывания и отлить из ёмкости около 50 мл жидкости в специально приобретённый для этого контейнер меньшего объёма, который и следует отнести в лабораторию на исследование.

На исследование мочу следует отнести в одноразовом стерильном контейнере, приобретённом в аптеке

Для забора урины у младенцев следует использовать специальные мочеприёмники, которые можно приобрести в аптеке. Сбор мочи у лежачих больных осуществляется через специальные подкладные судна. Также допустимо использовать в этих целях катетер, однако данная методика применима в стационарных условиях.

Мочеприёмник — это мягкий стерильный пластиковый контейнер, который крепится к наружным половым органам ребёнка клейкой частью

В лаборатории содержание белков в моче определяют при помощи двух методов:

Проба с азотной кислотой. Суть метода заключается в том, что в пробирку набирают небольшое количество азотной кислоты, а поверх неё добавляют мочу. При повышенном содержании в ней белков между слоями урины и кислоты образуется белесое кольцо.
Проба с сульфосалициловой кислотой. В пробирку с мочой добавляется сульфосалициловая кислота. Если белок отсутствует, то никакой реакции не произойдёт. При его наличии жидкость резко мутнеет и появляется небольшая взвесь.

Количественное содержание белка в моче высчитывается по специальным формулам. Точность данного вида исследования считается довольно высокой.

Нормальным показателем при данном исследовании является отсутствие белка в моче или же его концентрация не более 0,014 г/л. Это значение полностью исключает проблемы с почками и свидетельствует о хорошем состоянии мочевыделительной системы.

У беременных, особенно в период третьего триместра, это значение может повышаться до уровня 0,033 г/л. Это также является физиологической нормой у данной категории обследуемых. У детей допустимо повышение концентрации белка в моче до 0,036 г/л, и это тоже не является поводом для беспокойства.

Иногда количество белка может быть повышено и у вполне здоровых людей. Это связано с игнорированием правил подготовки, когда перед сдачей анализа пациент употребляет большое количество продуктов, содержащих протеины, или подвергает организм чрезмерным физическим нагрузкам. Во избежание ложных интерпретаций анализа при превышении содержания белка в моче исследование необходимо повторить.

Содержание белка в моче — важный показатель, свидетельствующий о состоянии здоровья органов мочевыделительной системы, в первую очередь почек. Точность метода довольно высока, однако его результаты сильно зависят от того, насколько обследуемый соблюдал правила подготовки к анализу.

источник

Определение суточной потери белка представляет собой исследование мочи, при котором определяется функциональное состояние почек, в частности клубочкового аппарата. Этот анализ получил достаточно широкое распространение в практической медицине благодаря простоте проведения, а также высокой информативности.

Белки (протеины) представляют собой органические азотсодержащие соединения, которые состоят из аминокислот и являются синтетическим материалом для всех структур организма. В крови они находится в виде альбуминов и глобулинов. Молекулы этих соединений имеют достаточно большие размеры, поэтому не проходят через полупроницаемую мембрану клубочков почек, выполняющую роль биологического фильтра во время фильтрации. При нормальном функциональном состоянии почек в моче может быть небольшое количество протеина (следы), концентрация которого не должна превышать 140 мг/мл мочи (0,140 г/л мочи). В небольшом количестве он попадает за счет слущивания эпителиальных клеток, продукции мукопротеидов слизистыми оболочками структур мочевыделительной системы, а также фильтрации единичных молекул альбуминов крови.

В пробе мочи проводится определение концентрации белка при помощи различных методик. Самой распространенной из них является добавление специальных химических реагентов, вызывающих денатурацию белковых соединений. При этом на границе мочи и реактива (реактив наслаивается на мочу в пробирке) образуется белое кольцо. По кратности разведения мочи, при котором образуется тоненькое кольцо из денатурированного протеина рассчитывается его концентрация. Количество белка, выводимого в течение суток (суточная протеинурия) определяется в пробе мочи, собранной за 24 часа.

В современных лабораториях данное исследование проводится при помощи специальных анализаторов, которые дают более точный количественный результат.

Определение суточной протеинурии позволяет оценить функциональное состояние клубочкового аппарата почек, выполняющего фильтрацию крови (образование первичной мочи). При различной патологии биологическая (полупроницаемая) мембрана воспаляется и повреждается, что приводит к прохождению белковых молекул через нее. По количеству протеинов при исследовании можно судить о выраженности повреждения клубочкового аппарата почек. Существует несколько основных показаний к проведению данного исследования:

Профилактическое исследование для определения функционального состояния почек (оно также может включать пробу по Зимницкому).
Диагностика различных заболеваний почек, сопровождающихся выведением протеинов, в частности аутоиммунного воспаления (гломерулонефрит) с поражением клубочкового аппарата.
Онкологический процессс формированием злокачественной опухоли почек или другой локализации.
Выявление инфекционного процесса в почках (пиелонефрит) или структурах мочевыделительной системы, при этом в моче белок появляется за счет повышения продукции слизи, появления лейкоцитов в моче.

Также данное исследование проводится в сомнительных случаях, когда другие методы диагностики не дают достоверного результата.

Для сбора мочи необходима чистая стеклянная посуда емкостью не менее 3-х литров. Утром в день исследования (обычно в 6.00) первое мочеиспускание производится без сбора. Затем при каждом последующем мочеиспускании она собирается в одну посуду до 6.00 утра следующего дня. Затем определяется общий объем мочи (необходим для проведения расчетов), часть порции отливается в чистую посуду объемом 100-150 мл и отправляется в лабораторию, где определяется суточная протеинурия.

Очень важным условием правильного сбора анализа является чистая посуда, так как загрязнение (особенно органическими веществами) может привести к ложноположительному результату. Также к этому может привести прием некоторых медикаментов (антибиотики, рентгенконтрастные вещества).

В норме в течение суток с мочой может выводится не более 150 мг протеинов. При превышении этого показателя, в зависимости от его выраженности различают несколько видов протеинурии:

Умеренная протеинурия (в сутки выводится до1 г белка) – бывает при инфекционном воспалительном процессе, интоксикации организма, начальной стадии опухолевой патологии, при диете с повышенным употреблением белковой пищи.
Средняя протеинурия (от 1-го до 3-х г белка) – может быть при тяжелых инфекциях или гнойных процессах, гломерулонефрите легкой степени.
Выраженная протеинурия (выводится более 3-х г белка в сутки) – указывает на тяжелое поражение клубочкового аппарата почек при гломерулонефрите, поражении организма различными токсинами.

Окончательное выяснение причины появления белка проводит врач на основании данных клинического обследования, а также других методов лабораторного, инструментального и функционального исследования.

источник

Протеинурия — это такое состояние организма, при котором усиливается нахождение общего белка в моче. Сам медицинский термин образовался от двух слов: protein, что переводится как белок, и urina (моча). Следовательно, в таком состоянии в моче человека находят два протеина — альбумин и глобулин (иммуноглобулин). Альбумин является наиболее часто встречающимся в урине протеином, что обуславливает название альбуминурии, которые было присвоено термину протеинурия вплоть до 1997 года.

Что такое синдром протеинурии?

Синдром протеинурии — состояние организма человека, при котором происходит выделение белка в моче более, чем 150 мг/сут. По данным международных исследований синдром протеинурии определяется у 17% пациентов, обратившихся с жалобами на мочеполовую систему.

Различают следующие формы протеинурии:

Физиологическая протеинурия возникает при таких временных состояниях, как марафонский бег, игровые виды и длительные походы, поздние сроки беременности, переохлаждение.
Ортостатическая (лордостатическая, постуральная) протеинурия носит изолированный характер, встречается у детей в возрасте от 5 до 15 лет. Проявляется как скудный осадок в моче, а прибавление к моче уксусной кислоты способствует осаждению особого белка, отсутствующего при нефрите и нефрозе. При наличии сопутствующих хронических заболеваний с прогрессирующими очагами (тонзиллит, ангина) в первую очередь необходима санация очагов, так как ортостатическая протеинурия в данном случае может стать первым проявлением поражения почек. При отсутствии сопутствующих заболеваний лечение не требуется. Ребенку показаны длительные прогулки на свежем воздухе и особый подход и осторожность к физическим нагрузкам. Также ортостатическая протеинурия возникает при ходьбе или длительном состоянии и исчезает при смене положения.
Алименарная заключается в чрезмерном нахождении белка в моче из-за переедания белковой пищи.
Эмоциональная протеинурия возникает при подготовке к экзаменам, стрессах, большой умственной нагрузки.
Причинами центрогенной протеинурии являются сильные сотрясения мозга и эпилепсия.
Пальпаторная протеинурия может возникнуть из-за длительного ощупывания почек и низа живота.
Застойная или сердечная протеинурия в основном проявляется при заболеваниях сердца и исчезает при излечении первопричины.
Лихорадочная протеинурия появляется у пациентов с температурой тела Особенно характерная для лиц пожилого, старческого возраста и детей, обычно указывает на поражение почек.
Протеинурия напряжения или рабочая (маршевая) протеинурия возникает практически у 20% здоровых людей после тяжелых физических нагрузок. Механизм возникновения канальцевый, из-за перераспределения внутрипочечного кровотока и относительной ишемией проксимальных канальцев.

Физиологическая протеинурия не превышает обычно 1 г/сут, редко бывает по продолжительности больше недели. Превышение 3 г/сут при протеинурии является ключевым признаком нефритического синдрома.

Патологическая протеинурия в зависимости от этиологии бывает надпочечная, почечная, постпочечная, а также внепочечного происхождения (ложная). Она является основным симптомом воспалительных, урологических и дистрофических заболеваний мочевыводящих путей и почек.
Надпочечная (преренальная) протеинурия формируется при нарушении фильтрации почек (поражение фильтра) и при гемолизе внутри сосудов (выделение гемоглобина).
При почечной (ренальной) протеинурии белок проникает в мочу непосредственно из крови через поврежденные участки эндотелия почечных клубочков. Формируется непосредственно при повышении фильтрации клубочков (гормональная форма) и при синдроме Фанкони (недостаточная реабсорбция, тубулярная форма). К почечной протеинурии также относится и физиологическая протеинурия, рассмотренная выше. Причинами почечной протеинурии также могут быть расстройства почечной гемодинамики, гипоксия и трофические изменения в эндотелии клубочков, токсические, а также и лекарственные влияния на стенки клубочковых капилляров.
Почечная клубочковая протеинурия возникает при гломерулонефритах и нефропатиях, которые связаны с обменными или сосудистыми заболеваниями. Наблюдается как при остром, так и при хроническом гломерулонефрите, тромбозе почечных вен, застое почке, гипертонической болезни, амилоидозе.
Почечная канальцевая протеинурия возникает из-за невозможности реабсорбации плазменных низкомолекулярных белков, отфильтрованных в нормальных клубочках. Отличительных признаком является отсутствие в моче высокомолекулярных белков, преобладание над альбумином α2- микроглобулина.
Постпочечный аналог проявляется при наличии бактерий в моче и при повышенной секреции белка мочевыводящими путями.
Внепочечная протеинурия называется еще ложной протеинурией, так как наличие белка в моче не зависит от его элиминации в почках. Он может примешиваться вследствие гнойных и катаральных процессов в почечных лоханках, предстательной железе (постренальная), мочевом пузыре, мочеточниках, мочеиспускательном канале.
Бенс-Джонса протеинурия или парапротеинурия встречается при различных парапротеинемиях (например, миеломная болезнь). В данном состоянии в моче определяется только одна фракция белка, повышено образование плазменных низкомолекулярных белков над отфильтрованными нормальными клубочками, которые реабсорбированы канальцами.
Протеинурия с мукопротеинами связана с наибольшим по сравнению с другими протеинами количеством белка Гамма-Хорсфалла.

Стоит отметить и следующие состояния, при которых в моче появляется лишний белок:

Миоглобинурия — состояние, при котором в моче превышение миоглобина в 30 мг %. Миоглобинурия рассматривается как одно из состояний ложной гемоглобинурии, существенным признаком является появление в моче миоглобулина и развитие в тяжелых случаях почечной недостаточности.
Гемоглобинурия является одной из форм гемолитической анемии (гемоглобинемии), симптомом такой патологии, как внутрисосудистое повреждение эритроцитов. Проявляется как массовое выделение сложного железосодержащего белка гемоглобина в околососудистую среду и мочу. Может возникнуть вследствие внешних факторов (чрезмерная физическая нагрузка, травмы, переохлаждение, интоксикация), так и внутренних (острая инфекция, пневмония, грипп). В здоровом состоянии может содержаться до 5% гемоглобина в плазме крови. Стоит отметить врожденную гемоглобинурию, когда содержание гемоглобина достигает 25% — бета-талассемия, серповидно-клеточная анемия.

С помощью электрофореза при исследованию мочи может быть определено происхождение белков, выделенной с мочой:

Селективная протеинурия выражена выделением с мочой альбумина и низкомолекулярных белков, которые либо указывают на минимальные повреждения клубочков (нефротический синдром), либо проходят через неповрежденные клубочки из почек в мочу. Значительная протеинурия обычно является селективной.
При неселективной протеинурии в моче могут быть обнаружены все виды плазменных белков. Такая протеинурия не может быть значительной, возникает за счет увеличения пор почечных клубочков, через которые происходит фильтрация. Характрная для более глубокого поражения почечного аппарата.

При диагностировании выделяют следующие степени протеинурии:

Умеренная протеинурия, при которой происходит выделение порядка сопутствует практически всем упомянутым выше заболеваниям.
Высокая наблюдается при превышении нормы протеинурии в 3 г/сут.

источник

Почечная (истинная) протеинурия бывает функциональной и органической. Среди функциональной почечной протеинурии наиболее часто наблюдаются следующие ее виды:

— физиологическая протеинурия новорожденных, которая исчезает на 4— 10-й день после рождения, а у недоношенных несколько позже;
— ортостатическая альбуминурия, которая характерна для детей в возрасте 7—18 лет и появляется только в вертикальном положении тела;
— транзиторная (инсультная) альбуминурия, причиной которой могут быть различные заболевания органов пищеварения, тяжелая анемия, ожоги, травмы или физиологические факторы: тяжелая физическая нагрузка, переохлаждение, сильные эмоции, обильная, богатая белком пища и др.

Органическая (почечная) протеинурия наблюдается вследствие прохождения белка из крови через поврежденные участки эндотелия почечных клубочков при заболеваниях почек (гломерулонефрит, нефроз, нефросклероз, амилоидоз, нефропатия беременных), расстройствах почечной гемодинамики (почечная венная гипертензия, гипоксия), трофических и токсических (в том числе лекарственных) воздействиях на стенки капилляров клубочков.

Большинство качественных и количественных методов определения белка в моче основаны на его коагуляции в объеме мочи или на границе сред (мочи и кислоты).

Среди качественных методов определения бедка в моче наибольшее распространение получили унифицированная проба с сульфосалициловой кислотой и кольцевая проба Геллера.

Унифицированная проба с сульфасалициловой кислотой проводится следующим образом. В 2 пробирки наливают по 3 мл профильтрованной мочи. В одну из них прибавляют 6—8 капель 20 % раствора сульфасалициловой кислоты. На темном фоне сравнивают обе пробирки. Помутнение мочи в пробирке с сульфасалициловой кислотой указывает на наличие белка. Перед исследованием необходимо определить реакцию мочи, и если она щелочная, то подкислить 2—3 каплями 10 % раствора уксусной кислоты.

Проба Геллера основана на том, что при наличии белка в моче на границе азотной кислоты и мочи происходит его коагуляция и появляется белое кольцо. В пробирку наливают 1—2 мл 30 % раствора азотной кислоты и осторожно по стенке пробирки наслаивают точно такое же количество профильтрованной мочи. Появление белого кольца на границе двух жидкостей указывает на наличие белка в моче. Следует помнить, что иногда белое кольцо образуется при наличии большого количества уратов, но в отличие от белкового кольца оно появляется несколько выше границы между двумя жидкостями и растворяется при нагревании [Плетнева Н.Г., 1987].

Из количественных методов наиболее часто применяются:

1) унифицированный метод Брандберга—Робертса—Стольникова, в основу которого положена кольцевая проба Геллера;
2) фотоэлектроколориметрический метод количественного определения белка в моче по помутнению, образующемуся при добавлении сульфасалициловой кислоты;
3) биуретовый метод.

Выявление белка в моче упрощенным ускоренным методом проводят колориметрическим методом с помощью индикаторной бумаги, которую выпускают фирмы «Lachema» (Словакия), «Albuphan», «Ames» (Англия), «Albustix», «Boehringer» (Германия), «Comburtest» и др. Метод заключается в погружении в мочу специальной бумажной полоски, пропитанной тетрабромфеноловым синим и цитратным буфером, которая меняет свой цвет от желтого до синего в зависимости от содержания белка в моче. Ориентировочно концентрацию белка в исследуемой моче определяют с помощью стандартной шкалы. Для получения правильных результатов необходимо соблюдать следующие условия. рН мочи должна быть в пределах 3,0—3,5; при слишком щелочной моче (рН 6,5) будет получен ложноположительный результат, а при слишком кислой моче (рН 3,0) — ложноотрицательный.

Бумага должна находиться в контакте с исследуемой мочой не дольше, чем указано в инструкции, в противном случае тест даст ложноположительную реакцию. Последнюю также наблюдают и при содержании в моче большого количества слизи. Чувствительность различных видов и серий бумаги может быть различной, поэтому к количественной оценке белка в моче этим методом следует относиться осторожно. Определение его количества в суточной моче при помощи индикаторной бумаги невозможно [Плетнева Н.Г., 1987]

Существует несколько способов определения количества белка, выделившегося с мочой за сутки. Наиболее простым является метод Брандберга —Робертса—Стольникова.

Методика. 5-10 мл тщательно перемешанной суточной мочи наливают в пробирку и осторожно по стенкам ее добавляют 30 % раствор азотной кислоты. При наличии белка в моче в количестве 0,033 % (т.е. 33 мг на 1 л мочи) через 2-3 мин появляется тонкое, но четко видимое белое кольцо. При меньшей его концентрации проба отрицательная. При большем содержании белка в моче его количество определяют путем многократных разведений мочи дистиллированной водой до тех пор, пока не перестанет образовываться кольцо. В последней пробирке, в которой еще видно кольцо, концентрация белка будет составлять 0,033 %. Умножив 0,033 на степень разведения мочи, определяют содержание белка в 1 л неразведенной мочи в граммах. Затем рассчитывают содержание белка в суточной моче по формуле:

где К — количество белка в суточной моче (г); х — количество белка в 1 л мочи (г); V — количество мочи, выделенное за сутки (мл).

В норме в течение суток с мочой выделяется от 27 до 150 мг (в среднем 40—80 мг) белка.

Указанная проба позволяет определить в моче только мелкодисперсные белки (альбумины). Более точные количественные методы (колориметрический метод Кьельдаля и др.) довольно сложны и требуют специальной аппаратуры.

При почечной протеинурии с мочой выделяются не только альбумины, но и другие виды белка. Нормальная протеинограмма (по Зейцу и соавт., 1953) имеет следующее процентное содержание: альбуминов — 20 %, α₁-глобулинов — 12 %, α₂-глобулинов — 17 %, γ-глобулинов — 43 % и β-глобулинов — 8 %. Отношение альбуминов к глобулинам изменяется при различных заболеваниях почек, т.е. нарушается количественное соотношение между белковыми фракциями.

Наиболее распространенными методами фракционирования уропротеинов являются следующие: высаливание нейтральными солями, электрофоретическое фракционирование, иммунологические методы (реакция радиальной иммунодиффузии по Манчини, иммуноэлектрофоретический анализ, преципитационный иммуноэлектрофорез), хроматография, гель-фильтрация, а также ультрацентрифугирование.

В связи с внедрением методов фракционирования уропротеинов, основанных на изучении электрофоретической подвижности, вариабильности молекулярной массы, размеров и формы молекул уропротеинов, появилась возможность выделять характерные для того или иного заболевания типы протеинурии, изучать клиренсы индивидуальных плазменных белков. К настоящему времени в моче идентифицировано свыше 40 плазменных белков, В том числе в нормальной моче 31 плазменный белок [Berggard, 1970].

В последние годы появилось понятие селективности протеинурии. В 1955 г. Hardwicke и Squire сформулировали понятие «селективная» и «неселективная» протеинурия, определив, что фильтрация плазменных белков в мочу подчиняется определенной закономерности: чем больше молекулярная масса белка, экскретируемого в мочу, тем меньше его клиренс и тем ниже концентрация его в окончательной моче. Протеинурия, соответствующая этой закономерности, является селективной в отличие от неселективной, для которой характерным является извращение выведенной закономерности.

Обнаружение в моче белков с относительно большой молекулярной массой свидетельствует об отсутствии избирательности почечного фильтра и выраженном его поражении. В этих случаях говорят о низкой селективности протеинурии. Поэтому в настоящее время широкое распространение получило определение белковых фракций мочи с использованием методов электрофореза в крахмальном и полиакриламидном геле. По результатам этих методов исследования можно судить о селективности протеинурии.

По данным В.С.Махлиной (1975), наиболее оправданным является определение селективности протеинурии путем сравнения клиренсов 6—7 индивидуальных белков плазмы крови (альбумина, транеферрина, α₂ — макроглобулина, IgA, IgG, IgM) с использованием точных и специфичных количественных иммунологических методов реакции радиальной иммунодиффузии по Манчини, иммуноэлектрофоретического анализа и преципитального иммуноэлектрофореза. Степень селективности протеинурии определяют по индексу селективности, представляющего собой отношение сравниваемого и эталонного белков (альбумина).

Изучение клиренсов индивидуальных плазменных белков позволяет получить достоверные сведения о состоянии фильтрационных базальных мембран клубочков почки. Связь между характером экскретируемых в мочу белков и изменениями базальных мембран клубочков настолько выражена и постоянна, что по уропротеинограмме можно косвенно судить о патофизиологических изменениях в клубочках почек. В норме средний размер пор гломерулярной базальной мембраны составляет 2,9—4 А° НМ, которые могут пропускать белки, имеющие молекулярную массу до 10 4 (миоглобулин, кислый α₁ — гликопротеин, легкие цепи иммуноглобулинов, Fc и Fab — фрагменты IgG, альбумин и трансферрин).

При гломерулонефрите, нефротическом синдроме размеры пор в базальных мембранах клубочков увеличиваются, в связи с чем базальная мембрана становится проницаемой для белковых молекул большого размера и массы (церулоплазмин, гаптоглобин, IgG, IgA и др.). При крайней степени повреждения клубочков почек в моче появляются гигантские молекулы белков плазмы крови (α₂-макроглобулин, IgM и β₂-липопротеин).

Определяя белковый спектр мочи, можно сделать заключение о преимущественном поражении тех или иных участков нефрона. Для гломерулонефрита с преимущественным поражением гломерулярных базальных мембран характерно наличие в моче крупно- и среднемолекулярных белков. Для пиелонефрита с преимущественным поражением базальных мембран канальцев характерны отсутствие крупномолекулярных и наличие повышенных количеств средне- и низкомолекулярных белков.

Концентрацию этого белка в плазме крови и моче определяют радиоиммунологическим методом с помощью стандартного набора «Phade-bas β₂-mikroiest» (фирма «Pharmaсia», Швеция). В сыворотке крови здоровых людей содержится в среднем 1,7 мг/л (колебания от 0,6 до 3 мг/л), в моче — в среднем 81 мкг/л (максимально 250 мкг/л) β₂-микроглобулина. Превышение его в моче свыше 1000 мкг/л — явление патологическое. Содержание β₂-микроглобулина в крови увеличивается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением клубочковой фильтрации, в частности при остром и хроническом гломерулонефрите, поликистозе почек, нефросклерозе, диабетической нефропатии, острой почечной недостаточности.

Концентрация β₂-микроглобулина в моче повышается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением реабсорбционной функции канальцев, что приводит к увеличению экскреции его с мочой в 10—50 раз, в частности, при пиелонефрите, ХПН, гнойной интоксикации и др. Характерно, что при цистите в отличие от пиелонефрита не наблюдается увеличения концентрации β₂-микроглобулина в моче, что может быть использовано для дифференциальной диагностики этих заболеваний. Однако при интерпретации результатов исследования надо учитывать, что любое повышение температуры всегда сопровождается увеличением экскреции β₂-микроглобулина с мочой.

Средние молекулы (СМ), иначе называемые белковыми токсинами, представляют собой вещества с молекулярной массой 500—5000 дальтон. Физическая структура их неизвестна. В состав СМ входят по меньшей мере 30 пептидов: окситоцин, вазопрессин, ангиотензин, глюкагон, адренокортикотропный гормон (АКТГ) и др. Избыточное накопление СМ наблюдается при снижении функции почек и содержании в крови большого количества деформированных белков и их метаболитов. Они обладают разнообразным биологическим действием и нейротоксичны, вызывают вторичную иммунодепрессию, вторичную анемию, угнетают биосинтез белка и эритропоэз, тормозят активность многих ферментов, нарушают течение фаз воспалительного процесса.

Уровень СМ в крови и моче определяют скрининговым тестом, а также путем спектрофотометрии в ультрафиолетовой зоне по длине волны 254 и 280 мм на спектрофотометре ДИ-8Б, а также динамической спектрофотометрии с компьютерной обработкой в диапазоне волн 220—335 нм на том же спектрометре фирмы Beckman. За норму принимают содержание СМ в крови, равное 0,24 ± 0,02 усл. ед., а в моче — 0,312 ± 0,09 усл. ед.
Будучи нормальными продуктами жизнедеятельности организма, они удаляются из него в норме ночками путем гломерулярной фильтрации на 0,5 %; 5 % их утилизируется другим путем. Все фракции СМ подвергаются канальцевой реабсорбции.

Кроме белков плазмы крови, в моче могут быть неплазменные (тканевые) протеины. По данным Buxbaum и Franklin (1970), неплазменные белки составляют приблизительно 2/3 всех биоколлоидов мочи и значительную часть уропротеинов при патологической протеинурии. Тканевые белки попадают в мочу непосредственно из почек или органов, анатомически связанных с мочевыми путями, или попадают из других органов и тканей в кровь, а из нее через базальные мембраны клубочков почки — в мочу. В последнем случае экскреция в мочу тканевых протеинов происходит аналогично выведению плазменных белков различной молекулярной массы. Состав неплазменных уропротеинов чрезвычайно разнообразен. Среди них гликопротеины, гормоны, антигены, ферменты (энзимы).

Тканевые протеины в моче выявляют с помощью обычных методов белковой химии (ультрацентрифугирование, гель-хроматография, различные варианты электрофореза), специфических реакций на ферменты и гормоны и иммунологических методов. Последние позволяют также определить концентрацию неплазменного уропротеина в моче и в ряде случаев определить тканевые структуры, ставшие источником его появления. Основным методом выявления в моче неплазменного белка является иммунодиффузионный анализ с антисывороткой, полученной иммунизацией экспериментальных животных мочой человека и истощенной (адсорбированной) в последующем белками плазмы крови.

При патологическом процессе наблюдаются глубокие нарушения жизнедеятельности клеток, сопровождающиеся выходом внутриклеточных ферментов в жидкостные среды организма. Энзимодиагностика базируется на определении ряда ферментов, выделившихся из клеток пораженных органов и не свойственных сыворотке крови.
Исследования нефрона человека и животных показали, что в отдельных его частях имеется высокая ферментативная дифференциация, тесно связанная с функциями, которые выполняет каждый отдел. В клубочках почки содержится относительно небольшое количество различных энзимов.

Клетки почечных канальцев, особенно проксимальных отделов, содержат максимальное количество энзимов. Высокая их активность наблюдается в петле Генле, прямых канальцах и собирательных трубочках. Изменения активности отдельных энзимов при различных заболеваниях почек зависят от характера, остроты и локализации процесса. Они наблюдаются до появления морфологических изменений в почках. Поскольку содержание различных ферментов четко локализовано в нефроне, определение того или иного фермента в моче может способствовать топической диагностике патологического процесса в почках (клубочки, канальцы, корковый или мозговой слой), дифференциальной диагностике почечных заболеваний и определению динамики (затухание и обострение) процесса в почечной паренхиме.

Дли дифференциальной диагностики заболеваний органов мочеполовой системы применяют определение активности в крови и моче следующих ферментов: лактатдегидрогеназы (ЛДГ), лейцинаминопептидазы (ЛАП), кислой фосфатазы (КФ), щелочной фосфатазы (ЩФ), β-глюкуронидазы, глютамино-щавелевоуксусной трансаминазы (ГЩТ), альдолазы, трансамидиназы и др. Активность ферментов в сыворотке крови и в моче определяют с помощью биохимических, спектрофотометрических, хроматографических, флуориметрических и хемилюминесцентных методов.

Энзимурия при заболеваниях почек более выражена и закономерна, чем энзимемия. Она особенно сильно выражена в острой стадии заболевания (острый пиелонефрит, травма, распад опухоли, инфаркт почки и т.д.). При этих заболеваниях обнаруживается высокая активность трансамидиназы, ЛДГ, ЩФ и КФ, гиалуронидазы, ЛАП, а также таких неспецифических энзимов, как ГЩТ, каталаза [Полянцева Л.Р., 1972].

Селективная локализация ферментов в нефроне при обнаружении ЛАП и ЩФ в моче позволяет с уверенностью говорить об острых и хронических заболеваниях почек (острая почечная недостаточность, некроз почечных канальцев, хронический гломерулонефрит) [Шеметов В.Д., 1968]. По данным А.А.Карелина и Л.Р.Полянцевой (1965), трансамидиназа содержится лишь в двух органах — почке и поджелудочной железе. Она является митохондриальным ферментом почек и в норме в крови и моче отсутствует. При различных заболеваниях почек трансамидиназа появляется в крови и в моче, а при поражении поджелудочной железы — только в крови.

Дифференциальным тестом в диагностике гломерулонефрита и пиелонефрита Krotkiewski (1963) считает активность ЩФ в моче, повышение которой более характерно для пиелонефрита и диабетического гломерулосклероза, чем для острого и хронического нефрита. Нарастающая в динамике амилаземия при одновременном снижении амилазурии может указывать на нефросклероз и сморщивание почки, ЛАП имеет наибольшее значение при патологических изменениях в клубочках и извитых канальцах почки, поскольку содержание ее в этих отделах нефрона более высокое [Шепотиновский В.П. и др., 1980]. Для диагностики волчаночного нефрита рекомендуется определение β-глюкуронидазы и КФ [Приваленко М.Н. и др., 1974].

При оценке роли энзимурии в диагностике заболеваний почек следует учитывать следующие положения. Энзимы, будучи по своей природе белками, при малой молекулярной массе могут проходить через неповрежденные клубочки, определяя так называемую физиологическую энзимурию. Среди этих энзимов постоянно определяются в моче α-амилаза (относительная молекулярная масса 45 ООО) и уропепсин (относительная молекулярная масса 38000).

Наряду с низкомолекулярными энзимами в моче здоровых лиц могут быть обнаружены в небольшой концентрации и другие энзимы: ЛДГ, аспартат- и аланинаминотрансферазы, ЩФ и КФ, мальтаза, альдолаза, липаза, различные протеазы и пептидазы, сульфатаза, каталаза, рибонуклеаза, пероксидаза [King, Воусе, 1963].

Высокомолекулярные энзимы с относительной молекулярной массой больше 70000-100000, по мнению Richterich (1958) и Hess (1962), могут проникать в мочу лишь при нарушении проницаемости клубочкового фильтра. Нормальное содержание ферментов в моче не позволяет исключить патологический процесс в почке при окклюзии мочеточника. При эпзимурии возможен выход энзимов не только из самих почек, но и из других паренхиматозных органов, клеток слизистых оболочек мочевых путей, предстательной железы, а также форменных элементов мочи при гематурии или лейкоцитурии.

Большинство энзимов неспецифично по отношению к почке, поэтому откуда происходят энзимы, обнаруженные в моче здоровых и больных, установить трудно. Однако степень энзимурии даже дли неспецифичных энзимов при поражении почек бывает выше нормы или той, которая наблюдается при заболеваниях других органов. Более ценную информацию может дать комплексное исследование в динамике ряда ферментов, особенно органоспецифичных, таких как трансаминаза.

В решении вопроса о почечном происхождении энзима в моче помогает исследование изоэнзимов с выявлением фракций, типичных для изучаемого органа. Изоэнзимы — это энзимы, изогенные по действию (катализируют одну и ту же реакцию), но гетерогенные по химической структуре и другим свойствам. Каждая ткань имеет характерный для нее изоэнзимный спектр. Ценными методами разделения изоэнзимов являются электрофорез в крахмальном и полиакриламидном геле, а также ионообменная хроматография.

При миеломной болезни и макроглобулинемии Вальденстрема в моче обнаруживают белок Бенс-Джонса. Метод обнаружения названного белка в моче основан на реакции термопреципитации. Применявшиеся ранее методы, с помощью которых оценивают растворение этого белка при температуре 100 °С и повторное осаждение при последующем охлаждении, ненадежны, так как не все белковые тела Бенс-Джонса обладают соответствующими свойствами.

Более достоверно выявление этого парапротеина путем осаждения его при температуре 40 -60 °С. Однако и в этих условиях осаждения может не произойти в слишком кислой (рН 6,5) моче, при низкой ОПМ и низкой концентрации белка Бенс-Джонса. Наиболее благоприятные условия для его осаждения обеспечивает методика, предложенная Patnem: 4 мл профильтрованной мочи смешивают с 1 мл 2 М ацетатного буфера рН 4,9 и согревают 15 мин на водяной бане при температуре 56 °С. При наличии белка Бенс-Джонса в течение первых 2 мин появляется выраженный осадок.

При концентрации белка Бенс-Джонса меньше 3 г/л проба может быть отрицательной, но на практике это встречается крайне редко, поскольку его концентрация в моче, как правило, более значительна. На пробы с кипячением нельзя вполне полагаться. С полной достоверностью он может быть обнаружен в моче иммуно-электрофоретическим методом с использованием специфических сывороток против тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов.

источник